هذا البروتوكول مهم لأنه ينتج أفضل نموذج ممكن لارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي. لا يوجد نموذج آخر ينتج الآفات البليكية الموجودة في المرضى PAH الإنسان. الميزة الرئيسية هي أننا نضاعف تدفق الدم في الرئة اليمنى والشريان الرئوي ، مما يسبب تلفًا رئويًا وإجبار الرئتين على العمل مرتين.
وقد طورت مجموعتنا نموذجًا عالي الكفاءة لارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي لتطوير العلاجات. إلى جانب ارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي، يمكن أن تكون هذه الطريقة مفيدة في الطب التجديدي ويمكن أن تعطي نظرة ثاقبة لأمراض أخرى مع زيادة التدفق الرئوي مثل عيوب القلب الخلقية أو مرضى ما بعد استئصال الرحم. بالنسبة لشخص لم يسبق له أن قام بهذه التقنية ، نصيحتي هي اتباع البروتوكول بالضبط والتأكد من أن الجراح يمكنه رؤية ما يفعلونه بالضبط.
بعد تخدير الجرذ مع 4٪ isoflurane، يتم تنبيب الحيوان باستخدام gooselight الألياف البصرية لإلقاء الضوء على القصبة الهوائية. أدخل قسطرة من 16 قياساً في الحنجرة، واستخدم مرآة باردة لمراقبة تكثيف الرطوبة في التنفس الزفير من القسطرة لتأكيد النوباض. توصيل الفئران إلى جهاز التنفس الصناعي ووضع الفئران تحت المجهر في موقف ديسوبيتوس الحق على وسادة التدفئة درجة مئوية 37.
تأمين forelimbs مع الشريط، واستخدام المقصات لحلق الصدر الأيسر من وراء الساق الأمامية إلى نهاية القفص الصدري. تنظيف الجلد المكشوف مع ثلاثة متتابعة 10٪ povidone اليود حل و 70٪ مناديل الإيثانول, ووضع oximeter نبض على قدم الفئران لمراقبة معدل ضربات القلب وتشبع الأكسجين طوال الجراحة. الآن، ضبط المجهر وجلب وجهة النظر الجراحية في التركيز.
ثم، وضع ستائر معقمة على جسم الجرذ وصينية الصك لخلق بيئة معقمة. وأخيرا، وضع أدوات عقيمة على علبة الصك العقيمة. لإجراء عملية استئصال الرحم الأيسر، استخدم مقص كولي مايو وملقط الأنسجة جيرالد لقطع ثقب سنتيمترين إلى ثلاثة سنتيمترات في الستارة الجراحية، واستخدام شفرة جراحية لإجراء شق عرضي طوله سنتيمترين في الصدر الأيسر.
استخدم مقص كولي مايو لقطع كل طبقة من الأنسجة حتى تتعرض الأضلاع والعضلات النترية. استخدام البعوض لجعل ثقب من خلال عضلة الفضاء الثالث الوربي. باستخدام مسبار مزدوج النهاية، حرك الرئة لتصور الشريان الرئوي، واستخدام مقص ماكفيرسون-فاناس إيريس لفتح العضلات النترية إلى عرض حوالي 1 إلى 2 سنتيمتر.
ضع ناقلًا صغيرًا محتفظًا ذاتيًا في الجنب الأيسر ليمسك الأضلاع والعضلات مفتوحة ، وحرك الرئة اليسرى إلى أسفل البطن للسماح بالوصول إلى الشريان الرئوي والنياضب. بالنسبة لـ الربط بين القصبات الهوائية الرئيسية اليسرى والشريان الرئوي ، أولاً ، قم بتحميل Hemoclip متوسط في قضيب مقطع الربط واستخدام ملقط Wangensteen atraumatic لرفع الجزء العلوي من الرئة اليسرى بعناية لفضح الشريان الرئوي. أغلق المقطع والمطبّق حول الشريان، مع الحرص على عدم إغلاق أو تمزق الوريد الأيسر من أزيغوس.
وفتح شق مزيد من استخدام اللوزتين لفصل الألياف العضلية. بعد تحميل آخر Hemoclip المتوسطة في قضيب مقطع الربط، واستخدام ملقط اتورامية والملقط الأنسجة القياسية لرفع الجزء السفلي من الرئة للخروج من شق حتى يتم تصور القصبات الرئيسية اليسرى والوريد الرئوي الأيسر. ligate بعناية القصبات الرئيسية اليسرى والوريد الرئوي جنبا إلى جنب مع Hemoclip الثانية، واستخدام مقص لإزالة الرئة دون قطع أو تمزيق مقطع.
ثم استخدم قطعة صغيرة من الشاش المعقم لامتصاص أي دم ووقف أي نزيف. استخدم حامل الإبرة وخياطة البرلين 4-0 لإغلاق الأضلاع والعضلات الوربية. قبل إغلاق العضلات الوربية، أدخل قسطرة قياس 16 في تجويف الصدر بعيدا عن الشق الجراحي وفي الفضاء الوربي السابع، وإزالة الإبرة على الفور، وترك القسطرة في مكانها.
ضع خياطة 5-0 في الجلد وحول أنبوب الصدر بحيث عندما يتم إزالة أنبوب الصدر ، سيتم ربط الثقب مغلقًا ، وربط الغرز لإغلاق الأضلاع. أغلق الجلد والمساحة تحت الجلد مع خياطة 5-0 الجارية، واستخدام حقنة ثلاثة ملليلتر لإخلاء الهواء من تجويف الجنبي من خلال القسطرة لاستعادة الضغط السلبي الطبيعي في الصدر. استخدم حامل إبرة لتشبك على الفور القسطرة لمنع الهواء من العودة إلى تجويف الصدر.
إزالة القسطرة وربط الغرزة لإغلاق الحفرة. في استئصال الرحم و المجموعة أحادية التكريكلين ، يتطور ارتفاع ضغط الدم الرئوي الحاد بحلول اليوم 21 ، كما يتضح من زيادة في متوسط ضغط الشريان الرئوي مقارنة بالسيطرة على الحيوانات الشامية غير المعالجة. في عملية استئصال الرحم بالإضافة إلى مجموعة سوغن، يكون متوسط ضغط الشريان الرئوي أعلى بثلاث مرات من ضغطه في مجموعة التحكم.
الضغط الانقباضي البطيني الأيمن هو أيضا أعلى بكثير في كل من الحيوانات المعالجة أحادية الcrocroline و Sugen، مقارنة بمجموعة التحكم. في الهماتوسلين ويوسين ملطخة العادية أقسام أنسجة الرئة الفئران، والمسافات بين الحويصلات والهياكل السنخية واضحة، والأوعية واضحة وسمك طبيعي. في الرئة ارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي، وهناك أدلة على إعادة عرض، سماكة جدران السفينة، وانقباض حاد من الأوعية، والتهاب والتهاب الشريان الرئوي البؤري.
على الحيوان أن يعوض عن فقدان رئة، لذا من المهم أن يكون صبوراً خلال فترة النقاهة. مراقبة العلامات الحيوية وإعطاء المزيد من الأوكسجين أو حجم الرئة حسب الضرورة. Sugen يخلق المبرمج البطانية التي هي علامة سريرية ذات الصلة من ارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي.
وقد مهد نموذج استئصال الرحم الأيسر في القوارض الطريق أمام العلماء لدراسة تشوهات التدفق وتطوير علاجات جديدة لارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي. بسبب استخدام ايزوفلوران، سوغن، و / أو MCT في هذا النموذج، يجب ارتداء معدات الحماية الشخصية في جميع الأوقات.
