この作品は、ドイツ学術振興（SFB 656、ミュンスター、ドイツ、プロジェクトC7＆C6）とIZKFミュンスター（コアユニットSMAP）によってサポートされていました。著者らは、放射性トレーサーを製造するための優れた技術支援とダニエルビュルケルトとスベンFatumのためのチュックヴァンル、アンKanzog、ウテノイゲバウアー、Wiebke Gottschlich、ローマPriebeに感謝しています。

1。ドナー臓器の回復<ol><li>定位顕微鏡、8-10週齢ラットの記録量（ドナーとレシピエントの体重が一致している必要があります）を設定します。 </li><li>酸素/イソフルラン吸入を（イソフルラン4％/ 2 L /分の酸素）を使用して、ドナーラット（ルイスブラウンノルウェーF1、LBN F1）を麻酔。 2から2.5パーセントにイソフルラン下げることで麻酔を維持します。 </li><li>手術パッド上麻酔ラットを置きます。パッド上に粘着テープで、ラットの四肢を固定し、ラットの目に眼軟膏（Bepanthen、バイエル）を適用。 </li><li>剃るとラットの腹部を消毒し、恥骨から肝臓の尾国境に腹側正中切開を行います。慎重に右側に腸を動かすことにより左腎とその血管を公開します。左腎上のガーゼの薄いシートを置き、乾燥を防ぐために温めておいた等張食塩水でそれを湿ら。 </li><li>慎重に（デュモンアングルティップ鉗子で脂肪組織を解剖デュモンSS-45鉗子イノックス医療、ファイン科学ツール、カタログ番号11203から25）、左尿管を包む。尿管との直接の接触を避け、代わりに、十分な周囲の脂肪組織でそれを動員する。 </li><li>デュモン斜めヒントピンセットを用いて腎動脈から左腎静脈を分離。両方の血管からすべての脂肪と結合組織を削除して、副腎や精巣血管を焼灼する。 </li><li>それぞれ、左腎動脈と静脈との接合部の上下大動脈と下大静脈（IVC）を解剖すると、すべての発信動脈を焼灼。 </li><li>上腸間膜動脈にできるだけ近くに、左腎動脈上顕微クランプ（マイクロSerrefines、ファイン科学ツール、カタログ番号18055から04まで）と副腎大動脈をクランプ。外科絹（5-0、Vömel、アートなし。14739）左腎動脈下約5mmを使って大動脈大動脈を連結。 </li><li>外科絹（5-0、Vömel）で大動脈IVCを連結し、副腎IVCをクランプ顕微クランプ付き（マイクロSerrefines、ファイン科学ツール、カタログ番号18055から03）。 </li><li>細かいハサミを（ - ToughCutストレート11.5センチメートル、ファイン科学ツール、カタログ番号14058から11アイリスはさみ）を使用してできるだけ近くIVCに腎静脈を切った。 </li><li>ゆっくり大動脈大動脈カニューレ（Microlance 3 27G¾、BD、カタログ番号302200）を挿入して2ミリリットルの氷冷HTK灌流液（CUSTODIOL HTK、博士はフランツ·ケーラーChemie社）とその場で腎臓灌流。腎臓の色の変化（現在はオリーブ彩色）ことを確認してください。 </li><li>まず、最終的に大動脈大動脈と膀胱にできるだけ近い尿管その後、副腎大動脈を横断する。 </li><li>氷の上でHTK灌流液中尿管や店舗とともに腎臓とその血管供給を削除します。 </li><li>麻酔下で心臓の血管のクランプと連続した切除を除去することにより、ドナーラットを安楽死させる。 </li></ol> 2。受信者の準備とTransplantaる<ol><li>定位顕微鏡、記録、ラットの体重を設定します。 </li><li>イソフルラン4％を使用したレシピエントラット（ルイス）を麻酔。 2から2.5パーセントにイソフルラン下げることで麻酔を維持します。 </li><li>手術パッド上麻酔ラットを置きます。パッド上に粘着テープで、ラットの四肢を固定し、ラットの `sの目に眼軟膏を適用します。直腸温度センサ加温パッドを使用して監視および制御中核体温。手術中に繰り返し温度、呼吸や動物の心拍数を制御します。 </li><li>剃ると腹部を消毒し、恥骨から肝臓の尾国境に腹側正中切開を行います。皮膚の外傷を最小限にするためにメスforcuttingのスキンを使用。右側に腸を動かすことにより左腎とその血管を公開します。 </li><li>注意深くデュモン斜めヒント鉗子や綿棒を使って腎カプセルを削除します。 </li><li>腎近左腎動脈、静脈と尿管を閉塞手術糸を（4-0 Mersilene、エチコン、カタログ番号EH6732H）を使用して2つのライゲーションと門。物品だけ腎門を残して腎臓の大部分は、。綿棒で切断面をきれいにし、出血を確認してください。必要に応じて別の字を追加します。 </li><li>慎重に綿棒と尾サイトに大動脈大動脈と大静脈をカバーする結合組織を通してぶっきらぼうに解剖する。 </li><li>デュモン斜めヒントピンセットを用いて大動脈大動脈と大静脈からの目に見える神経を分離。 </li><li>最初精巣血管の分岐下、および総腸骨血管の分岐上記の2番目の1：慎重に2〜4ミリメートルの長さの2つの開口部を形成し、大動脈大動脈と大静脈の間に結合組織シートを解剖する。間に腸腰動脈と静脈を焼灼。 </li><li>二つの開口部のそれぞれを通して、シングル手術糸（エチコン、猫no.EH6665E。Mersilene 0）を描画します。これらのスレッドを使用すると、大動脈を引っ張るそっと背サイトに分岐血管へのアクセスを得るための動物の右側に大動脈と大静脈。二つの開口部の間にこれらの血管のいずれかを焼灼し、その後手術のスレッドを削除します。 </li><li>次に、大動脈と上部開口部から始まり、上部開口（マイクロSerrefinesで下大静脈で終わる4顕微クランプ（マイクロSerrefines、ファイン科学ツール、カタログ番号18055から04）を時計回りに、アプリケーションによって大動脈とIVCを閉塞、ファイン科学ツール、カタログ番号18055から03）。 </li><li>その後慎重に穴を開ける針で大動脈の孤立部分の上部エンディング（Microlance 3 27G¾、BD、カタログ番号302200）は、細かい春のはさみ（Vannasスプリングはさみの下刃を挿入する - 3ミリメートルブレード、ファイン穿刺開口を通して科学ツール、cat.no 15000から00）と短い縦切開を行います。