Name: re-arterialized rat partial liver transplantation with an in vivo vessel-oriented 70% hepatectomy
Uploaded: 2018-04-08T13:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 52 s
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この研究は、国家自然科学基金、中国の (許可番号 81501382) と中国浙江省地方自然科学財団のグラント号によって支持されました。LQ13H100003 および LQ16H100002)。

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すべての著者は開示する利害の対立があります。

ラット PLTx は、コストの高され、長い期間20トレーニング プログラムの洗練された顕微鏡視下の手順です。研究者をこの動物モデルを用いたラット PLTx プロトコルの複雑さが発生しました。フルサイズ ラット LTx と比べると、ラット PLTx 提案、微小血管移植手順の課題だけでなく、小動物の肝切除術の課題とします。したがって、詳細に全体の手順を記述する可視化顕微鏡プロトコルはこの複雑なモデルを確立するため不可欠です。永井らによって報告された可視化以前の記事は、ラット5 (表 2) 肝動脈再建を伴う 50% 部分同所性同種 LTx のプロトコルを提示しました。このプロトコルを使用する前のヴィヴォ切除のプロシージャに臨床的に類似している LTx を分割します。
分割に比べ LTx、ドナーに対しての生活はその背面テーブル操作の肝臓を分割するのではなく、生きているドナーから部分的な肝移植を切離法します。体内肝切除より手術操作、もはや門脈圧亢進症、および部分肝移植にもより温虚血傷害につながる可能性があります。したがって、いくつかのラット体内肝を利用したモデルを関連する研究6,8,21,22に確立されている PLTx です。多くのプロトコルは、椎弓根か基本2,3,6,8,21,23に結紮後肝葉切除を伴います。ただし、異なる肝葉、異なる形状です。ラットの ML は基本半囲む上大静脈10,24ワイド。下大静脈が収縮する ML の基部に単結紮を簡単に配置すること。上大静脈の収縮を避けるためには、Madrahimovら開発フラット、ML の残骸の切り株を残して実質内に 4 つのピアスの縫合が行われた後、2 つの手順で ML を削除する柔組織保存容器指向肝10します。 ただし、ピアスの縫合糸で結紮肝葉の PVs の実質内に隠されていた。行方不明や、太陽光発電の小さな枝が負傷によって引き起こされる残骸の出血と、完全に回避11ができませんでした。我々 のプロトコルで対応する PVs および肝動脈さらに解剖されまず。その後、切除肝葉の血液供給を術前にして閉塞個別に。したがって、我々 のプロトコル (図 10) を使用して残切り株の出血率が低下しました。ML の切り株に 4 つピアス縫合糸を置くことの技術のまた用いられるプロトコル PV と肝動脈、肝静脈を縛ること。これらを複数ピアス縫合と段階的切除を使用すると上大静脈狭窄を回避が残肝の切り株のフラット形状は維持されました。
IHVC 復興のため、わずかな変更を鎌田らによって記述されたカフ吻合させられました。25します。 受信者の下大静脈で実質 IHVC 船は、上大静脈周囲円周肝実質を左ではなく右下葉に切離した。下大静脈周囲肝実質は、受信者の IHVC の血管の末円筒形ではなく平らな形状を維持助けた。したがって、IHVC の内腔は、宿泊縫合と鉗子の助けを借りず自然開設。この変更は宿泊縫合糸を置くことのステップを救う助けたし、IHVC カフの受信者の血管内腔への挿入を容易に。また、この変更は、カフ吻合中に 2 つの端間の緊張を減らす、IHVC の血管の長さを延長しました。
高速血管吻合の利点は、2 カフ技術は太陽光発電と IHVC 吻合のラット同所性同種 LTx でよく使用されます。宮田らも太陽光発電、IHVC、グラフトを吻合する方法 3 カフを含むプロトコルを提案する.ただし、カフの手法もその欠点があります。最初に、固定サイズのカフは完全に対応する容器のサイズを収めることはできません。さらに、カフ法は、血流、血栓症、袖口26に異物反応の発生率が高い結果を妨げます。グラフト、ラット、主な血管は、高血流を示しています。狭窄またはこの血管の血栓症は重篤な術後合併症を引き起こす可能性があります。したがって、私たちの PLTx プロトコルで我々 は物理的な設定に可能な限り近い吻合部の調整を可能にするグラフトを再構築に縫合手技を使用を選択します。ただし、高品質グラフト吻合部縫合手技によって完了したスキルの高い顕微鏡が必要です。初心者、吻合血管27のカレルの三角形分割法を使用することをお勧めします。この手法を使用して、3 つに宿泊の縫合、グラフトのまわりを一定の間隔で配置されます。グラフトの 3次元形状は、これらの 3 つ滞在中に吻合狭窄からグラフトを防ぐことができる 3 つの方向に沿って縫合の取り消しによって維持されます。
肝移植の再本来は物議を醸す話題です。我々 の意見で再本来は受信者の高い生存率を確保するため重要なステップではないが、高品質の肝移植を確保するため重要なステップがあります。ラット 2 カフ手法を含む LTx の伝統的なプロトコル、肝動脈はない再建肝動脈の血流不足ラット LTx12の結果には影響しなかった。また、長期生着率、組織学的変化、虚血性肝損傷、初期免疫活性化経路13再本来の効果を調べるためマウス LTx に関する以前の研究を行った。研究者は結論再大量肝移植の生存率や免疫学的活性化の程度に大きな影響を持っていなかった。しかし、黄らによって報告された最近の研究では、その再大量肝切除、特に流出28の妨害を受ける肝実質の回復にとって重要です示唆しています。部分肝移植の非本来は肝臓の損傷を悪化し、壊死から回復の遅れ。したがって、部分肝移植の再動脈化術をお勧めします。ここで示すように、端-側吻合法は著者14のいずれかで前に説明した肝動脈を再建していました。この手法の利点に薄いフェイ、肝動脈の再建の難しさを削減し、吻合部の開存率が高いを保持ではなく、2 本の太い動脈、CHA と GDA、吻合するのに適しています。
古典的なラット鎌田らによって提案された LTx プロトコルでは、26 分以内は、無肝期が 26 分25以上続いたときに生き残った動物はいないように無肝期を制御示唆しています。我々 の経験はこの提案では、一貫性のある我々 は以前フェーズ時間 26 分以上生存症例、無肝を観察しました。我々 の意見で安定した無肝期優先短い無肝期外科研究で。私たちのグループで無肝期は特定の時間内に正確に制御されます。無肝期グラフトと PV の吻合はもっと早く完了でしたがでプリセット無肝時間に到達するまでは止まらない。ただし、トレーニング プロジェクトの短い無肝期お勧めします。
訓練段階を短縮し、不必要な操作を排除に多くの改善を行ったラット LTx と PLTx がまだ複雑な顕微鏡操作20。したがって、可視化プロトコルに加えて、計画はチェック アクション サイクルに基づいて段階的トレーニングのプロトコルは高い生存率と高品質を達成するため重要です。このトレーニングのプロトコルを使用して私たちの予備的な経験は、40 73 操作ラット同所性同種 LTx をマスターする必要があることを示した。追加 9-13 操作ラットをマスターする必要がある再門脈 PLTx。トレーニングのプロトコルは、Czigány によって提案されたら50 60 LTxs の同所性同種 LTx と PLTx29をマスターする十分なの主張します。
私たちのプランはチェック アクション トレーニングのプロトコルで各トレーニングのステップで、それぞれの個々 の操作で品質管理強調されなければならない、このような複雑なモデルを中心に。生存率の高いはない高品質のプロシージャに等しいです。代表的な結果にマイクロサージャリーの品質を評価するためのいくつかの条件表示された組織学、肝酵素、身体の体重回復、黄疸 (血清ビリルビンと黄色尿)、無肝期の期間との開存を含む、肝動脈。高品質は、すべての条件が満たされたときのみ達成されます。

