والحرمان من النوم المزمن في الماوس الجراء عن طريق لطيف المناولة

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال النوم مثل تأثير قيود النوم المزمنة أثناء تطور ما بعد الولادة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هو أنه أقل إرهاقا من غيرها من تقنيات الحرمان من النوم ويمكن بسهولة أن تستخدم في جميع مراحل التنمية وتستمر في مرحلة البلوغ. تبدأ بتعيين كل قفص إما إلى الحرمان من النوم أو مجموعة التحكم.

تأكد من أن الفئران لديها إمكانية الحصول على الغذاء والماء الإعلانية libitum، وإزالة أي الغذاء، الفراش، أو الكائنات الإثراء التي قد تحد من وجهة نظر الفئران. بالنسبة لمجموعة التحكم، قم بإزالة المولى من قفص المربي في اليوم الخامس بعد الولادة واترك السد مع الجراء حتى الفوم. بعد ذلك ، قم بتحريك الفئران المخصصة لمجموعة التحكم إلى غرفة الحرمان من النوم وثني الفئران بلطف باستخدام فرشاة الطلاء بشكل مستمر لمدة 10 دقائق يوميًا طوال مدة التجربة.

بعد 10 دقائق ، عد الفئران إلى غرفة احتجاز الحيوانات ولا تزعجها. تبدأ عن طريق إزالة المولى من قفص مربي في اليوم التالي للولادة خمسة وترك السد مع الجراء حتى فتوم. نقل الفئران المخصصة لمجموعة الحرمان من النوم إلى غرفة الحرمان من النوم يوميا خلال دورة الضوء حيث سيتم رصدها.

خلال هذا الوقت، حث بلطف الماوس مع فرشاة الطلاء إذا اشتبه في كونه نائما حتى يتم ملاحظة استجابة. بدلا من ذلك، عكس الفئران ودفع أكثر على ظهورهم لتعطيل النوم. اعتبر الماوس نائمًا إذا حدث أي مما يلي: الارتعاش أو الخمول أو إذا كانت العينان مغلقتين.

النظر في الفئران لتكون مستيقظا إذا كانوا يتحركون حولها، في محاولة لقلب أكثر بعد أن كان على ظهورهم، أو الاستمالة أنفسهم. إذا كان السد يغطي الجراء أثناء الحرمان من النوم ، حثها بلطف بعيدًا عن الجراء ، وبالتالي فإن منظر الجراء غير مقيد. استمر في بروتوكول الحرمان من النوم حتى نقطة النهاية للتجربة.

عندما تكتمل فترة الحرمان من النوم لمدة ثلاث ساعات، ضع الفراش وأي طعام قد يكون تم إزالته مرة أخرى ووضع الغطاء مرة أخرى على القفص. وأخيراً، إعادة أقفاص إلى غرفة احتجاز الحيوانات حتى اليوم التالي من الحرمان من النوم. بعد فترة انتعاش شهر واحد، أشارت النتائج إلى أنه في اختبار المؤانسة، أمضت الإناث المقيدة وقتًا أطول في استنشاق الفأر الغريب أكثر من التحكم بالإناث، وكان لدى الذكور المقيدين أثناء النوم ميلًا إلى قضاء المزيد من الوقت في استنشاق الجسم عند مقارنتها بـتحكم الذكور.

وعلاوة على ذلك ، في مرحلة الجدة الاجتماعية للاختبار ، والنوم المقيد الفئران الإناث قضى كمية متزايدة من الوقت استنشاق الماوس الرواية من الضوابط الإناث. أثناء محاولة هذا الإجراء، من المهم أن تتذكر الانتباه والاستجابة الفورية لسلوكيات ما قبل النوم، خاصة في الفئران الوليدية حيث تكون الحاجة إلى النوم مرتفعة. بعد هذا الإجراء، يمكن تنفيذ طرق أخرى مثل الحقل المفتوح، rotarod، مرتفعة بالإضافة إلى متاهة، واختبار السلوك الاجتماعي من أجل الإجابة على أسئلة إضافية مثل الآثار السلوكية على المدى الطويل من تقييد النوم المزمن أثناء التنمية.