Name: procedures of laboratory fumigation for pest control with nitric oxide gas
Uploaded: 2017-11-24T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 58 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Procedures of Laboratory Fumigation for Pest Control with Nitric Oxide Gas at JoVE.com

מחקר זה נתמך בחלקה על ידי TASC מענקים משירותי חקלאי החוץ משרד החקלאות.

הערה: תחמוצת החנקן ההדברה של מוצרים טריים מתחיל על-ידי יצירת חמצן ultralow תנאים בתאי לעישון, ואחריו הזרקה של לא ממושכת הצ'יימברס ההדברה בטמפרטורות מסוימות משך זמן טיפול מסוים, ולאחר מכן היא הופסק על ידי שטיפה עם N2 כדי לדלל לא לפני פתיחת התאים לעישון כמו אילוסטרייטד (איור 3). מדידות של2 במרחב הראשי של צ'יימברס ההדברה וחנקה ו חנקיתי בדגימות הנוזל באמצעות דגם 405 ננומטר אין2/לא/NOx צג ו נועה תחמוצת החנקן מנתח, בבקשה פנה ל המדריכים למשתמש היצרנים עבור נהלי פעולה מפורטת.
התראה: תחמוצת החנקן הוא סוכן חמצון חזק, מגיב עם חמצן באופן ספונטני כדי לייצר חנקן דו-חמצני. תחמוצת החנקן והן חנקן דו-חמצני רעילים. אנא עיין שלהם MSDS לטיפול בטוח ולהשתמש. עבור ביטחון אישי, כל השלבים של ניסויים ההדברה בקנה מידה קטן לערב חשיפה טיפול ופוטנציאליים אין או לא2 צריכה להתבצע בשכונה fume. אישית אין אזעקה2 אמור לשמש לנהל גדול קנה המידה. אין ניסויים ההדברה.
1. הכנת חומרים וכלי נגינה
<ol><li>
כלי נגינה, וחלקי חומרי ההדברה לא
	<ol>
<li>להכין שקית רדיד עם שקע אבובים על מס<ol>
<li>חותם על פתיחת שקית רדיד אלומיניום סביב צינור טפלון (PTFE) באמצעות סילר לאיטום של חום.</li>
			<li>לאחר מכן השתמש דבק אפוקסי כדי לאטום את התפרים ואת משותף סביב צינור טפלון (PTFE) כדי לייצר את השקית בנייר כסף.</li>
			<li>הוסף של צימוד בסוף הצינור. הערה: שקיות נייר עם אבובים אינם זמינים מסחרית. אבל הם יכולים להתבצע בקלות למעבדה בשקיות נייר כסף ממקורות מסחריים באמצעות סילר לאיטום של חום. הערה: חנקן: תעשיית קבוע חנקן ב סלילי דחוס יש טוהר של ≥99.99% ומתאים לכל לעישון. לא. יכול להיות מוגדר יש לחצים שונים outlet, המחוברות יחד שניים או יותר צילינדרים עם הרגולטורים. הגליל עם הלחץ גבוה יותר עודפים ישמש קודם לפני הגליל עם הלחץ עודפים התחתונה ישמש. זה יהיה שימושי בבדיקות אריזות עץ גדול.</li>
		</ol>
</li>
		<li>צ'יימברס ההדברה אטום. הערה: Airtightness הינה קריטית לעישון. אין כי לא יגיב עם O2 דלף אל החדר. זה להפחית לא זמינים עבור הדברת מזיקים, גם לייצר2 אשר עלול לגרום נזק מוצרים טריים.<ol>
<li>צ'יימברס צנצנת זכוכית: משמנים את החישוק של המכסה בקלילות עם וזלין. ואז לאטום את הצנצנת עם המכסה בעל שני שקעים לאחר טעינת אובייקטים כגון מוצרי שורץ חרקים לתוך הצנצנת. הערה: כל מכסה הצנצנת יש שני שקעים, לאחד השקעים יש צינור פלסטיק מורחב בתחתית הצנצנת כדי להגביר את היעילות של החלפת אוויר.</li>
			<li>צ'יימברס העשוי cookers הלחץ: משמנים לקצה החדר עם וזלין. לטעון מוצרים וחרקים בבית הבליעה, לאטום אותו עם המכסה.</li>
			<li>אריזות עץ גדול צ'יימברס: משמנים את האטם בקלילות עם וזלין. ואז לטעון מוצרים בבית הבליעה. סגור את הדלת. להדק את התפסים במידת הצורך לשמור על חותם אטום. הערה: אין דלק הוא הפכפך מאוד, כך שאין צורך יש מאוורר בחדר ההדברה כדי לשמור על אוויר בתא מעורבים.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. הקמת ULO התנאים בלשכה לעישון.
<ol><li>להתחבר תא קו2 N ומנתח2 של O. הערה: T-מחבר עם קצה אחד הולך במנתח, בקצה השני מצויד עם שסתום חד-כיווני סימון יכול לשמש כדי לשחרר את האוויר כדי למנוע זרימה גבוהה כדי במנתח2 O.</li>
	<li>שחרר N2 דרך זרימה לרוקן את התא כדי להסיר את החמצן.</li>
	<li>להפחית את קצב הזרימה2 N ל- 0.5 - 1 ליטר/דקה, כאשר רמה2 O קרובה 30 דפים לדקה.</li>
</ol>3. הזרקה של אין דלק
<ol><li>
מלא את השקית בנייר כסף אין דלק.
	<ol>
<li>למלא את השקית עם N2 קודם, ואז לשאוב את האוויר החוצה לשטוף O2 מתוך התיק.</li>
		<li>ואז לשחרר אין דלק לתוך השקית בשכונה fume.</li>
		<li>לתלות את התיק בשכונה fume לשמש לעישון. לא. הערה: לאחר שימוש ממושך, התיק יכול להיות מפורק, הצנרת יכול להיות שביר בשל ההשפעות מאכל של2. ? אז, התיקים תצטרך להחליף מעת לעת.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
הכנסת לא לתוך ההדברה צ'יימברס.
	<ol>
<li>לשטוף את המזרק ומחוברת אבובים עם N2 לחשוף O2.</li>
		<li>לקחת דגימה לא מתוך התיק רדיד לא ולהזריק אותו ההדברה צ'יימברס.</li>
		<li>לאחר ההזרקה, לשטוף את המזרק ומחוברת אבובים עם N2.</li>
		<li>המקום ההדברה צ'יימברס ב 2 מעלות צלזיוס משך הטיפול ההדברה.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. למדוד אין ריכוז בתוך תא לעישון.
הערה: אין ריכוזים ב ההדברה מזיקים עשויים לנוע בין 2,000 דפים לדקה (0.2%) 50,000 עמודים לדקה (5%). טווח זה נמצא "מחוץ לטווח" של הנוכחי לא מפקחת. אבל, עדיין ניתן למדוד את רמות אין בדגימות מדולל או על-ידי שימוש בהתקן דילול.
<ol><li>
תא קטן fumigations
	<ol>
<li>לדלל דגימות אוויר הטיפול צנצנות בסוף לעישון:<ol>
<li>ליצור תנאים ULO-ppm O ≤302 בצנצנות.</li>
			<li>אקח דגימות דלק טיפול צנצנות להחדיר אותם לתוך הצנצנות ULO.</li>
		</ol>
</li>
		<li>למדוד רמות2 לא ולא הדגימות מדולל על ידי ומזרימים את האוויר דרך צג גז הארובה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Fumigations קאמרית גדולה: ההליכים מומחשים באיור4.
	<ol>
<li>להתקין מערכת דילול.</li>
		<li>למדוד רמות2 לא ולא.<ol>
<li>כבה את המסך גז הארובה, לשטוף את זה עם N2.</li>
			<li>הפעל זרימת הגז הדגימה כדי למדוד רמות2 לא ולא.</li>
			<li>סיום המדידה על-ידי ביטול זרימת הגז הדגימה.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. לסיים אין לעישון.
<ol><li>
ההדברה של חרקים בלבד
	<ol>
<li>מקום הריסוס צ'יימברס ברדס fume.</li>
		<li>פתח את התאים.</li>
		<li>אחזר חרקים להערכה התמותה. הערה: חרקים בדרך כלל מתקיימים תא סביבתיים בין לילה לאחר ההדברה כדי לאפשר כל חרקים חיים להתאושש לפני להיות הבקיע לתמותה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
ההדברה של מוצרים טריים
	<ol>
<li>להעביר ההדברה צ'יימברס ברדס fume (עבור תאים קטנים).</li>
		<li>ריקון הצ'יימברס ההדברה עם N2 כדי לאפשר החלפת אוויר מספר מסוים.</li>
		<li>לפקח אין רמה בנמל הפליטה. הערה: הצג גז הארובה יכול לשמש כדי לנטר רמות אין במהלך הסומק2 N. בדרך כלל, אנחנו מגלים ההדברה צ'יימברס כדי להקטין את רמת לא מתחת לדקה 200 לפני פתיחת רצה הסביבתית.</li>
		<li>אחזר חרקים להערכה התמותה (אם חרקים כאלה כלולים).</li>
		<li>חנות חיטאנו מוצרים לבקרת איכות ניתוח וטיפול פוסט-שאריות. הערה: אפשר מוצרים חיטאנו מספיק זמן בשכונה fume לא ולא2 להתפוגג לפני העברתם לאחסון. מעושן מוצרים מאוחסנים בדרך כלל בטמפרטורה נמוכה יחד עם הפקדים צידנית במשך תקופה מסוימת לפני חישובו איכות לאחר הקטיף, נפגעים.</li>
	</ol>
</li>
</ol>6. שאריות ניתוח
<ol><li>
חנקן דו-חמצני (2) מדידה באמצעות של 405 ננומטר אין2/לא/לאX לפקח
	<ol>
<li>הפעל ולאפשר את 405 ננומטר אין2/לא/לאX לפקח לחמם במשך 20-30 דקות.</li>
		<li>סגור את תא אריזות עץ המכיל את המוצר. הערה: לאחר הריסוס, צ'יימברס ההדברה היו פתוחים, שמוקם בטמפרטורה מסוימת כדי לאפשר2 להתפוגג. בזמנו כאשר אין שחרור2 נמדד, חותם התא אטום עם מכסה עם שתי יציאות מצויד stopcocks. לטמפרטורה של 20 ° C שימש את הפגנת הנוהל.</li>
		<li>חבר את הצג2 לא אל התא להפיץ את האוויר דרך שהצג2 לא.</li>
		<li>להתחיל מיד רישום נתונים על2 לא לפקח ולאסוף נתונים עבור 1 דקות.</li>
		<li>נתק את התא מהצג ולשמור על התא אטום. הערה: רישום נתונים ניתן להפעיל גם באמצעות תפריט -> Dat -> יומן על המסך לא2 , או באמצעות התוכנה graphing במחשב.</li>
		<li>לשמור על אטומים בתאי 20 ° C עבור 1 h ולאחר מכן חזור על השלב אוסף נתונים. הערה: ניתן להתאים את מרווח הזמן בהתאם קצב שחרור2 ממוצרים מעושן.</li>
		<li>חישוב ההפרש בין השניים לא2 ריכוזים ולא להמיר הנתונים מ ג/ק ג/שעה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
מדידות חנקתי, חנקיתי עם מנתח לא ג ' נרל אלקטריק Sievers 280i הערה: נא עיין במדריך של היצרן, את הנייר21 על ידי היאנג לבין ליאו (2017) לקבלת מידע מפורט.<ol>
<li>הכנת הדוגמא<ol>
<li>Homogenize דוגמאות מוצרים בבלנדר.</li>
			<li>להעביר 15 גרם של המדגם homogenized מ בבלנדר לתוך מבחנה.</li>
			<li>להוסיף 100 מ של מזוקקים H2O להתפשר על 10 דקות בתוך המבחנה.</li>
			<li>לסנן את הדגימה ולאחסן את פתרון מסונן-2 ° C עד השימוש.</li>
		</ol>
</li>
		<li>הפחתת הסוכן הכנה חנקתי מדידה עם תחמוצת החנקן מנתח הערה: נא עיין במדריך של היצרן לקבלת מידע מפורט.<ol>
<li>להוסיף 0.8 גר' ונדיום כלוריד (צ'לו3) בקבוקון.</li>
			<li>לאט לאט מוסיפים 100 מ ל חומצה הידרוכלוריד (HCl) של 1 מ' הבקבוק עם צ'לו3, קאפ. הבקבוק, ו מערבולת מספר פעמים.</li>
			<li>לסנן את הפתרון באמצעות נייר סינון ומשפך לאטום את הבקבוק פתרון מסונן עם רדיד אלומיניום ו לאחסן אותו במקרר.</li>