残りの血液を除去するために氷冷HTK灌流液で孤立大動脈をフラッシュします。 </li><li>同様に、慎重に穴を開ける針で静脈の隔離部の下部結末は、穿刺口から細かい春のはさみの下刃を挿入し、まもなく大動脈切開下に終わる縦切開を行います。繰り返しになりますが、残りの血液を除去するために容器をフラッシュします。 </li><li>ストレージソリューションから腎臓移植を削除します。左腎の元の位置の下に配置し、それが正しい方向であることを確認します。 </li><li>移植腎動脈の向きを確認し、ねじれがないことを確認。その後、移植上のガーゼの薄いシートを配置し、それを冷却するために氷のように冷たいHTK灌流液でそれを湿らせて、乾燥を防ぐために。 </li><li>アッパーで最初の、その後の下端 - 移植の腎動脈が、手術糸（。Ethilon 9-0、エチコン、猫なし2809G）とに開口する大動脈部分の副腎部の開口部を固定大動脈切開。手術糸を使用して連続縫合で時計回りに切開を閉じ（Ethilon 9-0）、デュモン斜めヒント鉗子と湾曲Castroviejo針ホルダ（ファイン科学ツール、カタログ番号12061から01）。その後、反時計回りに第2の連続縫合糸を通して結合組織を持つ最初の縫合糸をカバーしています。さて、グラフトの大動脈部分の唯一の下部には、閉鎖されていない。定期的に氷のように冷たいHTK灌流液で移植片を冷却する。 </li><li>縫合糸の気密性と整合性の検証、ならびに移植片の残りの血液を除去グラフトの大動脈片の開放端に挿入された鈍針を通して氷冷灌流HTK溶液1mlで移植片を灌流する。その後、外科絹（5-0、Vömel）と大動脈の部分の開放端を連結。 </li><li>移植腎静脈の向きを確認し、ねじれがないことを確認。 </li><li>大静脈に切開の下端にその後、アッパーで最初の - 手術糸（Ethilon 9-0）とグラフトの静脈の開口部を固定。切開を閉じ手術糸（Ethilon 9-0）、デュモン斜めヒント鉗子と湾曲Castroviejo針ホルダーを用いて連続縫合で時計回りに。定期的に氷のように冷たいHTK灌流液で移植片を冷却する。 </li><li>最大静脈クランプで始まる、顕微クランプを取り外し反時計回り。最後の大動脈クランプを除去した後、慎重に綿棒で、最終的に軽度の出血を止める。数秒後に移植はバラ色の彩色になり、そしてuretric収縮が表示されるはずです。 </li><li>受信者の `sの膀胱に移植尿管の挿入は慎重Vannasスプリングシザー（学生Vannasスプリングシザーストレート、ファイン科学ツール、カタログ番号91500から09を使用して膀胱の上部にある筋肉の小さなパッチを削除するための）。その後、デュモン角度の先端鉗子を使用して移植尿管から周囲の組織（主に脂肪）を取り外します。したがって、慎重に尿管の先端をつかむと、優しく周囲の脂肪、結合組織を分離し、埋め込まれた血管あちこち反対方向にそれらを引っ張ることによってそれをメートル。手術糸（PROLENE 6-0、エチコン、カタログ番号8697H）の末尾uretric先端を固定し、付属の針で膀胱の予め準備上部を穿孔。膀胱を通して尿管を引いて、第二の穿孔を介してベースでそれを終了します。 </li><li>手術糸（Ethilon 9-0）で膀胱の上部にある組織を分離した尿管から以前にこだわる。添付された手術糸と尿管の先端を切って静かに下から押して、膀胱に戻し尿管を引っ張る。その後、手術糸（Ethilon 9-0）と第二膀胱穿刺を閉じます。 </li><li>手術用縫合糸（Mersilene 0）を使用して、連続する二つの独立したが、縫合によって腹壁と皮膚を閉じます。 Pividonヨウ素を使用して傷を消毒し、傷の痛みを制御するために、手術後三日間ブプレノルフィン量（kg / BW /入札当たり0.1 mg）を皮下投与する。 </li></ol> 3。イメージング同種移植の拒絶<ol><li>イソフルラン2から2.5パーセントを使用して非空腹ラットを麻酔。 </li><li> 30 MBqのFDG（0.​​1ミリリットル0.9％NaCl中30 MBqのFDG）が24 Gカテーテル（ブラウン、Introcan、4252500から01）を使用して、横方向の尾静脈をcatheterizing介して静脈内投与する。その後、0.9ミリリットル0.9％NaCl溶液でカテーテルをパージ。 </li><li>毎時0.9％NaCl溶液1mlを静脈注射により動物のスキャンの開始とハイドまで麻酔なしで拘束ラットのままにしておきます。 </li><li>スキャンが開始される直前にイソフルラン2％を使用してラットの再麻酔。 </li><li>高解像度のマルチワイヤ室ベースの動物PETカメラquadHIDAC（オックスフォード陽電子システムズ株式会社、オックスフォード、英国）で開催麻酔ラット。 PETスキャナの空間分解能が1.0mmで、全FOV（直径165ミリメートル、軸方向長さ280 mm）の上で一定である。パルスオキシメータと直腸温度センサーと制御麻酔を使用してスキャン中にモニタと制御体温。 </li><li> 60メートルの動的取得を開始FDGの腎排泄に起因する腎臓でトレーサーの蓄積を減らすためにFDG-注入後180分を開始した。 </li><li> 18 F-フッ化物IVの5 MBqのを適用し、腎実質の識別のために、18 F-クリアランス5の計算のためのスキャナでラットの位置を移動することなくすぐに60分間、18 F-フッ化物注射後に別のPETスキャンを実行します。両方のスキャンから画像を再構成する。手動で2分腎皮質の周りに18 F-フッ化物注射液（灌流相）後に再構成された画像上で関心体積（VOI）をトレースし、FDG画像にVOIを転送します。慎重にVOIから腎盂を除外します。両方のスキャンから画像を再構成して、手動で腎皮質の周り関心体積（VOI）をトレース。リストモードデータは0.4×0.4×0.4ミリメートル3のボクセルサイズで画像に再構成された。慎重にVOIから腎盂を除外します。 </li><li>比OによるFDG集積を計算fの合計数と量と注入された投与量（％ID）の割合を計算します。私たちは、画像解析のためのMATLAB（バージョンR2011b、MathWorks社、ナティック、MA、USA）と断層画像（TIM）バージョン2.8を使用していました。 </li></ol>

