La nostra ricerca ha riguardato il campo del disturbo da uso di alcol. Questo studio evidenzia la metodologia comunemente utilizzata nel modello murino di dipendenza da Alco. Questo modello è un vapore di etanolo intermittente cronico abbinato al paradigma della scelta delle due bottiglie.
Il paradigma della scelta delle due bottiglie CIE. L'apparecchiatura automatizzata per la scelta di due bottiglie consente di monitorare il comportamento del mouse nel bere registrando la frequenza dei super tocchi. Questo ci consente di acquisire informazioni aggiuntive oltre al volume consumato, come la tempistica degli attacchi di consumo durante una sessione di bevute.
Negli studi preclinici sul disturbo da uso di alcol, gli approcci come l'imaging dell'intero cervello, la chemiogenetica e l'optogenetica con vari topi transgenici virali sono spesso utilizzati per far avanzare la ricerca in questo campo. Vengono utilizzati anche altri approcci come la modellazione computazionale. Il modello CIE a due bottiglie per la dipendenza da alcol è stato stabilito da molti anni.
Tuttavia, speriamo di rendere l'adozione di questo approccio più facilmente accessibile alla più ampia comunità di ricerca. Confronta con le altre tecniche che utilizzano per studiare il disturbo da uso di alcol. La scelta delle due bottiglie e il paradigma CIE hanno una serie di vantaggi che aumentano la rilevanza traslazionale, come l'induzione dei sintomi di astinenza significativi e lo sviluppo dell'escalation dell'assunzione di alcol.
Questo approccio è ideale per il suo utilizzo per studiare i cambiamenti neurobiologici rilevanti causati dalla dipendenza da alcol. Per iniziare l'abitazione, sposta i topi ospitati nel gruppo nelle loro gabbie individuali 30 minuti prima che le luci si spengano. Registra il volume di ogni bottiglia e poi lascia che i topi bevano per due ore.
Registrare i volumi delle bottiglie dopo il periodo di consumo. Ora esponi i topi ad almeno due settimane di consumo di base a scelta di due bottiglie per stabilire un'assunzione stabile di etanolo. Metti alla prova i topi dando loro una bottiglia d'acqua e una seconda bottiglia contenente il 15% di etanolo.
Registrare i volumi di ogni bottiglia prima e dopo il periodo di consumo di due ore. Una volta che i topi hanno raggiunto una base stabile di assunzione di etanolo, dividili in due gruppi in base alla loro assunzione e rimettili nella loro gabbia di casa. Iniettare intraperitonealmente nei topi una soluzione di etanolo-pirazolo.
Iniettare tutti i controlli dell'aria e gli altri gruppi con la stessa dose di pirazolo mescolata con soluzione fisiologica. Dopo le iniezioni, posizionare i topi di controllo dell'aria nelle gabbie domestiche e posizionare le gabbie CIE all'interno della camera di vapore. Bloccare gli sportelli e impostare la pompa sul livello di vapore appropriato.
Quindi, impostare il tempo di esecuzione dell'esperimento e quindi premere start sullo schermo di controllo della camera di vapore CIE 30 minuti prima che il sistema di vapore si spenga. Determinare la concentrazione di etanolo nel sangue dei topi. Dopo aver raccolto il sangue, riportare i topi al test a scelta delle due bottiglie la settimana dopo la CIE.
Centrifugare i campioni di sangue a 208 G per 1,0 minuti a quattro gradi Celsius per separare il plasma. Utilizzare un analizzatore di etanolo per il tasso di ossigeno per determinare la concentrazione di etanolo nel sangue. L'assunzione iniziale di etanolo al basale durante il periodo di tre settimane si è stabilizzata a 2,00 più o meno 0,21 grammi per chilogrammo prima del CIE.
Un test post hoc di Bonferroni ha dimostrato che i topi CIE hanno aumentato significativamente l'assunzione di etanolo alla sesta settimana post-vapore rispetto al loro volume di consumo basale. I topi CIE hanno consumato significativamente più etanolo rispetto ai topi non dipendenti a PV6. Il test post hoc di Bonferroni ha anche mostrato che a PV6, i topi dipendenti dall'etanolo avevano un'assunzione di etanolo significativamente più elevata rispetto ai loro topi di base e non dipendenti.
Le concentrazioni di etanolo nel sangue analizzate del gruppo CIE hanno mostrato una media settimanale di 173,12 milligrammi per decilitro.