現在、寄付された肝臓器官の数と寄付された肝臓を待っている患者の数に大きな違いがあります。肝臓の臓器の不足は、地球規模の問題です。ドナー プールを展開し、分割肝移植 (LTx) および生きているドナー LTx に部分肝を移植1として使用する開発されました。
部分肝移植 (PLTx) の背後にあるメカニズムをさらに調査するには、適切な動物モデルが確立された2,3,4,5をされています。ラット PLTx、肝葉切除体内と体外している生体臓器提供者に対しての条件を模倣し、ひとそれぞれに対してを分割可視化実験のジャーナルに掲載された論文は、50% のラットを使用して、前のヴィヴォ肝5PLTx を含む詳細なプロトコルを提示しました。しかし、体内肝切除ラット PLTx はまだ報告されていない可視化文学。
体内と体外肝切除の違いに加えて自体肝切除を行う手法は、またラット PTLx を使用して多くの外科研究の現在、PLTx の結果を決定する上で重要な役割を果たしています。モデル、肝葉切除肝葉2,3,6,7,8,9椎弓根で単結紮を配置した後。ただし、切除は適していませんとして異なる肝葉のすべての肝葉の前に単結紮を置く異なった形およびサイズがあります。中央の葉の基部に単結紮部分肝移植10,11の流出に影響を与える可能性があります最終的に上大静脈の圧迫感の原因のハイリスクが伴います。したがって、ラット肝の解剖学の知識に基づいて更新肝切除法は、ラット PTLx のフィールドに必要です。
本研究では記述されているプロトコル、ラット PLTx のプロシージャに更新の容器型 70% 切除を設立されました。ポータル静脈と左葉外側 (LLL) と中葉 (ML) の肝動脈解剖、肝実質の除去の前に個別に分かれています。その後、縫合をピアスで LLL と ML の肝静脈を結紮されました。単結紮を配置するのではなく、個々 をおよび複数のピアス縫合糸を使用して、ML の残切り株上大静脈に広がることができた。したがって、外科的結紮による infrahepatic 上大静脈の収縮が回避されました。さらに、個々 を前に肝実質の除去実験11に血損失の影響を最小限に抑えること、残肝の出血率の減少によって LLL と ML の血液供給の閉塞。
それは、microsurgeons、この船の非常に小さい直径のため肝移植の適切な肝動脈 (PHA) を再構築するための重要な課題です。肝動脈を再構築するための多数の顕微鏡技術が提案された14 をされている LTx で再動脈化術が本当に必要かどうかの質問は、まだ議論12,13,14下ですが、.ここでは、最後に側に拡大 pha (CHA) 総肝動脈の吻合肝臓の移植の再本来の手法を紹介します。この辺にテクニックを使用して、2 つの肝動脈は径の大きな吻合と接続されます。吻合部の直径が大きくなるほど、実行することです簡単に手縫合より吻合部の開存の改善になります。

