巣の挙動は、野生型およびトランスジェニックマウスにおける日常生活の活動を評価する有用な方法である。これは、寿命を通して神経変性の認知機能低下を文書化するのに特に有用です。この技術は、マウスの日常生活活動の経済的でシンプルでエレガントな評価です。
また、最小限のトレーニングで短期間で実行することもできます。私たちの研究室では、紙がより一貫した結果を生み出すので、細断された紙をお勧めします。ただし、パイロット調査を実施して、目標と予算に最適な材料を決定できます。
別の試験室で、試験間で一貫性があり、ハウジングルームと同じになるように環境条件を設定し、ケージの加量に食料と水を提供します。各マウスにランダムな識別番号または文字を割り当てます。そして、アシスタントと畜産スタッフが条件に目がくらんでいることを確実にするために、コロニー記録に元の動物IDやその他の必要な身分証明書を記録します。
試験室でケージの配置をランダムに並べ替え、野生型マウスとトランスジェニックマウスが不適切に分離しないようにする。そして、正方形のためのコーンコブ寝具の乾燥重量の100グラムで各ケージの底を覆い、ねじれ、細断された紙の試験。そして、柔らかいコブ試験のための柔らかいコブの寝具の100グラム。
その後、マウスをケージに導入する直前に、押された綿の正方形を1つ、1枚の紙ひねり、柔らかいコブ寝具に追加された材料、または5〜7センチメートルのストリップに切られたきれいな細断された白いプリンタペーパーの2.5グラムを置きます。同時に、光サイクルの開始時に、マウスを含むホームケージを試験室に持ち込む。そして、ケージに既に材料を持つ割り当てられたネスティングケージに各マウスを転送します。
すべてのマウスが配置されたら、ホームケージをハウジングルームに戻し、マウスが24時間試験を完了できるようにします。試験の終わりに、各ケージの蓋を慎重に取り除きます。また、各マウスが巣から外れたときに、写真の中で割り当てられたIDをキャプチャする各巣を撮影し、ケージの外の材料の外観を最小限に抑えます。
各巣が撮影されたら、各マウスを個々の一時的なケージにそっと移します。そして、各ケージから寝具やネスティング材料を護衛します。次に、寝具を交換し、次の入れ子材料をシーケンスに提供する。
そして、マウスを入れ子ケージに戻します。すべての試験が完了したら、マウスを自宅のケージに戻し、潜在的な攻撃的な行動についてマウスを観察します。再レイター間の信頼性を維持するために、各ネスト材料のベースライン画像を、研究に目がくらむ少なくとも2人の個人に提供する。
また、各種類の材料をスコアラーに馴染める一連のサンプル巣を提供します。巣を採点する場合、細断された紙や小さな正方形がケージ全体に散らばっているか、綿の正方形やねじれが手つかずのままである場合に、1のスコアを割り当てる必要があります。材料の一部がネストに構築されると、2 のスコアが割り当てられますが、その材料の 50% 以上がネストの構築に使用されていません。
目立つ巣が構築されると、3 のスコアが割り当てられますが、いくつかの部分がまだ散在しています。4 のスコアは、ほとんどすべての材料がネストに使用される場合に割り当てられますが、いくつかの材料が散在したままか、巣の近くにあります。5 のスコアは、ほとんどすべての材料が識別できない巣を作るために使用されるときに割り当てられます。
得点者に休憩を取り、必要に応じて得点手順中の疲労とバイアスを避けるためにベースライン写真を再訪してもらいます。すべてのケージがスコア付けされたら、スコアを入力し、動物のスコアが別々の列に表示されるように、長い形式でデータファイルをフォーマットします。提供された4つの材料すべてにわたるこの代表的な分析では、野生型マウスはAPOE e4マウスと比較して巣の品質が高かった。
細断された紙は、正方形、寝具、またはねじれ材料の品質が大幅に高く評価されています。正方形、寝具、およびねじれ材料の間に観察された違いがない。さらに、htauマウスを用いたこの実験では、生後5ヶ月の変異動物が細断された紙から巣を作り出し、その年齢で構築されたものは野生型と一致した。
スコアは実験条件に目がくらんで、得点基準を見直す必要があります。健全かつ有効な結論を得て、インターレートおよびイントラレートの信頼性も評価する必要があります。バローイングと概日回りの車輪の走りは、日常生活の活動を評価する他の2つの一般的な方法です。
そして、彼らは入れ子の行動を補完するのに役立つかもしれません。ネスティングは、認知の可能性のある減少を予測するための補助的な評価として使用することができ、モリス水迷路と概日ホイールランニングと組み合わせて行動評価の息を広げます。