		</ol>
</li>
		<li>מדידה של חנקת והן חנקיתי עם תחמוצת החנקן מנתח הערה: נא עיין במדריך של היצרן לקבלת מידע מפורט.<ol>
<li>מחממים את המים הרותחים עד 95 מעלות צלזיוס. להוסיף 4-6 מ"ל של חנקת צמצום סוכן לתוך הכלי מחק לצמיתות, להתאים את קצב זרימת גז אינרטי לרמה נאותה. הערה: גז אינרטי היה הוא. ניתן להשתמש גם גז2 N.</li>
			<li>מזריקים µL 5 של פתרון מדגם באמצעות מזרק לתוך כלי מחק לצמיתות.</li>
			<li>להמשיך הזריקה הדוגמה הבאה הפסגה מדגם תסתיים.</li>
		</ol>
</li>
		<li>חנקיתי מדידה עם תחמוצת החנקן מנתח הערה: נא עיין במדריך של היצרן לקבלת מידע מפורט.<ol>
<li>התאם את השסתום על הספינה נקה לארח 1-2 psi לחץ על הגז אדיש.</li>
			<li>מוסיפים 4-6 מ ל חומצה אצטית מרוכזת כדי למלא את הנורה הראשונה של הכלי מחק לצמיתות.</li>
			<li>שוקל 50 מ"ג של סודיום יודיד (NaI) ו להמיס 1-2 מ ל H2O.</li>
			<li>להוסיף הכלי מחק לצמיתות את הפתרון נאי ומאפשרים ערבוב במשך 1-2 דקות.</li>
			<li>להגביר את קצב זרימת גז אינרטי לרמה נאותה.</li>
			<li>מזריקים µL 5 של פתרון מדגם באמצעות מזרק לתוך כלי מחק לצמיתות.</li>
			<li>המשך הזריקה הבאה מדגם מדגם שיא תסתיים.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>7. לאחר הקטיף איכות הערכה של פירות וירקות
הערה: המוצר פציעות ההדברה לא עשויים להופיע מיד לאחר הריסוס (איור 5). עם זאת, איכות המוצר מחושבת בדרך כלל לאחר 1-2 שבועות של אחסון הקרה שלאחר הטיפול. הסימפטומים של פציעות התקדמות לאורך זמן, ניתן לזהות טוב יותר בהערכת איכות. נהלים להערכת מוצרים טריים שונים עשויות להיות שונות באופן משמעותי. רק נהלים להערכת איכות חסה מודגמות כאן כדוגמה באמצעות נהלים הקים5.
<ol><li>הסר חסה אחסון הקרה שבועיים לאחר הריסוס. הסר עוטפת, לבדוק משטחים כתמי ושינויי צבע עבור כל הטיפולים כולל פקדים.</li>
	<li>התוצאה, איכות חזותית חיצוניים עבור כל הטיפולים בהתבסס על נהלים הקים8.</li>
	<li>לחתוך חסה חצאים ולבדוק כל הכתמים, כתמי עבור כל הטיפולים.</li>
	<li>ציון והקלטה של איכות חזותית פנימית הציונים של כל הטיפולים.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Ashmore, P. G., Burnett, M. G., Tyler, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reaction+of+nitric+oxide+and+oxygen.">Reaction of nitric oxide and oxygen.</a> Trans. Faraday Soc. 58, 685-691 (1962).</li><li>Culotta, E., Koshland, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NO+news+is+good+news.">NO news is good news.</a> Sci. 258, 1862-1865 (1992).</li><li>Haldane, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+red+colour+of+salted+meat.">The red colour of salted meat.</a> J. Hyg. 1, 115-122 (1901).</li><li>Hole, B. D., Bell, C. H., Mills, K. A., Goodship, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+toxicity+of+phosphine+to+all+developmental+stages+of+thirteen+species+of+stored+product+beetles.">The toxicity of phosphine to all developmental stages of thirteen species of stored product beetles.</a> J. Stored Prod. Res. 12, 235-244 (1976).</li><li>Kader, A. A., Lipton, W. J., Morris, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systems+for+scoring+quality+of+harvested+lettuce.">Systems for scoring quality of harvested lettuce.</a> HortScience. 8, 408-409 (1973).</li><li>Liu, Y. -. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+as+a+potent+fumigant+for+postharvest+pest+control.">Nitric oxide as a potent fumigant for postharvest pest control.</a> J. Econ. Entomol. 106, 2267-2274 (2013).</li><li>Liu, Y. -. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+as+a+fumigant+for+postharvest+pest+control+and+its+safety+to+postharvest+quality+of+fresh+products.">Nitric oxide as a fumigant for postharvest pest control and its safety to postharvest quality of fresh products.</a> Acta Horticulturae. 1105, 321-327 (2014).</li><li>Liu, Y. -. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+fumigation+for+control+of+western+flower+thrips+and+its+safety+to+postharvest+quality+of+fresh+fruit+and+vegetables.">Nitric oxide fumigation for control of western flower thrips and its safety to postharvest quality of fresh fruit and vegetables.</a> J. Asia-Pacific Entomol. 19, 1191-1195 (2016).</li><li>Liu, Y. -. B., Yang, X., Navarro, S., Jayas, D. S., Alagusundaram, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prospect+of+nitric+oxide+as+a+new+fumigant+for+postharvest+pest+control.">Prospect of nitric oxide as a new fumigant for postharvest pest control.</a> Proc. 10th Intl. Conf. Controlled Atmosphere and Fumigation in Stored Products (CAF2016). , 161-166 (2016).</li><li>Liu, Y. -. B., Yang, X., Simmons, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+nitric+oxide+fumigation+for+controlling+codling+moth+in+apples.">Efficacy of nitric oxide fumigation for controlling codling moth in apples.</a> Insects. 7, 71 (2016).</li><li>Manjunatha, G., Lokesh, V., Neelwarne, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+in+fruit+ripening:+trends+and+opportunities.">Nitric oxide in fruit ripening: trends and opportunities.</a> Biotechnol. Adv. 28, 489-499 (2010).</li><li>Manjunatha, G., Lokesh, V., Bhagyalashmi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide-induced+enhancement+of+banana+fruit+attributes+and+keeping+quality.">Nitric oxide-induced enhancement of banana fruit attributes and keeping quality.</a> Acta Hort. 934, 799-806 (2012).</li><li>Muramoto, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Comparison of nitrate content in leafy vegetables from organic and conventional farms in California. , (1999).</li><li>Ricciardolo, F. L. M., Sterk, P. J., Gaston, B., Folkerts, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+in+health+and+disease+of+the+respiratory+system.">Nitric oxide in health and disease of the respiratory system.</a> Physiol. Rev. 84, 731-765 (2004).</li><li>Roberts, J. D., Lang, P., Bigatello, L. M., Vlahakes, G. J., Zapol, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhaled+nitric+oxide+in+congenital+heart+disease.">Inhaled nitric oxide in congenital heart disease.</a> Circulation. 87, 447-453 (1993).</li><li>Rossaint, R., Falke, K. J., Lopez, F., Slama, K., Pison, U., Zapol, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhaled+nitric+oxide+for+the+adult+respiratory+distress+syndrome.">Inhaled nitric oxide for the adult respiratory distress syndrome.</a> N. Engl. J. Med. 328, 399-405 (1993).</li><li>Saadatian, M., Ahmadiyan, S., Akbari, M., Balouchi, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+pretreatment+with+nitric+oxide+on+kiwifruit+storage+at+low+temperature.">Effects of pretreatment with nitric oxide on kiwifruit storage at low temperature.</a> Adv. Environ. Biol. 6, 1902-1908 (2012).</li><li>Soegiarto, L., Wills, R. B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short+term+fumigation+with+nitric+oxide+gas+in+air+to+extend+the+postharvest+life+of+broccoli,+green+bean,+and+bok+choy.">Short term fumigation with nitric oxide gas in air to extend the postharvest life of broccoli, green bean, and bok choy.</a> HortTechnol. 14, 538-540 (2004).</li><li>Wills, R. B. H., Ku, V. V. V., Leshem, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fumigation+with+nitric+oxide+to+extend+the+postharvest+life+of+strawberries.">Fumigation with nitric oxide to extend the postharvest life of strawberries.</a> Posth. Biol. Technol. 18, 75-79 (2000).</li><li>Wills, R. B. H., Soegiarto, L., Bowyer, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+a+solid+mixture+containing+diethylenetriamine/nitric+oxide+(DETANO)+to+liberate+nitric+oxide+gas+in+the+presence+of+horticultural+produce+to+extend+postharvest+life.">Use of a solid mixture containing diethylenetriamine/nitric oxide (DETANO) to liberate nitric oxide gas in the presence of horticultural produce to extend postharvest life.</a> Nitric Oxide. 17, 44-49 (2007).</li><li>Yang, X., Liu, Y. -. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Residual+analysis+of+nitric+oxide+fumigation+on+fresh+fruit+and+vegetables.">Residual analysis of nitric oxide fumigation on fresh fruit and vegetables.</a> Posth. Biol. Technol. 132, 105-108 (2017).</li></ol>

