Name: a morphometric and cellular analysis method for the murine mandibular condyle
Uploaded: 2018-01-11T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 7 s
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著者は、博士デビッド ・ ロウ提供いただきありがとうございます親切トランスジェニック マウスと李陳組織の援助をしたいと思います。
この出版物で報告された研究はだった国立歯科頭蓋顔面研究賞を受賞番号 K08DE025914 の下で健康の国民の協会 · スミット ・ ヤーダブに矯正基礎のアメリカ協会でサポートされています。

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著者は競合する金融興味を持ってないです。

この原稿は、形態計測およびマウス下顎頭および下顎骨の細胞分析のための方法を説明します。撮影形態計測は、実験用小動物から他の骨を分析する使用できます。また、細胞解析 (細胞の定量化と軟骨の距離マッピング) 齧歯動物の下顎に限定されないが多数の組織の組織学的セクションを定量化する使用ことができます。
蛍光レポーターを表現するトランスジェニック マウス モデルは、遺伝子発現の変化を視覚的に理解する優れたツールです。このレポートで使用されるダブル コラーゲン蛍光レポーター マウス モデル (Col2a1XCol10a1) だった MCC の勉強に特に向いている良くは、MCC の prehypertrophic および肥大地域で表されますので、コラーゲンの分布評価でした。研究者に蛍光レポーターを表現するトランスジェニック マウス モデルへのアクセスがあるない場合は、組織タンパク質の発現解析、蛍光抗体法などの他の方法を使用できます。
地形計測のキャビネットのレントゲン画像を撮影する前に重要なステップは分析する骨や下顎骨のすべての軟組織を取り除くことです。過剰な筋肉や骨に付着する軟部構造の実際の測定値のマスクでした。キャビネット レントゲン システムの制限事項に注意することが重要です。すべての x 線のような 3 次元構造の 2 次元表現だし、構造および成果物の重複を慎重に解釈する必要があります。さらに、レントゲン写真のキャビネット内のボーンの位置決めは一貫しているべきです。
肯定的なピクセルの数のカウントによって細胞の定量化、MCC など細胞の豊富な地域で組織定量化のための効率的な方法がこのアプローチの制限、セルの正確な数を行いません。さらに、以来、それは選択されたピクセルのみを定量化、別の画像を分析する際の強度の異なるピクセルの定量化を避けるために同じ「サンプリング」ピクセルを使用して興味のすべてのイメージを定量化する勧めします。
一般的な組織学的セクションを定量化する際のアドバイスは各サンプルの複数の連続切片を分析する (本稿では、3 つのシリアル セクション分析を行った各顆)、各サンプル内の変化は認められるので。
我々 の実験で説明した方法論は簡単、使いやすいと記者でマウスが使用されている任意の硬組織研究で使用できます。既存の方法論がトラップ (Col2a1 または Col10a1) または EdU (Col1a1 または Col2a1) の細胞の共局在の可視化による染色細胞を可視化することが可能です。