<ol><li>Wu, O., Levy, A. R., Briggs, A., Lewis, G., Jardine, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+rejection+and+chronic+nephropathy%3A+a+systematic+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Acute rejection and chronic nephropathy: a systematic review of the literature.</a> Transplantation. 87, 1330-1339 (2009).</li>
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</ol>

利害の衝突は宣言されていない。

FDG-PETイメージングは​​、急性拒絶反応の診断のための新しいオプションです。なぜなら、その非侵襲的かつ特異的な性質のため、FDG-PETは、コア針生検による古典的な診断と比較して利点がある。生検、FDG-PET解析移植片全体の限られたサンプルサイズとは対照的である。また、人は抗凝固療法を受けている患者に適用することができ、もう一方は繰り返し処理効率4を監視するために例えば PETの措置を行うことができます。また、既にAR、虚血再灌流障害および急性カルシニューリン阻害剤の毒性によって引き起こされる、すなわち急性尿細管壊死、2つの主要な鑑別診断は、FDG-PET 3を用いARから区別することができることを示している。 FDG-PETイメージングは​​、移植患者及び/又は腎機能障害のある患者のどちらかの活動とイメージングの比較的低い量は、このアプローチは簡単に転送することができます重篤な合併症のリスク増加に関連付けられていない必要がありますので、毎日の臨床ルーチンに。 それにもかかわらず、人はFDGは、地域の代謝活性を評価することではなく、非特異的なトレーサーであることを心に留めておく必要があります。したがって、移植感染症や腫瘍だけでなく、偽陽性の結果につながる可能性があります。腎実質にFDGの取り込みを評価する際に腎盂にFDGの排水が問題になるかもしれません。したがって、我々は、三時間FDGの腎排泄に起因する腎臓でトレーサーの蓄積を減らすために注射した後、後半の捕捉時間を選択しました。また、腎盂、腎FDGの取り込みを定量するときに慎重に除外する必要があります。このプロトコルPETに係る非侵襲ATNとCSAと区別するため、およびフォローアップのための又は治療の効率性3,4,6の評価のための連続的な調査を行うために、ARを検出することができる。 18 F-フッ化物を用いたPETは公開BEFとして腎フックリアランスの計算で（分割）腎機能を評価するためにも便利です鉱石5。 LBN F1ドナーとレシピエントルイスラットを用いた同種腎移植モデルは、急性細胞の同種移植片拒絶反応の調査のための理想的なモデルです。免疫抑制の非存在下では同種移植腎臓はバンフ分類7によるARの典型的な組織学的徴候を開発しています。さらに、選ばれたモダリティ（ユニ対移植3、8-10 binephrectomized）に応じて代謝データは同種移植片機能を監視するだけでなく、評価できる。免疫抑制治療がないため、傷やラットの全身感染は非常にまれです。このモデルの一般的な外科手術の合併症は主に、受信者の大動脈またはICVにグラフト脈管の挿入点で見られる血管狭窄が挙げられる。これは、虚血又はグラフト血栓症を引き起こす可能性があります。一つは、大動脈とIVCに長い切開を使用することで、この複雑化を避けることができます。時には、尿毒症が原因で移植故障やuに発見された圧着端子の漏れは、膀胱から尿管の尿管壊死や断線が原因で発生。食欲や自発的な体重増加の尿毒症など無関心、損失の兆候が発生した場合、動物はすぐに安楽死させなければならない。

