心血管疾病大型动物模型中心脏的解剖技术和组织学取样

物种和个体之间心脏的结构差异以及文献的差异需要对心脏解剖学有透彻的了解并遵守严格的方法。该技术可以提高观察者的均匀性，增加实验性心血管疾病研究的可比性和可重复性。不熟悉这种技术的人可能难以识别心脏的所有组成部分。

我的建议是花一些时间熟悉心脏的解剖结构。由于心脏的复杂解剖结构难以理解，因此需要对该方法进行视觉呈现。首先，在将对象动物放在其左侧的尸检台上之前，对对象动物进行称重。

然后通过检查和触诊皮肤和粘膜对受试者进行外部检查，注意颜色、稠度和体积的所有变化。接下来，用刀在右腋窝做一个锋利的七厘米切口。找到蜥股连接处后，用刀打开囊，切开股骨头韧带。

将腋窝颅骨的皮肤切口延伸到下颌联合，从尾部延伸到腓骨。用手术刀去除皮肤，将胸壁和腹壁从腹侧中线暴露到椎体横突的水平。接下来，使用手术刀和镊子，通过腹壁创建一个皮瓣，腹尾到右肋弓。

然后，沿着右肋骨的尾部，用剪刀打开腹腔。继续沿右腰旁区域向尾部延伸切口，直到髂外嵴。之后，延长切口直至耻骨插入白线，并原位简要检查腹部器官，以注意其颜色、稠度、体积和位置的任何变化。

接下来，使用手术刀和镊子，在最高点刺穿隔膜。然后使用切骨钳，首先切开胸骨旁软骨节段，然后切除肋骨背段，切除肋关节近端的肋骨背段。原位检查心脏，注意其大小、颜色、位置以及与邻近组织的连接。

此外，通过触诊寻找一致性的任何变化。然后，用剪刀打开心包腔，从心脏底部到心脏顶点有纵向切片。检查心包腔和心外膜是否有颜色、稠度和体积的任何变化。

接下来，使用剪刀将上腔静脉切开到右心房入口上方至少一厘米处，保留终颅并产生主动脉、肺干和两个腔静脉的横向切片，从而释放心脏。检查器官的外部轮廓，心外膜的外观，心外膜的透明度以及大血管的外观。要进行心脏夹层的流入-流出法，请将心脏心房朝上放置，并使用剪刀和无齿镊子，从尾腔静脉宽切到右心房。

切开心脏至右耳附肢以露出终末嵴或窦房结后，从背视图检查三尖瓣。然后，通过从右心房切开到右心室和室间隔之间交界处的切片，显示右房室瓣膜。接下来，沿室间隔切开右心室游离壁，直到肺干的起源。

在彻底检查右房室瓣膜（包括腱索肌腱和肌）后，切开腱索。接下来，将镊子沿肺干放置并纵向切开躯干以检查肺流出道、肺干起源和半月瓣。要从背视图检查二叶瓣，请从肺静脉切开左心房至左耳尖。

接下来，将心脏置于心室间隔朝下，并在心室游离壁上从心室底部到心尖做一个大切口。然后，切开左房室瓣尖的脊索肌腱。最后，通过将镊子通过左心室流出道来打开主动脉。

使用生理盐水去除所有血凝块并称量心脏。对于组织学取样，首先，用手术刀进行两次纵向平行切口，相距约 5 毫米，手术刀涉及右心房、三尖瓣和右心室游离壁。接下来，进行两次类似的平行切口，涉及左心房、二尖瓣、背肌和左心室。

在心脏背侧上三分之一内，沿着一条线横向剖断心脏底部，包括室间隔、右心房、主动脉、主动脉瓣和三尖瓣。并做两个平行的纵向切口，涉及主动脉底部和室间隔。然后，修剪末端吲啪周围的右心房。

为了获得窦房结的六块，制作几个平行的截面，相距约三到四毫米，横向定向于嵴的纵轴。接下来，将获得的组织修剪在组织学盒中，并将组织浸入10%中性缓冲福尔马林中至少48小时。要对冠状动脉进行取样，请使用镊子和手术刀从锥旁沟解剖冠状动脉，并将其固定在 10% 中性缓冲福尔马林中过夜。

如果需要，在8%甲酸和盐酸的一对一混合物中使组织脱钙。接下来，进行几个相距约三毫米的横向切口。将切片放入组织学盒中，并将盒放入 10% 中性缓冲福尔马林中包埋。

将心脏固定在10%中性缓冲福尔马林中至少48小时后，放置两个无齿直解剖钳。一个通过颅腔、右心房、三尖瓣和右心室。另一个通过肺静脉、左心房、二尖瓣和左心室。

利用镊子之间的空间作为引导，使用切割刀片从心脏的底部切割到顶点。相距约五毫米，切开包括主动脉在内的心脏段的另一个纵向部分。然后，将心脏基底与心尖完全分开。

将每个组织片段放入组织学盒中后，将盒式磁带置于10%中性缓冲福尔马林中直至包埋。该协议能够成功可视化心脏的外部特征和内部结构。使用这种技术，可以成功地收集心脏组织样本，用于狗和猫等不同动物的组织学研究。

释放心脏时要小心，因为它可能会损坏一些感兴趣的结构。而且，在解剖、收获和嵌入窦房结期间。虽然这种方法是为了诊断心律失常建模、肥厚性心肌病、心肌梗塞和心脏中毒而创建的，但它可用于诊断任何心脏病。