顎関節は顎顔面領域に位置するユニークな荷重関節で、線維軟骨の形成されます。顎関節の MCC が話すと、咀嚼しながら妨害されていない顎運動を含む関節の機能的な変性疾患、変形性関節症1を含む一般受けます。顎関節 MCC2,3,4、5のコンポーネントの構造および細胞の変更につながる外部刺激や負荷の変化に適応する能力があります。MCC の荷重特性は、水入り、コラーゲン ネットワークやプロテオグリカンが密集、成分間の相互作用によって説明できます。MCC はコラーゲンと非コラーゲン蛋白質の種類を表す 4 つの異なる細胞地帯: 1) 表在性または関節ゾーン;2) 増殖のゾーン、未分化間葉系細胞の構成要求の読み込みに対応します。3) prehypertrophic のゾーン、コラーゲン タイプ 2; を表現する成熟した軟骨細胞から成る・ 4)、肥大ゾーン、コラーゲンを表現する肥大軟骨細胞が死ぬ 10 を入力領域と石灰化を受けます。非鉱化地域は圧縮力6への抵抗を提供するプロテオグリカンが豊富です。
肥大軟骨軟骨から骨への転移が発生する MCC の継続的な鉱化作用がある7下顎頭の軟骨下骨の堅牢なミネラル構造を保証します。Unmineralized と鉱化地域の細胞の変化は、最終的に下顎頭および下顎骨の形態・構造の変化に します。クライアントのすべての携帯電話地域と軟骨部分の鉱化作用の恒常性の維持は、顎関節の健康、荷重容量性に不可欠です。
(前述の Utrejaらによって) 複数のコラーゲン トランスジェニック マウス モデル8は、すべての遺伝子は、MCC で表されるのでコラーゲン発現の変化を理解するを使用する素晴らしいツールです。詳細な病理組織学的評価、マトリックス析出、鉱化作用、細胞増殖、アポトーシス、MCC の異なる細胞層でのタンパク質発現を研究する組織学的汚れが使用されます。
この原稿、病理組織学的および形態計測学的解析はマウスの下顎の MCC と軟骨下骨の細胞および構造の変化を評価する使用されます。さらに、蛍光組織標本画像の分析や顕微鏡スライドをマッピングするためのように、セル定量化の方法を説明します。MCC と軟骨下骨9時細胞と形態学的変化が原因で、メソッドを読み込み、圧縮静的顎関節は、我々 の方法を検証するも示されています。
下顎頭および齧歯動物の下顎の組織変化と形態を決定するため、軟骨内骨化の他の地域とその他の硬組織の形態を分析したり、ここで説明する方法を使用できます。

<table><tbody><tr><td>MX20 Radiography System</td><td>Faxitron X-Ray LLC&amp;nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Digimizer Image software&amp;nbsp;</td><td>MedCalc Software</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Shandon Cryomatrix embedding resin</td><td>Thermo Scientific</td><td>6769006</td><td></td></tr><tr><td>Manual microscope Axio Imager Z1</td><td>Carl Zeiss</td><td>208562</td><td></td></tr><tr><td>yellow fluorescent protein filter&amp;nbsp; - EYFP</td><td>Chroma Technology Corp</td><td>49003</td><td></td></tr><tr><td>cyan fluorescent protein filter - ECFP</td><td>Chroma Technology Corp</td><td>49001</td><td></td></tr><tr><td>red fluoresecent protein filter - Cy5</td><td>Chroma Technology Corp</td><td>49009</td><td></td></tr><tr><td>sodium acetate anhydrous</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S2889</td><td></td></tr><tr><td>sodium L-tartrate dibasic dihydrate&amp;nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>228729</td><td></td></tr><tr><td>sodium nitrite&amp;nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>237213</td><td></td></tr><tr><td>ELF97 substrate</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>E6600</td><td></td></tr><tr><td>ClickiT EdU Alexa Fluor 594 HCS kit</td><td>Life Technologies</td><td>C10339&amp;nbsp;</td><td>includes EdU (5-ethynyl-2&#039;-deoxyuridine)&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>DAPI (4&#039;,6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride)</td><td>Thermo Scientific</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>Sodium phosphate dibasic&amp;nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S3264</td><td></td></tr><tr><td>Sodium phosphate monobasic&amp;nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>71505</td><td></td></tr><tr><td>Toluidine Blue O&amp;nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T3260</td><td></td></tr><tr><td>Adobe Photoshop&amp;nbsp;</td><td>Adobe Systems Incorporated</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Phosphate buffered saline tablets (PBS)</td><td>Research Products International</td><td>P32080-100T</td><td></td></tr><tr><td>CNA Beta III Nickel-Free Archwire</td><td>Ortho Organizers, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism&amp;nbsp;</td><td>GraphPad Software, Inc.</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