<table><tbody><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;Equipment&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>Mathieu Needle Holder - 14 cm</td><td>Fine Science Tools</td><td>12010-14</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo Micro Needle Holder - 9 cm</td><td>Fine Science Tools</td><td>12061-01</td><td></td></tr><tr><td>Surgical Scissors - Sharp_Blunt</td><td>Fine Science Tools</td><td>14001-12</td><td></td></tr><tr><td>Iris Scissors - ToughCut Straight 11.5 cm</td><td>Fine Science Tools</td><td>14058-11</td><td></td></tr><tr><td>Student Vannas Spring Scissors </td><td>Fine Science Tools</td><td>91500-09</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Spring Scissors - 3 mm Blades</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>Student Tissue Forceps - 1x2 Teeth 12 cm</td><td>Fine Science Tools</td><td>91121-12</td><td></td></tr><tr><td>Dumont SS-45 Forceps - Inox Medical</td><td>Fine Science Tools</td><td>11203-25</td><td></td></tr><tr><td>Micro-Serrefine Clip Applicator with Lock</td><td>Fine Science Tools</td><td>18056-14</td><td></td></tr><tr><td>Micro-Serrefine 6 mm x 1 mm</td><td>Fine Science Tools</td><td>18055-03</td><td></td></tr><tr><td>Micro-Serrefine 4 mm x 0.75 mm</td><td>Fine Science Tools</td><td>18055-04</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;Reagent&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>Isoflurane (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; Forene 100% v/v)</td><td>Abott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>cutane antiseptic (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; Octeniderm) </td><td>Sch&amp;#252;lke</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Povidone Iodine (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; Betaisodona)</td><td>Mundipharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ophthalmic ointment (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; Bepanthen)</td><td>Bayer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphin (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; Temgesic)</td><td>RB Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HTK perfusion solution (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; CUSTODIOL HTK)</td><td>Dr. Franz K&amp;#246;hler Chemie</td><td></td><td></td></tr><tr><td>surgical thread Mersilene 0</td><td>Ethicon</td><td>EH6665E</td><td></td></tr><tr><td>surgical thread Mersilene 4-0</td><td>Ethicon</td><td>EH6732H</td><td></td></tr><tr><td>surgical thread Prolene 6-0</td><td>Ethicon</td><td>8697H</td><td></td></tr><tr><td>surgical thread Ethilon 9-0</td><td>Ethicon</td><td>2809G</td><td></td></tr><tr><td>surgical silk 5-0</td><td>V&amp;#246;mel</td><td>14739</td><td></td></tr><tr><td>Canula (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; Microlance 3, 27G &amp;#190;)</td><td>BD</td><td>302200</td><td></td></tr></tbody></table>

non-invasive imaging of acute allograft rejection after rat renal transplantation using 18f-fdg pet

末期腎疾患の患者の数、腎同種移植レシピエントの数が増加し続ける。急性細胞の同種移植片拒絶反応（AR）のエピソードは、長期的な同種移植片生存のための負の予後因子であり、そのタイムリーな診断は、同種移植片機能1のために極めて重要である。現時点では、ARのみ間違い侵襲的な方法として、移植傷害あるいは損失の重大なリスクをむく、コア針生検によって診断することができる。また、生検は、抗凝固薬を服用した患者で実現不可能であり、ARが焦点または斑状である場合は、この手法の限られたサンプリングサイトは偽陰性の結果になることがあります。結果として、これはしばしば、様々な移植モデルの使用を含む動物に行わなければならない新しいAR検出方法に対する継続的な検索をもたらした。 60代前半ラット腎移植はexaminための十分に確立された実験的な方法であるため、AR 2 ATIONと分析。さらに小動物陽電子放射断層撮影（PET）が同種片側腎摘出ラット腎移植モデルでARを評価し、非侵襲的に、特定のための新たな選択肢として移植FDG-PETイメージングを提案する18 F-フルオロデオキシグルコース（FDG）を使用して、我々はここに存在し人間の状況3にもARのと早期診断。さらに、この方法は、移植片拒絶4の監視を改善するためのフォローアップのために適用することができる。

組織学 AR白血球の間に、 すなわち 、主にTリンパ球拒絶反応の重症度は、炎症の程度によって反射されるのに対し、移植に補充される。ここに示されている定期的な酸シッフ（PAS）染色（ 図1）では、腎同種移植片はAR、すなわち糸球体炎、尿細管炎、endothelialitisとグラフト浸潤（ 図1、ATX POD4）（POD =病日）の重要な組織学的兆候を示してい拒絶反応の兆候は、ネイティブコントロール腎臓（ 図1、CTR）には存在しない一方、グラフト浸潤細胞はブドウ糖を大量に消費する高度に代謝的に活発な細胞である。後者はFDGで置換されている場合は、これは、細胞内に蓄積され、PETにより測定し、定量することができる。 PET画像らの一連の動的な全身買収の代表PET画像logeneically 30 MBqのFDG（最大事後地図投影、180分π）（ 図2）の尾静脈注射した後、ラットを移植。典型的なFDG分布は脳、心臓、骨髄およびハーダー腺における異なる生理的蓄積と発見された。また、無料の濾過FDGは、尿路に蓄積。ネイティブ腎臓（緑色の丸、右腎）がまったく蓄積を示さないのに対し、AR実質を受けて腎移植（黄色の円、左腎）の高い、POD4で最大FDGを蓄積する。腎盂は無料排除FDGを含めることができますので、さらに測定結果から除外された。 3から取ら図。 定量的評価定量的な評価イメージが再構築されたために、興味のあるボリュームは18 F-フッ灌流に従って腎臓の周り手動トレースとFDG画像上に投影された。腎PEの除外後にLVISは腎実質にFDG集積がボリューム（％ID±SEM）に合計数の割合により計算したことを意味します。ネイティブコントロール（0.2±0.02％）またはsyngeneically移植腎臓（0.37±0.04％）と比較した場合、ARを開発する腎臓はPOD4で大幅に増加したFDG集積を（0.8±0.06％）を示した。また、ARの二つの主要な鑑別診断、虚血/再灌流障害（IRI）（0.31±0.02％）、急性カルシニューリン阻害毒性（CSA）（0.16±0.01％）のように、すなわち急性尿細管壊死が高いFDGの蓄積とを示さなかったしたがって、AR（3から取ら図3）と区別することができる。 <img src="/files/ftp_upload/4240/4240fig1.jpg" alt="図1"/> 図1。急性拒絶反応の組織学。看板、すなわち糸球体炎、尿細管炎、endothelialitis、グラフト浸潤が、同種移植群で発見された（ATX）と制御腎臓（CTR）に完全に存在しなかった。 <img src="/files/ftp_upload/4240/4240fig2.jpg" alt="図2"/> 図2。 allogeneically移植ラットの一連の動的な全身買収のFDG-PET画像は代表的なPET-画像。制御腎臓と比較して（緑丸）POD4上の最大腎同種移植の実質（黄色の丸）FDGを蓄積する。腎盂は無料排除FDGを含めることができますので、それは測定から除外しております。 3から取ら図。 <img src="/files/ftp_upload/4240/4240fig3.jpg" alt="図3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/4240/4240fig3highres.jpg"/> 図3。定量的評価。FDGの％IDを測定による急性拒絶反応の検出。腎同種移植片（ATX）が有意に高いFを示す0.8±0.06％CTR：0.2±0.02 syngeneically制御腎臓（CTR）、同種移植（STX）、POD4（ATXで急性尿細管壊死（ATN）または最大急性カルシニューリン阻害剤の毒性（CSA）と腎臓と腎臓よりDGの蓄積％、STX：0.37±0.04％％、ATN：0.31±0.02％％、CSA：0.16±0.01％）。 3から取ら図。