שמירה על O2 מהחדר ההדברה היא קריטית כדי לא מוצלח ההדברה מזיקים. צ'יימברס הריסוס צריך אטום המועצה ויש חיבור קווים יבוצע ריקון עם N2 או אחרים נייח כדי להסיר O2 לפני בשימוש לשחרר גז אין לתוך ההדברה צ'יימברס. עוד היבט קריטי לעישון. אין היא דילול של לא עם N2 סומק בסוף ההדברה. פעולה זו מונעת ייצור עודף2 ופציעות אפשריות שלה למוצרים טריים. כמו במוצרים טריים שונים יש רמות שונות של סובלנות. אין חשיפה2 , טיפול ההדברה לא עשויים לדרוש רמות שונות של ריקון2 N כדי למנוע פציעות. כי אין2 יש נקודת רתיחה גבוהה של 21 ° C והוא גם מגיב עם מים לקבלת טופס חומצות, אין ייצור2 יהיה עלול לגרום עלו2 על מוצרים חיטאנו כמו שאריות ומגדיל חנקתי ו/או חנקיתי שיומרו מ-2.
סוג המוצרים כדי להיות מעושן יכול גם לסבך את תהליך ההדברה, כגון ריקון הראשונית עם N2 כדי ליצור תנאים ULO רצף הסופי עם N2 כדי לסיים את הטיפול ההדברה. ירקות עלים גדולים מחורר עטיפות פלסטיק כגון חסה ראש עטוף מייצגים מכשול גדול אוויר אוורור ולכן אתגר כדי לשטוף החוצה O2 ב N2 בתחילת ההדברה ומרוקן החוצה. לא עם N2 בסוף ההדברה. עבור מוצרים אלה, עדיף להשתמש בשילובים של התחתון אין ריכוזים ושעות טיפול ארוך יותר כדי לשלוט מזיקים כי זה בטוח יותר עבור איכות המוצר.
פיקוח על אין רמות בתאי ההדברה הוא אתגר נוסף בביצוע ההדברה אין. רוב המכשירים לא יכול למדוד הגבוה אין ריכוזים בשימוש fumigations לא מזיקים. קיימים מספר התקנים דילול אשר זמינים מסחרית, אבל זה לא ידוע אם הם יהיו מתאימה לעישון. לא. עם זאת, התקן דילול יכול כמתואר לעיל וגם בשימוש עבור אין פיקוח באמצעות צג גז מצויד בחיישן לא.
שינויים נוספים ניתן לבצע נהלי ניטור אין ריכוזים בתאי ההדברה. לדוגמה, יכול להיות מדולל מדגם של האוויר בחדר לעישון. בתוך שקית נייר עם אמצעי מסוים של חנקן. המדגם מדולל אוויר יכול להיות הפיץ מכן דרך צג גז הארובה מצויד עם ריכוז גבוה אין חיישן למדידת ריכוז אין. עם זאת, זה יהיה קשה למנוע חמצון של נו בתהליך ועל את דילול התהליך עלול לגרום הפסדים של מס לכן, לא המחושבים על בסיס המדידה של האוויר מדולל דגימות של הריסוס צ'יימברס צפויה להיות נמוכה יותר בפועל אין רמות הצ'יימברס ההדברה.
תהליך הקמת ULO התנאים בלשכה אריזות עץ גם יכול להיות שונה בהתבסס על אילו סוגי ההדברה תאי הינם זמינים. עבור תאי ההדברה יכול לשמש בתנאים ואקום, ULO תנאים יכול להתבסס על התהליך של שואב אבק חוזרות ואחריו ממלא את החדר עם גז חנקן. תהליך זה יהיה יעיל יותר בהקמת ULO תנאים מאשר תהליך שטיפה רגילה שתוארו לעיל. עבור מוצרים מאוחסנים, CO2 עשוי לשמש גם במקום N2 להקמת ULO תנאים אין ההדברה.
לניתוח שאריות, כביש 405 ננומטר אין2/לא/אין צגx נבחר כדי למדוד אין שחרור גז2 מדגימות חיטאנו את החללים ראש ו במנתח תחמוצת החנקן נקבע לזהות חנקתי, חנקיתי דגימות נוזלים. עם זאת, סוגים אחרים של כלים זמינים עם רגישויות מתאימים, specificities מדידה2 ב- headspaces, מדידת חנקתי חנקיתי בדגימות הנוזל. לכן, ההליכים למדידות שאריות יכול להיות שונה בהתבסס על הזמינות של כלים.
כמו לא נדיפים מאוד עם נקודת רתיחה-152 ° C ו מגיבה באופן מיידי עם O2, לא צפוי זה לא יישאר כמו משקע על מוצרים חיטאנו לאחר הריסוס. לכן, רק2 נמדדה ב קראוון של מוצרים מעושן. 2 יש נקודת רתיחה גבוהה של 21 ° C כלתה איטי בהרבה ממוצרים ו ולכן צפויה להישאר על מוצרים חיטאנו זמן מה לאחר הריסוס.
עבור ירקות עליים, אם אין ההדברה לא שרוקן ב N2 בסוף, לא יגיב עם O2 כדי לייצר2 , יכול לגרום התמדתו של2 זמן כפי במוצרים טריים מאוחסנים בדרך כלל בטמפרטורות נמוכות. לכן, מנקודת בעמידה של קיצור תקופת הזמן reentering לאחר הריסוס, הריסוס לא צריך גם יבוצע ריקון עם N2 בסוף ההדברה. פיקוח על אין שחרור2 הוא, לכן, חשוב לקבוע כמה זמן ואיך הרבה NO2 יישאר על מוצרים לאחר הריסוס. בשום רמה2 על מוצרים חיטאנו ישפיע באופן פוטנציאלי כיצד טיפל או לאחסן המוצרים fumigated.
חנקת קיימת באופן טבעי קרקע וצמחים כולל פירות וירקות.  קצת ירקות שורש יכול לאסוף ריכוזים גבוהים של חנקות. ירקות הם המקור תזונתיים הגדול של חנקות. לדוגמה, חסה טרייה ותרד בעלי רמות ניטראט הממוצע של 786-1,080 1,420-3400 מ"ג/ק"ג. תקנת הנציבות האירופית מגדירה את הרמות המרבי של חנקת חסה, תרד 2,500-4,500 ו- 2,000-3,000 mg/kg13. חנקת והן חנקיתי מתווספים גם מרבה בשר מעובד כמו בייקון, נקניק, נקניקיות, נקניקיות, צורכים הם משמשים כחומר משמר במוצרים אלה בשר. מדידות של חנקת, חנקיתי כמו שאריות ההדברה לא נועדו לספק מידע על היקף כי הריסוס לא יכול לשנות את רמות שלהם במוצרים מעושן, ייתכן כי אין כל רלוונטיות בטיחות המזון. לכן, מדידות של חנקת, חנקיתי כמו שאריות להתייחס בו כאופציונליות. אלא אם כן הם נדרשים על ידי סוכנויות תקינה ברישום של לא כמו fumigant או תהליכים רגולטוריים אחרים. הליכים מפורטים למדידות חנקתי, חנקיתי הינם גם זמינים21.
תחמוצת החנקן הריסוס יש יתרונות של יעילות גבוהה נגד בכל שלבי החיים של חרקים ואקריות, ללא שאריות מזיקות לעומת שאר fumigants, כפי שפורט לפני6,7,9. נתון כי יש מחסור קריטי יעיל חלופות מתיל ברומיד ההדברה מזיקים לאחר הקטיף, רוב fumigants חלופי להשאיר משקעים רעילים במוצרים חיטאנו לעישון. אין צווי מורחב יותר במחקר, פיתוח, ו רישום מאמצים להביא זה המזיק ומעורבותם יעילה ובטוחה לשלוט פתרון לשוק. ובכל זאת, בשל המורכבות מחמירים הדרישה ULO תנאים מההליכים לעישון, הכשרה עשויות להידרש חוקרים רבים להתחיל שום מחקר ההדברה. הכוונה שלנו לספק אינפורמטיבי וקלים למעקב נהלי המעבדה אין טיפולים ההדברה מזיקים לאחר הקטיף לשלוט על טרייה ומאוחסנים מוצרים חקלאיים. העקרונות של ההליכים ניתן לפתח פרוטוקולים עבור בקנה מידה גדול לא fumigations עבור יישומים מעשיים.