a morphometric and cellular analysis method for the murine mandibular condyle

顎の関節 (顎関節) は外部からの刺激に適応する能力と顆の位置だけでなく、下顎頭軟骨 (MCC) の構造および細胞のコンポーネントに影響を与えることができます変更を読み込んでいます。本稿では、これらの変更、マウス (すなわち、読み込んで圧縮の静的顎) の顎関節の荷重を変更するためのメソッドを分析するためのメソッドについて説明します。ここで示した構造の評価は Digimizer ソフトウェアを使用して、小さな骨のレントゲン写真で実行される単純な形態計測学的アプローチです。さらに、携帯の解析式コラーゲン、骨、細胞分裂の変化にリードを変更してクライアントにおけるプロテオグリカンの分布を説明しました。使用して肯定的な蛍光ピクセルを数えることでの組織学的セクションでこれらの変更の定量化画像ソフトウェアと測定距離マッピングとすすけるエリア Digimizer - でも実証されています。ここに示すメソッドは、マウスの顎関節に限定されないが、追加骨実験用小動物の軟骨内骨化の他の地域で使用できます。

記述統計を行った地形計測 (下顎長, 顆頭長, 顆頭幅) と組織学的解析の分布を調べる。結果は、読み込まれたグループ (すなわち、 β チタン スプリング圧縮荷重を受けるマウス) および制御グループ (すなわち、任意のプロシージャを受けなかったコントロール マウスと一致する) を比較した.対になっていない t 検定の p 値、平均値の間に統計的有意差を求めた < 0.05 は統計的に有意とみなされました。
形態計測、ステップ 4、図 3で説明したようは、読み込まれているの無顎類と制御グループで行われました。大幅に増加した下顎の長さは、読み込まれたグループ (ロード: 16.62 ± 0.23 mm と制御: 16.21 ± 0.2 mm; p < 0.05) と下顎頭の長さ (ロード: 4.6 mm、SD 制御対 0.08 mm: 4.4 mm;SD 0.06;p < 0.05) 制御グループと比較して。それにもかかわらず、下顎頭幅でグループ間に有意差はありませんでした (ロード: 3.06 ± 0.12 mm と制御: 2.9 ± 0.11; p = 0.09)。
大幅に明らかに手順 8 で説明したメソッドを使用してコラーゲン分布の定量化増加コントロールと比較すると読み込まれたグループの顆のクライアント センターの Col10a1 式 (ロード: 制御対 21% ± 4.46%: 7.50% ± 2.03%; p <0.005;図 8A と D)。その一方ではない統計的に読み込まれている間 Col2a1 式の違いと対照群 (ロード: 4.85% ± 1.95% とコントロールの比較: 2.92% ± 1.89%; p = 0.13。図 8B と E)。さらに、TRAP 活性の分析は、読み込まれたマウスの顆部軟骨増加 TRAP 陽性領域を示した (ロード: 5.28% ± 1.45% 対コントロール: 2.41% ± 1.39%; p < 0.05;図 8C と F)。コントロール マウスと比較すると読み込まれたグループのクライアント増加エドゥ陽性細胞によって示されるように高められた細胞増殖の観察同様に、(ロード: 6.23% ± 1.89% とコントロールの比較: 1.90% ± 1.03%; p < 0.05;図 9A および C)。
ロードの MCC とコントロール マウスにおけるプロテオグリカン分布は、ステップ 9 と図 7に記載したトルイジン ブルー染色領域との距離マップを評価し定量化だった。我々 が見つかりました大幅増加の距離マッピング コントロールと比較すると読み込まれたグループの顆の MCC (ロード: 制御対 210.22 μ m ± 4.11 μ m: 187.36 μ m ± 8.64 μ m; p < 0.005;図 9B と D)。しかし、プロテオグリカン染色領域が読み込まれている間で有意差ではなかったし, 対照群 (ロード: 203,897.93 μ m2 ± 10,171.00 μ m2対コントロール: 202,875.09 μ m2 ± 33,419.09 μ m2; p = 0.94;図 9B と E)
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55998/55998fig8.jpg"> 図 8: 代表的な結果: (A) Col10a1 陽性細胞制御と読み込まれたマウスから顆の MCC の矢状セクション。読み込まれたグループ(D)Col10a1 陽性細胞数の増加があります。(B) Col2a1 陽性細胞制御と読み込まれたマウス。Col2a1 陽性細胞のグループ(E)との間の違いはありません。(C)トラップのコントロールと読み込まれたマウスの顆で染色します。コントロール(F)と比較すると読み込まれたグループでトラップの活動を強化。ヒストグラム(D-F)を表す n 平均 ± SD 4 =グループごとします。* * 差制御と読み込まれたグループ (p < 0.005)。スケール バー = 200 μ m.<a href="//cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/55998/55998fig8large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55998/55998fig9.jpg"> 図 9:代表の結果: (A)エドゥがコントロールと読み込まれたマウスの顆で染色します。読み込まれたグループの高められた細胞増殖表される増加エドゥ陽性細胞(C)。(B)トルイジン ブルー染色コントロールと読み込まれたマウスの顆。実験群(D)の増加の距離マッピングで示すように読み込まれたマウスの軟骨厚みが増します。コントロールと読み込まれたグループ((E))の間のプロテオグリカン染色領域に違いはありません。ヒストグラム(C E)を表す n 平均 ± SD 4 =グループごとします。* * 差制御と読み込まれたグループ (p < 0.005)。スケール バー = 200 μ m.<a href="//cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/55998/55998fig9large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。