<table><tbody><tr><td>Surgical microscope</td><td>M&amp;ouml;ller-Wedel, Germany</td><td>654359</td><td></td></tr><tr><td>Light source</td><td>OSRAM (China) Lighting Co., Ltd</td><td>64627</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane Vaporizer</td><td>MIDMARK Corporation</td><td>VIP3000</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Baxter Healthcare Corporation</td><td>40032609</td><td>For Inhalation anesthesia</td></tr><tr><td>Normal Saline</td><td>Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>716092103</td><td></td></tr><tr><td>Povidone Iodine Solution</td><td>HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL</td><td>H33021567</td><td>For disinfection</td></tr><tr><td>Hemostatic forceps</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>J31020</td><td></td></tr><tr><td>Surgical scissors</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>JC2116</td><td></td></tr><tr><td>Needle-holder</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>J32030</td><td></td></tr><tr><td>Dressing Forceps</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>J42020</td><td></td></tr><tr><td>Mosquito hemostatic forceps</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>W40340</td><td>For liver resection; For retracting the stay sutures.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Micro-scissors</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>WA1040</td><td></td></tr><tr><td>Micro needle-holder</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>WA2060</td><td></td></tr><tr><td>Curved micro typing forceps</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>WA3061</td><td></td></tr><tr><td>straight micro typing forceps</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>WA3060</td><td></td></tr><tr><td>Micro hemostatic forceps</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>WA3020</td><td></td></tr><tr><td>Bulldog clamp</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>XEC350</td><td></td></tr><tr><td>Vessel clamps</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>W40160</td><td></td></tr><tr><td>Micro Serrefine-curved</td><td>&amp;nbsp;Fine Science Tools, Inc</td><td>18055-05</td><td></td></tr><tr><td>Dacryosyrinx</td><td>Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd.</td><td>5# curve</td><td>Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen</td></tr><tr><td>Sterilized gauze swabs</td><td>Fuqing Health &amp;amp; Integral Medical</td><td>20230R</td><td></td></tr><tr><td>5mL syringe</td><td>Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd</td><td>811932416</td><td></td></tr><tr><td>18G needles</td><td>Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd</td><td>01-014</td><td>For fixing the upper abdomen wall</td></tr><tr><td>Intima II 22G intraveous catheter</td><td>Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.</td><td>383207y</td><td>For making biliary stent; For infusing perfusate</td></tr><tr><td>7-0 polypropylene sutures</td><td>Ningbo Medical Needle Co., Ltd</td><td>151026</td><td>For SHVC anastomsis</td></tr><tr><td>6-0 silk suture</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd</td><td>2650182</td><td>For ligation</td></tr><tr><td>Culture dish (100mm)</td><td>Corning Incorporated</td><td>430165</td><td>used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Culture dish (30 mm)</td><td>Corning Incorporated</td><td>3296</td><td>As a vessel for organ preservation</td></tr><tr><td>Angiocath 12G intravenous catheter</td><td>Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.</td><td>382277</td><td>For making a IHVC cuff</td></tr><tr><td>Angiocath 14G intravenous catheter</td><td>Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.</td><td>382269</td><td>For making a PV cuff</td></tr><tr><td>Buprenorphine (hydrochloride)</td><td>Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd</td><td>H12020275</td><td>For analgesic</td></tr><tr><td>Cefuroxime sodium for injection</td><td>Esseti FarmaceuticiS.r.l</td><td>H20160013</td><td>As an antibiotics</td></tr></tbody></table>

re-arterialized rat partial liver transplantation with an in vivo vessel-oriented 70% hepatectomy

