Die Autoren danken eine Universität in Albany-SUNY Presidential Initiatives Fund für Wissenschaft und Forschung in der Forensik und Cyber ​​Security Zuschuss anerkennen, eine National Science Foundation Grant (Zuschuss # 1310350) und National Institute of Justice Zuschuss (Zuschuss # 2015-DN-BX- K057) in den RAM. Wir erkennen auch Justine E. Giffen für die Fotos der Pflanzenmaterialien nehmen.

1. Herstellung von Pflanzenmaterialien <ol><li> Kratom Frisches Blattmaterial <ol><li> Verwenden Sie einen Durchmesser von 6 mm Lochung zu schaffen einheitliche chads von Kratom Blattmaterial von M. speciosa Pflanze. 5-mal wiederholen. </li></ol></li><li> Kratom Puderabsaugung <ol><li> Mix 5 ml Ethanol und 5 ml destilliertem Wasser zu schaffen 1: 1-Lösungsmittelgemisch für die Extraktion. </li><li> In einem 1,5 ml Mikrozentrifugenröhrchen, zu suspendieren , eine kleine Menge (~ 5 mg) von Kratom Bali Pulver in 1 ml 1: 1 EtOH: H 2 O Lösungsmittelgemisch. 5-mal wiederholen. </li><li> Beschallen die Kratom Bali Pulverextraktproben in einem Ultraschallbad für 30 min bei Umgebungstemperatur. </li><li> Zentrifugieren Sie die Kratom Bali Pulverextrakt Proben für 2 Minuten bei 750 · g bei Raumtemperatur. </li><li> Dekantieren, das Lösungsmittel aus Restpulver für die spätere Analyse. </li></ol></li><li> Datura Animpfmischung <ol><li> Schneiden Sie ein D. stramOnium - Samen in die Hälfte in der transversalen Ebene unter Verwendung einer Rasierklinge. Wiederholen Sie 5 verschiedene Samen verwendet. </li><li> Wiederholen Sie dies für D. inoxia und D. Ferox Samen. </li></ol></li></ol> 2. Direkte Analyse in Echtzeit Ionenquelle Parameter <ol><li> Gasheizung Temperatur <ol><li> Stellen Sie den Gaserhitzer Temperatur der Ionenquelle auf 350 ° C. </li></ol></li><li> Ionen - Modus <ol><li> Führen Sie die Analyse im Positiv-Ionen-Modus mit Netzspannung von 250 V. </li></ol></li><li> Helium Gasflussrate <ol><li> Stellen Sie den Heliumgasflussrate auf 2,0 l / sec. </li></ol></li></ol> 3. Time-of-Flight-Massenspektrometer-Parameter <ol><li> Orifice Spannungen <ol><li> Stellen Sie die Blende 1-Spannung bis 20 V und die Öffnung 2 Spannung bis 5 V. </li></ol></li><li> Ring - Objektiv und Spitzenspannung <ol><li> Stellen Sie die Ringlinse Spannung bis 5V und ändern Sie die Spitzen-Spannung bis 600 V. </li></ol></li><li> Massenspektrometrische Acquisition <ol><li> Stellen Sie die Massenspektralanalyse Erfassungsrate bis 1 Spektrum pro Sekunde über einen Massenbereich von m / z 60-800. </li></ol></li><li> Massenspektrometer Auflösungsvermögen <ol><li> Stellen Sie die Auflösung des Massenspektrometers bis 6000 FWHM. </li></ol></li></ol> 4. Analyse von Pflanzenmaterialien <ol><li> Analyse von Kratom Blatt <ol><li> Drücken Sie &quot;Start Run&quot; in Massenspektrometers Steuerungssoftware. Hängen Sie das chad von Pflanzenmaterial zwischen der Ionenquelle und Massenspektrometer Einlass (ca. 2 cm vom Einlass) mit einer Pinzette, bis ein Spektrum erhalten wird. Wiederholen Sie 5-mal mit separaten chads von Pflanzenmaterial. </li><li> Kalibrieren des Spektrums mit Polyethylenglycol 600 (PEG). <ol><li> Dip das geschlossene Ende eines Schmelzpunkt Kapillarrohr in die PEG-Standard. Hängen Sie die beschichtete Kapillare between der Ionenquelle und dem Massenspektrometer Einlass. </li></ol></li><li> Nach der PEG-Standard zu analysieren, wählen Sie die &quot;Stop&quot;, um den Analysenlauf zu beenden. </li><li> Drücken Sie &quot;Start Run&quot; in Massenspektrometers Steuerungssoftware. Suspend eine geringe Menge an getrockneten Blattmaterials zwischen der Ionenquelle und Massenspektrometereinlass mit einer Pinzette bis ein Spektrum erhalten wird. 5 Mal wiederholen, jedes Mal neue Pflanzenmaterial zu analysieren. </li><li> Kalibrieren Sie das Spektrum mit PEG. <ol><li> Dip das geschlossene Ende einer Kapillare in die PEG-Standard. Suspendieren des beschichteten Kapillare zwischen der Ionenquelle und dem Massenspektrometer Einlass. </li></ol></li><li> Nach der PEG-Standard zu analysieren, wählen Sie die &quot;Stop&quot;, um den Analysenlauf zu beenden. </li></ol></li><li> Analyse von Kratompulver <ol><li> Drücken Sie &quot;Start Run&quot; in Massenspektrometers Steuerungssoftware. Tauchen Sie das geschlossene Ende eines Schmelzpunkt Kapillare in das Kratom Pulver. </li><li> Suspend die beschichtete Kapillare zwischen der Ionenquelle und Massenspektrometereinlass bis ein Spektrum erhalten wird. Wiederholen Sie die Analyse 5-mal mit einer neuen Kapillare jedes Mal. </li><li> Kalibrieren Sie das Spektrum mit PEG. <ol><li> Dip das geschlossene Ende einer Kapillare in die PEG-Standard. Suspendieren des beschichteten Kapillare zwischen der Ionenquelle und dem Massenspektrometer Einlass. </li></ol></li><li> Nach der PEG-Standard zu analysieren, wählen Sie die &quot;Stop&quot;, um den Analysenlauf zu beenden. </li></ol></li><li> Analyse von Kratom Extract <ol><li> Tauchen das geschlossene Ende eines Kapillarröhrchens in den Extrakt. </li><li> Suspendiere das Kapillarrohr in den 12 Probenhalter auf der linearen Schiene zum Massenspektrometer befestigt. Wiederholen 5 mal mit einem anderen Extrakt jeder Zeit. </li><li> Drücken Sie &quot;Start Run&quot; in Massenspektrometers Steuerungssoftware. Mit dem Bedienfeld, wählen Sie die Schaltfläche &quot;&gt;&quot; die lineare Schiene durch den Ionenstrom mit einer Geschwindigkeit von 1 mm / s voraus zusammeln Spektren. </li><li> Kalibrieren Sie das Spektrum mit PEG. <ol><li> Dip das geschlossene Ende einer Kapillare in die PEG-Standard. Suspendieren des beschichteten Kapillare zwischen der Ionenquelle und dem Massenspektrometer Einlass. </li></ol></li><li> Nach der PEG-Standard zu analysieren, wählen Sie die &quot;Stop&quot;, um den Analysenlauf zu beenden. </li></ol></li><li> Analyse von Datura Samen <ol><li> Drücken Sie &quot;Start Run&quot; in Massenspektrometers Steuerungssoftware. Hängen Sie die Datura Samen Hälfte zwischen der Ionenquelle und Massenspektrometer Einlass mit einer Pinzette , bis ein Spektrum gesammelt wird. Stellen Sie sicher, dass die Schnittseite orientiert sich an die Ionenquelle gegenüber. 5 Mal wiederholen, eine neue Samen Hälfte jedes Mal zu analysieren. </li><li> Kalibrieren Sie das Spektrum mit PEG. <ol><li> Dip das geschlossene Ende einer Kapillare in die PEG-Standard. Suspendieren des beschichteten Kapillare zwischen der Ionenquelle und dem Massenspektrometer Einlass. </li></ol></li><li> Nach der PEG-Standard zu analysieren,wählen Sie die &quot;Stop&quot;, um den Analysenlauf zu beenden. </li><li> Wiederholen Sie die Schritte 4.4.1-4.4.3 für jede Datura - Arten. </li></ol></li></ol> 5. Datenverarbeitung <ol><li> Translating Datendateien <ol><li> In der Datenverarbeitungssoftware, wählen Sie Datei &quot;Übersetzen DART-Dateien&quot; mit &quot;automatische Kalibrierung&quot; eingeschaltet, um kalibrierte Daten-Dateien erstellen. </li><li> Linksklick und ziehen Sie einen Rahmen um den ersten Peak im Chromatogramm und wählen Sie &quot;Average&quot; eine gemittelte Spektrum zu erzeugen. </li><li> Rechts klicken und ein Feld um einen Bereich ziehen, wo keine Probe entnommen wurde, und wählen Sie &quot;Average gesamte Feld als Hintergrund&quot; Hintergrund aus dem gemittelten Spektrum zu subtrahieren. </li><li> Speichern Sie das Massenspektrum als TXT-Datei. </li><li> Wiederholen Sie die Schritte 5.1.1-5.1.4 für jeden Peak im Chromatogramm eine gemittelte Spektrum zu erzeugen für jede in der Datei zu replizieren. </li><li> Wiederholen Sie die Schritte 5.1.2-5.1.5 für jede Datei gesammelt. </li></ol&gt; </li></ol> 6. Statistische Analyse <ol><li> Hauptkomponentenanalyse <ol><li> Im Classify Abschnitt der Spektralanalyse-Software (Siehe Liste der Materialien), im Rahmen der &quot;Set up&quot; Registerkarte Erstellen von Klassen für die Datenverarbeitung durch die Auswahl von &quot;Klasse hinzufügen&quot;. </li><li> Importieren Sie die Textdateien von Daten, indem Sie auf &quot;Datei hinzufügen (s)&quot;. </li><li> Ordnen Sie Datendateien in die entsprechende Klasse von Pflanzen von Textdateien auswählen und &quot;Set-Klasse für ausgewählten Dateien&quot;. </li><li> Wählen Sie Merkmal Massen zur Unterscheidung von MS aus Trainingsset und eingestellten Schwellwert% bis 1%. </li><li> Legen Sie einen Massentoleranz (MMU) bis 10, und wählen Sie &quot;Build-Vektoren von Datendateien&quot;. </li><li> In der &quot;Compute&quot; Abschnitt, führen Hauptkomponentenanalyse durch die Box für 3D-PCA Graph Überprüfung und wählen Sie &quot;Berechnen&quot;. </li><li> Führen Sie Leave-one-out Kreuzvalidierung durch Auswahl von &quot;Validate (SLOW!).&quot; </li></ol></li><li><stronGenerieren g&gt; Heat Map <ol><li> Im Häufigkeitsplot Register der spektralen Analyse-Software, eine Heatmap von Daten erzeugen, indem Sie &quot;Heat Map&quot;. </li><li> Wählen Sie &quot;Threshold gespeicherten Daten&quot;, um Fülle Schwelle auf 1% festgelegt. </li><li> Exportieren Sie die Heatmap in eine Tabelle, indem Sie &quot;Speichern Heat Map zu Excel&quot;. </li><li> Im Tabellenkalkulationsprogramm, speichern Sie die exportierte Heatmap als TXT-Datei. </li></ol></li><li> Hierarchical Clustering - Analyse <ol><li> Importieren Sie die Heatmap als TXT-Datei in Cluster 3.0-Software. </li><li> In der hierarchischen Registerkarte Cluster 3.0 unter Gene und Arrays, Kontrollkästchen &quot;Cluster&quot; und &quot;berechnen Gewichte&quot;. Stellen Sie Cutoff bei 0,1 und Exponenten 1. Einzel Verknüpfung Wählen Sie Clustering-Analyse durchzuführen. </li><li> Sehen Sie sich die erzeugten .cdt Datendatei in Java Treeview. