Quelle: Labors von Dr. Ian Pfeffer und Dr. Charles Gerba - Arizona University
Demonstrierende Autor: Luisa Ikner
Die Qualität des Wassers für den Einsatz in Landwirtschaft, Freizeit- und inländischen Einstellungen bestimmt ist von großer Bedeutung wegen des Potentials für den Ausbruch von Wasser übertragenen Krankheit. Mikrobielle Mittel in solche Ereignisse verwickelt sind Parasiten, Bakterien und Viren, die Schuppen sind in hohen Stückzahlen in den Kot von infizierten Menschen und Tieren. Übertragung auf neue und anfällig für Hosts kann dann über den fäkal-oralen Weg nach Verschlucken von kontaminiertem Wasser auftreten. Daher ist die Fähigkeit, Wasser-Quellen auf das Vorhandensein von pathogenen Mikroorganismen überwachen erhebliche zur Sicherstellung der öffentlichen Gesundheit.
Durch die schiere Anzahl und Vielfalt potentieller fäkal-Oral-Erreger, die in Wasser und deren Variable Konzentrationen vorhanden sein können, ist es unpraktisch und teuer, um direkt für jeden einzelnen von ihnen in regelmäßigen Abständen zu überprüfen. Deshalb beschäftigen die mikrobiologische Assays für die Überwachung der Wasserqualität coliforme Indikatorbakterien. Coliformen umfassen, im Teil, der normale Darmflora von warmblütigen Säugetieren sind apathogen und sind konsequent in den Kot ausgeschieden. Daher bedeutet der Nachweis von coliformen Bakterien im Wasser, dass eine fäkale-Release stattgefunden, und schädliche pathogene Mikroorganismen auch vorhanden sein können.
Die Membran-Filtration-Technik wird verwendet, um die mikrobiologische Qualität des Wassers durch Prüfung für fäkale Indikatorbakterien zu beurteilen. Eine Menge Wasser (z.B. 100 mL) wird durch eine spezielle Membranfilter mit einer minimalen mittleren Porengröße von 0,45 µm, erleichtert die Erfassung von Bakterien, wie sie etwa 1 µm groß sind übergeben. Nach Filtration die Membrane ist sorgfältig auf einem spezialisierten Agarose-Nährmedium aufgebracht, und inkubiert unter den Bedingungen entsprechende Ziel Mikroorganismen Kultur.
Bei Anwendung für den Einsatz in der Überwachung der Wasserqualität ist die Membranfiltration ideal für geringe Trübung Quellen wie Trinkwasser, Schwimmbäder und natürliche Freizeit Gewässer wie Seen und Stauseen. Verschmutzung des Filters werden Gewässer reich an Feinstaub (z.B. Rohabwasser) führen; Daher, nur kleinere Mengen (z. B. 100 mL) analysiert werden kann. Membranfiltration ist auch nicht praktisch für Wasser-Quellen mit zahlreicher Hintergrund (oder nicht-Coliform) Bakterien, die die Schwierigkeit der aufzählen Ziel coliforme Bakterien auf die Agarose mittlere folgende Inkubation erhöhen können.
Dieses Video zeigt die Sammlung von Trinkwasser und Umweltschutz Wasserproben, die Membranfiltration von Proben und die Enumeration von mehreren Arten von fäkalen Indikator Bakterienkolonien mit spezialisierten Agarose Wachstumsmedien einschließlich insgesamt Coliformen, fäkalen Coliformen und fäkale Enterokokken. Weiter Tests durchgeführt, um sicherzustellen, dass die mutmaßliche Kolonien auch gezeigt werden.
1. Wasser Probengewinnung und Verarbeitung
(2) Kolonie Enumeration
(3) Kolonie Überprüfung
Fäkale bakterielle Indikator | Empfohlene Medien (Inkubationstemperatur, Zeit) 1 |
Insgesamt coliformen | LES Endo Agar (35 ± 5 ° C, 24 h) M-Endo-Medium (35 ± 5 ° C, 24 h) |
Fäkalen coliformen | m-FC Medium (44,5 ± 0,2 ° C, 24 h) |
Fäkale Enterokokken | m Enterococcus Agar (35 ± 0,5 ° C, 48 h) |
Tabelle 1. Häufig verwendete Wachstum Nährmedien für die Erkennung von fäkalen Bakterien Indikatoren in Umweltproben
1 Empfehlung der Standardmethoden für die Prüfung von Wasser und Abwasser (American Public Health Asssociation und American Water Works Association, 22Nd Edition, 2012)
Membranfiltration wird in Virus-Abscheidung und Konzentration von Wasser verwendet. Menschliche pathogene Viren tragen eine negative Nettoladung in aquatischen Lösungen und sind häufig auf einem niedrigen Niveau in Wasserquellen. Daher müssen sie vor der Analyse konzentriert werden. Membranfiltration ist aber ein Capture-Methode für diesen Zweck und beschäftigt einen negativ geladenen Filter. Wasserproben (z. B. 1-L) von Interesse mit einer Salzlösung geändert werden (zB. Magnesiumchlorid) vermitteln eine positive Ladung, die Viren, die Adsorption an den negativ geladenen HA Membranfilter dadurch zu erleichtern, da das Wasser gefiltert wird. Eine niedrige Konzentration saure Lösung dient zum Spülen der Membran und loszuwerden überschüssige Salze. Eine niedrige Konzentration und Volumen der Natronlauge wird dann verwendet, um die Viren aus dem Filter vor weitere Konzentrationen und Analysen (z.B. Zelle Kultur Infektiosität Assays oder quantitative PCR) freizugeben.
Membranfiltration wird auch bei der Herstellung von hochreinem Wasser für den industriellen Einsatz genutzt. Viele Branchen erfordern hoch gereinigtes Wasser für ihre betrieblichen Abläufe. Membranfiltration (z.B. Nano-Filtration) dient dazu, die Verunreinigungen einschließlich der gelösten Metalle zu entfernen und Salze aus dem Wasser. Membranfiltration dient auch in der Entsalzung von Meerwasser um zu Trinkwasser zu produzieren.
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