分割肝移植と生体肝ドナー肝移植肝臓臓器をより効率的に活用する診療所で開発されました。これらの手術の背後にあるメカニズムを理解、関連する外科研究ラット部分肝移植 (PLTx) モデルを設置しました。ラットの PLTx モデルの複雑さのため、詳細な説明とプロトコルが必要です。掲載された記事は以前体外肝切除が 50% ラット PLTx を達成するために使用されたプロトコルを報告しました。このプロトコルとは対照的、生体内で70% 切除再門脈 PLTx を導入しました。更新された容器指向の肝切除は、顕微鏡のプロシージャを調整する PLTx のラットに組み込まれました。ポータル静脈と左葉外側と中央の葉の肝動脈が個別に解剖し、残肝切り株で出血の確率を減らす、肝実質の除去前に結紮.さらに、拡大固有肝動脈と総肝動脈側に血管吻合は、肝動脈を再 arterialize に導入されました。この側に血管吻合技術を用いたは、手縫合の難しさを減少し、吻合部の開存性の高率を維持、吻合部の直径が拡大されました。また、infrahepatic 下大静脈のカフ吻合は若干変更されました。受信者の下大静脈周囲円周の肝実質のセクションは、カフ吻合血管の内腔の三次元形状を維持するために中に保たれていた.肝実質のこのセクションは、吻合部を完了した後削除されました。この変更を加えたカフ吻合時間をさらに短縮宿泊縫合の配置を含む工程は省略されました。ラット PLTx のこのプロトコルを使用して、手術後肝酵素の低レベル、そのまま肝小葉アーキテクチャと高い生存率が達成されました。