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Authority, E.F.S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EFSA+Compendium+of+botanicals+that+have+been+reported+to+contain+toxic,+addictive,+psychotropic+or+other+substances+of+concern+onrequest+of+EFSA.">EFSA Compendium of botanicals that have been reported to contain toxic, addictive, psychotropic or other substances of concern onrequest of EFSA.</a> EFSA Journal. 7, 1-100 (2009).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The challenge of new psychoactive substances: list of plant-based substances (20 Substances). , 101-102 (2013).</li><li>Jansen, K., Prast, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ehtnopharmacology+of+Kratom+and+the+Mitragyna+alkaloids.">Ehtnopharmacology of Kratom and the Mitragyna alkaloids.</a> J. Ethnopharmacol. 23, 115-119 (1988).</li><li>Matsumoto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pharmacological Studies on 7-Hydroxymitragynine, Isolated from the Thai Herbal Medicine Mitragyna speciosa: Discovery of an Orally Active Opioid Analgesic. , (2006).</li><li>Matsumoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+&#181;-opioid+receptors+in+antinociception+and+inhibition+of+gastrointestinal+transit+induced+by+7-hydroxymitragynine,+isolated+from+Thai+herbal+medicine+Mitragyna+speciosa.">Involvement of &#181;-opioid receptors in antinociception and inhibition of gastrointestinal transit induced by 7-hydroxymitragynine, isolated from Thai herbal medicine Mitragyna speciosa.</a> Eur. J. Pharmacol. 549, (2006).</li><li>Matsumoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antinociceptive+effect+of+7-hydroxymitragynine+in+mice:+Discovery+of+an+orally+active+opioid+analgesic+from+the+Thai+medicinal+herb+Mitragyna+speciosa.">Antinociceptive effect of 7-hydroxymitragynine in mice: Discovery of an orally active opioid analgesic from the Thai medicinal herb Mitragyna speciosa.</a> Life Sciences. 74, 2143-2155 (2004).</li><li>El Bazaoui, A., Stambouli, H., Bellimam, M. A., Soulaymani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+tropane+alkaloids+in+seeds+of+Datura+stramonium+L.+by+GC/MS+and+LC/MS.">Determination of tropane alkaloids in seeds of Datura stramonium L. by GC/MS and LC/MS.</a> Ann. Toxicol. Anal. 21, 183-188 (2009).</li><li>Friedman, M., Levin, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Composition+of+Jimson+Weed+(Datura+stramonium)+seeds.">Composition of Jimson Weed (Datura stramonium) seeds.</a> J. Agr. Food Chem. 37, 998-1005 (1989).</li><li>Philipof, S., Berkhov, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GC-MS+Investigation+of+tropane+alkaloids+in+Datura+stramonium.">GC-MS Investigation of tropane alkaloids in Datura stramonium.</a> Z Naturforsch. 57, 559-561 (2002).</li><li>Preissel, U., Preissel, H. -. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Brugmansia and Datura: Angel's Trumpets and Thorn Apples. , (2002).</li><li>Boumba, V. A., Mitselou, A., Vougiouklakis, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatal+poisoning+from+ingestion+of+Datura+stramonium+seeds.">Fatal poisoning from ingestion of Datura stramonium seeds.</a> Vet. Hum. Toxicol. 46, 81-82 (2004).</li><li>Kronstrand, R., Roman, M., Thelander, G., Eriksson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unintentional+Fatal+Intoxications+with+Mitragynine+and+O-Desmethyltramadol+from+the+Herbal+Blend+Krypton.">Unintentional Fatal Intoxications with Mitragynine and O-Desmethyltramadol from the Herbal Blend Krypton.</a> J. Anal. Toxicol. 35, 242-247 (2011).</li><li>Neerman, M., Frost, R., Deking, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+drug+fatality+involving+Kratom.">A drug fatality involving Kratom.</a> J. Forensic Sci. 58, 278-279 (2013).</li><li>Steenkamp, P. A., Harding, N. M., Van Heerden, F. R., Van Wyk, B. -. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatal+Datura+poisoning:+Identification+of+atropine+and+scopolamine+by+high+performance+liquid+chromatography+/+photodiode+array+/+mass+spectrometry.">Fatal Datura poisoning: Identification of atropine and scopolamine by high performance liquid chromatography / photodiode array / mass spectrometry.</a> Forensic Sci. Int. 145, 31-39 (2004).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Scientific Working Group for the Analysis of Seized Drug Recommendations. , (2014).</li><li>Kikura-Hanajiri, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+analysis+of+mitragynine,+7-hydroxymitragynine,+and+other+alkaloids+in+the+psychotropic+plant+"Kratom"+(Mitragyna+speciosa)+by+LC-ESI-MS.">Simultaneous analysis of mitragynine, 7-hydroxymitragynine, and other alkaloids in the psychotropic plant "Kratom" (Mitragyna speciosa) by LC-ESI-MS.</a> Forensic Toxicol. 27, 67-74 (2009).</li><li>Wang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+three+chromatographic+techniques+for+the+detection+of+mitragynine+and+other+indole+and+oxindole+alkaloids+in+Mitragyna+speciosa+(Kratom)+plants.">Comparison of three chromatographic techniques for the detection of mitragynine and other indole and oxindole alkaloids in Mitragyna speciosa (Kratom) plants.</a> J. Separation Sci. , (2014).</li><li>Cody, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Observation+of+molecular+ions+and+analysis+of+nonpolar+compounds+with+the+Direct+Analysis+in+Real+Time+ion+source.">Observation of molecular ions and analysis of nonpolar compounds with the Direct Analysis in Real Time ion source.</a> Anal. Chem. 81, 1101-1107 (2009).</li><li>Cody, R., Laramee, J., Durst, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Versatile+new+ion+source+for+the+analysis+of+materials+in+open+air+under+ambient+conditions.">Versatile new ion source for the analysis of materials in open air under ambient conditions.</a> Anal. Chem. 77, 2297-2302 (2005).</li><li>Musah, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+High+Throughput+Ambient+Mass+Spectrometric+Approach+to+Species+Identification+and+Classification+from+Chemical+Fingerprint+Signatures.">A High Throughput Ambient Mass Spectrometric Approach to Species Identification and Classification from Chemical Fingerprint Signatures.</a> Sci. Rep. 5, (2015).</li><li>Lesiak, A. D., Cody, R. B., Dane, A. J., Musah, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+detection+by+direct+analysis+in+real+time-mass+spectrometry+(DART-MS)+of+psychoactive+plant+drugs+of+abuse:+The+case+of+Mitragyna+speciosa+aka+"Kratom".">Rapid detection by direct analysis in real time-mass spectrometry (DART-MS) of psychoactive plant drugs of abuse: The case of Mitragyna speciosa aka "Kratom".</a> Forensic Sci. Int. 242, 210-218 (2014).</li><li>Lesiak, A. D., Cody, R. B., Dane, A. J., Musah, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant+Seed+Species+Identification+from+Chemical+Fingerprints:+A+High-Throughput+Application+of+Direct+Analysis+in+Real+Time+Mass+Spectrometry.">Plant Seed Species Identification from Chemical Fingerprints: A High-Throughput Application of Direct Analysis in Real Time Mass Spectrometry.</a> Anal. Chem. , (2015).</li><li>Espinoza, E. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinguishing+wild+from+cultivated+agarwood+(Aquilaria+spp.)+using+direct+analysis+in+real+time+and+time+of-flight+mass+spectrometry.">Distinguishing wild from cultivated agarwood (Aquilaria spp.) using direct analysis in real time and time of-flight mass spectrometry.</a> Rapid Commun. Mass Spectrom. 28, 281-289 (2014).</li><li>Lancaster, C., Espinoza, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluating+agarwood+products+for+2-(2-phenylethyl)chromones+using+direct+analysis+in+real+time+time-of-flight+mass+spectrometry.">Evaluating agarwood products for 2-(2-phenylethyl)chromones using direct analysis in real time time-of-flight mass spectrometry.</a> Rapid Commun. Mass Spectrom. 26, 2649-2656 (2012).</li><li>Sisco, E., Dake, J., Bridge, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Screening+for+trace+explosives+by+AccuTOF&#8482;-DART&#174;:+An+in-depth+validation+study.".">"Screening for trace explosives by AccuTOF&#8482;-DART&#174;: An in-depth validation study.".</a> Forensic Sci. Int. 232, 160-168 (2013).</li><li>Fernandez, F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterizatoin+of+solid+counterfeit+drug+samples+by+desorption+electrospray+ionization+and+direct+analysis+in+real+time+coupld+to+time-of-flight+mass+spectrometry.">Characterizatoin of solid counterfeit drug samples by desorption electrospray ionization and direct analysis in real time coupld to time-of-flight mass spectrometry.</a> Chem. Med. Chem. 1, 702-705 (2006).</li></ol>

