Dieses Protokoll ermöglicht es Anfängern, qualitativ hochwertige Nieren-, Herz- und Leberdaten zu erhalten. Die integrierte robotergestützte Ultraschalluntersuchung ist ebenfalls von Bedeutung, da keine Tiere oder die akustischen Sonden neu positioniert werden müssen. Die Hauptvorteile dieser Technik sind sowohl die Geschwindigkeit als auch die Benutzerfreundlichkeit des Instruments.
Man kann leicht qualitativ hochwertige Bilder von 20 bis 30 Mäusen in einer Stunde erhalten. Wir würden erwarten, dass ein unerfahrener Benutzer Schwierigkeiten hat, das Tier richtig zu positionieren. Unser Rat wäre, eine große ROI-Box zu verwenden, um sicherzustellen, dass die gesamte Niere abgebildet wird.
Beginnen Sie mit einem elektrischen Rasierer, um den gewünschten Hautbereich für Ultraschall- oder US-Messungen zu rasieren. Tragen Sie die Enthaarungscreme mit einem Applikator mit Baumwollspitze auf die rasierte Haut des Tieres auf. Wischen Sie die Creme nach 30 bis 60 Sekunden mit einem trockenen Papiertuch ab.
Wischen Sie die Rückstände der Enthaarungscreme mit mit Wasser angefeuchteten Mullbinden ab und stellen Sie sicher, dass die Haarentfernung abgeschlossen ist, bevor Sie mit den Scans beginnen. Schalten Sie die US-Maschine und die Temperaturregelung über der US-Plattform ein. Schalten Sie die entsprechenden Anästhesieventile für die entsprechenden US-Buchten ein.
Für Herzmessungen stellen Sie das Tier in eine Bauchlage und neigen Sie es etwa 30 Grad nach rechts. Für Nierenmessungen stellen Sie das Tier in eine gerade und rückende Position. Drücken Sie den Körper des Tieres vorsichtig ab, um die Lufteinschlüsse zwischen dem Tier und der Membran zu minimieren.
Wählen Sie in der US-Imaging-Software DIE Option US-Erfassung aus, und lassen Sie das Gerät initialisieren. Um mit der Nierenbildgebung im B-Modus zu beginnen, geben Sie im entsprechenden Dialogfeld einen Namen für die Studie ein. Geben Sie dann die Tier-ID in das entsprechende Dialogfeld ein.
Klicken Sie auf die Registerkarte 3D, um das 3D-Scannen zu initialisieren. Bewegen Sie mit dem Live-Kamera-Feed die Region of Interest oder ROI-Box, um die Nieren zu enthalten. Wählen Sie je nach Gewünschtem Bildtyp Linear Array oder Wobbler aus, um den Aufnehmer auszuwählen.
Wählen Sie zwischen Fast Scan oder Optimized für einen der beiden Messumformer. Klicken Sie auf Live View, um ein Livebild des gewünschten Betrachtungsbereichs zu sehen. Um den Wandler zu bewegen, klicken Sie auf die kreisförmige Schaltfläche Gehe zu und dann auf den Bereich der Maus, der abgebildet werden soll.
Verwenden Sie die Richtungspfeile mit vorgegebenen Schrittweiten, um die Position des Messumformers fein einzustellen. Klicken Sie auf den Pfeil an der Seite des Bedienfeldfensters, um die Taskleiste Einstellungen zu öffnen Klicken Sie auf Scanprotokoll, um die Scaneinstellungen zu öffnen. Bestimmen Sie die ideale Fokustiefe und passen Sie die Schieberegler für die Zeitverstärkungskompensation (TGC) an, um den Bildkontrast so zu ändern, dass die Nieren optimal angezeigt werden.
Nachdem Sie die gewünschten Einstellungen vorgenommen haben, klicken Sie erneut auf den Pfeil, um die Einstellungsleiste zu schließen. Drücken Sie die Taste Static erfassen, um den 3D-Scan zu starten. Sobald der Scanvorgang abgeschlossen ist, überprüfen Sie die Bildqualität, indem Sie auf den blauen Download-Pfeil klicken, um den Scan im Vorschaumodus zu öffnen.
