Questo metodo aiuta a determinare se la cellula tumorale ha invaso oltre la lamina elastica nel cancro gastrico pT3. l'erosione elastica della lamina nel quadro prognostico per il cancro gastrico pT3. Il vantaggio principale di questa tecnica è che è un approccio conveniente e accurato per identificare la lamina elastica, il che rende più preciso per il patologo valutare se le cellule tumorali invadono oltre la lamina elastica nel cancro gastrico pT3.
Questa tecnica può essere verso una diagnosi patologica in fase di test del cancro ai polmoni e al cancro. Questo metodo potrebbe essere applicato anche al sistema di stadio TNM del cancro ai polmoni e del colo-retto. Per prima cosa, immergere le diapositive in xilene in un barattolo coplin per 10 minuti.
Rimuovere le diapositive da questo barattolo e immergerle in xilene fresco in un barattolo coplin diverso per altri 10 minuti. Immergere le diapositive in etanolo al 100% per cinque minuti, quindi trasferirle in etanolo fresco al 100% per altri cinque minuti. Quindi, immergere le diapositive nel 95% di etanolo per due minuti.
Trasferire le diapositive in un barattolo contenente il 70% di etanolo per due minuti. Successivamente, sciacquare brevemente gli scivoli con acqua distillata in un nuovo barattolo coplin. In primo luogo, utilizzare carta velina per pulire qualsiasi soluzione in eccesso sullo scivolo o intorno al tessuto.
Posizionare le diapositive in condizioni che corrispondano alla temperatura e all'umidità ambiente. Aggiungere alcune gocce di permanganato di potassio ad ogni diapositiva per ossidarle, assicurandosi che il volume aggiunto sia sufficiente per coprire la sezione tissutale su ogni diapositiva. Dopo cinque minuti, sciacquare gli scivoli ossidati con acqua distillata nei barattoli coplin, ripetendo il risciacquo da due a tre volte e utilizzando un nuovo barattolo d'acqua per ogni risciacquo.
Il tessuto dovrebbe avere un colore marrone osservabile. Ora, aggiungi alcune gocce di acido ossalico a ogni diapositiva per sbiancarle, assicurandoti che il volume aggiunto sia sufficiente per coprire la sezione tissutale su ogni diapositiva. Dopo cinque minuti, sciacquare gli scivoli sbiancati con acqua distillata, ripetendo il risciacquo da due a tre volte e utilizzando un nuovo barattolo d'acqua per ogni risciacquo.
Lavare brevemente le diapositive con il 95% di alcol. Immergere gli scivoli lavati in soluzione di elastina per otto-24 ore. Quindi immergere le diapositive direttamente in etanolo al 95% per uno o due minuti per differenziare bene ogni sezione tissutale.
Risciacquare completamente gli scivoli con acqua distillata. Controllare microscopicamente la colorazione delle fibre elastiche blu-nere e lo sfondo grigio. Controsostenere le diapositive in una soluzione van Gieson per un minuto, assicurandosi che il volume utilizzato sia sufficiente per coprire completamente la sezione tissutale su ogni diapositiva.
Successivamente, far cadere rapidamente il 95% di etanolo sulle fette di tessuto per alcuni secondi per differenziare bene ogni sezione tissutale. Per iniziare, immergere le diapositive nel 95% di alcol per cinque minuti per disidratarle rapidamente. Trasferire le diapositive al 100% di alcol per cinque minuti per continuare la disidratazione.
Quindi, trasferire le diapositive al 100% fresco di alcol per altri cinque minuti. Immergere le diapositive in due diversi cambi di xilene ad ogni immersione della durata di tre minuti. Successivamente, aggiungere una goccia di mezzo di montaggio resinoso allo scivolo e posizionare uno scivolo di copertura sopra.
Utilizzando un microscopio, osservare le sezioni tissutali come delineato nel protocollo di testo. In questo studio, la colorazione elastica viene utilizzata per identificare visivamente la lamina elastica subsossale. Una colorazione rappresentativa di successo rivela che dopo la colorazione della soluzione di elastina, ma prima della controsoffittizione di van Gieson, la lamina elastica può essere chiaramente vista sotto forma di filamenti macchiati blu-nero.
Sono vicini alle cellule mesoteliali sierosali e si vede ancora una certa distanza tra la lamina elastica e le cellule tumorali. Le tipiche colorazioni elastiche con la controsoffitti di van Gieson dimostrano che la lamina elastica è macchiata blu-nera. Le fibre di collagene sono colorate di rosso e le fibre muscolari e le cellule tumorali sono colorate di giallo.
Le cellule tumorali che penetrano nella lamina elastica sono considerate invasione elastica della lamina. Mentre le cellule tumorali sono vicine ma non invadono la lamina elastica è considerata non invasione elastica della lamina. Se la colorazione rivela una struttura ripetitiva indicativa di più strati di lamina elastica e il tumore non invade oltre lo strato più esterno, il campione deve essere diagnosticato come lamina elastica non invasione.
La soluzione di elastina è un e il tempo di colorazione è relativamente lungo, quindi è meglio immergere tutte le diapositive con la colorazione dell'elastina in un contenitore sigillato. Dopo la colorazione della soluzione di elastina, deve essere lavato via con acqua distillata.