The authors have no disclosures.

Die Fähigkeit , auf pflanzlicher Basis Drogen zu identifizieren , ist die Notwendigkeit der Erhöhung aufgrund der dramatischen Anstieg in den Bereichen Marketing, Verkauf und Konsum von ungeplanten psychotroper Substanzen. 2 Traditionelle Methoden zur Identifizierung von botanischen Material in der Regel Charakterisierung der physikalischen Merkmale betreffen , gekoppelt mit der Analyse der chemische Bestandteile durch Bindestriche chromatographischen-massenspektrometrischen Methoden. Doch diese beiden Ansätze gegenwärtigen Herausforderungen zu rationalisiert Analyse. Physikalische Eigenschaften der Pflanzen werden oft zerstört , wenn die Pflanzen getrocknet, pulverisierten oder während des Herstellungsprozesses extrahiert und als solches ist es oft schwierig , eine Art von Pflanzenbasis psychotrope Produkt von einem anderen zu unterscheiden , allein basierend auf physikalischen Eigenschaften. 23 Analyse von chromatographische-massenspektrometrischen Methoden kann die Identifizierung der psychotrope Verbindungen in pflanzlichen Matrices ermöglichen, aber die Probenvorbereitung und Methodenentwicklung ist Zeit einnd ressourcenintensiv, und die Schaffung neuer Protokolle für jede Klasse oder Spezies von pflanzlicher Basis Drogenmissbrauch ist unpraktisch in vielen forensischen Chemie-Labors. Eine direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie umgeht einige dieser Herausforderungen, wie komplexen Matrices wie Blätter, Pulver, Extrakte und Samen können mit wenig Probenvorbereitung analysiert werden. Trotz der komplexen Matrices der Materialien hier abgetastet wurden die psychoaktive Bestandteile leicht erkennbar, selbst bei Konzentrationen Nanogramm-, 21 aufgrund der hohen Empfindlichkeit des Massenspektrometers. Samen, Blättern und Pulver wurden gezeigt, um leicht durch direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie, und eine Vielzahl von anderen Arten von Materialien können auch in der gleichen Weise abgetastet werden, analysiert werden, einschließlich der DC-Platten, Währung, Tabletten, Blumen, Festphasenmikroextraktion (SPME) Fasern und sogar Insekten puparial Hüllen 21,22 . Durch genaue Masse anaLyse, elementare Zusammensetzung Bestimmung und Isotopenanpassung kann Biomarkern und Verbindungen von Interesse identifiziert werden, unabhängig davon, ob die Verbindungen in einem Blatt enthalten sind, auf einer DC-Platte getupft und auf ein Kapillarrohr beschichtet. Eine direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie Methodik kann für eine optimierte Analyse verwendet werden, da es nur sehr wenige Parameter, die aus dem Experiment modifiziert werden müssen, zu experimentieren. Die Analyse kann in positive Ionen oder negative Ionen-Modus durchgeführt werden, und die Moleküle von bis zu 3.000 amu kann in beiden Fällen nachgewiesen werden. Ionisierung in Positivionenmodus erfolgt durch Protonenübertragung von aktivierten Wassercluster, 21 und jede Verbindung mit einer Protonenaffinität höher als die von Wasser ionisiert werden. Hier wurde als positiv-Ionen-Modus aufgrund der hohen Protonenaffinität von Alkaloiden verwendet, die sie verursacht leicht durch Protonierung ionisiert werden. Die Analyse im Negativionen-Modus kann für die erfolgreiche Erkennung von -Kohlenwasserstoff verwendet werdenons (wie O 2 -Addukte) 21, explosive Materialien 27 und organischen Säuren, wie Artesunat in malarial Medikamente. 28 Aufgrund der Ionisationsverfahren von Protonentransfer und die Unfähigkeit , mehrfach geladenen Ionen, direkte Analyse in Echtzeit-Hochauflösungsmassen herzustellen Spektrometrie beschränkt sich hauptsächlich auf die Analyse von kleinen Molekülen bis zu 3.000 amu. Außer Ionisierungsmodus ist die Temperatur der Ionenquelle ein wichtiger Parameter, und die geeignete Temperatur hängt weitgehend von der analysierten Probe. Zum Beispiel ist es wichtig, niedrigere Temperaturen zu verwenden (~ 250 ° C) für die SPME-Faser Analyse Zerstörung des Beschichtungsmaterials auf der Faser zu verhindern, während höhere Temperaturen (~ 500 ° C) soll für die Aminosäureanalyse zur Desorption verwendet werden, und nachfolgende Ionisierung. Hier Pflanzenmaterial Analysen wurden bei 350 ° C durchgeführt, da dies für die Ionisierung von Alkaloiden und anderen Verbindungen von Interesse ermöglicht, mitout verursacht Pyrolyse von Verbindungen in der Pflanzenmatrix. Eine direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Analyse Massenspektrometrie ermöglicht nicht nur die Identifizierung der psychoaktiven Bestandteile des Pflanzenmaterials auf Basis von genauen Massen, elementare Zusammensetzung Bestimmung und Isotopenanpassung, aber es produziert auch einzigartige chemische Fingerabdrücke, die für die Identifizierung von Arten genutzt werden können unter Verwendung von multivariate statistische Analyse mit hoch reproduzierbare Ergebnisse, auch bei kleineren Datenmengen. Multivariate statistische Analyse wurde in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie-Daten zu einer Vielzahl von direkten Analyse angewandt, einschließlich der Bestandteile von Holz, puparial Hüllen, Samen, Blattmaterial und Biodiesel fuelstocks, die Vielseitigkeit und die Reproduzierbarkeit des Verfahrens zur Schau stellt. 22-26 die Hochdurchsatz - Funktionen der direkten Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie ermöglichen die Erfassung von großen Mengen an Masse spectral Daten in einer kurzen Zeitperiode, und die große Anzahl der Replikate für die statistische Analyse benötigt werden, unter Verwendung dieses Verfahrens leicht erworben. Die direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie Massenspektralanalyse Datensatz von Datura und Kratom wurde von mehr als 100 Einzelspektren besteht, die mit weniger als einer Stunde der Gesamtzeitaufwand gesammelt wurden. Zu erhalten, die gleiche Anzahl von Spektren GC-MS mit einer Ofentemperaturprogramm von 30 Minuten dauern würde, etwa 50 Stunden, ohne Berücksichtigung der zugesetzten Zeit für die Probenvorbereitungsschritte, wie Extraktion oder Derivatisierung verwendet wird. Hauptkomponentenanalyse können verwendet werden, um Substanzen zu markieren Variationen zwischen den Sätzen von Pflanzen basierend auf dem Vorhandensein und der Intensität des ausgewählten Merkmals Massen. Die statistische Analyse Verarbeitung liefert Artbestimmung sowie sorten Informationen. Andere Methoden der statistischen Analyse, wie hierarchischen Clustering-Analyse (HCA), kann auch sein,ohne die a-priori-Auswahl von Merkmals Massen angewandt. Die Ergebnisse der HCA von umfassenden chemischen Fingerabdrücke zeigen , dass ohne Aufsicht statistische Analyse erfolgreich für Artbestimmung von pflanzlichen Drogen von Missbrauch angewendet werden. 