Este método presenta la producción automatizada de la tomografía por emisión de positrones o PET trazador de galio-68 FAPI-46 en el sintetizador de medicamentos iPHASE. El galio-68 FAPI-46 es un nuevo trazador de imágenes PET dirigido a la proteína de activación de fibroblastos, o FAP. La FAP está sobreexpresada por los fibroblastos asociados al cáncer en el microambiente de la mayoría de los tumores sólidos.
Se ha demostrado que el galio-68 FAPI-46 es un trazador PET muy prometedor con una ventaja diagnóstica sobre el estándar de oro flúor-18 FDG en múltiples cánceres. Aunque el etiquetado manual por radio del galio-68 FAPI-46 se ha informado anteriormente, el uso de un sintetizador automatizado cumple mejor con las GMP y representa un menor riesgo de radiación para el personal. La síntesis automatizada de galio-68 FAPI-46 se ha descrito en diferentes sintetizadores comerciales utilizando galio-68 producido por generador y ciclotrón.
El producto se sintetizó con un rendimiento curado de 89.8%decay. El producto final cumplió con todas las especificaciones de control de calidad recomendadas y fue estable durante tres horas después de la síntesis. Anticipamos que cualquier sitio que fabrique galio-68 PSMA-11 o galio-68 en el sintetizador MultiSyn debe estar completamente equipado para producir galio-68 FAPI-46 utilizando este protocolo.
Para preparar el sintetizador MS, encienda el aire comprimido de celda caliente, el suministro de gas nitrógeno, la ventilación, la luz y la alimentación de la computadora portátil y el controlador lógico programable. Compruebe el nivel de la botella de residuos del módulo y sustitúyala por una botella vacía si está llena en tres cuartas partes. Después de iniciar sesión en el software del sintetizador, presione descargar receta.
Seleccione el archivo de secuencia de Excel para la producción de galio-68 FAPI-46 y presione abrir. Haga clic en Aceptar después de que la secuencia se haya descargado correctamente. Presione inicio, ingrese el número de lote, el número de lote del kit de reactivos y cualquier comentario en la ventana emergente antes de presionar OK.
Siguiendo el mensaje de paso en la interfaz de usuario, retire el kit de hardware antiguo y presione siguiente. A continuación, según las instrucciones de la interfaz de usuario, retire la jeringa de elución del generador del sintetizador tirando del reposapulgares de la ranura del controlador de la jeringa y desenroscando la jeringa de la línea de entrada del generador. Presione siguiente en la interfaz de usuario.
Para comenzar, vierta aproximadamente dos mililitros de agua en la tapa de un tubo de 50 mililitros. Extraiga un mililitro de agua en una jeringa de cinco mililitros etiquetada como jeringa A y táptela con una aguja. Pipetear 400 microlitros de agua.
Agréguelo al vial de siete miligramos de ácido ascórbico etiquetado como vial A y agite suavemente para disolver. Abra el vial de tampón de acetato de sodio de 0,25 molares provisto y el vial de vidrio FAPI-46 de 50 microgramos. Con una pipeta, transfiera 0,9 mililitros del tampón al vial de vidrio etiquetado con FAPI-46 B y mezcle suavemente.
Extraiga el contenido de los viales A y B en la jeringa A y mezcle suavemente. Etiquete la jeringa de cinco mililitros provista en el juego auxiliar como jeringa B. Con la jeringa B, extraiga cinco mililitros de ácido clorhídrico 0.1 molar de la bolsa de ácido clorhídrico 0.1 molar y táptela con el pin dispensador provisto. Etiquete la jeringa de tres mililitros provista en el kit auxiliar como jeringa C. Del vial de solución de cloruro de sodio acidificado de cinco molares en la jeringa C, pipetee un mililitro de la solución en la jeringa C y tábrala con el pin dispensador provisto.
Extraiga un mililitro de solución salina al 0,9% en una jeringa de cinco mililitros etiquetada como D y agréguela al vial C.To ensamble un casete estéril de galio-68 dedicado, desenvuelva el sobre del casete y verifique si hay algún daño. Apriete cada conexión de señuelo y gire y alinee cada llave de paso en el casete para asegurarse de que no estén atascados y encajen en el módulo. Retire todas las tapas de las espigas.
