La recherche à long terme et l’utilisation d’un agent de biocontrôle dépendent de la disponibilité de techniques d’élevage efficaces et économiques, et ce protocole s’est avéré efficace pour l’élevage de ce parasitoïde. Il existe actuellement un énorme intérêt pour l’élevage de ce parasitoïde pour la recherche ou la libération sur le terrain, et le protocole bénéficiera à la recherche et à l’utilisation futures à long terme de cet agent de biocontrôle prometteur. Les premiers utilisateurs peuvent avoir besoin de comprendre une certaine biologie de base des insectes impliqués en lisant les références pertinentes fournies dans l’article et certaines pratiques des méthodes.
Pour faire le régime de l’hôte, préparez d’abord la partie liquide du régime comme décrit dans le manuscrit. Ensuite, ajoutez 25 à 30 grammes de purée de bleuets dans une fiole vide de 250 millilitres. Ensuite, versez le liquide dans la fiole avec le liquide recouvrant simplement le dessus de la purée de bleuets.
Ensuite, pour élever l’hôte Drosophila suzuki, coupez d’abord un morceau d’essuie-tout absorbant et tordez-le au centre. Ensuite, placez la section centrale tordue de l’essuie-tout dans la fiole de régime. Pour retenir l’humidité, utilisez de l’eau distillée pour mouiller l’essuie-tout et le régime alimentaire.
Ensuite, pour transférer des mouches adultes sexuellement matures, retirez soigneusement le bouchon d’une fiole de colonie de mouches et inversez-la dans la fiole de régime. Après une semaine de cette exposition, maintenez les mouches dans une chambre environnementale pendant trois semaines pour l’émergence des mouches. Pour exposer la larve hôte à des parasitoïdes, retirez d’abord les mouches adultes et l’essuie-tout de la fiole, en laissant les œufs et les larves de mouches.
Pour servir de substrat de nymphose pour les larves, pliez une nouvelle serviette en papier absorbante et insérez-la dans la fiole. Ensuite, aspirez six paires femelles et mâles du parasitoïde G3 Ganaspis brasiliensis dans la fiole et tracez une fine couche de miel au fond du bouchon de mousse. Pour collecter et stocker les parasitoïdes, retirez les adultes après cinq jours.
Ensuite, conservez la fiole dans la chambre environnementale pendant 35 jours dans les conditions mentionnées précédemment. Avec l’émergence de guêpes adultes, aspirez-les trois fois par semaine. Pour tenir les guêpes, placez d’abord une serviette en papier humidifiée mais non saturée d’eau distillée au fond d’un flacon de drosophile de 2,5 x 9,5 centimètres carrés.
Ensuite, transférez environ 60 guêpes dans le flacon et marquez la date d’émergence. Conservez le flacon dans la chambre environnementale. Deux fois par semaine, stroyez une fine couche de miel sur le fond du bouchon en mousse des flacons.
Tout d’abord, organisez l’élevage à grande échelle de Drosophila suzuki en plaçant 1 500 à 2 000 mouches adultes sexuellement matures à un rapport de masculinité de 50:50 dans une grande cage tricotée recouverte de mailles. Ensuite, placez une assiette avec du coton imbibé d’eau et quatre à six boîtes de Petri avec un milieu standard de drosophile dans la cage. Deux fois par semaine, remplacez les boîtes de Petri exposées par des boîtes fraîches.
Placez chaque boîte de Petri infestée sans le couvercle dans un gobelet en plastique de 800 millilitres et couvrez le gobelet d’une maille fine. Ensuite, incubez les tasses à 23 degrés Celsius et 75% d’humidité relative pendant 12 à 15 jours. Après l’incubation, transférer La drosophile suzuki adulte nouvellement éclose dans une cage d’élevage.
Ensuite, commencez à préparer les larves hôtes en rinçant les bleuets dans de l’eau froide pendant une minute et faites tremper les fruits dans une bassine remplie d’une solution d’eau de Javel, diluée à 5% pendant trois minutes. Ensuite, remplissez les boîtes de Petri de neuf centimètres avec les bleuets lavés. En fin d’après-midi, mettez les boîtes de Petri dans la cage d’élevage et laissez-les toute la nuit.
Le lendemain matin, tapotez doucement sur les boîtes de Pétri pour déloger les mouches des fruits et retirer les fruits de la cage d’élevage. Pendant ce temps, préparez une cage de parasitisme et une cage d’émergence de guêpes pour le parasitoïde G1 Ganaspis brasiliensis. Les deux cages doivent avoir une fine ficelle sous le plafond pour suspendre une ou plusieurs mangeoires.
Dans chaque cage, suspendez un flacon de drosophile contenant de l’eau et scellez avec un bouchon d’acétate de cellulose à l’envers du plafond tous les cinq à sept jours, selon l’humidité relative. Immédiatement après avoir sorti les bleuets infestés de la cage de Drosophila suzuki, mettez-les dans la cage de parasitisme avec 1 500 à 2 000 guêpes Ganaspis brasiliensis pendant deux à trois jours. Ensuite, collectez les fruits dans un gobelet en plastique de 800 millilitres avec du papier absorbant au fond.
Incuber la coupe ouverte dans la cage d’émergence ou d’éclosion à 21 degrés Celsius et 65% d’humidité relative pendant au moins 28 jours. Au cours des deuxième et troisième semaines d’incubation, vérifiez chaque semaine l’eclosion précoce de l’hôte dans la cage. Pour faciliter la collecte successive de parasitoïdes, retirez les mouches adultes.
À la fin de la quatrième semaine d’incubation, fournissez une mangeoire et une source d’eau à la cage. Recueillir environ 10 à 15% des guêpes adultes et les transférer dans la cage de parasitisme pour remplacer les guêpes âgées et improductives. Parmi les guêpes restantes de la cage d’éclosion, stockez jusqu’à 700 adultes à un rapport de masculinité de 50:50 avec un gobelet en plastique de 800 millilitres contenant un tube de deux millilitres rempli d’eau et scellé avec un rouleau de coton dentaire au fond de la tasse.
Conservez la tasse avec un état d’émergence marqué dans une chambre environnementale jusqu’à un mois. Pour l’expédition de parasitoïdes, placez environ 200 adultes dans un tube conique de 50 millilitres. Ensuite, mettez tous les tubes dans un conteneur d’expédition isolant avec des sacs de glace.
Ce protocole a permis de réussir l’élevage à petite échelle de G3 Ganaspis brasiliensis, un agent parasitoïde, contre le ravageur agricole Drosophila suzuki en laboratoire. La production de progéniture n’a pas été affectée par les différences de densité parasitoïde et de temps d’exposition. La génération à grande échelle de G1 Ganaspis brasiliensis a également pu être réalisée, la production commençant cinq semaines après l’exposition initiale à l’hôte Drosophila suzuki.
De la semaine 8 à la semaine 22, la production de parasitoïdes est devenue proportionnelle à la quantité de fruits qui y sont exposés. Il est extrêmement important de maintenir une température d’élevage appropriée, de contrôler l’humidité et de toujours fournir de la nourriture aux insectes adultes. Les méthodes pourraient être encore améliorées en optimisant les densités d’élevage de l’hôte et du parasitoïde afin de maximiser la reproduction des guêpes et en explorant la possibilité d’élever ce parasitoïde sur d’autres hôtes.