25 Die Art der Diskriminierung von forensischer botanischen Material durch direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie wurde mit der Identifizierung von Psychopharmaka und andere Biomarker in der Soft-Ionisationsmassenspektren demonstriert, und die Anwendung der multivariaten statistischen Analyse. Die Anwendung von zwei Arten von statistischen Analysen zeigten nicht nur, dass die Klasse eines pflanzlicher Basis Missbrauchsdroge identifiziert werden kann, sondern auch, dass die Vielfalt und Art des Arzneimittels kann durch die direkte Analyse beobachtet, basierend auf den einzigartigen chemischen Fingerabdrücken bestimmt werden, in Echtzeit-hochauflösender Massenspektrometrie. Das hier vorgestellte Verfahren ermöglicht die schnelle Hochdurchsatz-Identifizierung mind einserweiternden Substanzen in einer Weise, die Herausforderungen begegnet bei herkömmlichen analytischen Methoden umgeht, und bietet forensische Laboratorien mit einem Mittel zur Charakterisierung und psychoPflanzenMaterial ohne Zeit zu identifizieren und intensive Methodenentwicklung Ressourcen. Dieses Protokoll kann auf Arten Differenzierung einer Vielzahl von anderen von Pflanzen abgeleiteten Materialien erweitert werden. 22-26

Seit Jahrtausenden psycho natürliche Produkte wurden in schamanistischen Ritualen, missbraucht für ihre bewusstseinser Attribute und verbraucht für ihre medizinischen Eigenschaften verwendet. Die Einnahme dieser Pflanzen und verwandten pflanzlichen Stoffen können in Bereichen von Bedeutung sein, wo sie endemisch sind, und sie haben soziale und wirtschaftliche Bedeutung. Vor kurzem jedoch hat es einen dramatischen Anstieg bei der Verwendung dieser &quot;natürlichen&quot; Drogen gewesen wegen der Leichtigkeit der Zugänglichkeit durch den Handel im Internet. Die Wahrnehmung, dass diese Substanzen sicher sind, mit einem erhöhten Vorgehen gegen den Besitz und die Verwendung von traditionellen Drogen und synthetische Substanzen gekoppelt zu verwenden, haben auf die Spitze in den Missbrauch von pflanzlichen Drogen beigetragen. Es ist im Allgemeinen schwierig, durch Visualisierung zwischen diesen Produkten und harmlos Pflanzenmaterial zu unterscheiden, und daher besteht ein Interesse Methoden zu entwickeln, die verwendet werden können, diese Produkte zu identifizieren. Doch herkömmliche analytische Methoden für die PflanzenSpezies Identifizierung sind zeitaufwendig und unpraktisch durchzuführen. Darüber hinaus ist das Verfahren Entwicklungsprozess zeit- und ressourcenintensiv. Diese Faktoren haben die Crafting von Rechtsvorschriften die Verwendung dieser Stoffe weit hinter der Geschwindigkeit der Eskalation in ihren Missbrauch Einhalt zu gebieten. So gibt es nur wenige Gesetze, die die Erzeugung, Herstellung, Verkauf und Konsum von vielen dieser natürlichen Psychoaktiva und als solche regeln, gibt es Hunderte von Pflanzen von Missbrauch Nutzern zur Verfügung , in Tausenden von verschiedenen Formen. 1,2 Zwei solche pflanzlichen Drogen von Missbrauch sind Kratombaum, die gemeinhin als Kratom bekannt und Pflanzen aus der Datura Gattung, nämlich D. stramonium, D. ferox und D. inoxia. Kratom und Datura sind azyklisch in den Vereinigten Staaten, aber die Drug Enforcement Administration hat sowohl als Arzneimittel zur Sorge aufgeführt. 3,4 Kratom durch die Anwesenheit der psychotrope Verbindungen gekennzeichnet ist Mitragynin einnd 7-hydroxymitragynine sowie andere nicht-psychoaktiven Alkaloide einschließlich Mitraphyllin, paynantheine, corynoxeine und Rhynchophyllin. 4-8 Die psychoaktiven Eigenschaften von Datura spp. werden Atropin und Scopolamin zugeschrieben, aber eine Vielzahl von anderen Tropan - Alkaloiden wurden in den Pflanzen. 9-12 Sowohl Kratom und Datura wurden impliziert in Vergiftungen und Todesfälle und ihre Identifizierung ist zunehmend notwendig in beiden forensischen und toxikologischen Kontexte identifiziert worden ist , als der Missbrauch dieser Produkte ist auf dem Vormarsch. 13-16 Im Großen und Ganzen verwendet traditionelle Methoden für die Analyse von forensischer Drogen Material, wie zum Beispiel Farbtests, Mikroskopie und Raman und Infrarotspektroskopie, werden in der Regel in / Regel-out vermutliche lastet. Kopplungstechniken, wie beispielsweise GC-MS und Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie (LC-MS) sind bestätigende Analyseverfahren basierend auf einem Vergleich der Profile von detektierten AnalytenIn den wissenschaftlichen Arbeitsgruppe zur Analyse der beschlagnahmten Drogen (SWGDRUG) Bibliotheksstandards. 17 Die Probenbehandlungsschritte , die vor der Analyse einschließlich Pulverisierung, Extraktion, Derivatisierung und Verdampfung durchgeführt werden, können Stunden , um die Laufzeit hinzugefügt und die Probe verfälschen, 9,11 , 18,19 Herstellung Analyse von botanischen Drogen weniger als einfach im Vergleich zu derjenigen für andere traditionelle Drogen wie Kokain oder Heroin. Darüber hinaus müssen die einzelnen chromatographischen Programme für jedes Produkt von Interesse entwickelt werden, die für jede Art oder Sorte von pflanzlicher Basis Drogenmissbrauch sehr unpraktisch für Routine Fallarbeit der Implementierung von Standard-Betriebsprotokolle macht. Eine direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie ist eine Ambient-Ionisations-Massenspektrometrie-Technik, die einige der Herausforderungen im Zusammenhang mit herkömmlichen analytischen Methoden umgeht. Gase, Flüssigkeiten, Feststoffe, Pulver, DC-Platten und Pflanzen material können direkt durch direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie und sowohl polare als auch nichtpolare Verbindungen leicht in komplexen Matrices nachgewiesen werden kann. 20-22 Des Weiteren analysiert werden, haben Studien gezeigt , dass psychoaktive Verbindungen können schnell in identifiziert werden Pflanzenmaterial durch die direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie und speziesspezifische Informationen können aus der statistischen Verarbeitung der massenspektroskopischen Daten zu entnehmen. 22-26 Hier zeigen wir , dass die direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie verwendet werden können , um schnell verschiedene Pflanzenmaterial (dh Pflanzen, Pulver, Extrakte und Samen) für ihre psycho Komponenten beurteilen zu können , und dass die Arten und Sorten der anlagen- abgeleiteten Produkte können in einer schnellen und Hochdurchsatz-Art und Weise bestimmt werden. Die Analyse der forensically relevant botanischen Materials ohne die Notwendigkeit für die Probenvorbereitungsschritte oder Lang chromatographischeAnalyse Laufzeiten wird zusätzlich zu den Pflanzenarten Identifizierung berichtet.

