OP-IVM: Combinazione della maturazione in vitro dopo il prelievo di ovociti con la chirurgia ginecologica

La tecnologia, OP-IVM, è un'estensione del protocollo IVM convenzionale che combina IVM dopo il recupero degli ovociti con la chirurgia ginecologica di routine. È adatto per donne infertili o subfertili che hanno bisogno di ricevere un intervento chirurgico ginecologico prima del trattamento ART o della conservazione della fertilità, pazienti con sindrome dell'ovaio policistico con resistenza al clomifene che necessitano di un intervento chirurgico di perforazione ovarica laparoscopica, pazienti infertili che necessitano di interventi chirurgici ginecologici benigni come miomectomia isteroscopica, polipectomia, resezione transtoracica del setto e chirurgia del tubo laparoscopico, e l'ovariocistectomia prima del trattamento ART, e anche i pazienti con cancro e malattie ematologiche che ricevono chemioradioterapia o radioterapia, possono fare questo intervento chirurgico per la conservazione della fertilità. Posizionare la sonda ad ultrasuoni all'interno della vagina per scansionare e registrare il numero di follicoli in entrambe le ovaie.

Trova la posizione più vicina all'ovaio come sito di puntura, evitando l'intestino, la vescica e i grandi vasi sanguigni. Lavare l'ago di aspirazione a singolo lumen calibro 19 con un mezzo di manipolazione stabile a pH, quindi iniettare l'ago nelle ovaie sotto la guida degli ultrasuoni. Aspirare il fluido follicolare con l'ago sotto una pressione da 80 a 90 millimetri di mercurio, ruotando leggermente l'ago per aspirare più liquido follicolare possibile.

Utilizzare l'eparina per ridurre la viscosità del fluido follicolare durante l'aspirazione. Regolare la posizione della sonda per mantenerla il più vicino possibile alle ovaie in ogni momento e premere il fornice vaginale con la forza adeguata per ridurre lesioni e sanguinamento. Assicurarsi di completare l'aspirazione del fluido follicolare entro 25-30 minuti.

Estrarre l'ago dopo aver finito in un'ovaia, lavare l'ago con il mezzo di manipolazione e perforare l'altro lato con lo stesso metodo. Lavorando in un piatto omotermico a 37 gradi Celsius, preparare il mezzo di manipolazione, la capsula di Petri e il filtro cellulare. Risciacquare il tubo di coltura e il colino con un mezzo di manipolazione preriscaldato a pH stabile.

Filtrare il fluido follicolare aspirato con un filtro a celle di nylon da 70 micrometri, risciacquando ripetutamente il tubo di coltura e il filtro con un mezzo di manipolazione stabile a pH preriscaldato. Assicurarsi che tutti i COC immaturi siano completamente trasferiti al piatto di coltura. Trasferire il sangue in mezzi di manipolazione puliti.

Quindi, trasferire il colino cellulare in un nuovo piatto e lavarlo. Aspirare e trasferire il mezzo di manipolazione con i COC, le cellule della granulosa e i tessuti in un nuovo piatto. Esaminare i COC sotto lo stereoscopio con ingrandimento 40 volte.

Trasferire rapidamente gli immaturi in un mezzo ovocitario IVM preriscaldato. Quindi, esaminare i COC nel coagulo di sangue e nel colino cellulare. Trasferire i COC e i mezzi di manipolazione in un mezzo ovocitario IVM preriscaldato.

Coltivate i COC immaturi per 28-32 ore a 37 gradi Celsius in aria umidificata contenente il 5% di anidride carbonica e il 5% di ossigeno. A dicembre 2019, OP-IVM era stato utilizzato per la conservazione della fertilità di 274 pazienti. Un esempio è stato un paziente di 28 anni a cui è stata diagnosticata infertilità primaria, cisti annessiale sinistra e PCOS.

Ha ricevuto cistectomia laparoscopica e OP-IVM nel settembre 2016 e sono stati ottenuti 27 COC immaturi. Dopo 28 ore in coltura, sette ovociti nella fase MII sono stati selezionati e fecondati dall'ICSI. Dopo cinque giorni, due blastocisti sono state congelate.

Uno è stato scongelato nel febbraio 2017 e trasferito nell'utero. Il paziente ha partorito una ragazza sana a novembre. OP-IVM è stato applicato per la prima volta al recupero di ovociti di donne infertili con PCOS che sono sottoposte a operazioni di perforazione ovarica, e ora le sue applicazioni possono essere estese alle donne subfertili che hanno bisogno di ricevere un'operazione ginecologica benigna, anche le donne cancro per la conservazione della fertilità.

Indica che il campo di applicazione di IVM può essere ampliato combinandolo con altre operazioni ginecologiche tradizionali per la conservazione della fertilità femminile.