Evaluación hemodinámica invasiva para el sistema ventricular derecho y hipertensión arterial pulmonar inducida por hipoxia en ratones

Este protocolo es una evaluación hemodinámica basada en cirugía torácica abierta y es útil para la evaluación correcta de la presión de la arteria ventricular y pulmonar en animales pequeños como ratones. La ventaja de este procedimiento es que puede generar parámetros VP y PAP al mismo tiempo. Por lo tanto, es preferible para las evaluaciones de los modelos de HAP.

Comience por configurar el equipo para la cirugía. Sumerja el catéter del transductor de presión en 0,9% de solución salina a temperatura ambiente durante al menos 30 minutos antes del experimento hemodinámico. A continuación, conecte el catéter a un sistema de volumen de presión.

Calibre el transductor de presión girando el mando de calibración a cero y 25 milímetros de mercurio para enviar una señal de presión de verificación al software de adquisición de datos y, a continuación, configure el ajuste de calibración. Gire la perilla al transductor y ajuste la válvula de equilibrio a la línea de base cero. Configure un microscopio estéreo estándar, una mesa quirúrgica para animales pequeños con control de temperatura y un sistema de iluminación de luz para la microcirugía.

Una vez que el ratón esté correctamente anestesiado, retire el piel del pecho y el cuello con una afeitadora y una loción de depilación. Fije el ratón en la posición supina en la mesa quirúrgica con temperatura controlada. Después de asegurarse de que la anestesia está en efecto, haga una incisión de línea media en la piel del cuello.

Disecciona el músculo esquelético usando fórceps curvos y exponer la tráquea. Realizar intubación a través de la boca con un catéter de vaina intravenosa de calibre 22, confirmando que el tubo está en la tráquea con fórceps. Conecte el tubo a un respirador de animales pequeños y fíjelo para la ventilación con cinta adhesiva.

Luego, haz una incisión de línea media en la piel del pecho y disecciona cuidadosamente el músculo torácico usando una herramienta de cautería. Corte el esternón usando tijeras a través del medio, y exponga la cavidad torácica. Asegúrese de evitar cualquier sangrado con la herramienta cautey.

Exponga el ventrículo derecho con retractores, luego inserte el catéter de transductor de presión empapado en solución salina a través de un pequeño túnel creado con una aguja de calibre 25 en el ventrículo derecho para medir la presión ventricular derecha, o RVP. Sostenga el cable del catéter y cruce la válvula pulmonar de manera coaxial con la arteria pulmonar. Observe la forma de onda de presión y obtenga una presión arterial pulmonar estable o una señal PAP.

A continuación, registre los datos hemodinámicos utilizando el software de adquisición de datos. Retire cuidadosamente el catéter del sistema cardíaco derecho y colóquelo en una jeringa de un mililitro que contenga 1%solución enzimática digestiva. Este protocolo se utilizó con éxito para obtener formas de onda RVP y PAP en ratones mediante la inserción de un catéter de transductor de presión en el ventrículo derecho y la arteria pulmonar.

Con el fin de evitar la generación de datos artificiales, se excluyeron segmentos con ruido del análisis de datos y se realizaron correcciones si el nivel cero del catéter se había desviado. RvP y PAP se midieron en ratones con hipoxia crónica inducida, y los resultados se compararon con los obtenidos de un grupo de control. Pap sistólico, PAP diastólico, PAP medio y presión sistólica ventricular derecha aumentaron significativamente en el grupo de hipoxia crónica.

Lo más importante a recordar es insertar el catéter del transductor de presión en el ventrículo derecho cuidadosamente, asegurándose de evitar daños en el catéter y confirmar que la forma de onda RVP lisa aparece en la pantalla.