<table><tbody><tr><td>AccuTOF Mass Spectrometer</td><td>JEOL USA, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DART-SVP Ion Source</td><td>IonSense, Inc.</td><td>DART-SVP</td><td></td></tr><tr><td>Linear Rail System</td><td>IonSense, Inc.</td><td>HW-10029</td><td></td></tr><tr><td>Hole puncher (6 mm)</td><td>Swingline</td><td>A7074005</td><td></td></tr><tr><td>One-Pint Compact Ultrasonic Cleaner</td><td>Cole-Palmer</td><td>EQ-08849-00</td><td></td></tr><tr><td>1.5 ml Eppendorf Microcentrifuge tubes</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-682-550</td><td></td></tr><tr><td>AccuSpin Micro 17R Centrifuge</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-100676</td><td></td></tr><tr><td>#9 Stainless Steel Razor blade</td><td>Stanley</td><td>11-515</td><td></td></tr><tr><td>Dip-it Tip Holder</td><td>IonSense, Inc.</td><td>SCT-70003</td><td></td></tr><tr><td>Dip-it Tips</td><td>IonSense, Inc.</td><td>DPT-110</td><td></td></tr><tr><td>Melting Point Capillary</td><td>Krackeler Scientific</td><td>1-9530-3</td><td></td></tr><tr><td>Polyethylene glycol (600)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>81180</td><td></td></tr><tr><td>Rifat Kratom Live Plant</td><td>World Seed Supply Kratom Collection</td><td>LIVEKRATOMPLANT</td><td></td></tr><tr><td>Bali Kratom Dried Leaf</td><td>The Kratom King</td><td>OZKRAPCOM</td><td></td></tr><tr><td>Bali Kratom Powder</td><td>The Kratom King</td><td>OZKRAPCOMPOW</td><td></td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Datura stramonium&lt;/em&gt; seeds</td><td>Horizon Herbs LLC</td><td>PDATUJ</td><td></td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Datura inoxia&lt;/em&gt; seeds</td><td>Horizon Herbs LLC</td><td>PDATUM</td><td></td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Datura ferox&lt;/em&gt; seeds</td><td>Georgia Vines</td><td>255/737</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol, anhydrous</td><td>Krackeler Scientific</td><td>1328-E402-4L</td><td></td></tr><tr><td>Mass Mountaineer Spectral Analysis Software</td><td>mass-spec-software.com</td><td>MM-20030-PCA-DVD</td><td></td></tr><tr><td>TSSPro3 Data Processing/Data Reduction Software</td><td>Shrader Labs</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cluster 3.0</td><td>http://bonsai.hgc.jp/~mdehoon/software/cluster/software.htm</td><td>Open Source Software</td><td></td></tr><tr><td>Java Treeview</td><td>http://jtreeview.sourceforge.net/</td><td></td><td>Open Source Software</td></tr></tbody></table>

rapid high-throughput species identification of botanical material using direct analysis in real time high resolution mass spectrometry

Wir zeigen, dass die direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie verwendet werden können Massen Spektralprofile botanischer Material zu produzieren, und dass diese chemischen Fingerabdrücke für die Pflanzenarten Identifizierung verwendet werden. Die massenspektroskopischen Daten schnell und in einem Hochdurchsatz Weise ohne die Notwendigkeit für die Probenextraktion, Derivatisierung oder pH-Einstellung Schritten erfasst werden. Die Verwendung dieser Technik umgeht Herausforderungen durch herkömmlichere Techniken vorgestellt einschließlich langwierige Chromatographie Analysezeiten und ressourcenintensive Verfahren. Die hohe Durchsatzfähigkeiten der direkten Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie-Protokoll, gekoppelt mit multivariaten statistischen Analyseverarbeitung der Daten, bieten nicht nur Klasse Charakterisierung von Pflanzen, sondern auch Arten und Sorten Informationen ergeben. Hier wird die Technik mit zwei psycho pflanzlichen Produkten demonstriert, Kratombaum (Kratom) und Datura(Jimsonweed), die direkte Analyse in Echtzeit-Hochauflösende Massenspektrometrie durch statistische Analyseverarbeitung der Massenspektraldaten gefolgt unterworfen. Die Anwendung dieser Werkzeuge im Tandem ermöglicht die Pflanzenmaterialien schnell auf der Ebene der Vielfalt und Arten identifiziert werden.