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18F-FDG PETを使用したラット腎移植後の急性同種移植片拒絶反応の非侵襲的イメージング |医学 |ビデオ

Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

我々はここに非侵襲的に18F-フルオロデオキシと陽電子放射断層撮影法を用いた急性同種移植片拒絶反応を評価するために、ラット腎移植モデルを提示する。

使用したラット腎移植後の急性拒絶反応の非侵襲的イメージング<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG PET

The number of patients with end-stage renal  disease, and the number of kidney allograft recipients continuously increases.  Episodes of acute cellular ...

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Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

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16.9K ビュー.  University of Münster. 我々はここに非侵襲的に18F-フルオロデオキシと陽電子放射断層撮影法を用いた急性同種移植片拒絶反応を評価するために、ラット腎移植モデルを提示する。

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PET and MRI Guided Irradiation of a Glioblastoma Rat Model Using a Micro-irradiator

For decades, small animal radiation research was mostly performed using fairly crude experimental setups applying simple single-beam techniques without the ability to target a specific or well-delineated tumor volume. The delivery of radiation was achieved using fixed radiation sources or linear accelerators producing megavoltage (MV) X-rays. These devices are unable to achieve sub-millimeter precision required for small animals. Furthermore, the high doses delivered to healthy surrounding tissue hamper response assessment. To increase the translation between small animal studies and humans, our goal was to mimic the treatment of human glioblastoma in a rat model. To enable a more accurate irradiation in a preclinical setting, recently, precision image-guided small animal radiation research platforms were developed. Similar to human planning systems, treatment planning on these micro-irradiators is based on computed tomography (CT). However, low soft-tissue contrast on CT makes it very challenging to localize targets in certain tissues, such as the brain. Therefore, incorporating magnetic resonance imaging (MRI), which has excellent soft-tissue contrast compared to CT, would enable a more precise delineation of the target for irradiation. In the last decade also biological imaging techniques, such as positron emission tomography (PET) gained interest for radiation therapy treatment guidance. PET enables the visualization of e.g., glucose consumption, amino-acid transport, or hypoxia, present in the tumor. Targeting those highly proliferative or radio-resistant parts of the tumor with a higher dose could give a survival benefit. This hypothesis led to the introduction of the biological tumor volume (BTV), besides the conventional gross target volume (GTV), clinical target volume (CTV), and planned target volume (PTV).
At the preclinical imaging lab of Ghent University, a micro-irradiator, a small animal PET, and a 7 T small animal MRI are available. The goal was to incorporate MRI-guided irradiation and PET-guided sub-volume boosting in a glioblastoma rat model.

In the past, small animal irradiation was usually performed without the ability to target a well-delineated tumor volume. The goal was to mimic the treatment of human glioblastoma in rats. Using a small animal irradiation platform, we performed MRI-guided 3D conformal irradiation with PET-based sub-volume boosting in a preclinical setting.

PET や MRI 誘導照射ラットの神経膠芽腫モデルのマイクロ照射器を使用して

For decades, small animal radiation research was mostly performed using fairly crude experimental setups applying simple single-beam techniques without ...

がん研究

Utilizing 18F-FDG PET/CT Imaging and Quantitative Histology to Measure Dynamic Changes in the Glucose Metabolism in Mouse Models of Lung Cancer

A hallmark of advanced tumors is a switch to aerobic glycolysis that is readily measured by [18F]-2-fluoro-2-deoxy-D-glucose positron emission tomography (18F-FDG PET) imaging. Co-mutations in the KRAS proto-oncogene and the LKB1 tumor suppressor gene are frequent events in lung cancer that drive hypermetabolic, glycolytic tumor growth. A critical pathway regulating the growth and metabolism of these tumors is the mechanistic target of the rapamycin (mTOR) pathway, which can be effectively targeted using selective catalytic mTOR kinase inhibitors. The mTOR inhibitor MLN0128 suppresses glycolysis in mice bearing tumors with Kras and Lkb1 co-mutations, referred to as KL mice. The therapy response in KL mice is first measured by 18F-FDG PET and computed tomography (CT) imaging before and after the delivery of MLN0128. By utilizing 18F-FDG PET/CT, researchers are able to measure dynamic changes in the glucose metabolism in genetically engineered mouse models (GEMMs) of lung cancer following a therapeutic intervention with targeted therapies. This is followed by ex vivo autoradiography and a quantitative immunohistochemical (qIHC) analysis using morphometric software. The use of qIHC enables the detection and quantification of distinct changes in the biomarker profiles following treatment as well as the characterization of distinct tumor pathologies. The coupling of PET imaging to quantitative histology is an effective strategy to identify metabolic and therapeutic responses in vivo in mouse models of disease.