תחמוצת החנקן הוא מולקולה messenger תא בכל מקום מערכות ביולוגיות כל2. היא פרסמה בכמויות גדולות כמו גורם מזהם נפוץ של שריפת דלק פוסילי תחנות כוח, כלי רכב מנועיים, מיוצר בכמויות גדולות כמו תוצר ביניים בייצור דשנים. מחקר אינטנסיבי בלי ב-20 השנים האחרונות הניב כמות גדולה של ידע על החשיבות שלה, פונקציות מנגנוני ויסות תהליכים ביוכימיים פיזיולוגיים במערכות ביולוגיות שונות. ידע זה הביא ביישומים רפואיים שונים של לא לטיפול במחלות והנשימה14,15,16. בחקלאות, לא שימש לפני יותר ממאה שנים על מוצרי בשר מעובד עבור שימור פיגמנט אדום3. גם לא מאריך חיי מדף ומשפר את איכות ומעורבותם של מגוון רחב של מוצרים טריים11,12,17,18,19,20. יותר לאחרונה, לא נמצאה fumigant חזק עבור בקרת מזיקים לאחר הקטיף6.
לא הוכח להיות יעיל נגד בכל שלבי החיים של החרקים נבדק (איור 1). המין המזיק נבדק מייצגים סוגים מגוונים של שלבי חיים מזיקים, מצביעים על הפוטנציאל הגדול של ההדברה לא לשלוט המזיק מגוון מינים. היעילות של אין הריסוס נגד חרקים מזיקים הוא קרוב לזה של מתיל ברומיד לעישון.... עם זאת, אין ההדברה יכול להתבצע בטמפרטורות אחסון הקרה. ההדברה מתיל ברומיד דורש מחממת את המוצרים המאוחסנים קר ו, לכן, עשוי להשפיע על איכות המוצר. לדוגמה, תריפס, תריפסכנימות עלה חסה, Nasonovia ribisnigri, יכול להיות נשלטת ב- 2 ו- 3 h עם 2.0% ו- 1.0% אין לעישון, בהתאמה, על 2 ° C6. אין מתכון שלישי הוא גם הרבה יותר מהר מאשר לעישון פוספין אשר הוא הטיפול העיקרי מתיל ברומיד חלופי יכול לקחת מעל עשרה ימים כדי לשלוט כמה מזיקים4,6,9,10.
תחמוצת החנקן הריסוס יעילה נגד חיצוניות ופנימיות האכלה חרקים. הבחין כנף דרוזופילה, דרוזופילה suzukii, הזחלים של דובדבנים שורץ נשלטים ב 8 שעות עם 2.5% אין לעישון.9. הזחלים של codling העש, Cydia pomonella, בתפוחים שורץ נשלטים לחלוטין ב ההדברה 24 שעות עם 5% לא ב 2 ° C9,10. היעילות של ההדברה לא עולה עם הגדלת ריכוז, זמן טיפול ו טמפרטורה6. גורמים אלה יכול לשמש כדי למטב טיפולים ההדברה לא עבור מינים חרקים שונים על סחורות שונות.
עם זאת, לא מגיבה עם O2 באופן ספונטני כדי לייצר21. זה לא רק צורכת לא אך יכול גם לגרום נזקים למוצרים טריים כגון חסה (איור 2). לכן, אין ההדברה להתבצע בתנאים ultralow חמצן (ULO) כדי לשמר את מס עבור מוצרים טריים, fumigations לא צריך גם להיות מחוסל על ידי שטיפה עם N2 כדי לדלל לא לפני חשיפת חיטאנו את המוצרים אויר כדי להקטין את החשיפה שלהם לא2. דרישות אלה מחמירים להגביר את המורכבות ואת העלות של ההדברה אין. עם זאת, אין מתכון שלישי צפוי להיות באופן טכני ריאלי, העלות האפקטיבית7. כל הרכיבים של גדול קנה המידה לעישון. אין הם גם זמינים מסחרית או יכול להתבצע באופן מסחרי כולל חנקן דור ציוד, אין אספקה, ציוד ניטור (O2 מנתח, אין מטר), צ'יימברס ההדברה לאוויר. אחסון מבוקר בבקרה (CA) והמשלוח תחת האווירה נמוך של2 O שימשו מסחרית. עלות אנרגיה ביצירת N2 עבור לעישון. אין גם צנוע, ישתנו בהתאם למיקום7.
תחמוצת החנקן ההדברה גם בטוח פירות טריים, ירקות כאשר ומנותקים כהלכה על ידי שטיפה עם N2 כדי לדלל לא קודם לפני חשיפת המוצרים הסביבה אוויר8. הריסוס לא הוכח כדי להיות בטוחים כל נבדק עד היום כולל חסה, ברוקולי, מלפפונים, פלפלים, עגבניות, תותים, תפוחים, אגסים, תפוזים, לימונים8ירקות ופירות טריים. ההדברה 4 שעות עם 1% לא ב 2 מעלות צלזיוס לשליטה תריפס משפר גם את איכות תות. שבוע לאחר הריסוס, תותים שטופלו תקיף, יש צבע בהיר יותר, עשירה יותר הינם, לכן, כדאי postharvest איכות לעומת שליטה8.
תחמוצת החנקן ההדברה גם לא מותיר שאריות מזיקות על תוצרת טרייה מעושן. כמו לא מגיבה עם O2 כדי לייצר2, אין הריסוס עלול לגרום בתצהיר של2 על המוצרים בשל נקודת הרתיחה 21 ° C של2. בנוכחות מים,2 הידרוליזה ליצירת חומצה חנקתית (עב ס3). לכן, אין ההדברה עשוי עשוי לגרום לכך חנקות (אין3–) ניטריטים (לא2–) כמו שאריות על סחורות שטופלו. בעת הריסוס הסתיים עם N2 פלאש, אין תוצאות ההדברה מגביר אין או מעט מאוד חנקתי או חנקיתי כמו שאריות-24 שעות לאחר הריסוס מצרכים טריים9,21.
אופי תגובתי לא עם O2 דורש גם נהלים מחמירים להשאיר בחוץ O2 במהלך התהליך של ביצוע טיפולים לעישון. לא. המורכבות ואת הנהלים המחמירים ביותר מומחשים חזותית צריך להיות עקב, שולט. במצגת זו סירטון, אין ההדברה של מוצרים טריים הייתה הסביר, מאויר, הפגינו כדי לאפשר לחוקרים אחרים לערוך מחקר ההדברה לא ולפתח טיפולים ההדברה לא מזיקים לאחר הקטיף. מאמצים אלה יעזור כדי להאיץ שימוש מסחרי אין לעישון. כדי לשלוט מזיקים לאחר הקטיף על מוצרים טריים מאוחסנות.