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A Morphometric and Cellular Analysis Method for the Murine Mandibular Condyle

この原稿は、形態および齧歯動物の下顎内携帯電話の変更を分析するための方法を示します。

形態とマウスの下顎頭軟骨細胞解析法

The temporomandibular joint (TMJ) has the capacity to adapt to external stimuli, and loading changes can affect the position of condyles, as well as the ...

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Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Biology

8.2K ビュー.  University of Connecticut Health Center. この原稿は、形態および齧歯動物の下顎内携帯電話の変更を分析するための方法を示します。

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Laser Capture Microdissection of Mouse Embryonic Cartilage and Bone for Gene Expression Analysis

Laser capture microdissection (LCM) is a powerful tool to isolate specific cell types or regions of interest from heterogeneous tissues. The cellular and molecular complexity of skeletal elements increases with development. Tissue heterogeneity, such as at the interface of cartilaginous and osseous elements with each other or with surrounding tissues, is one obstacle to the study of developing cartilage and bone. Our protocol provides a rapid method of tissue processing and isolation of cartilage and bone that yields high quality RNA for gene expression analysis. Fresh frozen tissues of mouse embryos are sectioned and brief cresyl violet staining is used to visualize cartilage and bone with colors distinct from surrounding tissues. Slides are then rapidly dehydrated, and cartilage and bone are isolated subsequently by LCM. The minimization of exposure to aqueous solutions during this process maintains RNA integrity. Mouse Meckel&rsquo;s cartilage and mandibular bone at E16.5 were successfully collected and gene expression analysis showed differential expression of marker genes for osteoblasts, osteocytes, osteoclasts, and chondrocytes. High quality RNA was also isolated from a range of tissues and embryonic ages. This protocol details sample preparation for LCM including cryoembedding, sectioning, staining and dehydrating fresh frozen tissues, and precise isolation of cartilage and bone by LCM resulting in high quality RNA for transcriptomic analysis.

This protocol describes laser capture microdissection for the isolation of cartilage and bone from fresh frozen sections of the mouse embryo. Cartilage and bone can be rapidly visualized by cresyl violet staining and collected precisely to yield high quality RNA for transcriptomic analysis.

遺伝子発現解析のためのマウス胚軟骨と骨のレーザー捕捉微小分片

Laser capture microdissection (LCM) is a powerful tool to isolate specific cell types or regions of interest from heterogeneous tissues. The cellular and ...

発生生物学

Dissection, MicroCT Scanning and Morphometric Analyses of the Baculum

Modern morphometrics provides powerful methods to quantify size and shape variation. A basic requirement is a list of coordinates that define landmarks; however such coordinates must represent homologous structures across specimens. While many biological objects consist of easily identified landmarks to satisfy the assumption of homology, many lack such structures. One potential solution is to mathematically place semi-landmarks on an object that represent the same morphological region across specimens. Here, we illustrate a recently developed pipeline to mathematically define semi-landmarks from the mouse baculum (penis bone). Our methods should be applicable to a wide range of objects.