Utilizing 18F-FDG PET/CT Imaging and Quantitative Histology to Measure Dynamic Changes in the Glucose Metabolism in Mouse Models of Lung Cancer

In this protocol, we describe how to utilize [18F]-2-fluoro-2-deoxy-D-glucose positron emission tomography and computed tomography (18F-FDG PET/CT) imaging to measure the tumor metabolic response to the targeted therapy MLN0128 in a Kras/Lkb1 mutant mouse model of lung cancer and coupled imaging with high resolution ex vivo autoradiography and quantitative histology.

肺癌のマウスモデルにおける糖代謝の動的変化を測定する18F-FDG PET/CT イメージングと定量組織学を活用

A hallmark of advanced tumors is a switch to aerobic glycolysis that is readily measured by [18F]-2-fluoro-2-deoxy-D-glucose positron emission tomography ...

Management of Respiratory Motion Artefacts in 18F-fluorodeoxyglucose Positron Emission Tomography using an Amplitude-Based Optimal Respiratory Gating Algorithm

Positron emission tomography (PET) combined with X-ray computed tomography (CT) is an important molecular imaging platform that is required for accurate diagnosis and clinical staging of a variety of diseases. The advantage of PET imaging is the ability to visualize and quantify a myriad of biological processes in vivo with high sensitivity and accuracy. However, there are multiple factors that determine image quality and quantitative accuracy of PET images. One of the foremost factors influencing image quality in PET imaging of the thorax and upper abdomen is respiratory motion, resulting in respiration-induced motion blurring of anatomical structures. Correction of these artefacts is required for providing optimal image quality and quantitative accuracy of PET images.
Several respiratory gating techniques have been developed, typically relying on acquisition of a respiratory signal simultaneously with PET data. Based on the respiratory signal acquired, PET data is selected for reconstruction of a motion-free image. Although these methods have been shown to effectively remove respiratory motion artefacts from PET images, the performance is dependent on the quality of the respiratory signal being acquired. In this study, the use of an amplitude-based optimal respiratory gating (ORG) algorithm is discussed. In contrast to many other respiratory gating algorithms, ORG permits the user to have control over image quality versus the amount of rejected motion in the reconstructed PET images. This is achieved by calculating an optimal amplitude range based on the acquired surrogate signal and a user-specified duty cycle (the percentage of PET data used for image reconstruction). The optimal amplitude range is defined as the smallest amplitude range still containing the amount of PET data required for image reconstruction. It was shown that ORG results in effective removal of respiration-induced image blurring in PET imaging of the thorax and upper abdomen, resulting in improved image quality and quantitative accuracy.

Management of Respiratory Motion Artefacts in 18F-fluorodeoxyglucose Positron Emission Tomography using an Amplitude-Based Optimal Respiratory Gating Algorithm

Amplitude-based optimal respiratory gating (ORG) effectively removes respiratory-induced motion blurring from clinical 18F-fluorodeoxyglucose (FDG) positron emission tomography (PET) images. Correction of FDG-PET images for these respiratory motion artefacts improves image quality, diagnostic and quantitative accuracy. Removal of respiratory motion artefacts is important for adequate clinical management of patients using PET.

振幅ベース最適呼吸格子アルゴリズムを用いた 18F-フルオロデオキシグルコースポジトロン放出断層撮影における呼吸運動アーティファクトの管理

Positron emission tomography (PET) combined with X-ray computed tomography (CT) is an important molecular imaging platform that is required for accurate ...

Dynamic Imaging of Chimeric Antigen Receptor T Cells with [18F]Tetrafluoroborate Positron Emission Tomography/Computed Tomography

T cells genetically engineered to express chimeric antigen receptors (CAR) have shown unprecedented results in pivotal clinical trials for patients with B cell malignancies or multiple myeloma (MM). However, numerous obstacles limit the efficacy and prohibit the widespread use of CAR T cell therapies due to poor trafficking and infiltration into tumor sites as well as lack of persistence in vivo. Moreover, life-threatening toxicities, such as cytokine release syndrome or neurotoxicity, are major concerns. Efficient and sensitive imaging and tracking of CAR T cells enables the evaluation of T cell trafficking, expansion, and in vivo characterization and allows the development of strategies to overcome the current limitations of CAR T cell therapy. This paper describes the methodology for incorporating the sodium iodide symporter (NIS) in CAR T cells and for CAR T cell imaging using [18F]tetrafluoroborate-positron emission tomography ([18F]TFB-PET) in preclinical models. The methods described in this protocol can be applied to other CAR constructs and target genes in addition to the ones used for this study.

Dynamic Imaging of Chimeric Antigen Receptor T Cells with [18F]Tetrafluoroborate Positron Emission Tomography/Computed Tomography

This protocol describes the methodology for non-invasively tracking T cells genetically engineered to express chimeric antigen receptors in vivo with a clinically available platform.

[18F]テトラフルオロホウ酸陽電子放射断層撮影/コンピュータ断層撮影によるキメラ抗原受容体T細胞の動的イメージング

T cells genetically engineered to express chimeric antigen receptors (CAR) have shown unprecedented results in pivotal clinical trials for patients with B ...