合計では、ラット門脈 PLTx 31 例は、このプロトコルを使用して完成しました。すべての受信者は、観測時間の最後まで生き残った。受信者の体重は術後 (POD) 4 後回復し始めた。体重の斜面は、間接的に受信者の回復ポッド 6 (図 8) 後、ルイス ・ ラットが正常に近いでした。組織学的胆管のわずかな増殖を認めた、受信者と受信者の肝小葉アーキテクチャは無傷であった。壊死や明らかな正弦波の拡張が認められなかった (図 9)。アラニンアミノトランスフェラーゼ (ALT) の血清レベルは、ポッド 30 (図 10) で正常範囲であった。これらの受信者、寝具の毎日ケージをチェックによって示された、胆管ステントの開存性を示すに黄疸による黄色の尿の例は認められなかった。ポッド 30 にビリルビンの正常な血清のレベルはさらに胆管 (図 11) の成功の復興を確認しました。肝動脈の開存性は犠牲の間に吻合部の近位側に PHA を transecting により確認されました。ープからの出血は、すべての受信者には、吻合部の開存を意味で観察されました。すべてのこれらの結果は肝移植がよく作用したことを示唆しました。
無肝期の平均期間は 23.03 ± 2.3 分。PV のカフ吻合時間がかかった 4.68 ± 0.77 分、IHVC のカフ吻合のみ 2.05 ± 0.71 分に比べてカフ吻合 PV、滞在縫合を配置する手順を保存 IHVC のカフ吻合を取り、anas をさらに短縮tomosis 時間 (表 1)。
容器指向肝切除術 31 例のうち、ML の残切り株で 70% 肝切除時の出血の 2 例を認めた.以前実験、ML の残切り株で出血柔組織保存容器指向肝 (図 12) の 8 のうち 18 例で観察されました。この結果は、容器指向 70% 肝切除を使用した後、ML の残肝の出血率が低いを示されました。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56392/56392fig1.jpg"> 図 1.袖口と胆管ステント。 (C)袖口のサイズ。(袖口に丸平ネジ B)。(D) 本体とカフのハンドル部分。(E) (a) の IHVC のカフ。(b) 太陽光発電カフ.(F) 胆道ステント。スケール バー = 5 mm.<a href="/files/ftp_upload/56392/56392fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56392/56392fig2v2.jpg"> 図 2.LLL と ML の血液供給をオクルードします。 (A)太陽光発電、肝動脈、胆管の共通のトランク、LLL のダクトし、私の人生が大好き。 (B)LLL の変色と共通のトランクを transecting 後私の人生が大好きです。 (C)RML の門脈。 (D)すべての Pv、肝動脈、胆管、LLL と ML が離断。 スケール バー = 5 mm. 略語: 左外側の葉、ML 中葉、LLL 愛私の人生左中間葉、RML 右中葉、RSL は優れた葉、RIL を右右下葉、SCL 優れた尾状葉。<a href="/files/ftp_upload/56392/56392fig2v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56392/56392fig3.jpg"> 図 3.左中央の葉を切除。 (A) 鉗子のすぐ上の私の人生の愛の肝の質量を切除します。 (B) 場所 3 ピアス縫合糸、切開。(<img alt="Image 1" src="/files/ftp_upload/56392/56392img1.jpg">) スケール バー = 5 mm. 略語: RML 右中葉、RSL 右葉、RIL 右肺下葉、SCL 優れた尾状葉。<a href="/files/ftp_upload/56392/56392fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56392/56392fig4.jpg"> 図 4.右中葉 (RML) を切除します。 (A)RML の拠点。 (B)モスキート止血鉗子 RML のベースの周りに配置します。 (C)すぐ上に鉗子 RML の肝実質を切除します。 (D)グラフトに残肝組織のプレーンで薄い層を残します。 スケール バー = 5 mm. 略語: ML 中葉、RSL 右優れた葉。<a href="/files/ftp_upload/56392/56392fig4large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56392/56392fig5.jpg"> 図 5.カフをインストールします。 (A) カフの内腔を通じて太陽光発電を引き出します。 (B) 修正カフ ハンドルと PV 一緒に容器クランプすることによって。 (C) エバート PV カフの外側の表面をカバーするため血管の壁。 (D) 血管壁との位置にカフを保護します。 スケール バー = 5 mm.<a href="/files/ftp_upload/56392/56392fig5large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56392/56392fig6.jpg"> 図 6.グラフトの再構築にします。 (A & B)それぞれ右と左、2 つの滞在縫合糸を引き出します。 (C) 血管内腔の実行縫合によるグラフトの後壁を吻合します。 (D) 吻合する血管の内腔からグラフトの前の壁。 スケール バー = 5 mm.<a href="/files/ftp_upload/56392/56392fig6large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56392/56392fig7.jpg"> 図 7.IHVC の再構築にします。 (A) 円筒血管内腔の受信者に IHVC。 (B)、IHVC のカフ吻合を保護します。 (C) 再灌流を開始します。 (D) 円周絹糸上周囲肝実質を切り落とします。 スケール バー = 5 mm. 略語: 太陽光発電門脈, IHVC 下 infrahepatic 上大静脈、RIL 右肺下葉。<a href="/files/ftp_upload/56392/56392fig7large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56392/56392fig10v4.jpg"> 図 8.術後の体の体重の回復。 受信者の体重は、術後 4 日目後回復し始めた。体重の斜面は、間接的に受信者の回復を 6 病日後、通常ルイス ・ ラットに近いでした。
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56392/56392fig9.jpg"> 図 9.30 日後肝移植の組織。 組織の受信者、胆管のわずかな増殖を認めたし、受信者の肝小葉アーキテクチャは無傷であった。壊死や明らかな正弦波の拡張が認められなかった (400 X)。スケール バー 20 を um =<a href="/files/ftp_upload/56392/56392fig9large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 10" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56392/56392fig8v4.jpg"> 図 10.オルタナの血清 ALT の血清レベルは、ポッドの 30 日に正常範囲であった。(* *、P < 0.05)。
<img alt="Figure 11" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56392/56392fig11v2.jpg"> 図 11.血清ビリルビン。 ポッドの 30 日のビリルビンの血中濃度は通常ルイス ・ ラットのそれに匹敵する (P > 0.05)。
<img alt="Figure 12" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56392/56392fig12v2.jpg"> 図 12.肝切除の異った方法の料金を出血します。 ML の残肝の出血率が低い容器指向 70% 肝切除を用いた観察されました。
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>手順</td>
			<td>肝臓の除去</td>
			<td>グラフト吻合</td>
			<td>太陽光発電の吻合</td>
			<td>IHVC 吻合</td>
			<td>無肝時間</td>
		</tr>
<tr>
<td>時間 (分)</td>
			<td>2.62±0.46</td>
			<td>15.73±2.05</td>
			<td>4.68±0.77</td>
			<td>2.05±0.71</td>
			<td>23.03±2.30</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">データは Mean±SD で表現されました。</td>
		</tr>
</tbody></table>表 1。無肝期の間に個々 の手術の時間
<img alt="Table 2" src="/files/ftp_upload/56392/56392tbl2.jpg"> 表 2。ラットの PLTx の 2 つの可視化プロトコルの違い。<a href="/files/ftp_upload/56392/56392tbl2large.jpg" target="_blank">この表の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。