Repräsentative weiche Ionisierung positiv-Ionen - Modus eine direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie - Daten von Kratom Produkte und Datura Samen sind in den Abbildungen 2 und 3 dargestellt ist . Verschiedene Verbindungen , die bereits von M. isoliert speciosa, einschließlich Mitragynin (C 23 H 30 N 2 O 4 + H +, m / z 399,2284) und 7-hydroxymitragynine (C 23 H 30 N 2 O 5 + H +, m / z 415,2233), in allen vier nachgewiesen Proben und die Massenmessdaten entsprechen , sind in Tabelle 1 aufgeführt . 4-8 Representative Datura Daten werden in Figur 3 gezeigt und Unterschrift Biomarkern einschließlich Atropin (C 17 H 23 NO 3 + H +, m / z 290,1756) und Scopolamin (C 17 präsentiert H 21 NO 4 + H + </sup&gt;, M / z 304.1549) wurden in den drei Spezies nachgewiesen. Massenmessdaten mit Abbildung 3 zugeordnet sind in Tabelle 2 dargestellt. 12.09 Verbindung Identitäten wurden durch Elementarzusammensetzung Bestimmung, Isotopenanpassung bestätigt und Vergleiche zu Berichten in der Literatur. 23-24 Heatmap - Renderings der direkten Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie - Spektren von Kratom und Datura sind in Abbildung 4 dargestellt. Die präsentierten Daten wurden in der Hauptkomponentenanalyse (PCA) verwendet , um zwischen den beiden Klassen von pflanzlichen Drogen zu unterscheiden von Missbrauch (Abbildung 5). Die PCA Plot wurde mit zehn Spiel Massen konstruiert sind (siehe Tabelle 3), mit blauen Kreisen repräsentieren Kratom Daten und rote Quadrate repräsentieren Datura Daten. Die Merkmals Massen entsprach verschiedene Alkaloide ausgewählt, die inDatura oder Mitragyna spp., Einschließlich der psycho Verbindungen Atropin, Scopolamin, Mitragynin und 7-hydroxymitragynine 23,24 . Drei Hauptkomponenten für 75,26% der Varianz und Leave-one-out Kreuzvalidierung (LOOCV) betrug 100%. Die PCA Kurve zeigt deutlich , dass die Kratom Daten und Datura Daten gut voneinander gelöst werden. PCA - Analyse zeigte auch , dass die einzelnen Sorten von Kratom und die verschiedenen Arten von Datura identifiziert werden konnten und voneinander unterschieden (Figur 6). LOOCV betrug 94,29% mit drei Hauptkomponenten 75,26% der Varianz abdeckt. Die beiden Sorten von Kratom (Bali in blauen Kreisen und Rifat in roten Quadraten) Cluster zusammen angeben, dass sie zu der Spezies M. gehören speciosa, sind jedoch voneinander gelöst, was zeigt , dass sie verschiedene Varietäten darstellen. Darüber hinaus ist die Datura Artengruppe zusammen und vom M. getrennt speciosa Daten, aber jeder der einzelnen Arten von Datura (D. inoxia in grüne Dreiecke, D. stramonium in rosa Quadrate und D. ferox in Türkis Kreise) sind deutlich zu unterscheiden. Trotz eines Datenpunktes für D. stramonium erscheint ein Ausreißer zu sein, wird das Saatgut korrekt als D. eingestuft stramonium und nicht D. inoxia mit PCA. Am wichtigsten ist , den Unterschied in der Samenfarbe zwischen D. stramonium und D. inoxia bestätigt sie unterschiedliche Arten sind und dass der Datenpunkt in Frage kann nicht sein D. inoxia. Hierarchical Clustering (Abbildung 7) wurde ohne a priori - Auswahl von Merkmals Massen durchgeführt. Stattdessen wurde die gesamte Gruppe der spektralen Datensätzen überspannt einen Massenbereich von m / z 60-800 importiert in Open - Source - genomische Clustering - Software und ein Dendrogramm diese Daten mit produziert. Die Ergebnisse of HCA auch Klasse enthüllt, Art und Sorte Differenzierung allein auf der Grundlage direkter Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie abgeleiteten Daten und denen der PCA-Analyse bestätigt. Die beiden Klassen von pflanzlichen Drogen von Missbrauch, Kratom und Datura, wurden in einzelne clades des dendrogram getrennt. Darüber hinaus wurden die Rifat und Bali Sorten von Kratom jeweils getrennt in einzelne Teil clades innerhalb des Kratom-Klasse. In ähnlicher Weise D. inoxia, D. ferox und D. stramonium wurden innerhalb der Datura Klasse in ihre eigenen clades nach Arten gelöst werden . <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/54197/54197fig1.jpg" /> Abbildung 1. Bilder von M. speciosa (Kratom) Produkte und Datura spp Samen a: Bali Kratom getrocknete Blatt; b:.. Bali Kratom Pulver; c: Rifat Kratom lebenden Pflanzen; <strong&gt; d: D. stramonium Samen; e: D. inoxia Samen; f: D. Ferox Samen. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig1large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/54197/54197fig2.jpg" /> Abbildung 2. Direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie positiv-Ionen - Spektren von M. speciosa (Kratom) Produkte ein: Rifat frisches Blatt; b. Bali getrocknete Blätter, c: Bali - Pulver; d: Bali Pulverextrakt. Die Massenmessdaten mit diesen Spektren zugeordnet sind in Tabelle 1 dargestellt. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig2large.jpg" target="_blank">Bitte hier klicken</a> , um <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig2large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Figur 3" src="/files/ftp_upload/54197/54197fig3.jpg" /> Abbildung 3. Eine direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie positiv-Ionen - Spektren von Datura spp. . Samen a: D. ferox; b: D. inoxia; c: D. stramonium. Die Massenmessdaten mit diesen Spektren zugeordnet sind in Tabelle 2 dargestellt. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig3large.jpg" target="_blank">Bitte hier klicken</a> , um <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig3large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Abbildung 4" src="/files/ftp_upload/54197/54197fig4.jpg" /> Abbildung 4. Heatmap Renderings der direkten Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie - Spektren von Kratom und Datura Pflanzenmaterialien. Hallogh Intensitätsspitzen sind in Dunkelrot und untere Intensitätsspitzen gezeigt in helleren Farbtönen angezeigt werden. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig4large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig4large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Abbildung 5" src="/files/ftp_upload/54197/54197fig5.jpg" /> Abbildung 5. Hauptkomponentenanalyse (PCA) Grundstück von Kratom und Datura Produkte konstruiert direkte Analyse in Echtzeit hochauflösender Massenspektrometrie abgeleitete Daten. Drei Hauptkomponenten (PCs) für 75,26% der Variation bilanziert und der Abschied ein- out Kreuzvalidierung (LOOCV) betrug 100%. Die Feature - Massen für die PCA sind in Tabelle 3. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig5large.jpg" target="_blank">Bitte hier klicken</a> , um <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig5large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> Abbildung 6. Hauptkomponentenanalyse (PCA) Grundstück von Kratom und Datura Produkte durch direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie - Daten. Klassenzuordnungen wurden auf der Grundlage der Vielfalt (Kratom) oder Art (Datura) der Pflanzenmaterialien. Drei Hauptkomponenten (PCs) entfielen 75,26% der Variation und der leave-one-out Kreuzvalidierung (LOOCV) betrug 94,29%. Die Feature - Massen für PCA sind in Tabelle 3 aufgeführt. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig6large.jpg" target="_blank">Bitte hier klicken</a> , um <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig6large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="7" src="/files/ftp_upload/54197/54197fig7.jpg" /> Abbildung 7. Hierarchical Clustering Ergebnisse mithilfe der direkten Analyse in Echt ti erhaltenme-hochauflösender Massenspektrometrie-abgeleiteten Daten aus der Analyse von Kratom und Datura Pflanzenmaterialien. Die beiden Klassen von Pflanzen deutlich in zwei verschiedene Zweige in Dendrogramm getrennt sind (in blau und rot Klammern für Kratom und Datura dargestellt sind). Die Datura Saatgutarten sind auch voneinander (gezeigt in grün, türkis und rosa gestrichelte Kästen für D. inoxia, D. ferox und D. stramonium beziehungsweise) gelöst. Die Kratom Pflanzenmaterialien durch Vielfalt (dargestellt in rot und blau gestrichelte Kästen für Rifat und Bali, beziehungsweise) voneinander getrennt sind. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197fig7large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier um eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Tabelle 1" src="/files/ftp_upload/54197/54197tbl1.jpg" /> Tabelle 1. Massenmessdaten im Zusammenhang mit der weichen Ionisierung Spektren von Kratom products in Abbildung 2 dargestellt. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197tbl1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197tbl1large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Tabelle anzuzeigen.</a> <img alt="Tabelle 2" src="/files/ftp_upload/54197/54197tbl2.jpg" /> Tabelle 2. Massenmessdaten im Zusammenhang mit der weichen Ionisierung Spektren von Datura Samen in Abbildung 3. <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197tbl2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="https://www-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54197/54197tbl2large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Tabelle anzuzeigen.</a> <img alt="Tabelle 3" src="/files/ftp_upload/54197/54197tbl3.jpg" /> Tabelle 3. Eigenschaft Massen für die Hauptkomponentenanalyse Grundstück verwendet von Kratom und Datura Produkte in den 5 und 6.

Watch this Scientific Journal Video about Rapid High-throughput Species Identification of Botanical Material Using Direct Analysis in Real Time High Resolution Mass Spectrometry at JoVE.com

Rapid High-throughput Species Identification of Botanical Material Using Direct Analysis in Real Time High Resolution Mass Spectrometry

Verfahren zur Identifizierung von Arten von botanischen Material durch direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie und multivariate statistische Analyse vorgestellt.

