مثل الثدييات ، يتم إنشاء عدد الألياف العضلية ، وهو محدد رئيسي لكتلة العضلات النهائية أثناء تكوين جنين الدواجن. تسمح هذه الطريقة للباحثين بدراسة الدواجن في تكوين عضلات البويضة والتلاعب بتضخم ألياف العضلات. تتطلب هذه التقنية القليل من الاستثمار في المعدات وهي طريقة سهلة ومنخفضة التكلفة نسبيا لدراسة التلاعب بتكوين العضلات.
قد يكافح الباحثون الجدد في هذه التقنية في احتضان البيض بشكل صحيح. إظهار هذه التقنية سيكون أنا ومورغان غريفلي ، وكلاهما من طلاب الدراسات العليا في ماجستير العلوم في مختبرنا. قبل البدء في التجربة ، افحص البيض ذي النوعية الرديئة وتخلص منه.
قم بتعيين وتسجيل أرقام البيض الفردية للبيض المحدد ثم قم بوزن البيض. بعد ذلك ، ضع البيض في صينية الحضانة المناسبة ، واحتضنه مسبقا عند 26.6 درجة مئوية مع رطوبة نسبية 40٪ لمدة ست ساعات. بعد الحضانة ، قم بزيادة درجة حرارة الحاضنة والحفاظ عليها عند 37 درجة مئوية مع رطوبة نسبية 40٪ حتى يوم الحضانة 18.
قم بقياس درجة حرارة سطح عدة بيضات في جميع أنحاء الحاضنة مرتين يوميا باستخدام ميزان حرارة سطحي حراري لضمان درجة حرارة سطح البيض 37 درجة مئوية. استمر في إعادة وضع البيض عن طريق الدوران كل ساعة. لضمان فقدان وزن البيض بنسبة 10٪ إلى 12.5٪ ، سجل أوزان البيض يوميا خلال أول 18.5 يوما من الحضانة.
في اليوم 10 من الحضانة ، قم بإعداد محلول ريبوسيد نيكوتيناميد اللازم لكل 100 ميكرولتر في معالجة حقن البويضة كما هو موضح في المخطوطة والحفاظ على المحاليل عند 37 درجة مئوية في حمام مائي. بعد إزالة البيض صينية واحدة في كل مرة من الحاضنة ، وتغطيتها بمنشفة دافئة ، شمعة كل بيضة لتحديد موقع كيس صفار البيض. نظف منطقة الحقن بالإيثانول بنسبة 70٪ قبل إدخال إبرة معقمة بقياس 20 سم 2.54 سم تحت الجلد بعمق سنتيمتر واحد في قشرة البيضة لحقن الجرعة المخصصة من علاج ريبوسيد نيكوتيناميد مع 100 ميكرولتر من محلول ملحي معقم في كيس صفار البيض.
غطى موقع الحقن على الفور بقطعة صغيرة من الشريط المقاوم للماء المطلق لتجنب فقدان الرطوبة المفرط. بمجرد أن يتلقى جميع البيض علاجه ، ضع الدرج مرة أخرى في الحاضنة. في يوم الحضانة 18 ، قم بإزالة البيض من الصواني لوضعه في صناديق الفقس المخصصة وفقا لمعالجاتها ، ثم ضع صناديق الفقس في الحاضنة مع زيادة الرطوبة إلى 60٪ حتى يفقس كل البيض أو حتى اليوم 23 من الحضانة.
قبل جمع العينة، حدد التاج لتقاوم طول الكتاكيت التي تم قتلها الرحيم عن طريق وضع الفرخ على جانبه مع رأس مدسوس لأسفل والساقين تحت الجسم وقياس الطول من أعلى الرأس إلى الذيل، ثم قياس عرض الرأس من ثقب أذن إلى ثقب أذن آخر في طول الرأس من الجزء الخلفي من المنقار إلى الجزء الخلفي من الجمجمة. لتقييم محيط الرأس ، لف خيطا غير مرن حول الجمجمة من ثقب أذن إلى آخر ، ثم احصل على قياس السلسلة بمسطرة مترية. بنفس الطريقة ، حدد محيط الصدر عن طريق لف سلسلة حول الصدر تحتها حيث تلامس الأجنحة الجسم قبل وضع الخيط على مسطرة مترية للحصول على القياس.
رش ثدي الفرخ بنسبة 70٪ من الإيثانول ، وبالأصابع ، اسحب الريش والجلد للكشف عن العضلات الرئيسية الصدرية تليها أخذ القياسات باستخدام الفرجار الرقمي. قياس عرض الصدر عبر الصدر حيث تلامس الأجنحة الجسم وطول الصدر من أسفل الترقوة إلى أعلى وسادة الدهون. لاستخراج العضلة الصدرية الرئيسية اليمنى، استخدم المقص الجراحي أو المشرط والملقط لقطع عظم العارضة قبل إطلاق العضلات من جدار الجسم.
بعد إزالة العضلة الصدرية الرئيسية، ضع العضلة مسطحة على عصا المصاصة لجمع القياسات باستخدام الفرجار الرقمي. تعرف على طول العضلات من الجمجمة إلى الجزء الذيلي من العضلات وعرض العضلات في أوسع جزء من الجزء القحفي من العضلات. لتحديد سمك العضلات ، التقط الثدي باستخدام الملقط وقياس الجزء الأكثر سمكا من القسم القحفي من العضلات.
عند الانتهاء من القياسات ، يمكن تخزين العضلات الرئيسية الصدرية اليمنى واليسرى لمزيد من التحليلات عند درجة حرارة 80 درجة مئوية تحت الصفر لمدة تصل إلى عام. تم حقن الأجنة بأربع جرعات من ريبوسيد نيكوتيناميد أو جرعة لدراسة تأثير التغذية البيضوية. لوحظ أنه لم تكن هناك آثار جرعة على وزن الجسم من اليوم 18 الأجنة والكتاكيت الفقس.
وبالمثل ، لم يتم الكشف عن أي آثار جرعة على قياسات العضلات الرئيسية الصدرية لجميع الأجنة 18 اليوم. بالنسبة للكتاكيت الفقس ، لم تكن هناك تأثيرات جرعة على قياسات طول العضلات وعرضها الرئيسية في الصدر . ومع ذلك ، أثرت الجرعة على وزن العضلات وعمقها.
كانت الكتاكيت التي تطورت من الأجنة التي لم يتم حقنها مع ريبوسيد نيكوتيناميد تحتوي على عضلات رئيسية صدرية تزن أقل من الكتاكيت من الأجنة التي تم حقنها ب 501،000 ملليمولار نيكوتيناميد ريبوسيد. كان لدى الكتاكيت من الأجنة التي تم حقنها بصفر و 250 ملليمولار نيكوتيناميد ريبوسيد عمق رئيسي أقل من الكتاكيت من الأجنة التي تم حقنها ب 501،000 ملليمولار نيكوتيناميد ريبوسيد. المفتاح لتنفيذ تجربة قوية هو اختيار بيض خال من العيوب وموحد.
سيضمن ذلك تحفيز جميع الآثار على العلاج. مع حصاد العضلات الرئيسية الصدرية ، يمكن استخدام الأنسجة لقياس مورفومترات الألياف العضلية ، ويمكن استخراج الحمض النووي الريبي الكلي والبروتين لتحليل التعبير الجيني والبروتين. نحن ندرس حاليا آثار هذه التكنولوجيا على أداء النمو في جودة اللحوم الطازجة للطيور المعالجة.