<img src="/files/ftp_upload/56392/SUPPLEMENTARY_MATERIAL.jpg"> 補足資料

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Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

ここでは、再門脈ラット部分肝移植を含むプロトコルが表示されます。具体的には、70% 肝切除だった体内肝の血管指向の更新手法を用いた肝動脈は、-側の方法で再建されました。カフのテクニックは、infrahepatic 下大静脈の吻合時間を短縮に変更されました。

再門脈部分肝移植のラット体内血管指向 70% 肝切除

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

re-arterialized-rat-partial-liver-transplantation-with-an-vivo-vessel

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

11.5K ビュー.  The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University. ここでは、再門脈ラット部分肝移植を含むプロトコルが表示されます。具体的には、70% 肝切除だった体内肝の血管指向の更新手法を用いた肝動脈は、-側の方法で再建されました。カフのテクニックは、infrahepatic 下大静脈の吻合時間を短縮に変更されました。

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Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat liver transplantation in 1979 by Kamada et al.3, this model has remained the gold standard despite various proposed alternative techniques4. Nevertheless, its broader use is limited by its steep learning curve5.
In this video paper, we show a simple and easy-to-establish revision of Kamada's two-cuff technique. The suprahepatic vena cava anastomosis is performed manually with a running suture, and the vena porta and infrahepatic vena cava anastomoses are performed utilizing a quick-linker cuff system6. Manufacturing the quick-linker kit is shown in a separate video paper.

We present an easy-to-establish revision of the classical two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.

ラット同所性肝移植

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

医学

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as studies on graft preservation and ischemia-reperfusion injury 1,2, immunological responses 3,4, hemodynamics 5,6, and small-for-size syndrome 7. The rat OLT is among the most difficult animal models in experimental surgery and demands advanced microsurgical skills that take a long time to learn. Consequently, the use of this model has been limited. Since the reliability and reproducibility of results are key components of the experiments in which such complex animal models are used, it is essential for surgeons who are involved in rat OLT to be trained in well-standardized and sophisticated procedures for this model.
While various techniques and modifications of OLT in rats have been reported 8 since the first model was described by Lee et al. 9 in 1973, the elimination of the hepatic arterial reconstruction 10 and the introduction of the cuff anastomosis technique by Kamada et al. 11 were a major advancement in this model, because they simplified the reconstruction procedures to a great degree. In the model by Kamada et al., the hepatic rearterialization was also eliminated. Since rats could survive without hepatic arterial flow after liver transplantation, there was considerable controversy over the value of hepatic arterialization. However, the physiological superiority of the arterialized model has been increasingly acknowledged, especially in terms of preserving the bile duct system 8,12 and the liver integrity 8,13,14.
In this article, we present detailed surgical procedures for a rat model of OLT with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft after ex vivo liver resection. The reconstruction procedures for each vessel and the bile duct are performed by the following methods: a 7-0 polypropylene continuous suture for the supra- and infrahepatic vena cava; a cuff technique for the portal vein; and a stent technique for the hepatic artery and the bile duct.

Orthotopic liver transplantation in rats is an indispensable experimental model for biomedical research. Here we present our surgical procedures for orthotopic rat liver transplantation with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft.

肝動脈再建を用いた部分同所性肝移植のラットモデルのための外科的処置

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the failing native liver has regenerated.1-3 The APOLT-method, the orthotopic implantation of auxiliary segments- averts most of the technical problems. However this method necessitates extensive resections of both the native liver and the graft.4 In 1998, Erhard developed the heterotopic auxiliary liver transplantation (HALT) utilizing portal vein arterialization (PVA) (Figure 1). This technique showed promising initial clinical results.5-6 We developed a HALT-technique with flow-regulated PVA in the rat to examine the influence of flow-regulated PVA on graft morphology and function (Figure 2).
A liver graft reduced to 30 % of its original size, was heterotopically implanted in the right renal region of the recipient after explantation of the right kidney.&#160; The infra-hepatic caval vein of the graft was anastomosed with the infrahepatic caval vein of the recipient. The arterialization of the donor&#8217;s portal vein was carried out via the recipient&#8217;s right renal artery with the stent technique. The blood-flow regulation of the arterialized portal vein was achieved with the use of a stent with an internal diameter of 0.3 mm. The celiac trunk of the graft was end-to-side anastomosed with the recipient&#8217;s aorta and the bile duct was implanted into the duodenum. A subtotal resection of the native liver was performed to induce acute hepatic failure. 7
In this manner 112 transplantations were performed. The perioperative survival rate was 90% and the 6-week survival rate was 80%. Six weeks after operation, the native liver regenerated, showing an increase in weight from 2.3&#177;0.8 g to 9.8&#177;1 g. At this time, the graft&#8217;s weight decreased from 3.3&#177;0.8 g to 2.3&#177;0.8 g.
We were able to obtain promising long-term results in terms of graft morphology and function. HALT with flow-regulated PVA reliably bridges acute hepatic failure until the native liver regenerates.