Schnelle Hochdurchsatz-Spezies Identifizierung von Pflanzen von Material mit Direktanalyse in Echtzeit hochauflösender Massenspektrometrie

We demonstrate that direct analysis in real time-high resolution mass spectrometry can be used to produce mass spectral profiles of botanical material, ...

rapid-high-throughput-species-identification-botanical-material-using

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Chemistry

11.5K Aufrufe.  University at Albany-SUNY.  Verfahren zur Identifizierung von Arten von botanischen Material durch direkte Analyse in Echtzeit hochauflösende Massenspektrometrie und multivariate statistische Analyse vorgestellt. 

Serie: Rapid High-throughput Species Identification of Botanical Material Using Direct Analysis in Real Time High Resolution Mass Spectrometry

Untargeted Metabolomics from Biological Sources Using Ultraperformance Liquid Chromatography-High Resolution Mass Spectrometry (UPLC-HRMS)

Here we present a workflow to analyze the metabolic profiles for biological samples of interest including; cells, serum, or tissue. The sample is first separated into polar and non-polar fractions by a liquid-liquid phase extraction, and partially purified to facilitate downstream analysis. Both aqueous (polar metabolites) and organic (non-polar metabolites) phases of the initial extraction are processed to survey a broad range of metabolites. Metabolites are separated by different liquid chromatography methods based upon their partition properties. In this method, we present microflow ultra-performance (UP)LC methods, but the protocol is scalable to higher flows and lower pressures. Introduction into the mass spectrometer can be through either general or compound optimized source conditions. Detection of a broad range of ions is carried out in full scan mode in both positive and negative mode over a broad m/z range using high resolution on a recently calibrated instrument. Label-free differential analysis is carried out on bioinformatics platforms. Applications of this approach include metabolic pathway screening, biomarker discovery, and drug development.

Untargeted Metabolomics from Biological Sources Using Ultraperformance Liquid Chromatography-High Resolution Mass Spectrometry UPLC-HRMS

Untargeted metabolomics provides a hypothesis generating snapshot of a metabolic profile. This protocol will demonstrate the extraction and analysis of metabolites from cells, serum, or tissue. A range of metabolites are surveyed using liquid-liquid phase extraction, microflow ultraperformance liquid chromatography/high-resolution mass spectrometry (UPLC-HRMS) coupled to differential analysis software.

Untargeted Metabolomics aus biologischen Quellen Mit UltraPerformance Flüssigkeits-Chromatographie-hochauflösender Massenspektrometrie (UPLC-HRMS)

Here we present a workflow to analyze the metabolic profiles for biological samples of interest including; cells, serum, or tissue. The sample is first ...

Forschung

Chemie

Robust DNA Isolation and High-throughput Sequencing Library Construction for Herbarium Specimens

Herbaria are an invaluable source of plant material that can be used in a variety of biological studies. The use of herbarium specimens is associated with a number of challenges including sample preservation quality, degraded DNA, and destructive sampling of rare specimens. In order to more effectively use herbarium material in large sequencing projects, a dependable and scalable method of DNA isolation and library preparation is needed. This paper demonstrates a robust, beginning-to-end protocol for DNA isolation and high-throughput library construction from herbarium specimens that does not require modification for individual samples. This protocol is tailored for low quality dried plant material and takes advantage of existing methods by optimizing tissue grinding, modifying library size selection, and introducing an optional reamplification step for low yield libraries. Reamplification of low yield DNA libraries can rescue samples derived from irreplaceable and potentially valuable herbarium specimens, negating the need for additional destructive sampling and without introducing discernible sequencing bias for common phylogenetic applications. The protocol has been tested on hundreds of grass species, but is expected to be adaptable for use in other plant lineages after verification. This protocol can be limited by extremely degraded DNA, where fragments do not exist in the desired size range, and by secondary metabolites present in some plant material that inhibit clean DNA isolation. Overall, this protocol introduces a fast and comprehensive method that allows for DNA isolation and library preparation of 24 samples in less than 13 h, with only 8 h of active hands-on time with minimal modifications.

This article demonstrates a detailed protocol for DNA isolation and high-throughput sequencing library construction from herbarium material including rescue of exceptionally poor-quality DNA.

Robuste DNA-Isolierung und Hochdurchsatz-Sequenzierung Bibliotheksbau für Herbar

Herbaria are an invaluable source of plant material that can be used in a variety of biological studies. The use of herbarium specimens is associated with ...

Genetik

PTR-ToF-MS Coupled with an Automated Sampling System and Tailored Data Analysis for Food Studies: Bioprocess Monitoring, Screening and Nose-space Analysis

Proton Transfer Reaction (PTR), combined with a Time-of-Flight (ToF) Mass Spectrometer (MS) is an analytical approach based on chemical ionization that belongs to the Direct-Injection Mass Spectrometric (DIMS) technologies. These techniques allow the rapid determination of volatile organic compounds (VOCs), assuring high sensitivity and accuracy. In general, PTR-MS requires neither sample preparation nor sample destruction, allowing real time and non-invasive analysis of samples. PTR-MS are exploited in many fields, from environmental and atmospheric chemistry to medical and biological sciences. More recently, we developed a methodology based on coupling PTR-ToF-MS with an automated sampler and tailored data analysis tools, to increase the degree of automation and, consequently, to enhance the potential of the technique. This approach allowed us to monitor bioprocesses (e.g. enzymatic oxidation, alcoholic fermentation), to screen large sample sets (e.g. different origins, entire germoplasms) and to analyze several experimental modes (e.g. different concentrations of a given ingredient, different intensities of a specific technological parameter) in terms of VOC content. Here, we report the experimental protocols exemplifying different possible applications of our methodology: i.e. the detection of VOCs released during lactic acid fermentation of yogurt (on-line bioprocess monitoring), the monitoring of VOCs associated with different apple cultivars (large-scale screening), and the in vivo study of retronasal VOC release during coffee drinking (nosespace analysis).

Proton Transfer Reaction Time of Flight Mass Spectrometry allows high-sensitivity, rapid and non-invasive analysis of volatile organic compounds. To demonstrate its potential, we give three examples: lactic acid fermentation of yogurt (on-line bioprocess monitoring), different apple genotypes (large-scale screening), and retronasal space after drinking coffee (nosespace analysis).

PTR-ToF-MS gekoppelt mit einem automatisierten Probenahmesystem und einer maßgeschneiderten Datenanalyse für Lebensmittelstudien: Bioprozessüberwachung, Screening und Nasenraumanalyse

Proton Transfer Reaction (PTR), combined with a Time-of-Flight (ToF) Mass Spectrometer (MS) is an analytical approach based on chemical ionization that ...

Leaf Spray Mass Spectrometry: A Rapid Ambient Ionization Technique to Directly Assess Metabolites from Plant Tissues

Plants produce thousands of small molecules that are diverse in their chemical properties. Mass spectrometry (MS) is a powerful technique for analyzing plant metabolites because it provides molecular weights with high sensitivity and specificity. Leaf spray MS is an ambient ionization technique where plant tissue is used for direct chemical analysis via electrospray, eliminating chromatography from the process. This approach to sampling metabolites allows for a wide range of chemical classes to be detected simultaneously from intact plant tissues, minimizing the amount of sample preparation needed. When used with a high-resolution, accurate mass MS, leaf spray MS facilitates the rapid detection of metabolites of interest. It is also possible to collect tandem mass fragmentation data with this technique to facilitate a compound identification. The combination of accurate mass measurements and fragmentation is beneficial in confirming compound identities. The leaf spray MS technique requires only minor modifications to a nanospray ionization source and is a useful tool to further expand the capabilities of a mass spectrometer. Here, fresh leaf tissue from Sceletium tortuosum (Aizoaceae), a traditional medicinal plant from South Africa, is analyzed; numerous mesembrine alkaloids are detected with leaf spray MS.

Leaf spray mass spectrometry is a direct chemical analysis technique that minimizes the sample preparation and eliminates chromatography, allowing for the rapid detection of small molecules from plant tissues.

Blatt-Spray-Massenspektrometrie: Eine schnelle Ambient Ionisation Technik direkt Metaboliten von Pflanzengewebe bewerten

Plants produce thousands of small molecules that are diverse in their chemical properties. Mass spectrometry (MS) is a powerful technique for analyzing ...