<table><tbody><tr><td>Nitric oxide gas</td><td>Praxair</td><td>UN1660</td><td>99.5% purity</td></tr><tr><td>Nitrogen gas</td><td>Praxair</td><td>UN1066</td><td>Industry grade</td></tr><tr><td>Fumigation chamber</td><td>(custom made)</td><td></td><td>Size: 30&quot;x30&quot;x30&quot;; made of stainless steel with rubber gaskit along the rim.&amp;nbsp; The chamber is sealed by clampdown its lid to the vaseline greased gaskit. The chamber has multiple ports for flushing the chamber and for taking air samples.</td></tr><tr><td>Nitric Oxide Analyzer</td><td>GE Scientific</td><td>NOA 280i analyzer</td><td>Measure NO plus NO2, Nitrate and nitrite</td></tr><tr><td>Model 405nm NO2/NO/Nox monitor</td><td>2B Technologies Inc</td><td></td><td>Ranges: NO (0-2ppm), NO2+NO (0-10ppm)</td></tr><tr><td>Kane 900+ gas monitor</td><td>Kane International</td><td></td><td>With NO, NO2, CO, O2 sensors</td></tr><tr><td>Flowmeter and controllers</td><td>Omega Engineering</td><td></td><td>Flow ranges: 0-1, 0-5, 0-20 LPM</td></tr><tr><td>Tubing, connectors, stopcocks</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>Tubing: nylon and teflon, sizes: 1/8&quot; and 5/32&quot; (4mm); They fit to connectors and stockcocks&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Oxygen analyzer</td><td>Illinois Instruments</td><td>Model 810</td><td>Ziconia sensor, sensitivity: 0.1ppm, range: 0-100%</td></tr><tr><td>NO2 personal alarm</td><td>SENSIT Technologies</td><td>Sensit P100</td><td>Should be used in conducting large scale NO fumigations outside a fume hood</td></tr><tr><td>Flowmeter and controllers</td><td>Omega Engineering</td><td></td><td>Flow ranges: 0-1, 0-5, 0-20 LPM</td></tr><tr><td>Gastight syringes</td><td>SGE Analytical Science</td><td></td><td>10 ml, 100 ml</td></tr><tr><td>Gastight syringes</td><td>Hamilton Company</td><td></td><td>10uL</td></tr><tr><td>Tubing, connectors, stopcocks</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>Tubing: nylon and teflon, sizes: 1/8&quot; and 5/32&quot; (4mm); They fit to connectors and stockcocks&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Sodium Iodide</td><td>Fisher Chemical</td><td>S324-100</td><td></td></tr><tr><td>Acetic acid, Glacial</td><td>Fisher Chemical</td><td>UN2789</td><td>&amp;ge;99.7% purity</td></tr><tr><td>Hydrochloric acid</td><td>Cole-Parmer</td><td>SA48-500</td><td>1.0 Normal</td></tr><tr><td>Vanadium(III) Chloride</td><td>Acros Organics</td><td>197000250</td><td>97% purity</td></tr><tr><td>Sodium Hydroxide</td><td>Fisher Chemical</td><td>BPSS266-1</td><td>1 M</td></tr><tr><td>SAHARA S3 Stainless-steel heated bath circulator</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SC 100 Digiital Imersion Circulator</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Oxygen</td><td>Praxair</td><td>*001043</td><td>99.5-100% purity</td></tr><tr><td>Hot Jaw</td><td>Sorbent Systems</td><td></td><td>Mylar bag heat sealer</td></tr><tr><td>Mylar bags</td><td>Sorbent Systems</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Flipmate filtration assemblies</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-35202-29</td><td></td></tr><tr><td>15 ml polypropylane tube</td><td>Falcon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Filter Paper P5</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Blender</td><td>Waring</td><td>Blender 7010G</td><td>Model WF2211212</td></tr><tr><td>Dilution device</td><td>Made in our lab</td><td></td><td>Combine the ends of four equal length Teflon microtubing into one connector and have a connector for each end of the four microtubing.</td></tr></tbody></table>

procedures of laboratory fumigation for pest control with nitric oxide gas

תחמוצת החנקן (NO) הוא fumigant שהתגלתה מזיקים לאחר הקטיף. מאמר זה מספק פרוטוקולים מפורט לביצוע אין לעישון על מוצרים טריים ונהלים לבקרת איכות ניתוח והמוצר שאריות. תא אטום ההדברה המכיל פירות וירקות טריים התרוקן קודם עם חנקן (N2) להקים סביבה ultralow חמצן (ULO) ואחריו הזרקה של מס תא הריסוס ואז נשמרת בטמפרטורה נמוכה של 2-5 ° C עבור תקופת זמן שצוינה הכרחי להרוג נודניק היעד להשלמת טיפול ההדברה. בסוף הטיפול לעישון, תא ההדברה התרוקן ב N2 כדי לדלל לא לפני פתיחת התא לאוויר הסביבה כדי למנוע את התגובה בין לא O2, אשר מייצרת2 עשוי להזיק עדין מוצרים טריים. בזמנים שונים לאחר הריסוס אין, אין2 בתוך קראוון וחנקה ו חנקיתי בדגימות הנוזל נמדדו כמו שאריות. איכות המוצר הוערך לאחר 2 שבועות של אחסון הקרה שלאחר הטיפול כדי לקבוע את ההשפעות של ההדברה לא על איכות המוצר. מונע O2 מגיבים לא חיוני לעישון. לא, היא חלק חשוב של הפרוטוקולים. מדידת רמות אין הוא מאתגר, פתרון מעשי הינו מסופק. פרוטוקול אפשרי שינויים מוצעים גם למדידת אין רמות ההדברה צ'יימברס, כמו גם משקעים. הריסוס לא יש את הפוטנציאל להיות אלטרנטיבה מעשית מתיל ברומיד ההדברה להדברה לאחר הקטיף על מוצרים טריים מאוחסנת. פרסום זה מיועד לסייע לחוקרים אחרים אין מחקר ההדברה מזיקים לאחר הקטיף, האצת הפיתוח של אין ההדברה עבור יישומים מעשיים.

תחמוצת החנקן ההדברה לצרכים מוצרים טריים שיש לסיימו עם N2 פלאש לדלל לפני פתיחת אריזות עץ צ'יימברס. לא לחשוף את המוצרים הסביבתית. כאשר טיפול ההדברה מופסקת על-ידי פתיחת ישירות לחדר כדי אויר ללא N2 סומק, התגובה בין לא ו O2 תגרום בייצור2 אין חשיפה של מוצרים טריים2 לעתים קרובות התוצאות פציעות כולל כתמים חומים, שינוי צבע הרקמה המתה כתמים8. עדין ירקות ופירות כגון חסה, זוקיני, אגסים נוטים לגרום נזק על ידי2. בעת הריסוס לא מסתיימת כהלכה עם N2 סומק, הטיפול ההדברה הוכח כדי להיות בטוחים ללא פציעות על איכות המוצר (איור 6 ואיור 7). למעשה, אין ההדברה מזיקים נמצאה כדי לשפר את איכות ומעורבותם של מוצרים טריים לעומת פקדים unfumigated כפי שמתואר על תותים. תותים חיטאנו ללא שליטה תריפס שומרים על צבע בהיר יותר, עשירה יותר, והם גם פחות רך שבוע לאחר הריסוס לעומת שליטה8. ראשי חסה עטוף שרוולי פלסטיק יכול לקיים פציעות עלים משטח ישר מתחת חורים לאוורור של עוטפת עקב תגובה של לא עם O2 כדי לייצר2 אם ההדברה לא הסתיים כראוי.
שטיפה עם N2 בסוף ההדברה לא מושפעים אין שחרור2 ממוצרים מעושן. כאשר אין ההדברה חוסל ב- N2 סומק, היו אין הבדלים משמעותיים אין קצב שחרור2 בין הטיפול הפקד. אין טיפול ההדברה לרוקן אוויר בסוף, לעישון. לעומת זאת, היה גבוה יותר אין קצב שחרור2 לעומת את הפקד ואת שחרורו של2 ירדה לאורך זמן.
עבור מוצרים טריים ביותר כולל חסה, ברוקולי, תות, תפוח, תפוז, וכו ', היו אין הבדלים משמעותיים3– או אין רמות2– בין הטיפול הופסק עם N2 פלאש, שהפקד. רק כאשר אין טיפול ההדברה חוסל על ידי שטיפה עם אוויר נורמלי, היו גבוהות משמעותית3– וריכוזי אין2– של כל המוצרים fumigated מאשר שניהם שולטים סמוקות N2 מעושן מוצרים. ריכוז2– לא היה בדרך כלל לא לזיהוי והן חיטאנו ושליטה מוצרים (טבלה 1 ו לטבלה 2). לכן, היו אין רמות משמעותיות של שאריות של מוצרים טריים fumigated ב- 24 שעות לאחר הריסוס בעת הריסוס הסתיים כראוי עם חנקן שטיפה.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig1.jpg"> איור 1: השפעות לעישון. אין על חרקים ואקריות. <a href="//cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56309/56309fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig2.jpg"> איור 2: הפגנה של פציעות חסה על ידי2 מן התגובה בין לא O2 <a href="//cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56309/56309fig2large.jpg" target="_blank">. לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig3.jpg"> איור 3: תרשים זרימה של ותכניסו לעישון.. <a href="//cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56309/56309fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig4.jpg"> איור 4: שיטת באמצעות מכשיר דילול וגז שפעת צג עם חיישן אין למדוד אין רמה ב בקנה מידה גדול אין בדיקה לעישון. <a href="//cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56309/56309fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig5.jpg"> איור 5: השווה השפעות טיפולים ההדברה הסתיים ב- N2 ועצירה של אוויר מיושרות על איכות ומעורבותם של פירות וירקות טריים. <a href="//cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56309/56309fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig6.jpg"> איור 6: תוצרת חקלאית באיכות של חסה, ברוקולי, תפוחי שלושה טיפולים (C, T1, T2) 14 ימים לאחר הריסוס עם שליטה ייצוג C, T1, T2, הריסוס הסתיים עם N2 סומק ההדברה הסתיים עם אוויר סומק, בהתאמה. <a href="//cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56309/56309fig6large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>