Auxiliary liver transplantation provides a temporary support in acute hepatic failure, until regeneration of the failing liver. The heterotopic auxiliary liver transplantation (HALT) with portal vein arterialization (PVA) renders sufficient liver function. We developed an analogous technique in the rat, to examine the influence of the portal vein arterialization on the morphology and function of the graft.

急性肝障害における流れ調節性門脈動脈血と異補助ラット肝移植

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

Organ engineering is a novel strategy to generate liver organ substitutes that can potentially be used in transplantation. Recently, in vivo liver engineering, including in vivo organ decellularization followed by repopulation, has emerged as a promising approach over ex vivo liver engineering. However, postoperative survival was not achieved. The aim of this study is to develop a novel surgical technique of in vivo selective liver lobe perfusion in rats as a prerequisite for in vivo liver engineering. We generate a circuit bypass only through the left lateral lobe. Then, the left lateral lobe is perfused with heparinized saline. The experiment is performed with 4 groups (n = 3 rats per group) based on different perfusion times of 20 min, 2 h, 3 h, and 4 h. Survival, as well as the macroscopically visible change of color and the histologically determined absence of blood cells in the portal triad and the sinusoids, is taken as an indicator for a successful model establishment. After selective perfusion of the left lateral lobe, we observe that the left lateral lobe, indeed, turned from red to faint yellow. In a histological assessment, no blood cells are visible in the branch of the portal vein, the central vein, and the sinusoids. The left lateral lobe turns red after reopening the blocked vessels. 12/12 rats survived the procedure for more than one week. We are the first to report a surgical model for in vivo single liver lobe perfusion with a long survival period of more than one week. In contrast to the previously published report, the most important advantage of the technique presented here is that perfusion of 70% of the liver is maintained throughout the whole procedure. The establishment of this technique provides a foundation for in vivo partial liver engineering in rats, including decellularization and recellularization.

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

We establish a novel surgical technique for an in vivo single liver lobe perfusion model in rat as a prerequisite for further studying in vivo partial liver engineering in the future.

ラットでの肝部分工学生体内での基盤として新しい手術手技

Organ engineering is a novel strategy to generate liver organ substitutes that can potentially be used in transplantation. Recently, in vivo liver ...

生物工学

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the silicone compound, via a 26 G catheter, into the portal or hepatic vein. After silicone injection, organs were explanted and prepared for ex-vivo micro-CT (&#181;CT) scanning. The silicone injection procedure is technically challenging. Achieving a successful outcome requires extensive microsurgical experience from the surgeon. One of the challenges of this procedure involves determining the adequate perfusion rate for the silicone compound. The perfusion rate for the silicone compound needs to be defined based on the hemodynamic of the vascular system of interest. Inappropriate perfusion rate can lead to an incomplete perfusion, artificial dilation and rupturing of vascular trees.
The 3D reconstruction of the vascular system was based on CT scans and was achieved using preclinical software such as HepaVision. The quality of the reconstructed vascular tree was directly related to the quality of silicone perfusion. Subsequently computed vascular parameters indicative of vascular growth, such as total vascular volume, were calculated based on the vascular reconstructions. Contrasting the vascular tree with silicone allowed for subsequent histological work-up of the specimen after &#181;CT scanning. The specimen can be subjected to serial sectioning, histological analysis and whole slide scanning, and thereafter to 3D reconstruction of the vascular trees based on histological images. This is the prerequisite for the detection of molecular events and their distribution with respect to the vascular tree. This modified silicone injection procedure can also be used to visualize and reconstruct the vascular systems of other organs. This technique has the potential to be extensively applied to studies concerning vascular anatomy and growth in various animal and disease models.

Tools used for visualizing vascular regeneration require methods for contrasting the vascular trees. This film demonstrated a delicate injection technique used to achieve optimal contrasting of the vascular trees and illustrate the potential benefits resulting from a detailed analysis of the resulting specimen using &#181;CT and histological serial sections.