Para acondicionar el cartucho SPE de prepurificación de intercambio catiónico fuerte, retire el cartucho colocado en el colector tres válvula siete del casete. Coloque la jeringa que contiene dos mililitros de ácido clorhídrico de tres molares provisto en el kit de reactivos en el cartucho SPE y eluya lentamente a través del cartucho gota a gota en una botella de vidrio de desecho dedicada. Retire la jeringa, extraiga cinco mililitros de aire y enjuague el cartucho SPE con ella.
Conecte la jeringa que contiene cinco mililitros de agua provista en el kit de reactivos al cartucho SPE y eluya lentamente gota a gota en la botella de residuos de vidrio. Enjuague el cartucho con aire como se demostró anteriormente. Presione siguiente en la interfaz de usuario.
Como se muestra en la interfaz de usuario, proceda a ensamblar e instalar el nuevo casete sin ningún reactivo siguiendo las conexiones adecuadas. Primero, conecte la jeringa de 10 mililitros del conjunto auxiliar al colector de dos válvulas seis. Instale los cuatro colectores y bloquee el casete con las cerraduras magnéticas del sintetizador.
Coloque el reactor en el horno. Conecte los tubos a los puertos G1, W2, W1, R y G2. Conecte el tubo del lado derecho del colector de una válvula tres al cartucho de intercambio catiónico en el colector de tres válvulas siete.
Instale un cartucho de purificación posterior SPE en el colector dos válvulas cuatro. Finalmente, presione siguiente en la interfaz de usuario. Para comenzar, retire las tapas de los viales de etanol, solución salina y agua del kit de reactivos y frote cada tabique con una toallita con alcohol.
Cuando el sintetizador se lo solicite, instale los viales respectivos en las posiciones M4 válvula 10, M4 válvula 11 y M4 válvula 12 antes de hacer clic en siguiente en la interfaz de usuario. Retire la aguja de la jeringa A y extraiga el émbolo a cinco mililitros. Después de desconectar la línea al puerto central del reactor, transfiera el contenido de la jeringa A al vial del reactor a través del puerto central del reactor.
Vuelva a conectar la línea al puerto central del reactor y haga clic en siguiente en la interfaz de usuario. Instale las líneas de salida del generador en el casete en la posición M1 de la válvula dos y haga clic en siguiente. Después de retirar la aguja dispensadora de la jeringa C, instálela en la posición M1 de la válvula tres y haga clic en siguiente.
Retire la aguja dispensadora de la jeringa B.Conecte el bloqueo Luer de la jeringa B en el accesorio de la línea de entrada del generador y empuje la jeringa B para que el resto del pulgar del émbolo se deslice en la ranura del controlador de la jeringa antes de hacer clic en siguiente. Para preparar el vial del producto final, en un armario de seguridad biológica de clase dos o equivalente, coloque un vial estéril de 25 mililitros etiquetado en una olla de tungsteno o adecuadamente protegida. Después de frotar el tabique del vial con una toallita con alcohol, coloque una tapa en la olla e inserte una aguja de ventilación filtrada.
Conecte la salida de un filtro ventilado de PVDF esterilizante de 0,22 micras de baja unión a proteínas a una aguja hipodérmica estéril de calibre 20. Etiquete el filtro con el número de lote del producto e inserte la aguja en el vial de producto final de 25 mililitros ventilado. Extraer el contenido del vial C en la jeringa vacía D y añadir cuatro mililitros de aire.
Conecte la jeringa D a la entrada del filtro ventilado de 0,22 micras y empuje el contenido de la jeringa a través del filtro y la aguja hasta el vial del producto final. Enjuague el filtro dos veces con cinco mililitros de aire antes de retirar la jeringa del filtro ventilado. Después de transferir el recipiente que contiene el vial del producto final a la celda caliente, conecte el tubo final de la válvula M2 de la posición cinco al filtro del vial del producto.
Haga clic en siguiente y espere a que el sintetizador realice los pasos preliminares. Cuando aparezca el mensaje Listo para eluir el generador de Ga-68", presione siguiente en la interfaz de usuario. Una vez que comience la síntesis automatizada, monitoree el etiquetado de radio en tiempo real en la pestaña esquemática observando la actividad de los tres detectores de actividad de radio estratégicamente ubicados, el cartucho de prepurificación, el reactor y el cartucho de pospurificación.
Alternativamente, consulte la pestaña de tendencias que muestra el perfil de actividad de cada detector durante la síntesis. Cuando aparezca el mensaje "Síntesis completa", retire el filtro ventilado esterilizante y la aguja de ventilación filtrada del vial del producto final y recupere el recipiente de tungsteno de la celda caliente.
