השתלת כליה בעכברים חיונית לחקר מנגנונים של דחיית אלוגרפט חריפה וכרונית. כאן אנו מציגים טכניקה כירורגית חדשה לאנסטומוזיס כלי דם והשתלת השופכה במודל השתלת הכליה הבטני בעכברים. במודלים מסורתיים של השתלת כליה של עכברים, החלק העליון של אבי העורקים קשור בקירוב לעורקי הכליה.
וריד הכליה השמאלי של התורם עובר בווריד קאווה ואבי העורקים התורם מחולק שווה בשווה מתחת לעורק הכליה כדי להיות מאוחר יותר אנסטומוז לאבי העורקים הבטני של המקבל. בטכניקה שונה זו של השתלת הכליה של העכבר, וריד הכליה השמאלי התורם עובר גם הוא בווריד קאווה, אך אבי העורקים התורם נחתך מעל צאצאי עורק הכליה והאנסטומוז שלו לאבי העורקים הבטני המקבל. בעוד הקצה התורם של אבי העורקים קשור, עורק השופכה נשמר במכוון.
עכשיו אנחנו מתחילים את ההדגמה של ההליך הכירורגי. להרדמה, מניחים את העכבר לתוך הקופסה לשאיפת איזופלורן כ-40 עד 60 שניות על מנת לגרום לחוסר הכרה. לאחר שהעכבר מורדם, שקלו את העכבר.
על פי משקל העכבר, הזרקה תוך-צפקית של קטמין, קסילאזין, אקפרומזין ניתנת לעכבר המרדים. כאשר ההרדמה נכנסה לתוקף, קוצצים את פרוות הבטן. לאחר מכן, תקן וחטא את העכבר על שולחן הניתוח.
חותכים את העור באמצעות חתך בטן צולב. לחתוך את השרירים של דופן הבטן. לאחר מכן, המכסה הזיז בזהירות את הקרביים עם גזה טבולה מלוחה.
חשוף את הכליה השמאלית, אבי העורקים והווריד הנבוב התחתון. תזהו את הוורידים המותניים השמאליים, כולל הענפים שמתחתיהם וכלי דם קטנים אחרים, כולל כלי יותרת הכליה השמאלי, בזהירות. גייסו את אזור אבי העורקים בין עורקי הכליה השמאליים והימניים באורך של כשני מילימטרים.
הפרד את הווריד התחתון האינפרא-רנלי קאווה ואת אבי העורקים. ולעבור מלקחיים מעוקלים מתחת לאבי העורקים כדי להניח עניבה רופפת של 7.06 תפר סביב כלי זה. לחצות את האזור של אבי העורקים מתחת לעורק הכליה הימני ואת הווריד הנבוב התחתון באמצעות שני מלחציים מיקרו-וסקולריים של חמישה מילימטרים.
העבר את הווריד הכליתי השמאלי מהווריד קאווה. לשטוף את אבי העורקים עם מיליליטר אחד של תמיסת הפרין. הידקו את הליגטורה וחתכו את אבי העורקים מתחת לליגטורה וכן מתחת למהדק הפרוקסימלי.
הכן בזהירות, כך עורק השופכה העדין נשמר לחלוטין. לשחרר את הכליה השמאלית ואת כלי הדם הקשורים לחלוטין על ידי זהירות זהירה של כל כלי הדם המקיפים את הרקמה. מוציאים את הכליה ומאחסנים אותה בתמיסת קו התאים בארבע מעלות.
שלבי הניתוח הראשוניים דומים לאלה שהוצגו בעבר עבור העכבר התורם, כולל הרדמה וחיטוי. פותחים את הבטן באמצעות חתך חציוני, ואז מכסים את איברי הבטן בגאזה רטובה באמצעות תמיסת מלח. שמרו בזהירות על אבי העורקים האינפרא-רנלי וודאו שכל ענף כלי גדול מצומק.
השתמש בצריבה החשמלית כדי לנתח את השופכן השמאלי בזהירות בתנוחה קרובה לאגן הכליות. לאחר מכן, הסר את הכליה השמאלית. חושפים את הווריד הנבוב התחתון ואת אבי העורקים הבטני ומנתקים אותם מרקמת השומן שמסביב באורך של כארבעה מילימטרים.
לאחר מכן לחצות מהדק כל אחד עם שני מלחציים מיקרו-וסקולריים בערך ובאופן דיסטלי מהם. השתמש במחזיק מחט מיקרו כדי להנחות מחט תפר מונופילמנטית 10/0, אשר ממוקמת דרך דופן אבי העורקים באופן פרוקסימלי לדיסטלי. עורק אליפטי של כמילימטר אחד מושגת על ידי מתיחה עדינה כלפי מעלה של התפר, תוך חיתוך ישירות מתחת לפנים התחתונות של המחט עם מספריים עדינים ומעוקלים.
בצעו את אבי העורקים המקבל-תורם באופן אנסטומוזיס מקצה לקצה. תפר את הקצוות הפרוקסימליים והדיסטליים של האנסטומוזה. תפר אחרון באמצעות שני תפרים נפרדים 10.0.
