マウス腎臓と鶏絨毛性膜に確立された転移性透明細胞腎細胞癌モデルの比較

明確な細胞腎細胞癌またはCCRCCは、腎臓癌の最も一般的なサブタイプである。CCRCCの局地は手術で好ましい結果を持っています。しかし、CCRCC患者の3分の1は肺に遠隔転移を発症する。

これは、患者のための非常に悪い結果につながります.残念ながら、この致命的な段階では治療は受け付けできません。転移の分子機構が引き続き有効である。

このプロトコルの目的は、転移性CCRCCのために最近確立された2つの動物モデルを導入し、比較することです。最初のモデルは、トピックの注入のマウスです。このマウスモデルでは、異種CCRCCがマウスの腎カプセルに移植される。

腫瘍の増殖および転移は、10週間後に資産である。2番目のモデルは、鶏絨毛膜モデル、またはCAMモデルです。この鶏モデルでは、異種CCRCCが卵に移植される。

腫瘍増殖および循環腫瘍細胞は、胚が孵化する前に10日間の移植後に資産である。肺転移は、移植の24日後の資産である。これは孵化から2週間後です。

これら2つの新しいモデルは、CCRCCにおける転移の背後にある分子メカニズムをさらに研究するのに役立ちます。CAMの手順はこのビデオでは紹介されていませんのでご注意ください。CAMモデルの詳細なプロトコルは、Sharrowらによって別のトローブ記事で説明され、撮影されています。

マウスを麻酔した後、マウスの後部をポビドネヨウ素で完全に3回消毒する。70%のエスノルを一度続け、滅菌綿棒で拭きます。次に、3つの無菌医療用ドレッシングを順次に塗布し、背中全体を覆い、外科的分野を作成し、マウスを固定化します。

手術前に、オペレータはポビドネヨウ素で指を消毒する必要があります。マウスを起こしやすい位置に置きます。そして、指を使って左の腎臓を左脇腹のすぐ下に見つけます。

指定された場所の下で皮膚と筋肉層を切り開くために鈍い鉗子とはさみのペアを使用してください。滅菌綿棒と鉗子を使用して、腹部から左腎臓を部分的に外装します。別に調製された腫瘍細胞懸濁液とインスリン注射器またはカスタマイズされたハミルトン注射器のいずれかをロードします。

腎臓カプセルの下に20マイクロリットルの細胞懸濁液を注入する。細胞外マトリックス溶液を固めるために針をゆっくりと引き抜きます。出血や腫瘍細胞漏れを防ぐだけでなく.

そして、無菌綿棒を使用して腎臓を腹部に押し戻します。筋肉層をステッチするために縫合を使用します。ポビドネヨウ素で皮膚を消毒する。

そして、傷ついたオートクリップで皮膚を閉じます。異所性敷設植えられた腫瘍細胞は、BLIによって確認されたようにマウス腎臓に正常に成長した。一次増殖に違いはなかったが、異種転移性腫瘍だけが肺に対して強い転移を有していた。

転移は免疫検査によっても確認された。同様に、転移性腫瘍を有するマウスでは、非転移性腫瘍を有するマウスよりも循環腫瘍細胞数が高かった。マウスモデルとの関連では、CAMモデルは転移性腫瘍と非転移性腫瘍の間にも成長差を示さなかった。

一方、循環腫瘍細胞の数は、転移性腫瘍を有する卵において有意に高かった。組織学的に検出可能な転移は、孵化した鶏の肺で観察された。結論として、このプロトコルは、転移性CCRCCのための2つの新しい動物モデルを示した。

マウスと鶏の両方のモデルは、クリニックで観察された肺転移を忠実に再現した。これら2つの前臨床モデルは、転移の背後にある分子機構の理解を広げるために有用であろう。転移性CCRCCの新しい治療法を発見するだけでなく。