Biochemie

Single-throughput Complementary High-resolution Analytical Techniques for Characterizing Complex Natural Organic Matter Mixtures

Natural organic matter (NOM) is composed of a highly complex mixture of thousands of organic compounds which, historically, proved difficult to characterize. However, to understand the thermodynamic and kinetic controls on greenhouse gas (carbon dioxide [CO2] and methane [CH4]) production resulting from the decomposition of NOM, a molecular-level characterization coupled with microbial proteome analyses is necessary. Further, climate and environmental changes are expected to perturb natural ecosystems, potentially upsetting complex interactions that influence both the supply of organic matter substrates and the microorganisms performing the transformations. A detailed molecular characterization of the organic matter, microbial proteomics, and the pathways and transformations by which organic matter is decomposed will be necessary to predict the direction and magnitude of the effects of environmental changes. This article describes a methodological throughput for comprehensive metabolite characterization in a single sample by direct injection Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry (FTICR-MS), gas chromatography mass spectrometry (GC-MS), nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy, liquid chromatography mass spectrometry (LC-MS), and proteomics analysis. This approach results in a fully-paired dataset which improves statistical confidence for inferring pathways of organic matter decomposition, the resulting CO2 and CH4 production rates, and their responses to environmental perturbation. Herein we present results of applying this method to NOM samples collected from peatlands; however, the protocol is applicable to any NOM sample (e.g., peat, forested soils, marine sediments, etc.).

This protocol describes a single throughput for complementary analytical and omics techniques culminating in a fully-paired characterization of natural organic matter and microbial proteomics in different ecosystems. This approach permits robust comparisons for identifying metabolic pathways and transformations important for describing greenhouse gas production and predicting responses to environmental change.

Single-Durchsatz ergänzende hochauflösende Analysetechniken für die Charakterisierung von komplexen natürlichen organischen Substanz Mischungen

Natural organic matter (NOM) is composed of a highly complex mixture of thousands of organic compounds which, historically, proved difficult to ...

Umwelt

<meta charset="utf8"></head><body>DNA-Barcoding für Heilpflanzen: Identifizierung und phylogenetische Analyse

Application of DNA Barcoding to Identify Medicinal Plants

Medicinal plants are valuable resources globally and are used worldwide to maintain health and treat disease; however, the presence of adulteration obstructs their development. DNA barcoding, a technique for species identification by standard DNA regions, facilitates prompt and accurate identification of traditional medicinal plants. The process of DNA barcoding entails six basic steps: 1) processing the medicinal plants, 2) extracting high-quality total DNA from the medicinal plants using centrifugal column method, 3) amplifying target DNA region internal transcribed spacer 2 (ITS2) with universal primers of plants and performing Sanger sequencing, 4) splicing and aligning sequence to obtain the target sequence, 5) matching the barcode sequence against the barcode library for identification, 6) aligning sequence, comparing intraspecific and interspecific variation, constructing phylogenetic neighbor-joining tree. As shown in the results, the universal primer can amplify the target region. Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) demonstrates the percentage identified was 100%, and the neighbor-joining tree demonstrates that the splicing sequences were clustered with the A. sinensis OR879715.1 clade, and the clade support value is 100. This protocol provides a reference for applying DNA barcoding technology as an effective method to identify medicinal plants and adulterants.

<meta charset="utf8"></head><body>Autor im Rampenlicht: Nutzung der DNA-Barcode-Technologie zur Verbesserung der Effizienz der Identifizierung von Heilpflanzen

The present protocol describes the use of DNA barcoding technology to authenticate plant-based medicinal materials, and the medicinal plant Angelica sinensis (Oliv.) Diels was identified as an example.

Anwendung von DNA-Barcoding zur Identifizierung von Heilpflanzen

Medicinal plants are valuable resources globally and are used worldwide to maintain health and treat disease; however, the presence of adulteration ...

Early Detection of Cyanobacterial Blooms and Associated Cyanotoxins using Fast Detection Strategy

Fast detection of cyanobacteria and cyanotoxins is achieved using a Fast Detection Strategy (FDS). Only 24 h are needed to unravel the presence of cyanobacteria and related cyanotoxins in water samples and in an organic matrix, such as bivalve extracts. FDS combines remote/proximal sensing techniques with analytical/bioinformatics analyses. Sampling spots are chosen through multi-disciplinary, multi-scale, and multi-parametric monitoring in a three-dimensional physical space, including remote sensing. Microscopic observation and taxonomic analysis of the samples are performed in the laboratory setting, which allows for the identification of cyanobacterial species. Samples are then extracted with organic solvents and processed with LC-MS/MS. Data obtained by MS/MS are analyzed using a bioinformatic approach using the online platform Global Natural Products Social (GNPS) to create a network of molecules. These networks are analyzed to detect and identify toxins, comparing data of the fragmentation spectra obtained by mass spectrometry with the GNPS library. This allows for the detection of known toxins and unknown analogues that appear related in the same molecular network.

A fast-multidisciplinarystrategy for early detection of cyanobacterial blooms and associated cyanotoxins is described here. It allows for the detection of cyanobacteria and related cyanotoxins in water samples and in organic matrices, such as bivalve samples, in 24 h.

Früherkennung von Cyanobakterienblüten und assoziierten Cyanotoxinen mit Fast Detection Strategy

Fast detection of cyanobacteria and cyanotoxins is achieved using a Fast Detection Strategy (FDS). Only 24 h are needed to unravel the presence of ...

An Integrated Workflow of Identification and Quantification on FDR Control-Based Untargeted Metabolome

Untargeted metabolomics techniques are being widely used in recent years. However, the rapidly increasing throughput and number of samples create an enormous amount of spectra, setting challenges for quality control of the mass spectrometry spectra. To reduce the false positives, false discovery rate (FDR) quality control is necessary. Recently, we developed a software for FDR control of untargeted metabolome identification that is based on a Target-Decoy strategy named XY-Meta. Here, we demonstrated a complete analysis pipeline that integrates XY-Meta and metaX together. This protocol shows how to use XY-meta to generate a decoy database from an existing reference database and perform FDR control using the Target-Decoy strategy for large-scale metabolome identification on an open-access dataset. The differential analysis and metabolites annotation were performed after running metaX for metabolites peaks detection and quantitation. In order to help more researchers, we also developed a user-friendly cloud-based analysis platform for these analyses, without the need for bioinformatics skills or any computer languages.

We constructed an untargeted metabolomic workflow that integrated XY-Meta and metaX together. In this protocol, we displayed how to use XY-Meta to generate a decoy spectral library from open access spectra reference, and then performed FDR control and used the metaX to quantitate the metabolites after identifying the metabolomics spectra.

Ein integrierter Workflow zur Identifizierung und Quantifizierung von FDR-Kontroll-basierten, ungezielten Metabolomen

Untargeted metabolomics techniques are being widely used in recent years. However, the rapidly increasing throughput and number of samples create an ...

Schnelle Hochdurchsatz-Spezies Identifizierung von Pflanzen von Material mit Direktanalyse in Echtzeit hochauflösender Massenspektrometrie

Zusammenfassung

Weitere Videos entdecken

Kapitel in diesem Video

Untargeted Metabolomics aus biologischen Quellen Mit UltraPerformance Flüssigkeits-Chromatographie-hochauflösender Massenspektrometrie (UPLC-HRMS)

Robuste DNA-Isolierung und Hochdurchsatz-Sequenzierung Bibliotheksbau für Herbar

PTR-ToF-MS gekoppelt mit einem automatisierten Probenahmesystem und einer maßgeschneiderten Datenanalyse für Lebensmittelstudien: Bioprozessüberwachung, Screening und Nasenraumanalyse

Blatt-Spray-Massenspektrometrie: Eine schnelle Ambient Ionisation Technik direkt Metaboliten von Pflanzengewebe bewerten

Single-Durchsatz ergänzende hochauflösende Analysetechniken für die Charakterisierung von komplexen natürlichen organischen Substanz Mischungen

Anwendung von DNA-Barcoding zur Identifizierung von Heilpflanzen

Anwendung von DNA-Barcoding zur Identifizierung von Heilpflanzen

Anwendung von DNA-Barcoding zur Identifizierung von Heilpflanzen

Früherkennung von Cyanobakterienblüten und assoziierten Cyanotoxinen mit Fast Detection Strategy

Ein integrierter Workflow zur Identifizierung und Quantifizierung von FDR-Kontroll-basierten, ungezielten Metabolomen