La maladie neurodégénérative se manifeste souvent par des symptômes de comportement dévastateurs, tels que des troubles cognitifs, des dysfonctionnements de l’humeur, ou même des dysfonctionnements moteurs. Cette étude permet d’évaluer avec précision un phénotype comportemental avec un haut niveau de répétabilité. Nous concevons une batterie complète qui peut être utilisée à plusieurs reprises dans l’analyse du comportement chez la souris.
Ce test asses fonctions motrices, l’interaction sociale, la fonction émotionnelle, et la fonction cognitive. En organisant l’ordre et l’intervalle des tests dans cette batterie, nous avons augmenté l’efficacité des tests et diminué l’interférence entre les tests et le stress sur les souris de manipulation fréquente. Pour commencer, organisez le test comportemental dans l’ordre décrit dans le protocole texte.
Effectuez l’essai en plein champ dans une arène en plastique non transparente, blanche. Commencez l’enregistrement de la caméra, et mettez doucement la souris à côté du milieu d’un mur de l’arène, face au mur. Enregistrez le comportement de la souris pendant 10 minutes et retournez-la dans sa cage d’origine.
Ensuite, divisez l’arène en quatre par quatre carrés sur l’écran de l’ordinateur. Comptez le nombre de fois où la souris traverse les lignes de grille dans l’arène pour évaluer la fonction locomotrice. Pour évaluer l’anxiété, mesurez le temps que la souris passe dans la zone centrale de l’arène.
Effectuez le test surélevé plus labyrinthe le même jour. Une fois que toutes les souris ont terminé l’essai en plein champ, placez la souris à la jonction des bras ouverts et fermés. Enregistrez le comportement de la souris pendant cinq minutes avant de retourner la souris dans sa cage d’origine.
Après deux jours consécutifs d’essai en plein champ, configurez le nouveau test de reconnaissance d’objets selon le protocole texte. Démarrez la caméra, et placez la souris dans l’arène, face au milieu du mur, pour familiariser la souris. Enregistrez le comportement de la souris pendant 10 minutes.
Ensuite, retournez la souris dans sa cage d’origine. 24 heures après la familiarisation, répétez le test avec un nouvel objet. Mesurez le temps pendant que la souris interagit avec un nouvel objet et un objet familier séparément.
Calculez ensuite la mémoire de la souris comme la préférence à l’objet nouveau. Pour le test d’interaction sociale, utilisez une arène en plein champ avec deux chambres transparentes avec des trous sur la surface. Placez la souris en question dans l’arène pendant une période d’exploration d’objets de trois minutes pour habituer la souris dans les chambres.
Retournez ensuite la souris sujette dans sa cage d’origine et nettoyez l’arène. Mettez une nouvelle souris dans l’une des chambres. Puis réintroduire la souris sujet à l’arène et enregistrer pendant trois minutes.
Lors de l’examen de la vidéo, évaluer l’interaction sociale en mesurant le rapport de temps que la souris objet passe à interagir avec la nouvelle chambre de souris ou la chambre vide. Effectuez ensuite le test rotarod d’accélération. Dans chaque essai, placez la souris sur la tige statique face au mur opposé à la machine.
Habituez les souris au rotarod en l’entraînant pendant trois jours chez les souris naïves avant l’apparition de symptômes possibles, de sorte que la souris apprend également l’échelle. Arrêtez l’appareil lorsque la souris tombe et enregistrez le temps que la souris a passé sur la tige. Répétez ce processus deux fois de plus avant de retourner la souris dans sa cage d’origine.
Ensuite, mettez le labyrinthe d’eau au centre d’une pièce comportementale, et marquez la position du labyrinthe pour s’assurer que la position du labyrinthe d’eau reste constante. Divisez le labyrinthe en quatre quadrants imaginaires. Accrochez des repères visuels au centre de chaque quadrant.
Placez ensuite une plate-forme au centre du quatrième quadrant et marquez son emplacement. Remplissez le labyrinthe d’eau, de couleur blanche avec du lait en poudre, jusqu’à ce que le niveau d’eau soit un centimètre plus élevé que la plate-forme. Au début de chaque essai d’entraînement, commencez l’enregistrement vidéo et mettez doucement la souris dans le labyrinthe.
Restez hors de vue de la souris. Retournez la souris dans sa cage lorsque la souris ne peut pas localiser la plate-forme dans les 60 secondes ou si la souris localise la plate-forme dans les 60 secondes et reste dessus pendant 10 secondes. Une fois le test terminé, arrêtez la vidéo et mettez la souris dans sa cage sous une lumière infrarouge.
Enfin effectuer la phase de sonde de l’essai labyrinthe d’eau comme décrit précédemment, sans la plate-forme. Ensuite, préparez le réservoir cylindrique pour l’essai de natation forcée. Démarrez l’enregistrement vidéo et mettez doucement la souris dans l’eau au centre du réservoir.
Enregistrez la souris pendant six minutes avant de remettre la souris dans sa cage d’origine. Passez en revue la vidéo du test de natation forcée. Mesurez le temps d’immobilité dans les cinq dernières minutes de la vidéo.
Ce protocole était d’étudier les changements comportementaux chez la souris après l’exposition respiratoire aux nanoparticules de silice. Les résultats de l’essai en plein champ et de l’accélération de l’essai rotarod ont démontré que les nanoparticules de silice n’affectaient pas la fonction locomotrice ou motrice chez la souris. L’activité d’interaction sociale a été affectée après une exposition d’un mois aux nanoparticules de silice, cependant l’essai en plein champ, l’essai élevé plus de labyrinthe, et l’essai forcé de natation n’ont pas indiqué n’importe quelle inquiétude ou dépression après un mois d’exposition.
Une exposition de deux mois aux nanoparticules de silice a eu comme conséquence l’inquiétude, comme démontré par les résultats de l’essai élevé plus de labyrinthe. L’affaiblissement cognitif a été également détecté dans l’essai de labyrinthe d’eau après deux mois d’exposition. Cette batterie est conçue pour l’analyse complète du comportement en neurodégénérescence dans la souche de souris C57.
Il convient le mieux aux études longitudinales liées à la neurodégénérescence en toxicité de la neurotoxine ou des facteurs de risque potentiels, ou au développement de médicaments, qui comporte souvent une administration à long terme et des tests répétés.