<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig7.jpg"> איור 7: תוצרת חקלאית באיכות של תפוזים, אגסים, אפרסקים של שלושה טיפולים (C, T1, T2) 14 ימים לאחר הריסוס עם שליטה ייצוג C, T1, T2, הריסוס הסתיים עם N2 סומק ההדברה הסתיים עם אוויר סומק, בהתאמה. <a href="//cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56309/56309fig7large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>


<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>המוצר</td>
			<td>אין (%)</td>
			<td>טיפול</td>
			<td>3– (מ"ג/100 גרם)</td>
			<td>2– (מ"ג/100 גרם)</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">אפל</td>
			<td>5.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>1.60±0.12</td>
			<td>0.50±0.16</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>1.36±0.13 אלב</td>
			<td>0.03±0.01 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>0.76±0.28 b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">מישמש</td>
			<td>3.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>1.84±0.14</td>
			<td>0.21±0.02</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>0.92±0.17 b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>0.54±0.01 b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">אספרגוס</td>
			<td>3.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>2.19±0.13</td>
			<td>0.08±0.04</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>0.70±0.03 b</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>0.84±0.07 b</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">אוכמניות</td>
			<td>3.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>2.74±0.46</td>
			<td>0.14±0.02</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>1.24±0.19 b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>1.22±0.15 b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">ברוקולי</td>
			<td>3.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>18.69±3.75</td>
			<td>0.17±0.06</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>18.51±3.42</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>12.26±2.31</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">דובדבן</td>
			<td>3.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>1.75±0.11</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>0.56±0.09 b</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>0.65±0.08 b</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">השום</td>
			<td>3.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>5.05±0.45</td>
			<td>0.14±0.02</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>4.45±0.79</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>5.01±0.69</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">ענבים</td>
			<td>3.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>6.32±0.68</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>2.38±0.43 b</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>2.74±0.25 b</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">פלפל</td>
			<td>3.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>9.26±0.35</td>
			<td>0.71±0.12</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>6.75±0.68 b</td>
			<td>0.02±0.01 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>6.23±0.72 b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">קיווי</td>
			<td>3.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>1.66±0.55</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>1.25±0.09</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>1.41±0.31</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">חסה</td>
			<td>2.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>112.85±20.17a</td>
			<td>7.99±2.02</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>38.97±5.87 b</td>
			<td>0.1±0.1 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>40.64±10.81b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">כתום</td>
			<td>3.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>1.22±0.13</td>
			<td>0.27±0.05</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>1.05±0.05</td>
			<td>0.02±0.01 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>1.24±0.22</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">שזיף</td>
			<td>3.0</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>1.04±0.08</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>0.63±0.04 b</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>0.84±0.11 אלב</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">תות שדה</td>
			<td>2.5</td>
			<td>לא-אייר</td>
			<td>6.01±0.62</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>לא-N2
</td>
			<td>5.30±0.77</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>שליטה</td>
			<td>6.16±1.06</td>
			<td>0</td>
		</tr>
</tbody></table>טבלה 1: חנקתי ורמות חנקיתי כמו שאריות-24 שעות לאחר הריסוס תחמוצת החנקן 16 h על ירקות ופירות טריים- עבור כל מוצר, ערכים ואחריו אותיות שונות הם שונים באופן משמעותי על סמך Tukey HSD טווח מרובים מבחן (P ≤0.05). מתפרסם מ יאנג ו ליו (2017).

Watch this Scientific Journal Video about Procedures of Laboratory Fumigation for Pest Control with Nitric Oxide Gas at JoVE.com

Procedures of Laboratory Fumigation for Pest Control with Nitric Oxide Gas

מאמר זה מתאר את תחמוצת החנקן (NO) פרוטוקולים ההדברה מזיקים לאחר הקטיף. צ'יימברס ההדברה הם סמוקים עם חנקן (N2) להקים ultralow חמצן בתנאים לא מוזרק. בסוף, צ'יימברס הם סמוקים ב N2 כדי לדלל לא לפני חשיפת מוצרים אויר כדי למנוע חשיפה2.

תהליכי מעבדה ההדברה להדברה בגז תחמוצת החנקן

Nitric oxide (NO) is a newly discovered fumigant for postharvest pest control. This paper provides detailed protocols for conducting NO fumigation on ...

procedures-laboratory-fumigation-for-pest-control-with-nitric-oxide

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Environment

16.9K Views.  USDA-ARS. מאמר זה מתאר את תחמוצת החנקן (NO) פרוטוקולים ההדברה מזיקים לאחר הקטיף. צ'יימברס ההדברה הם סמוקים עם חנקן (N2) להקים ultralow חמצן בתנאים לא מוזרק. בסוף, צ'יימברס הם סמוקים ב N2 כדי לדלל לא לפני חשיפת מוצרים אויר כדי למנוע חשיפה2.

Video: Procedures of Laboratory Fumigation for Pest Control with Nitric Oxide Gas

A General Method for Detecting Nitrosamide Formation in the In Vitro Metabolism of Nitrosamines by Cytochrome P450s

N-nitrosamines are a well-established group of environmental carcinogens, which require cytochrome P450 oxidation to exhibit activity. The accepted mechanism of metabolic activation involves formation of &#945;-hydroxynitrosamines that spontaneously decompose to DNA alkylating agents. Accumulation of DNA damage and the resulting mutations can ultimately lead to cancer. New evidence indicates that &#945;-hydroxynitrosamines can be further oxidized to nitrosamides processively by cytochrome P450s. Because nitrosamides are generally more stable than &#945;-hydroxynitrosamines and can also alkylate DNA, nitrosamides may play a role in carcinogenesis. In this report, we describe a general protocol for evaluating nitrosamide production from in vitro cytochrome P450-catalyzed metabolism of nitrosamines. This protocol utilizes a general approach to the synthesis of the relevant nitrosamides and an in vitro cytochrome P450 metabolism assay using liquid chromatography-nanospray ionization-high resolution tandem mass spectrometry for detection. This method detected N&#8242;-nitrosonorcotinine as a minor metabolite of N&#8242;-nitrosonornicotine in the example study. The method has high sensitivity and selectively due to accurate mass detection. Application of this method to a wide variety of nitrosamine-cytochrome P450 systems will help determine the generality of this transformation. Because cytochrome P450s are polymorphic and vary in activity, a better understanding of nitrosamide formation could aid in individual cancer risk assessment.

A General Method for Detecting Nitrosamide Formation in the In Vitro Metabolism of Nitrosamines by Cytochrome P450s

&#945;-hydroxylation of carcinogenic nitrosamines by cytochrome P450s is the accepted metabolic pathway that produces DNA-damaging intermediates, which cause mutations. However, new data indicates further oxidation to nitrosamides can occur. We describe a general method for detecting nitrosamides produced from in vitro cytochrome P450-catalyzed metabolism of nitrosamines.

שיטה כללית לגילוי Nitrosamide היווצרות בחילוף החומרים במבחנה של Nitrosamines מאת ציטוכרום P450s

N-nitrosamines are a well-established group of environmental carcinogens, which require cytochrome P450 oxidation to exhibit activity. The accepted ...

Cancer Research

Assessment of Labile Organic Carbon in Soil Using Sequential Fumigation Incubation Procedures

Management practices and environmental changes can alter soil nutrient and carbon cycling. Soil labile organic carbon, a readily decomposable C pool, is highly sensitive to disturbance. It is also the primary substrate for soil microorganisms, which is fundamental to nutrient cycling. Due to these attributes, labile organic carbon (LOC) has been identified as an indicator parameter for soil health. Quantifying the turnover rate of LOC also aids in understanding changes in soil nutrient cycling processes. A sequential fumigation incubation method has been developed to estimate soil LOC and potential C turnover rate. The method requires fumigating soil samples and quantifying CO2-C respired during a 10 day incubation period over a series of fumigation-incubation cycles. Labile organic C and potential C turnover rate are then extrapolated from accumulated CO2 with a negative exponential model. Procedures for conducting this method are described.

Labile organic carbon (LOC) and the potential carbon turnover rate are sensitive indicators of changes in soil nutrient cycling processes. Details are provided for a method based on fumigating and incubating soil in a series of cycles and using the CO2 accumulated during the incubation periods to estimate these parameters.

הערכת פחמן אורגני יציב בקרקע שימוש סדרתית פומיגציה ונהלי דגירה

Management practices and environmental changes can alter soil nutrient and carbon cycling. Soil labile organic carbon, a readily decomposable C pool, is ...

