Das Nistverhalten ist eine nützliche Möglichkeit, Aktivitäten des täglichen Lebens in wildtypischen und transgenen Mäusen zu bewerten. Es ist besonders nützlich bei der Dokumentation kognitiven Rückgang der Neurodegeneration über die gesamte Lebensdauer. Diese Technik ist eine wirtschaftliche einfache und elegante Bewertung der täglichen Lebensaktivitäten bei Mäusen.
Es kann auch in kurzer Zeit mit minimalem Training durchgeführt werden. In unserem Labor empfehlen wir geschreddertes Papier, da Papier konsistentere Ergebnisse liefert. Es können jedoch Pilotstudien durchgeführt werden, um zu bestimmen, welches Material Am besten zu Ihren Zielen und Ihrem Budget gehört.
Legen Sie in einem separaten Testraum die Umgebungsbedingungen so fest, dass sie versuchsübergreifend konsistent sind und mit dem Wohnraum identisch sind, und liefern Sie Nahrung und Wasser in die Käfige addlibitum. Weisen Sie jeder Maus eine zufällige Identifikationsnummer oder einen Buchstaben zu. Und notieren Sie die ursprüngliche Tier-ID und andere notwendige Identifizierung in einer Kolonie-Aufzeichnung, um sicherzustellen, dass die Assistenten und Tierhaltungspersonal blind für die Bedingungen bleiben.
Ordnen Sie die Käfigplatzierung im Testraum nach dem Zufallsprinzip an, so dass wildartig und transgene Mäuse nicht unangemessen getrennt sind. Und bedecken Sie den Boden jedes Käfigs mit 100 Gramm Trockengewicht Maiskolbenbettwäsche für die quadratischen, verdrehten und geschredderten Papierversuche. Und 100 Gramm Weichekholz-Bettwäsche für die Soft-Cob-Versuche.
Dann, kurz bevor Sie eine Maus in einen Käfig einführen, legen Sie ein einzelnes gepresstes Baumwollquadrat, einen einzigen Papier-Twist, kein zusätzliches Material, das der weichen Stoffbetten hinzugefügt wird, oder 2,5 Gramm sauberes, geschreddertes weißes Druckerpapier, das in fünf bis sieben Zentimeter große Streifen geschnitten wurde. Zur gleichen Tageszeit, zu Beginn des Lichtzyklus, bringen Sie den Hauskäfig mit den Mäusen in den Testraum. Und jede Maus in ihren zugewiesenen Nistkäfig mit dem Material bereits im Käfig übertragen.
Wenn alle Mäuse platziert sind, bringen Sie die heimischen Käfige in den Wohnraum zurück und lassen Sie die Mäuse die Prüfung 24 Stunden lang ungestört abschließen. Entfernen Sie am Ende der Studie vorsichtig den Deckel jedes Käfigs. Und wenn sich jede Maus aus dem Nest entfernt hat, fotografieren Sie jedes Nest, das die zugewiesene ID auf dem Foto erfasst und das Aussehen von Materialien außerhalb des Käfigs minimiert.
Wenn jedes Nest fotografiert wurde, übertrage jede Maus vorsichtig in einzelne temporäre Haltekäfige. Und eskortieren Sie die Bettwäsche und alle Nistmaterialien aus jedem Käfig. Ersetzen Sie dann die Bettwäsche, geben Sie das nächste Nistmaterial in der Sequenz an.
Und kehren Sie die Maus in den Nistkäfig zurück. Wenn alle Versuche abgeschlossen sind, bringen Sie die Mäuse in ihre heimischen Käfige zurück und beobachten Sie die Mäuse auf ein mögliches aggressives Verhalten. Um die Zuverlässigkeit zwischen einander zu gewährleisten, stellen Sie für jedes Verschachtelungsmaterial Basisbilder für mindestens zwei Personen bereit, die blind für die Studie sind.
Und stellen Sie eine Reihe von Beispielnestern zur Verfügung, um die Torschützen mit jeder Art von Material vertraut zu machen. Bei der Bewertung der Nester sollte eine Punktzahl von einem zugewiesen werden, wenn das geschredderte Papier oder kleine Quadrate im Käfig verstreut bleiben, oder das Baumwollquadrat oder twist unberührt bleibt. Eine Punktzahl von zwei wird zugewiesen, wenn ein Teil des Materials in ein Nest gebaut wird, aber über 50% des Materials wurde nicht für den Nestbau verwendet.
Eine Punktzahl von drei wird zugewiesen, wenn ein auffälliges Nest gebaut wird, aber mehrere Stücke sind immer noch verstreut. Eine Partitur von vier wird zugewiesen, wenn fast das gesamte Material für das Nest verwendet wird, aber ein paar Stück Material bleibt verstreut oder sind in der Nähe des Nestes. Eine Punktzahl von fünf wird zugewiesen, wenn fast das gesamte Material verwendet wird, um ein nicht identifizierbares Nest zu bilden.
Lassen Sie den Torschützen eine Pause einlegen und die Basisfotos erneut ansehen, um Ermüdung und Voreingenommenheit während des Scoring-Vorgangs zu vermeiden. Wenn alle Käfige bewertet wurden, geben Sie die Partituren ein und formatieren Sie die Datendatei so, dass sie im langformatigen Format ist, sodass sich die Tierergebnisse in separaten Spalten befinden. In dieser repräsentativen Analyse über alle vier bereitgestellten Materialien schnitten Wildtypmäuse bei der Nestqualität besser ab als APOE e4-Mäuse.
Mit geschreddertem Papier, das deutlich höher in der Qualität bewertet wird als die quadratischen, einbettigen oder Twist-Materialien. Ohne Unterschiede zwischen dem Quadrat, Bettwäsche und Twist-Materialien beobachtet. Darüber hinaus bauen die 5,5 Monate alten mutierten Tiere in diesem Experiment mit Htau-Mäusen ein Nest aus geschreddertem Papier, das deutlich am schlechtesten war als die, die durch ihr Alter konstruiert wurden, um wildtypische Pendants zu entsprechen.
Die Ergebnisse sollten blind für die experimentellen Bedingungen bleiben und die Bewertungskriterien überprüfen. Da die Schlussfolgerungen solide und gültig sind, sollten auch die Inter- und Intra-Rater-Verbindlichkeiten bewertet werden. Burrowing und Circadian Wheel Running sind zwei weitere gängige Methoden zur Beurteilung der Aktivitäten des täglichen Lebens.
Und sie können dazu dienen, das Verschachtelungsverhalten zu ergänzen. Verschachtelung kann als Nebenbewertung verwendet werden, um einen möglichen Rückgang der Kognition vorherzusagen, was den Atem der Verhaltensbeurteilungen in Verbindung mit Morris Wasserlabyrinth und zirkadianem Radlauf erweitert.