Many biological structures lack easily definable landmarks, making it difficult to apply modern morphometric methods. Here we illustrate methods to study the mouse baculum (a bone in the penis), including dissection and microCT scanning, followed by computational methods to define semi-landmarks that are used to quantify size and shape variation.

陰茎骨の解剖、マイクロCTスキャンおよび形態計測分析

Modern morphometrics provides powerful methods to quantify size and shape variation. A basic requirement is a list of coordinates that define landmarks; ...

生物工学

A Simple Critical-sized Femoral Defect Model in Mice

While bone has a remarkable capacity for regeneration, serious bone trauma often results in damage that does not properly heal. In fact, one tenth of all limb bone fractures fail to heal completely due to the extent of the trauma, disease, or age of the patient. Our ability to improve bone regenerative strategies is critically dependent on the ability to mimic serious bone trauma in test animals, but the generation and stabilization of large bone lesions is technically challenging. In most cases, serious long bone trauma is mimicked experimentally by establishing a defect that will not naturally heal. This is achieved by complete removal of a bone segment that is larger than 1.5 times the diameter of the bone cross-section. The bone is then stabilized with a metal implant to maintain proper orientation of the fracture edges and allow for mobility. 
Due to their small size and the fragility of their long bones, establishment of such lesions in mice are beyond the capabilities of most research groups. As such, long bone defect models are confined to rats and larger animals. Nevertheless, mice afford significant research advantages in that they can be genetically modified and bred as immune-compromised strains that do not reject human cells and tissue.
Herein, we demonstrate a technique that facilitates the generation of a segmental defect in mouse femora using standard laboratory and veterinary equipment. With practice, fabrication of the fixation device and surgical implantation is feasible for the majority of trained veterinarians and animal research personnel. Using example data, we also provide methodologies for the quantitative analysis of bone healing for the model.

Animal models are frequently employed to mimic serious bone injury in biomedical research. Due to their small size, establishment of stabilized bone lesions in mice are beyond the capabilities of most research groups. Herein, we describe a simple method for establishing and analyzing experimental femoral defects in mice.

マウスの簡単な重要なサイズの大腿欠陥モデル

While bone has a remarkable capacity for regeneration, serious bone trauma often results in damage that does not properly heal. In fact, one tenth of all ...

医学

Analysis of Craniomaxillofacial Malformations in Mice Using Three-dimensional Microcomputed Tomography

To model craniofacial malformations caused by vitamin A deficiency (VAD), we expressed a dominant-negative retinoid receptor mutation in osteoblasts to specifically inhibit RAR transcriptional activity in mice. This approach allowed us to investigate the effects of VAD on cranial hypomineralization, mandibular deformity, and clavicular hypoplasia in clinical cases. In this study, microcomputed tomography (microCT) scanning of the craniomaxillofacial region of mice represented a valuable tool for studying the growth and development of this animal model. The manual estimation of images is both time-consuming and inaccurate. Hence, here, we present a straightforward, efficient, and accurate approach for segmenting and quantifying the microCT images of each craniomaxillofacial bone. MicroCT software was used to slice the mandible, frontal bone, parietal bone, nasal bone, premaxilla, maxilla, interparietal bone, and occipital bone of mice and measure their corresponding lengths and widths. This segmentation method can be applied to study growth and development in developmental biology, biomedicine, and other related sciences and allows researchers to analyze the effects of genetic mutations on individual craniofacial bones.

Here, we describe in depth a method, which is based on microcomputed tomography, to segment and measure 3D models of craniomaxillofacial bones in mice, for better assessment of craniomaxillofacial bone development in mice than what is possible with current methods.

3次元マイクロコンピュータ断層撮影法によるマウス頭蓋顎顔面奇形の解析

To model craniofacial malformations caused by vitamin A deficiency (VAD), we expressed a dominant-negative retinoid receptor mutation in osteoblasts to ...