Automated, High-resolution Mobile Collection System for the Nitrogen Isotopic Analysis of NOx

Nitrogen oxides (NOx = NO + NO2) are a family of atmospheric trace gases that have great impact on the environment. NOx concentrations directly influence the oxidizing capacity of the atmosphere through interactions with ozone and hydroxyl radicals. The main sink of NOx is the formation and deposition of nitric acid, a component of acid rain and a bioavailable nutrient. NOx is emitted from a mixture of natural and anthropogenic sources, which vary in space and time. The collocation of multiple sources and the short lifetime of NOx make it challenging to quantitatively constrain the influence of different emission sources and their impacts on the environment. Nitrogen isotopes of NOx have been suggested to vary amongst different sources, representing a potentially powerful tool to understand the sources and transport of NOx. However, previous methods of collecting atmospheric NOx integrate over long (week to month) time spans and are not validated for the efficient collection of NOx in relevant, diverse field conditions. We report on a new, highly efficient field-based system that collects atmospheric NOx for isotope analysis at a time resolution between 30 min and 2 hr. This method collects gaseous NOx in solution as nitrate with 100% efficiency under a variety of conditions. Protocols are presented for collecting air in urban settings under both stationary and mobile conditions. We detail the advantages and limitations of the method and demonstrate its application in the field. Data from several deployments are shown to 1) evaluate field-based collection efficiency by comparisons with in situ NOx concentration measurements, 2) test the stability of stored solutions before processing, 3) quantify in situ reproducibility in a variety of urban settings, and 4) demonstrate the range of N isotopes of NOx detected in ambient urban air and on heavily traveled roadways.

Automated, High-resolution Mobile Collection System for the Nitrogen Isotopic Analysis of NOx

Previous work suggests that the nitrogen isotopic composition of atmospheric nitrogen oxides might distinguish the influence of different sources in the environment. We report on an automated, mobile, field-based method for the high collection efficiency of atmospheric NOx for N isotopic analysis at an hourly time resolution.

אוטומטיות, מערכת איסוף ניידת ברזולוציה גבוהה עבור ניתוח איזוטופי החנקן של NO<sub&gt; x</sub

Nitrogen oxides (NOx = NO + NO2) are a family of atmospheric trace gases that have great impact on the environment. NOx concentrations directly influence ...

Analytical Techniques for Assaying Nitric Oxide Bioactivity

Nitric oxide (NO) is a diatomic free radical that is extremely short lived in biological systems (less than 1 second in circulating blood)1. NO may be considered one of the most important signaling molecules produced in our body, regulating essential functions including but not limited to regulation of blood pressure, immune response and neural communication. Therefore its accurate detection and quantification in biological matrices is critical to understanding the role of NO in health and disease. With such a short physiological half life of NO, alternative strategies for the detection of reaction products of NO biochemistry have been developed. The quantification of relevant NO metabolites in multiple biological compartments provides valuable information with regards to in vivo NO production, bioavailability and metabolism. Simply sampling a single compartment such as blood or plasma may not always provide an accurate assessment of whole body NO status, particularly in tissues. The ability to compare blood with select tissues in experimental animals will help bridge the gap between basic science and clinical medicine as far as diagnostic and prognostic utility of NO biomarkers in health and disease. Therefore, extrapolation of plasma or blood NO status to specific tissues of interest is no longer a valid approach. As a result, methods continue to be developed and validated which allow the detection and quantification of NO and NO-related products/metabolites in multiple compartments of experimental animals in vivo. The established paradigm of NO biochemistry from production by NO synthases to activation of soluble guanylyl cyclase (sGC) to eventual oxidation to nitrite (NO2-) and nitrate (NO3-) may only represent part of NO's effects in vivo. The interaction of NO and NO-derived metabolites with protein thiols, secondary amines, and metals to form S-nitrosothiols (RSNOs), N-nitrosamines (RNNOs), and nitrosyl-heme respectively represent cGMP-independent effects of NO and are likely just as important physiologically as activation of sGC by NO. A true understanding of NO in physiology is derived from in vivo experiments sampling multiple compartments simultaneously. Nitric oxide (NO) methodology is a complex and often confusing science and the focus of many debates and discussion concerning NO biochemistry. The elucidation of new mechanisms and signaling pathways involving NO hinges on our ability to specifically, selectively and sensitively detect and quantify NO and all relevant NO products and metabolites in complex biological matrices. Here, we present a method for the rapid and sensitive analysis of nitrite and nitrate by HPLC as well as detection of free NO in biological samples using in vitro ozone based chemiluminescence with chemical derivitazation to determine molecular source of NO as well as ex vivo with organ bath myography.

The endogenous production of nitric oxide (NO) regulates a wide variety of biological functions. It is becoming increasingly clear that disruption or dysregulation of NO based signaling is involved in many human diseases. Methods to quantify relevant NO metabolites may provide novel diagnostic or prognostic biomarkers for human disease.

טכניקות אנליטיות עבור assaying bioactivity תחמוצת החנקן

Nitric oxide (NO) is a diatomic free radical that is extremely short lived in biological systems (less than 1 second in circulating blood)1. NO may be ...

Medicine

Measurement of the Potential Rates of Dissimilatory Nitrate Reduction to Ammonium Based on 14NH4+/15NH4+ Analyses via Sequential Conversion to N2O

The importance of understanding the fate of nitrate (NO3&#8722;), which is the dominant N species transferred from terrestrial to aquatic ecosystems, has been increasing because global nitrogen loads have dramatically increased following industrialization. Dissimilatory nitrate reduction to ammonium (DNRA) and denitrification are both microbial processes that use NO3&#8722; for respiration. Compared to denitrification, quantitative determinations of the DNRA activity have been carried out only to a limited extent. This has led to an insufficient understanding of the importance of DNRA in NO3&#8722; transformations and the regulating factors of this process. The objective of this paper is to provide a detailed procedure for the measurement of the potential DNRA rate in environmental samples. In brief, the potential DNRA rate can be calculated from the 15N-labeled ammonium (15NH4+) accumulation rate in 15NO3&#8722; added incubation. The determination of the 14NH4+ and 15NH4+ concentrations described in this paper is comprised of the following steps. First, the NH4+ in the sample is extracted and trapped on an acidified glass filter as ammonium salt. Second, the trapped ammonium is eluted and oxidized to NO3&#8722; via persulfate oxidation. Third, the NO3&#8722; is converted to N2O via an N2O reductase deficient denitrifier. Finally, the converted N2O is analyzed using a previously developed quadrupole gas chromatography&#8211;mass spectrometry system. We applied this method to salt marsh sediments and calculated their potential DNRA rates, demonstrating that the proposed procedures allow a simple and more rapid determination compared to previously described methods.

Measurement of the Potential Rates of Dissimilatory Nitrate Reduction to Ammonium Based on 14NH4+/15NH4+ Analyses via Sequential Conversion to N2O

A series of methods to determine the potential DNRA rate based on 14NH4+/15NH4+ analyses is provided in detail. NH4+ is converted into N2O via several steps and analyzed using quadrupole gas chromatography&#8211;mass spectrometry.

מדידה של שיעורי חנקה דיספילציה הפחתת אמוניום מבוסס על 14NH4+/15NH4+ ניתוחים באמצעות המרה רציפים N2O

The importance of understanding the fate of nitrate (NO3&#8722;), which is the dominant N species transferred from terrestrial to aquatic ecosystems, has ...

Novel Whole-tissue Quantitative Assay of Nitric Oxide Levels in Drosophila Neuroinflammatory Response

Neuroinflammation is a complex innate immune response vital to the healthy function of the central nervous system (CNS). Under normal conditions, an intricate network of inducers, detectors, and activators rapidly responds to neuron damage, infection or other immune infractions. This inflammation of immune cells is intimately associated with the pathology of neurodegenerative disorders, such as Parkinson&#39;s disease (PD), Alzheimer&#39;s disease and ALS. Under compromised disease states, chronic inflammation, intended to minimize neuron damage, may lead to an over-excitation of the immune cells, ultimately resulting in the exacerbation of disease progression. For example, loss of dopaminergic neurons in the midbrain, a hallmark of PD, is accelerated by the excessive activation of the inflammatory response. Though the cause of PD is largely unknown, exposure to environmental toxins has been implicated in the onset of sporadic cases. The herbicide paraquat, for example, has been shown to induce Parkinsonian-like pathology in several animal models, including Drosophila melanogaster. Here, we have used the conserved innate immune response in Drosophila to develop an assay capable of detecting varying levels of nitric oxide, a cell-signaling molecule critical to the activation of the inflammatory response cascade and targeted neuron death. Using paraquat-induced neuronal damage, we assess the impact of these immune insults on neuroinflammatory stimulation through the use of a novel, quantitative assay. Whole brains are fully extracted from flies either exposed to neurotoxins or of genotypes that elevate susceptibility to neurodegeneration then incubated in cell-culture media. Then, using the principles of the Griess reagent reaction, we are able to detect minor changes in the secretion of nitric oxide into cell-culture media, essentially creating a primary live-tissue model in a simple procedure. The utility of this model is amplified by the robust genetic and molecular complexity of Drosophila melanogaster, and this assay can be modified to be applicable to other Drosophila tissues or even other small, whole-organism inflammation models.

Novel Whole-tissue Quantitative Assay of Nitric Oxide Levels in Drosophila Neuroinflammatory Response

Levels of the inflammatory cell-signaling molecule nitric oxide (NO) are commonly assayed using Griess reagent. In this protocol, we have created a modified Griess assay utilizing live Drosophila brain tissue in order to detect the secretion of NO in a simple, quantifiable and highly repeatable method.

