L'obiettivo generale di questo metodo è la visualizzazione della funzione coronarica discendente anteriore sinistra nei ratti usando l'ecocardiografia per calcolare la riserva di flusso coronarica. Questo metodo offre un importante strumento di valutazione per una diagnosi di disfunzione microvascolare nei cuori masi e per la valutazione di potenziali trattamenti durante lo studio. Sebbene sia stato dimostrato che la terapia di riperfusione ha messo a repentaglio il miocardio compromesso e per migliorare la funzione ventricolare sinistra, le anomalie funzionali dei piccoli vasi coronari possono verificarsi dopo la ricanalizzazione dell'arteria coronarica.
Questo metodo può fornire informazioni sul microcircolo coronarico dei ratti, così come su altri modelli, tra cui l'infarto del miocardio e il sovraccarico del volume di pressione del ventricolo sinistro. Prima dell'imaging ecografico di riperfusione pre-ischemia, confermare la mancanza di risposta al dito del dito in un ratto Fischer 344 anestetizzato. Radersi i capelli dal petto.
Applicare un unguento agli occhi dell'animale e posizionare l'animale in posizione supina su una piattaforma di riscaldamento integrata da 37 a 38 gradi Celsius. Collegare la sonda lineare da 13 a 24 megahertz alla macchina ad ultrasuoni. Impostare l'impostazione dell'applicazione preimpostata sull'imaging cardiaco e utilizzare il sistema ferroviario per posizionare la sonda per ottenere la vista parasternale dell'asse corto.
Utilizzare il micromanipolatore dell'asse XY per spostare la sonda nella direzione rostrale per localizzare l'arteria polmonare. Spostare la sonda, rendendo il ventricolo sinistro più facilmente visibile. Una volta acquisita l'immagine in modalità B e memorizzata cine, fare clic sul colore Doppler e visualizzare l'arteria coronarica nell'asse corto.
Il colore rosso, come osservato in tempo reale, è indicativo della direzione del flusso. Dopo aver visualizzato l'arteria coronarica discendente anteriore inferiore in modalità Doppler a colori, cambiare la modalità all'onda dell'impulso e cercare la presenza di una linea di indicatori gialli sull'arteria coronarica. Posizionare la linea d'onda dell'impulso giallo al centro dell'arteria coronarica, facendo attenzione che l'angolo sia parallelo alla direzione del flusso e utilizzare Cine Store per catturare la velocità del flusso coronarico discendente anteriore sinistro a riposo e il diastole di picco delle forme d'onda.
Dopo aver ottenuto la velocità di flusso discendente anteriore sinistra a riposo, posizionare una piccola striscia di garza intorno alla base della coda e usare gli emostati per afferrare e torcere il laccio emostatico per applicare pressione, causando l'ingrossamento della vena. Posizionare con cura un ago a farfalla per infusione calibro 25 attaccato a una siringa da 10 millilitri caricata con dobutamina nella vena di coda dilatata e stabilizzare l'ago con colla e un pezzo di nastro chirurgico. Una volta fissata la linea di infusione, rimuovere gli emostati e il laccio emostatico per recuperare il flusso e posizionare la siringa in una pompa per infusione impostata per iniettare 20 microgrammi al chilogrammo al minuto.
Durante l'infusione, monitorare attentamente il picco dell'arteria discendente anteriore sinistra e la frequenza cardiaca, registrando periodicamente i picchi dell'onda d'impulso dell'arteria discendente anteriore sinistra nella modalità Doppler nelle condizioni di stress indotte dalla dobutammina. Dopo che i picchi dell'arteria coronarica discendente anteriore e la frequenza cardiaca si sono stabilizzati durante la sfida, interrompere l'infusione, rimuovere il set di infusione della vena della coda e rimuovere l'animale dalla piattaforma. Quindi, usa lo strumento della velocità di picco per ottenere le velocità diastoliche di picco dalle immagini e calcolare l'indice di riserva del flusso coronarico come rapporto tra la velocità del flusso di flusso diastolico di picco dell'arteria discendente anteriore sinistra e la velocità del flusso diastolico del picco dell'arteria discendente anteriore a riposo.
Utilizzando una sorgente luminosa in fibra ottica, intubare il ratto con un catetere IV di 18 gauge e connettersi al catetere a un ventilatore. Quindi, utilizzare un 8-0 sutura monofilamento per legare l'arteria discendente anteriore sinistra attraverso un'apertura di 15 millimetri al quinto spazio intercostale con un nodo semplice per 30 minuti. Alla fine del periodo dell'ischemia, confermare visivamente l'ischemia attraverso lo scolorimento della superficie cardiaca e rilasciare la legatura.
La riperfusione può essere verificata mediante arrossamento dell'area precedentemente scolorita del muscolo cardiaco. 72 ore dopo l'intervento chirurgico, misurare il flusso coronario e la riserva di flusso coronarica come dimostrato e confrontare le misurazioni con quelle ottenute prima della lesione. In questo esperimento rappresentativo, prima dell'intervento di riperfusione dell'ischemia, la velocità dell'arteria coronarica discendente anteriore sinistra a riposo è stata misurata come circa 423 millimetri al secondo a più del doppio della velocità dopo l'infusione di dobutammina.
72 ore dopo la riperfusione dell'ischemia, la velocità dell'arteria coronarica discendente anteriore sinistra a riposo era significativamente più alta rispetto alla velocità dell'arteria coronarica discendente anteriore sinistra a riposo prima dell'intervento chirurgico. La risposta allo stress a un test di dobutamina dopo la lesione è stata significativamente ridotta rispetto alla risposta prima delle risposte dell'intervento chirurgico. La riserva di flusso coronarica è calcolata come il rapporto tra la velocità del flusso di picco durante lo stress e la velocità del flusso di riposo ed era di circa 2,1 nei ratti giovani prima dell'intervento chirurgico, ma significativamente ridotta 72 ore dopo la lesione.
Inoltre, non vi sono stati cambiamenti significativi nella funzione sistolica del ventricolo sinistro 72 ore dopo l'infortunio. Dopo il suo sviluppo, questa tecnica consentirà ai ricercatori di esplorare e utilizzare l'imaging ad ultrasuoni delle arterie coronarie in piccoli modelli animali che imitano accuratamente le condizioni delle malattie umane. Dopo aver visto questo video, dovresti avere un'ottima comprensione di come misurare il flusso sanguigno coronarica e valutare il microcircolo coronarica in un piccolo modello di malattia cardiaca animale.