Non-Invasive PET/MR Imaging in an Orthotopic Mouse Model of Hepatocellular Carcinoma

Preclinical experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate human disease represent an important tool to study tumorigenesis and evaluate novel therapeutic approaches. Non-invasive whole-body imaging using positron emission tomography (PET) provides critical insights into the in vivo characteristics of tissues at the molecular level in real-time. We present here a protocol for orthotopic HCC xenograft creation with and without hepatic artery ligation (HAL) to induce tumor hypoxia and the assessment of their tumor metabolism in vivo using [18F]Fluoromisonidazole ([18F]FMISO) and [18F]Fluorodeoxyglucose ([18F]FDG) PET/magnetic resonance (MR) imaging. Tumor hypoxia could be readily visualized using the hypoxia marker [18F]FMISO, and it was found that the [18F]FMISO uptake was higher in HCC mice that underwent HAL than in the non-HAL group, whereas [18F]FDG could not distinguish tumor hypoxia between the two groups. HAL tumors also displayed a higher level of hypoxia-inducible factor (HIF)-1&#945; expression in response to hypoxia. Quantification of HAL tumors showed a 2.3-fold increase in [18F]FMISO uptake based on the standardized value uptake (SUV) approach.

Here, we present a protocol to create orthotopic hepatocellular carcinoma xenografts with and without hepatic artery ligation and perform non-invasive positron emission tomography (PET) imaging of tumor hypoxia using [18F]Fluoromisonidazole ([18F]FMISO) and [18F]Fluorodeoxyglucose ([18F]FDG).

肝細胞癌の同所性モデルマウスにおける非侵襲的PET/MRイメージング

Preclinical experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate human disease represent an important tool to study tumorigenesis and ...

Non-invasive Imaging and Analysis of Cerebral Ischemia in Living Rats Using Positron Emission Tomography with 18F-FDG

Stroke is the third leading cause of death among Americans 65 years of age or older1. The quality of life for patients who suffer from a stroke fails to return to normal in a large majority of patients2, which is mainly due to current lack of clinical treatment for acute stroke. This necessitates understanding the physiological effects of cerebral ischemia on brain tissue over time and is a major area of active research. Towards this end, experimental progress has been made using rats as a preclinical model for stroke, particularly, using non-invasive methods such as 18F-fluorodeoxyglucose (FDG) coupled with Positron Emission Tomography (PET) imaging3,10,17. Here we present a strategy for inducing cerebral ischemia in rats by middle cerebral artery occlusion (MCAO) that mimics focal cerebral ischemia in humans, and imaging its effects over 24 hr using FDG-PET coupled with X-ray computed tomography (CT) with an Albira PET-CT instrument. A VOI template atlas was subsequently fused to the cerebral rat data to enable a unbiased analysis of the brain and its sub-regions4. In addition, a method for 3D visualization of the FDG-PET-CT time course is presented. In summary, we present a detailed protocol for initiating, quantifying, and visualizing an induced ischemic stroke event in a living Sprague-Dawley rat in three dimensions using FDG-PET.

Non-invasive Imaging and Analysis of Cerebral Ischemia in Living Rats Using Positron Emission Tomography with 18F-FDG

Brain damage resulting from cerebral ischemia may be non-invasively imaged and studied in rats using pre-clinical positron emission tomography coupled with the injectable radioactive probe, 18F-fluorodeoxyglucose. Further, the use of modern software tools that include volume of interest (VOI) brain templates dramatically increase the quantitative information gleaned from these studies.

と陽電子放射断層撮影法を用いた非侵襲的イメージングとリビングラットにおける脳虚血の分析<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG

Stroke is the third leading cause of death among Americans 65 years of age or older1. The quality of life for patients who suffer from a stroke fails to ...

医学

Mouse Kidney Transplantation: Models of Allograft Rejection

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely replicates both the technical and pathological processes that occur in human renal transplantation. Although mouse models of allogeneic rejection in organs other than the kidney exist, and are more technically feasible, there is evidence that different organs elicit disparate rejection modes and dynamics, for instance the time course of rejection in cardiac and renal allograft differs significantly in certain strain combinations. This model is an attractive tool for many reasons despite its technical challenges. As inbred mouse strain haplotypes are well characterized it is possible to choose donor and recipient combinations to model acute allograft rejection by transplanting across MHC class I and II loci. Conversely by transplanting between strains with similar haplotypes a chronic process can be elicited were the allograft kidney develops interstitial fibrosis and tubular atrophy. We have modified the surgical technique to reduce operating time and improve ease of surgery, however a learning curve still needs to be overcome in order to faithfully replicate the model. This study will provide key points in the surgical procedure and aid the process of establishing this technique.

Here, we present a protocol to study the immunology of rejection. The surgical model presented reports a short operating time and a concise technique. Depending on the donor-recipient strain combination, the transplanted kidney may develop acute cellular rejection or chronic allograft damage, defined by interstitial fibrosis and tubular atrophy.

マウス腎臓移植：同種移植片拒絶のモデル

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely ...

A Rat Orthotopic Renal Transplantation Model for Renal Allograft Rejection

Renal allograft rejection limits the long-term survival of patients after renal transplantation. Rat orthotopic renal transplantation is an essential model to investigate the mechanism of renal allograft rejection in pre-clinical studies and could aid in the development of novel approaches to improve the long-term survival of renal allografts. Donor kidney implantation in rat orthotopic renal transplantation is commonly performed by end-to-side anastomosis to recipients' aorta and inferior vena cava. In this model, the donor's kidney was implanted using end-to-end anastomosis to the recipients' renal artery and renal vein. The donor's ureter was anastomosed to the recipient's bladder in an end-to-side 'tunnel' method. This model contributes to better healing of ureter-bladder anastomosis and increases the recipients' survival by avoiding interference with blood supply and venous reflux of the lower body. This model can be used to investigate the mechanisms of acute and chronic immune and pathologic rejection of renal allografts. Here, the study describes the detailed protocols of this orthotopic renal transplantation between rats.

