该方法描述了多电解复式微晶硅体的设计、组装和表征的全路径，这些微晶硅是由相反带电聚合物的自组装形成的纳米粒子。聚分子自组装的一些主要挑战是避免动力学陷阱和纳米粒子的特性。我们描述的盐退火技术允许在尺寸和形状上具有低分散性的麦克风的可重复组装，我们描述了包括光散射、小角度X射线散射和电子显微镜在内的表征方法。
提供治疗性核酸是纳米医学的长期挑战。这些多电聚细胞复合细胞利用核酸的强负电荷，将它们隔离在中性聚合物日冕保护它们免受核酸酶和免疫反应的细胞核心中。装配方法应适用于任何类型的带电聚合物。
我们已经用几种聚物和聚物测试了它们，表征方法应适用于任何自组装的纳米粒子，包括表面活性纳米粒子和其他水磷驱动系统。首先在70摄氏度下孵育寡核苷酸溶液5分钟。孵育后，在室温下冷却15分钟，对核酸进行热退，然后加入40微升20毫摩尔电浓度二块共糖。
立即对溶液进行涡旋，并在室温下孵育五分钟。要执行盐退火，在寡核苷酸溶液中加入氯化钠溶液，最终浓度为一摩尔，以最高速度旋转10秒。在室温下孵育混合物10分钟，然后继续装入透析盒。
在装入之前，用永久标记标记墨盒，并在缓冲液中浸泡至少两分钟，以滋润膜。通过逆时针旋转去除盖，并使用凝胶加载移液器尖端装载样品。轻轻挤压膜以去除多余的空气并更换盖。
将墨盒放入 1X PBS 0.5 摩尔氯化钠透析浴中，确保它们漂浮在两个膜暴露在浴池中。24 小时后，将墨盒转移到 1X PBS 中，然后再浸泡 24 小时。最后透析后，通过从浴池中取出墨盒、取下盖子以及用凝胶加载移液器尖端取出样品来回收样品。
将样品放入干净的 1.5 毫升微离心管中，然后冷藏至使用。根据手稿方向在 DLS 仪器中准备样品，然后获取数据至少一分钟，确保计数速率在整个采集时间内保持不变。检查自动关联数据。
长时间基线应为平面，自相关曲线应平滑且散点最小。通过获取更多数据，可以改善数据中的噪声。若要使用 Irena 执行数据缩减和分析，请从在后台数据集中导入 micelle 开始。
在日志刻度上绘制样本和背景，并计算样本与背景的比率，并验证高 Q 无症状。计算此 Q 范围内的平均比率，并使用数据操作宏使用计算比率缩放背景。然后绘制 Q 上的背景减去信号，然后用新名称保存数据，确保不覆盖原始数据。
打开建模宏，然后加载和绘制背景减去的数据。要查找聚细胞复杂微米（PCM）外部表面的近似模型，请在数据控件中选择到中等 Q 范围的流，以确保在存在振荡时包括振荡。在模型控件中，选择第一个散射总体，并确保它是唯一正在使用的散射总体。
为模型选择大小分布，选择所需的分布类型，然后选择外形规格。此示例用于必须在用户外形下手动添加的柔性气缸。下载并添加灵活的气缸外形，然后输入分别对应于气缸长度和库恩长度的参数 1 和 2 的函数名称和初始值。
这些气缸比 SAXS 可以解析的要长，因此气缸长度参数固定在大值。通过在比例、平均大小和宽度字段中输入值来设置搜索的初始参数。然后单击计算模型以绘制生成的外形因子。
找到合理的参数后，单击拟合模型以执行与数据拟合的非线性最少平方。接下来，对PCM核心内单个聚合物的散射进行建模。调整数据控件以选择发生多余散射的 Q 范围，该范围通常位于中高范围内。
添加第二个散射总体，并确保它是唯一正在使用的人口。为模型选择统一级别，调整 GDA 因子 G 和 RG，以确保模型不会预测低 Q 时过度散射，并使用游标宏之间的拟合 PB 获取这些参数的初始猜测。至于外形，对统一水平模型执行非线性拟合。
如果存在衍射峰值，则为 Q 感兴趣范围内的衍射峰值添加第三个模型。一旦获得单个散射量的近似拟合值，则将所有三个点合一打开并优化组合拟合。最后，检查每个值在物理上是否合理，并通过在文件夹中选择存储来保存拟合。
此过程的结果应该是一个复合模型，该模型描述小角度 X 射线散射数据，以及大范围的大小尺度。该协议用于设计、组装和表征核酸聚细胞复合米特尔或PCM。 Micelle芯大小主要由块共聚物带电块的长度驱动，并且在很大程度上与同聚物的长度无关。
为短单链寡核苷酸中相对长的块共聚合物形成的球形PCM采集了动态光散射数据。自相关函数衰减为具有单个时间刻度的平面值，从而在 repIS 大小分布中生成单个大小峰值。复杂的小天使 X 射线散射或 SAXS 强度光谱可以通过结合存在的多个空间相关性模型来精确拟合，多角度光散射可用于将散射测量扩展到更长的长度尺度。
不同形态的PCM也可以用电子显微镜进行成像，以验证核心半径和形状是否与拟合SAXS数据获得的值一致。安装 SAXS 数据时，请务必考虑每个散射特征，并使用 TEM 等免费方法确保使用正确的外形规格。