לאחר הקשירה, השאירו את שני התפרים הארוכים, כולל המחט, במקומם. לתפור את הצד השמאלי של דופן אבי העורקים של האנסטומוזיס ברציפות עם שני תפרים במרווחים שווים בכיוון דיסטלי-פרוקסימלי. לאחר התפר האחרון, הובילו את התפר דרך עובי חלקי של דופן הכלי מעל לקשירת תפר השהייה העליונה ובמקביל הפעילו אחיזה עדינה לקצה הקצר של עניבת התפר התחתונה.
שים לב, בטכניקה חדשה זו ללא קשר, התפר האחרון אינו קשור לקצה הקצר של העניבה העליונה. להפוך את הכליה המושתלת למקומה הרגיל. כעת לתפור ברציפות את הדופן הימנית של האנסטומוזיס אבי העורקים באופן פרוקסימלי עד דיסטלי באמצעות שלושה תפרים באופן פרוקסימלי עד דיסטלי.
שימו לב, בהשוואה לטכניקה הכירורגית הקונבנציונלית, התפר האחרון מתמזג עם הקשר הדיסטלי הסמוך. אין לקשור אותו לקצה התפר התחתון, לחתוך אותו כדי להשאיר אורך חופשי של כשני עד שלושה מילימטרים במקום זאת. חותכים את הווריד הנבוב הנחות קאווה אורכי באורך מספיק של כ-1.5 מילימטרים.
מקם חתך זה מעט מתחת למקבילו אבי העורקים. בצע את האנסטומוזה הוורידית באמצעות אותו הליך תפירה כפי שתואר קודם לכן עם ההבדל כי ארבעה עד חמישה תפרים נדרשים עבור כל צד של anastomosis. התפר הסופי נותר כקצה חופשי באורך דומה בדומה לאנסטומוזיס אבי העורקים שתואר לעיל.
וטכניקת האנסטומוזיס החדשה ללא קשר, התפר האחרון אינו קשור אלא נותר חופשי. זה מקצר את זמן הניתוח וזה מאפשר למנתח להגדיל או להקטין את גודל האנסטומוזיס. שיפור זה מפחית את הקושי ואת הסיבוכים שלאחר הניתוח של anastomosis כלי הדם.
לאחר השלמת שני הרנסטומוזות, השתמש במטוש יבש כדי להפעיל לחץ עדין לכיוון אזור התפירה במשך כ -10 עד 20 שניות. לאחר מכן, ניתן להסיר את שני המהדקים. חודרים דרך שלפוחית השתן של הנמען באמצעות מחט ישרה עם תפר 10.0 ומחדירים אותה לתוך לומן מחט 21 גרם להנחיה.
כעת הנחה את המחט 21 G כדי לתפור חור במקום יישום המחט הקודם ולשלוף את המחט. תפרו את קצה השופכן הגזום וחדרו את שלפוחית השתן עם תפר 10.0 זה שוב במקום כניסתו. גררו את חוט ה-10.0 ואת השופכן לתוך שלפוחית השתן דרך החור שנבנה.
Anastomose השופכן של התורם לשלפוחית השתן של המקבל. כאן, חברו את הקרום החיצוני של השופכן לממברנה החיצונית של דופן שלפוחית השתן ובצעו תפרים לסירוגין עם שלושה עד ארבעה תפרים. לשלוף את תפר המתיחה.
מכניסים את המעיים בחזרה לחלל הבטן. בצע תפרים דו שכבתיים, תחילה שרירי הבטן ואחריהם העור כדי לסגור את פצע הבטן. מכניסים את העכברים המושתלים לחדר מבוקר חמצן וטמפרטורה לצורך התאוששות לאחר הניתוח.
תן משכך כאבים הולם לאחר הניתוח ארבעה ימים רצופים לאחר הניתוח. בצע כריתת נפרקציה של העכבר המושתל חמישה ימים לאחר הרדמה השתלה. הרם ותעד את מצב העכבר.
השווינו את טכניקות ההשתלה הקונבנציונליות והמשתנות על ידי הערכת השינויים ההיסטולוגיים של כליות האיזוגרפט המושתלות לעומת הכליות הקונטרולטרליות של המושתלים המקומיים. הן מידת הגביע של צינוריות הכליה והן פיברוזיס אינטרסטיציאלי כלייתי לא נמצאו שונים באופן משמעותי ארבעה ו -12 שבועות לאחר ההשתלה בהתאמה. בעבר חקרנו את התוצאות של טכניקה חדשה זו ללא קשר והשווינו אותה לגישה הקלאסית מבחינת ההיבטים הטכניים של הסיבוכים ההדדיים והפוסט-ניתוחיים של ההליך.
טכניקה שונה המוצגת כאן נקשרה לתופעה נמוכה יותר של אירועים טרומבוטיים ורידיים עורקיים תוך-עורקיים. הזמן לבצע את היצרות היה נמוך משמעותית והושג איזוגרפט כליות מצוין, הישרדות לטווח ארוך. השתלת הכליה בעכברים היא הליך מסובך ומתקדם.
זוהי טכניקה כירורגית חדשה לאנסטומוזיס כלי דם והשתלת כליות המחויבת לשפר את אחוזי ההצלחה הכוללים, מה שהופך אותה לכלי אמין לחקר התגובה האוטואימונית לאחר השתלת כליה.