The rat orthotopic renal transplantation model contributes to investigating the mechanism of renal allograft rejection. The current model increases the recipients' survival without interference with blood supply and venous reflux of the lower body using an end-to-end anastomosis of kidney implantation and an end-to-side "tunnel" method of ureter-bladder anastomosis.

腎同種移植片拒絶反応のためのラット同所性腎移植モデル

Renal allograft rejection limits the long-term survival of patients after renal transplantation. Rat orthotopic renal transplantation is an essential ...

High-Resolution Cardiac Positron Emission Tomography/Computed Tomography for Small Animals

Positron emission tomography (PET) and computed tomography (CT) are among the most employed diagnostic imaging techniques, and both serve in understanding cardiac function and metabolism. In preclinical research, dedicated scanners with high sensitivity and high spatio-temporal resolution are employed, designed to cope with the demanding technological requirements posed by the small heart size and very high heart rates of mice and rats. In this paper, a bimodal cardiac PET/CT imaging protocol for experimental mouse and/or rat models of cardiac diseases is described, from animal preparation and image acquisition and reconstruction to image processing and visualization.
In particular, the 18F-labeled fluorodeoxyglucose ([18F]FDG)-PET scan allows for the measurement and visualization of glucose metabolism in the different segments of the left ventricle (LV). Polar maps are convenient tools to display this information. The CT part consists of a time-resolved 3D reconstruction of the entire heart (4D-CT) using retrospective gating without electrocardiography (ECG) leads, allowing the morphofunctional evaluation of the LV and the subsequent quantification of the most important cardiac function parameters, such as ejection fraction (EF) and stroke volume (SV). Using an integrated PET/CT scanner, this protocol can be executed within the same anesthesia induction without the need to reposition the animal between different scanners. Hence, PET/CT can be seen as a comprehensive tool for the morphofunctional and metabolic evaluation of the heart in several small animal models of cardiac diseases.

Here, we present an experimental imaging protocol for the quantification of cardiac function and morphology using high-resolution positron emission tomography/computed tomography for small animals. Both mice and rats are considered, discussing the different requirements of computed tomography contrast agents for the two species.

小動物用高分解能心臓陽電子放出断層撮影/コンピュータ断層撮影

Positron emission tomography (PET) and computed tomography (CT) are among the most employed diagnostic imaging techniques, and both serve in understanding ...

マウスへの肝移植と同種移植片の開存性の分析

Successful Orthotopic Liver Transplantation in Mice Utilizing Microcomputed Tomography Angiography

Microcomputed tomography (microCT) angiography is an invaluable resource to researchers. New advances in this technology have allowed for high-quality images to be obtained of micro-vasculature and are high-fidelity tools in the field of organ transplantation. In this model of orthotopic liver transplantation (OLT) in mice, microCT affords the opportunity to evaluate allograft anastomosis in real time and has the added benefit of not having to sacrifice study animals. The choice of contrast, as well as image acquisition settings, create a high-definition image, which gives researchers invaluable information. This allows for evaluation of the technical aspects of the procedure as well as potentially evaluating different therapeutics over an extended duration of time. In this protocol, we detail an OLT model in mice in a stepwise fashion and finally describe a microCT protocol that can give high-quality images, which aid researchers in in-depth analysis of solid organ transplantation. We provide a step-by-step guide for liver transplantation in a mouse, as well as briefly discuss a protocol for evaluating the patency of the graft through microCT angiography.

著者スポットライト:マウスモデルにおけるMicroCT血管造影による移植研究の強化 

In this protocol, we discuss the implementation of a model of successful orthotopic liver transplantation (OLT) in mice. Additionally, adjuvants to further analyze allograft patency after successful OLT in a mouse are discussed as well, specifically utilizing microcomputed tomography (microCT) scans.

マイクロコンピュータ断層撮影血管造影を用いたマウスの同所性肝移植の成功

Microcomputed tomography (microCT) angiography is an invaluable resource to researchers. New advances in this technology have allowed for high-quality ...

使用したラット腎移植後の急性拒絶反応の非侵襲的イメージング

要約

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PET や MRI 誘導照射ラットの神経膠芽腫モデルのマイクロ照射器を使用して

肺癌のマウスモデルにおける糖代謝の動的変化を測定する¹⁸F-FDG PET/CT イメージングと定量組織学を活用

振幅ベース最適呼吸格子アルゴリズムを用いた ¹⁸F-フルオロデオキシグルコースポジトロン放出断層撮影における呼吸運動アーティファクトの管理

[^18F]テトラフルオロホウ酸陽電子放射断層撮影/コンピュータ断層撮影によるキメラ抗原受容体T細胞の動的イメージング

肝細胞癌の同所性モデルマウスにおける非侵襲的PET/MRイメージング

と陽電子放射断層撮影法を用いた非侵襲的イメージングとリビングラットにおける脳虚血の分析

マウス腎臓移植：同種移植片拒絶のモデル

腎同種移植片拒絶反応のためのラット同所性腎移植モデル

小動物用高分解能心臓陽電子放出断層撮影/コンピュータ断層撮影

マイクロコンピュータ断層撮影血管造影を用いたマウスの同所性肝移植の成功