Cantilever Bending of Murine Femoral Necks

Fractures in the femoral neck are a common occurrence in individuals with osteoporosis. Many mouse models have been developed to assess disease states and therapies, with biomechanical testing as a primary outcome measure. However, traditional biomechanical testing focuses on torsion or bending tests applied to the midshaft of the long bones. This is not typically the site of high-risk fractures in osteoporotic individuals. Therefore, a biomechanical testing protocol was developed that tests the femoral necks of murine femurs in cantilever bending loading to replicate better the types of fractures experienced by osteoporosis patients. Since the biomechanical outcomes are highly dependent on the flexural loading direction relative to the femoral neck, 3D printed guides were created to maintain a femoral shaft at an angle of 20&#176; relative to the loading direction. The new protocol streamlined the testing by reducing variability in alignment (21.6&#176; &plusmn; 1.5&#176;, COV = 7.1%, n = 20) and improved reproducibility in the measured biomechanical outcomes (average COV = 26.7%). The new approach using the 3D printed guides for reliable specimen alignment improves rigor and reproducibility by reducing the measurement errors due to specimen misalignment, which should minimize sample sizes in mouse studies of osteoporosis.

The present protocol describes the development of a reproducible testing platform for murine femoral necks in a cantilever bending set-up. Custom 3D printed guides were used to consistently and rigidly fix the femurs in optimal alignment.

マウス大腿骨首のカンチレバー曲げ

Fractures in the femoral neck are a common occurrence in individuals with osteoporosis. Many mouse models have been developed to assess disease states and ...

Standardized Histomorphometric Evaluation of Osteoarthritis in a Surgical Mouse Model

One of the most prevalent joint disorders in the United States, osteoarthritis (OA) is characterized by progressive degeneration of articular cartilage, primarily in the hip and knee joints, which results in significant impacts on patient mobility and quality of life. To date, there are no existing curative therapies for OA able to slow down or inhibit cartilage degeneration. Presently, there is an extensive body of ongoing research to understand OA pathology and discover novel therapeutic approaches or agents that can efficiently slow down, stop, or even reverse OA. Thus, it is crucial to have a quantitative and reproducible approach to accurately evaluate OA-associated pathological changes in the joint cartilage, synovium, and subchondral bone. Currently, OA severity and progression are primarily assessed using the Osteoarthritis Research Society International (OARSI) or Mankin scoring systems. In spite of the importance of these scoring systems, they are semiquantitative and can be influenced by user subjectivity. More importantly, they fail to accurately evaluate subtle, yet important, changes in the cartilage during the early disease states or early treatment phases. The protocol we describe here uses a computerized and semiautomated histomorphometric software system to establish a standardized, rigorous, and reproducible quantitative methodology for the evaluation of joint changes in OA. This protocol presents a powerful addition to the existing systems and allows for more efficient detection of pathological changes in the joint.

The current protocol establishes a rigorous and reproducible method for quantification of morphological joint changes that accompany osteoarthritis. Application of this protocol can be valuable in monitoring disease progression and evaluating therapeutic interventions in osteoarthritis.

外科用マウスモデルにおける変形性関節症の標準化組織形態評価

One of the most prevalent joint disorders in the United States, osteoarthritis (OA) is characterized by progressive degeneration of articular cartilage, ...

3D Imaging of PDL Collagen Fibers during Orthodontic Tooth Movement in Mandibular Murine Model

Orthodontic tooth movement is a complex biological process of altered soft and hard tissue remodeling as a result of external forces. In order to understand these complex remodeling processes, it is critical to study the tooth and periodontal tissues within their 3D context and therefore minimize any sectioning and tissue artefacts. Mouse models are often utilized in developmental and structural biology, as well as in biomechanics due to their small size, high metabolic rate, genetics and ease of handling. In principle this also makes them excellent models for dental related studies. However, a major impediment is their small tooth size, the molars in particular. This paper is aimed at providing a step by step protocol for generating orthodontic tooth movement and two methods for 3D imaging of the periodontal ligament fibrous component of a mouse mandibular molar. The first method presented is based on a micro-CT setup enabling phase enhancement&#160;imaging of fresh collagen tissues. The second method is a bone clearing method using ethyl cinnamate that enables imaging through the bone without sectioning and preserves endogenous fluorescence. Combining this clearing method with reporter mice like Flk1-Cre;TdTomato provided a first of its kind opportunity to image the 3D vasculature in the PDL and alveolar bone.