Neuroinflammation is a complex innate immune response vital to the healthy function of the central nervous system (CNS). Under normal conditions, an ...

Immunology and Infection

Encapsulating Cytochrome c in Silica Aerogel Nanoarchitectures without Metal Nanoparticles while Retaining Gas-phase Bioactivity

Applications such as sensors, batteries, and fuel cells have been improved through the use of highly porous aerogels when functional compounds are encapsulated within the aerogels. However, few reports on encapsulating proteins within sol&#8211;gels that are processed to form aerogels exist. A procedure for encapsulating cytochrome c (cyt. c) in silica (SiO2) sol-gels that are supercritically processed to form bioaerogels with gas-phase activity for nitric oxide (NO) is presented. Cyt. c is added to a mixed silica sol under controlled protein concentration and buffer strength conditions. The sol mixture is then gelled and the liquid filling the gel pores is replaced through a series of solvent exchanges with liquid carbon dioxide. The carbon dioxide is brought to its critical point and vented off to form dry aerogels with cyt. c encapsulated inside. These bioaerogels are characterized with UV-visible spectroscopy and circular dichroism spectroscopy and can be used to detect the presence of gas-phase nitric oxide. The success of this procedure depends on regulating the cyt. c concentration and the buffer concentration and does not require other components such as metal nanoparticles. It may be possible to encapsulate other proteins using a similar approach making this procedure important for potential future bioanalytical device development.

Encapsulating Cytochrome c in Silica Aerogel Nanoarchitectures without Metal Nanoparticles while Retaining Gas-phase Bioactivity

This procedure describes how to encapsulate cytochrome c (cyt. c) in silica (SiO2) sol-gels, process these gels to form bioaerogels, and use these bioaerogels to rapidly recognize nitric oxide (NO) through a gas-phase reaction. This type of protocol may aid in the future development of biosensors or other bioanalytical devices.

encapsulating ציטוכרום<em&gt; ג</em&gt; ב סיליקה אירוג&#39;ל Nanoarchitectures ללא מתכת חלקיקים תוך שמירת גז שלב פעילות ביולוגית

Applications such as sensors, batteries, and fuel cells have been improved through the use of highly porous aerogels when functional compounds are ...

Bioengineering

A Novel Inhalation Mask System to Deliver High Concentrations of Nitric Oxide Gas in Spontaneously Breathing Subjects

Nitric Oxide (NO) is administered as gas for inhalation to induce selective pulmonary vasodilation. It is a safe therapy, with few potential risks even if administered at high concentration. Inhaled NO gas is routinely used to increase systemic oxygenation in different disease conditions. The administration of high concentrations of NO also exerts a virucidal effect in vitro. Owing to its favorable pharmacodynamic and safety profiles, the familiarity in its use by critical care providers, and the potential for a direct virucidal effect, NO is clinically used in patients with coronavirus disease-2019 (COVID-19). Nevertheless, no device is currently available to easily administer inhaled NO at concentrations higher than 80 parts per million (ppm) at various inspired oxygen fractions, without the need for dedicated, heavy, and costly equipment. The development of a reliable, safe, inexpensive, lightweight, and ventilator-free solution is crucial, particularly for the early treatment of non-intubated patients outside of the intensive care unit (ICU) and in a limited-resource scenario. To overcome such a barrier, a simple system for the non-invasive NO gas administration up to 250 ppm was developed using standard consumables and a scavenging chamber. The method has been proven safe and reliable in delivering a specified NO concentration while limiting nitrogen dioxide levels. This paper aims to provide clinicians and researchers with the necessary information on how to assemble or adapt such a system for research purposes or clinical use in COVID-19 or other diseases in which NO administration might be beneficial.

This simple and highly adaptable system device for the inhalation of high-concentration nitric oxide (NO) gas does not require mechanical ventilators, positive pressure, or high gas flows. Standard medical consumables and a snug-fitting mask are used to safely deliver NO gas to spontaneously breathing subjects.

מערכת מסכת שאיפה חדשנית כדי לספק ריכוזים גבוהים של גז תחמוצת החנקן בנבדקים נושמים באופן ספונטני

Nitric Oxide (NO) is administered as gas for inhalation to induce selective pulmonary vasodilation. It is a safe therapy, with few potential risks even if ...

Chemiluminescence-based Assays for Detection of Nitric Oxide and its Derivatives from Autoxidation and Nitrosated Compounds

Nitric oxide (NO) activity in vivo is the combined results of its direct effects, the action of its derivatives generated from NO autoxidation, and the effects of nitrosated compounds. Measuring NO metabolites is essential to studying NO activity both at vascular levels and in other tissues, especially in the experimental settings where exogenous NO is administered. Ozone-based chemiluminescence assays allow precise measurements of NO and NO metabolites in both fluids (including plasma, tissue homogenates, cell cultures) and gas mixtures (e.g., exhaled breath). NO reacts with ozone to generate nitrogen dioxide in an excited state. The consequent light emission allows photodetection and the generation of an electric signal reflecting the NO content of the sample. Aliquots from the same sample can be used to measure specific NO metabolites, such as nitrate, nitrite, S-nitrosothiols, and iron-nitrosyl complexes. In addition, NO consumed by cell-free hemoglobin is also quantified with chemiluminescence analysis. An illustration of all these techniques is provided.

Here, we present protocols for detecting nitric oxide and its biologically relevant derivatives using chemiluminescence-based assays with high sensitivity.

מבחנים מבוססי כימילומינסנציה לזיהוי תחמוצת החנקן ונגזרותיה מאוטוקידציה ותרכובות ניטרוסטיות

Nitric oxide (NO) activity in vivo is the combined results of its direct effects, the action of its derivatives generated from NO autoxidation, and the ...

Measuring Nitrite and Nitrate, Metabolites in the Nitric Oxide Pathway, in Biological Materials using the Chemiluminescence Method

Nitric oxide (NO) is one of the main regulator molecules in vascular homeostasis and also a neurotransmitter. Enzymatically produced NO is oxidized into nitrite and nitrate by interactions with various oxy-heme proteins and other still not well known pathways. The reverse process, reduction of nitrite and nitrate into NO had been discovered in mammals in the last decade and it is gaining attention as one of the possible pathways to either prevent or ease a whole range of cardiovascular, metabolic and muscular disorders that are thought to be associated with decreased levels of NO. It is therefore important to estimate the amount of NO and its metabolites in different body compartments &#8212; blood, body fluids and the various tissues. Blood, due to its easy accessibility, is the preferred compartment used for estimation of NO metabolites. Due to its short lifetime (few milliseconds) and low sub-nanomolar concentration, direct reliable measurements of blood NO in vivo present great technical difficulties. Thus NO availability is usually estimated based on the amount of its oxidation products, nitrite and nitrate. These two metabolites are always measured separately. There are several well established methods to determine their concentrations in biological fluids and tissues. Here we present a protocol for chemiluminescence method (CL), based on spectrophotometrical detection of NO after nitrite or nitrate reduction by tri-iodide or vanadium(III) chloride solutions, respectively. The sensitivity for nitrite and nitrate detection is in low nanomolar range, which sets CL as the most sensitive method currently available to determine changes in NO metabolic pathways. We explain in detail how to prepare samples from biological fluids and tissues in order to preserve original amounts of nitrite and nitrate present at the time of collection and how to determine their respective amounts in samples. Limitations of the CL technique are also explained.

Nitric oxide (NO) is an important signaling molecule in vascular homeostasis. NO production in vivo is too low for direct measurement. Chemiluminescence provides useful insight into NO cycle via measuring its precursors and oxidation products, nitrite and nitrate. Nitrite / nitrate determination in body tissues and fluids is explained.

מדידת הניטריט ו חנקתי, מטבוליטים במסלול תחמוצת החנקן, חומרים ביולוגיים באמצעות שיטה chemiluminescence

Nitric oxide (NO) is one of the main regulator molecules in vascular homeostasis and also a neurotransmitter. Enzymatically produced NO is oxidized into ...

תהליכי מעבדה ההדברה להדברה בגז תחמוצת החנקן

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

שיטה כללית לגילוי Nitrosamide היווצרות בחילוף החומרים במבחנה של Nitrosamines מאת ציטוכרום P450s

הערכת פחמן אורגני יציב בקרקע שימוש סדרתית פומיגציה ונהלי דגירה

אוטומטיות, מערכת איסוף ניידת ברזולוציה גבוהה עבור ניתוח איזוטופי החנקן של NO

טכניקות אנליטיות עבור assaying bioactivity תחמוצת החנקן

מדידה של שיעורי חנקה דיספילציה הפחתת אמוניום מבוסס ^{על 14}NH₄⁺/¹⁵NH₄⁺ ניתוחים באמצעות המרה רציפים N₂O

Novel Whole-tissue Quantitative Assay of Nitric Oxide Levels in Drosophila Neuroinflammatory Response

encapsulating ציטוכרום

מערכת מסכת שאיפה חדשנית כדי לספק ריכוזים גבוהים של גז תחמוצת החנקן בנבדקים נושמים באופן ספונטני

מבחנים מבוססי כימילומינסנציה לזיהוי תחמוצת החנקן ונגזרותיה מאוטוקידציה ותרכובות ניטרוסטיות

מדידת הניטריט ו חנקתי, מטבוליטים במסלול תחמוצת החנקן, חומרים ביולוגיים באמצעות שיטה chemiluminescence