הקלטות סימולטני של פוטנציאל שדה מקומי קורטיקליים ו- Electrocorticograms בתגובה לגירויים לייזר Nociceptive לנוע בחופשיות חולדות

שיטה זו מסייעת לבסס את הקשר הישיר של אותות אלקטרוקורטיים שנרשמו הן מ- ECoG והן ממעמקי החוטים כדי לענות על שאלות מפתח על התרומות העצביות של פוטנציאל לייזר-לעורר. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא כי השתלת אלקטרודה יכול להיות מוגן על ידי מעטפת polylactic, ולכן ההקלטה יכולה להיות מיושמת על חולדות נעות חינם שלנו. שיטה זו יכולה להיות מיושמת בהקלטת תגובות המוח עורר על ידי גירויים של תחושות שונות או תכונות קצרות של מחלות פסיכיאטריות אשר לקדם את החקירה של neuromagnetisms בהתאמה שלהם.

התחל הליך זה עם הרדמה של החולדה כמפורט בפרוטוקול הטקסט. לאחר מכן, השתמש ב מכשיר סטריאוטוקסי כדי לתקן את ראשו של החולדה עם האף שלה ממוקם לתוך מסכת ההרדמה. סובלנות כירורגית מושגת כאשר אז החולדה אינה מגיבה לצביטת בוהן.

החל משחה עיניים על העיניים, כדי למנוע ייבוש הקרנית. לגלח את החלק העליון של הקרקפת של החולדה באמצעות מכונת גילוח סטנדרטית. לאחר מכן, לחטא את הקרקפת באמצעות פתרון חיטוי יודופר רפואי 75% אלכוהול כדי להסיר את היוד.

הזריקו 2% לידוקאין לקרקפת לשככי כאבים מקומיים. לאחר מכן, לנהל אטרופין כדי לעכב hypersecreation הנשימה. בצע חתך קו האמצע של כ 2-3 ס"מ על הקרקפת באמצעות אזמל.

חותכים ומסירים חלק מהקרקפת לאורך קו האמצע וחושפים את הגולגולת. סמן את מיקומן של אלקטרודות ECoG בהתבסס על הקואורדינטות הסטריאוטוקסיות המוגדרות מראש. כמו כן, סמן את מיקומי ההתייחסות ואלקטרודות הקרקע בקו האמצע.

חורי קידוח עבור ברגים ECoG באמצעות מקדחת גולגולת חשמלית על הגולגולת במראות המסומנים מבלי להרוס את דורה. כונן בורג אל חלד, אשר מתחבר חוט נחושת מצופה בידוד, לתוך החור לעומק מילימטר אחד משוער. הימנעו מחשיפה לדורה הבסיסית.

מניחים בסיס פגז מגן על הגולגולת. תקן את הבסיס עם הברגים הסמוכים לו על הגולגולת באמצעות אקריליק דנטלי. סמן את מיקומן של אלקטרודות חוטי העומק בהתבסס על הקואורדינטות הסטריאוטוקסיות המוגדרות מראש.

עכשיו, לקדוח חורים קטנים על הגולגולת סביב המראות סימן להשתלת תיל בזהירות להסיר את דש העצם לחשוף את דורה. לשטוף את craniotomy לעתים קרובות עם מלוחים רגילים. באמצעות מחט, להרים לחתוך את דורה מבלי לפגוע פיא מאטר, כלי ואת פני השטח של neocortex.

מנמיך את אלקטרודות חוט העומק אל פני השטח של הניאוקורטקס. לאחר מכן, לחדור לאט את המוח לעומק היעד. לאטום את craniotomy עם תערובת של שעווה ושמן פרפין כדי להבטיח כי אלקטרודות חוט העומק ניתן להעביר עבור מניפולציות ניסיוניות הבאות.

לתקן את מנגנון האלקטרודה באמצעות אקריליק שיניים על הגולגולת. רתך כל חוט נחושת המתחבר לבורג ECoG לערוץ המתאים במודול המחבר. להרכיב את קיר מעטפת מגן לבסיס לרתך את ההתייחסות אלקטרודות הקרקע לערוצים המתאימים.

תקן את המכסה לקליפת המגן באמצעות קלטות כדי למנוע זיהום. לאחר הזרקת החולדה עם פניצילין, בית יחיד החולדה בכלוב מבוקר טמפרטורה ולחות לאחר הניתוח כמפורט בפרוטוקול הטקסט. שים את החולדה בתא ההתנהגות לפחות שעה אחת לפני הניסוי כדי להבטיח שהעכברוש יסתגל לסביבת ההקלטה.

לחבר בעדינות את שלב ראש ההקלטה עם מודול האלקטרודה, כדי למנוע להפחיד את החולדה ולפגוע במודול האלקטרודה. תארגן את מחולל הלייזר. חבר את הסיב האופטי ולהתאים את גודל הספוט של הלייזר על פי מדריך מפעילי הציוד.

עכשיו, לחבר את הפלט הדיגיטלי ממחולל ההדק ליציאת הקלט הדיגיטלית של לוח ההקלטה. הגדר את מצלמת הווידאו מתחת לפינת תא הניסוי כדי לתעד ללא הרף את ההתנהגויות הנוניקטיביות של החולדה כאשר הכף שלה מקבלת גירוי לייזר לא מספק. ספק רעש לבן מתמשך באמצעות רמקול חזק בחלק העליון של התא.

לאסוף את הנתונים האלקטרופיזיולוגיים הן ECoG ואת אלקטרודות חוט העומק באמצעות מערכת ההקלטה על פי מדריך מפעילי הציוד. עכשיו, לספק את פולסים לייזר ל plantar של ההתרפסות של החולדה דרך הפערים בחלק התחתון של התא על ידי תחילה מיקום גנרטור הלייזר. לאחר מכן, לחץ על המתג כדי לספק גירוי לייזר.

להלן הנתונים האלקטרופיזיולוגיים הגולמיים של קליפות המנוע הראשי הדו-צדדיות, קליפות המוח הדו-צדדיות הראשיות וה-ECoG. פוטנציאל לייזר-עורר ברור, או תגובת LEP, ניתן לגילוי לאחר הופעת גירוי הלייזר. מוצג כאן הוא רמת הקבוצה ממוצע LEP צורות גל משש אלקטרודות של חמישה חולדות.

תגובות LEP מורכבות מהטיה שלילית דומיננטית הנקראת N1 Wave. שים לב לגל N1 של קליפות המוח הראשיות הדו-צדדיות מציג השהיה קצרה יותר משרעת גבוהה יותר מזה של קליפת המוח המנועית העיקרית הדו-צדדית. נתון זה מראה גל הפך קוהרנטיות בין LEPs שנדגמו מן ECoG וחוטים עומק ב S1 ו M1 דו צדדי, עם לייזר נמסר על plantar של הקדמה הימנית של החולדה.

שים לב שה-S1 וה-M1 השמאליים הראו קוהרנטיות גבוהה יותר מה-S1 וה-M1 הימניים בתדר הגמא. לאחר פיתוחה טכניקה זו תסלול את הדרך לחוקרים להיזכר בו זמנית הן ECoG והן פוטנציאל מילוי מקומי בין-קורקטי בחולדות נעות חופשיות כדי לחשוף את התרומות העצביות של פוטנציאל מעורר לייזר.