We present a protocol for generating orthodontic tooth movement in mice and methods for 3D visualization of the collagen fibers and blood vessels of periodontal ligament without sectioning.

下顎マウスモデルにおける歯歯運動中のPDLコラーゲン線維の3Dイメージング

Orthodontic tooth movement is a complex biological process of altered soft and hard tissue remodeling as a result of external forces. In order to ...

Destabilization of the Medial Meniscus and Cartilage Scratch Murine Model of Accelerated Osteoarthritis

Osteoarthritis is the most prevalent musculoskeletal disease in people over 45, leading to an increasing economic and societal cost. Animal models are used to mimic many aspects of the disease. The present protocol describes the destabilization and cartilage scratch model (DCS) of post-traumatic osteoarthritis. Based on the widely used destabilization of the medial meniscus (DMM) model, DCS introduces three scratches on the cartilage surface. The current article highlights the steps to destabilize the knee by transecting the medial meniscotibial ligament followed by three intentional superficial scratches on the articular cartilage. The possible analysis methods by dynamic weight-bearing, microcomputed tomography, and histology are also demonstrated. While the DCS model is not recommended for studies that focus on the effect of osteoarthritis on the cartilage, it enables the study of osteoarthritis development in a shorter time window, with special focus on (1) osteophyte formation, (2) osteoarthritic and injury pain, and (3) the effect of cartilage damage in the whole joint.

The present protocol describes the controlled microblade scratches on the surface of the articular cartilage after destabilizing the mouse knee by cutting the medial miniscotibial ligament. This animal model presents an accelerated form of osteoarthritis (OA) suitable for studying osteophyte formation, osteosclerosis, and early-stage pain.

加速変形性関節症の内側半月板および軟骨スクラッチマウスモデルの不安定化

Osteoarthritis is the most prevalent musculoskeletal disease in people over 45, leading to an increasing economic and societal cost. Animal models are ...

骨リモデリング解析のためのマウス上顎矯正モデルガイド

The Establishment of a Murine Maxillary Orthodontic Model

Due to the lack of reproducible protocols for establishing a murine maxillary orthodontic model, we present a reliable and reproducible protocol to provide researchers with a feasible tool to analyze mechanical loading-associated bone remodeling. This study presents a detailed flowchart in addition to different types of schematic diagrams, operation photos, and videos. We performed this protocol on 11 adult wide-type C57/B6J mice and harvested samples on postoperative days 3, 8, and 14. The micro-CT and histopathological data have proven the success of tooth movements coupled with bone remodeling using this protocol. Furthermore, according to the micro-CT results on days 3, 8, and 14, we have divided bone modeling into three stages: preparation stage, bone resorption stage, and bone formation stage. These stages are expected to help researchers concerned with different stages to set sample collection time reasonably. This protocol can equip researchers with a tool to carry out regenerative analysis of bone remodeling.

著者スポットライト:効率的なマウス上顎矯正モデルプロトコルへの洞察

Here we demonstrate step-by-step a manageable, orthodontic tooth movement protocol operated on a murine maxillary model. With the explicit explanation of each step and visual demonstration, researchers can master this model and apply it to their experimental needs with a few modifications.

マウス上顎矯正モデルの確立

Due to the lack of reproducible protocols for establishing a murine maxillary orthodontic model, we present a reliable and reproducible protocol to ...

形態とマウスの下顎頭軟骨細胞解析法

要約

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遺伝子発現解析のためのマウス胚軟骨と骨のレーザー捕捉微小分片

陰茎骨の解剖、マイクロCTスキャンおよび形態計測分析

マウスの簡単な重要なサイズの大腿欠陥モデル

3次元マイクロコンピュータ断層撮影法によるマウス頭蓋顎顔面奇形の解析

マウス大腿骨首のカンチレバー曲げ

外科用マウスモデルにおける変形性関節症の標準化組織形態評価

下顎マウスモデルにおける歯歯運動中のPDLコラーゲン線維の3Dイメージング

加速変形性関節症の内側半月板および軟骨スクラッチマウスモデルの不安定化

マウス上顎矯正モデルの確立

マウス上顎矯正モデルの確立