正常マウスで70％肝切除後の血管と実質再生の可視化

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep learning curve. The introduction of the cuff technique for anastomosis of the portal vein (PV) and infrahepatic vena cava (IHVC) has significantly simplified the transplant procedure in rats. However, due to the short anterior wall of the recipients' suprahepatic vena cava (SHVC), the cuff technique is very difficult to use for the reconstruction of the SHVC. Most researchers in this field still use the hand-suture technique for SHVC reconstruction, which makes it the bottleneck step in rat orthotopic liver transplantation. The magnetic anastomosis technique (i.e., magnamosis) is a method of connecting two vessels using the attractive force between two magnets. Our recent study has shown that the magnetic anastomosis technique is superior to the hand-suture technique for SHVC reconstruction in rats. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using the novel magnetic anastomosis technique. In this model, the reconstruction of the PV and IHVC was performed by the standard cuff technique, while the reconstruction of the bile duct (BD) was performed by a stent technique. The hepatic re-arterialization was not performed. The magnetic anastomosis technique made SHVC reconstruction much easier and significantly shortened the anphepatic phase. After a reasonable learning curve, even researchers without advanced microsurgical skills can produce reliable and reproducible results using this rat model of OLT.

The reconstruction of the suprahepatic vena cava (SHVC) remains a difficult step in rat orthotopic liver transplantation. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using a novel magnetic anastomosis technique.

同所性同種のモデルラット Suprahepatic 上大静脈再建のため新規磁気吻合法を用いた肝移植

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

ラット型異形肝移植モデルにおける動脈リコネクション後の合併症の減少

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, including ischemia-reperfusion injury (IRI) of extrahepatic organs. This model requires numerous experiments and devices. The duration of anhepatic phase is closely related to the time to develop IRI after transplantation. In this experiment, we used hemodynamic changes to induce extrahepatic organ damage in rats and determined the maximum tolerance time. The time until the most severe organ injury varied for different organs. This method can easily be replicated and can also be used to study IRI of the extrahepatic organs after liver transplantation.

This paper provides a detailed description of how to build an animal model of the anhepatic phase (liver ischemia) in rats to facilitate basic research into ischemia-reperfusion injury after liver transplantation.

ラット肝移植モデルにおける血球力学的変化をシミュレートすることによる臓器虚血再灌流損傷

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...

マウス肝移植における効率的な血管吻合のための戦略

Vascular Reconstruction with the Cuff Technique in Mouse Orthotopic Liver Transplantation

Mouse orthotopic liver transplantation is an effective methodology for investigating the underlying mechanisms of liver ischemia and reperfusion injury. However, the technical challenges pose a barrier to utilizing this valuable experimental model and passing on these skills to the next generation. The most challenging aspect of this procedure is vascular reconstruction, including the portal vein (PV), infrahepatic inferior vena cava (IHIVC), and suprahepatic inferior vena cava. The use of plastic cuffs, rather than sutures, allows for smoother PV and IHIVC reconstruction. Vessels are reconstructed by attaching a cuff made from an intravenous catheter to the tip of the graft vessel and interposing the cuff into the recipient vessel. The two most crucial aspects are properly visualizing the inner lumen of the vessel and avoiding the use of excessive force. Our aim is to provide a technical overview of vascular reconstructions using the cuff technique in recipient surgery. These technical tips for the cuff technique are expected to help microsurgeons facilitate vascular reconstruction and advance their research.

著者スポットライト:脂肪肝移植における冷虚血と温再灌流障害の探索

This protocol provides technical information for vessel reconstruction using the cuff technique in mouse orthotopic liver transplantation.

マウス同所性肝移植におけるカフ技術による血管再建

Mouse orthotopic liver transplantation is an effective methodology for investigating the underlying mechanisms of liver ischemia and reperfusion injury. ...

再門脈部分肝移植のラット体内血管指向 70% 肝切除

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ラット同所性肝移植

肝動脈再建を用いた部分同所性肝移植のラットモデルのための外科的処置

急性肝障害における流れ調節性門脈動脈血と異補助ラット肝移植

ラットでの肝部分工学生体内での基盤として新しい手術手技

正常マウスで70％肝切除後の血管と実質再生の可視化

同所性同種のモデルラット Suprahepatic 上大静脈再建のため新規磁気吻合法を用いた肝移植

ラット型異形肝移植モデルにおける動脈リコネクション後の合併症の減少

ラット肝移植モデルにおける血球力学的変化をシミュレートすることによる臓器虚血再灌流損傷

マウス同所性肝移植におけるカフ技術による血管再建

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