Bewegen Sie sich durch die 3D-Frames des Scans, indem Sie den roten Pfeil oben im Fenster ziehen. Halten Sie zum Vergrößern oder Verkleinern die Strg-Taste gedrückt und verwenden Sie die Bildlauftaste der Maus. Klicken Sie auf die Registerkarte M-Modus, um die kardiale Bildgebung zu aktivieren.
Drücken Sie die Herz-Finder-Taste, um das Herz zu lokalisieren. Verwenden Sie die Heatmap, um die Position des Wandlers zu optimieren. Verwenden Sie die kreisförmige Schaltfläche Gehe zu, um den Wandler in den linken Ventrikel zu bewegen.
Gehen Sie zur Live-Ansicht und verwenden Sie die Pfeiltasten, um den Schallkopf zwischen den Papillarmuskeln zu platzieren, und die korrekte Platzierung des Schallkopfes kann in der Live-Ansicht überprüft werden. Sobald sich der Aufnehmer in der entsprechenden Position befindet, klicken Sie auf Sequenz erfassen. Wenn die Scans abgeschlossen sind, trocknen Sie die Tiere ab und bringen Sie sie in ihre Heimkäfige zurück.
Bewegen Sie die farbigen Linien, die verschiedene Ebenen darstellen, um die Niere in allen Ebenen zu finden. Klicken Sie auf Hinzufügen, um eine neue Segmentierung hinzuzufügen. Geben Sie einen Markupnamen für die Datei an.
Verwenden Sie die Schaltfläche Flächenschnitt (Surface Cut), um Punkte um den äußeren Rand der Niere in mehreren Ebenen hinzuzufügen. Klicken Sie auf Anwenden, um eine Segmentierung durch die gesamte Niere zu generieren. Scrollen Sie durch die verschiedenen Frames in jeder Ebene und bearbeiten Sie ungenaue Bereiche, indem Sie auf Bearbeiten klicken und die Punkte an die richtige Position ziehen.
Verwenden Sie das Point Placement-Werkzeug, um die Systole und diastole für jede Schicht herzgewebe zu verfolgen. Fahren Sie mit den anderen Schichten des Herzgewebes fort. Verwenden Sie die Funktion Bearbeiten, um die Ablaufverfolgungen zu ändern.
Wählen Sie Anwenden aus, um die Herzparameter zu berechnen. Zeigen Sie die Registerkarte Quantifizieren an und wählen Sie Statistik exportieren, um alle Daten als CSV-Datei zu exportieren. Es wurde beobachtet, dass die Oberflächen- und Volumendaten, die aus der Segmentierung der Nieren gewonnen wurden, und das Messschieberwerkzeug, das zur Messung von Anomalien verwendet wird, verwendet werden können, um das Zystenvolumen genau zu messen.
Es wurde ein deutlicher Unterschied im gesamten Nierenvolumen zwischen altersangepassten Kontroll- und experimentellen Mäusen beobachtet. Die 3D-Visualisierung der Volumenrenderings wurde innerhalb des Systems durchgeführt, einschließlich Drehungen innerhalb des 3D-Raums. Die hintere epikardiale Schicht erschien hellweiß und folgte einem ähnlichen Muster wie die hintere Endokardschicht.
Die vordere Endokardschicht wurde entlang der höchsten Kontur verfolgt. Die vordere epikardiale Schicht erschien am unteren Rand des Bildes aufgrund der bauchigen Positionierung des Tieres linear. Eine normale Mausniere wurde mittels Ultraschall mit einer zystischen Mausniere und einer mäßig verkalkten Mausniere verglichen.
Der wichtigste Schritt, um qualitativ hochwertige Bilder zu erhalten, besteht darin, sicherzustellen, dass die Haare vollständig entfernt werden. Verbleibende Haare verursachen Interferenzen in den Bildern und verringern die Bildqualität.
