Name: observation and quantification of mating behavior in the pinewood nematode, bursaphelenchus xylophilus
Uploaded: 2016-12-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 55 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Observation and Quantification of Mating Behavior in the Pinewood Nematode, Bursaphelenchus xylophilus at JoVE.com

ساهم Najie تشو ولى تشون باي بالتساوي على هذا العمل. وأيد هذا العمل ماليا من الصندوق الخاص للبحوث العلمية الغابات في النفع العام (201204501) ومؤسسة العلوم الطبيعية الوطنية الصينية (31170604، 31270688، 31570638 و). نشكر الدكتور جيريت Holighaus والدكتور دانييل Hickford للحصول على اقتراحات مفيدة على الكتابة باللغة الإنجليزية.

1. اكتساب العذراء الديدان الخيطية الكبار <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غابة الصنوبر عزل النيماتودا والظروف والثقافة ملاحظة: إن B. xylophilus عزل تم استخراج Nxy61 أصلا من massoniana صنوبر المريضة في منطقة نينغبو بمقاطعة تشجيانغ في الصين. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد البطاطس سكر العنب آجار (PDA، انظر الجدول من المواد) لوحات لزراعة عفن رمادي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للتلقيح، لكمة قطعة من حصير الفطرية بقطر 10 مم من حصيرة ب السنجابية ووضعها في منتصف لوحة PDA جديدة. ثقافة السنجابية B. لمدة 5 د عند 25 درجة مئوية في الظلام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثقافة النيماتودا غابة الصنوبر في طبق بتري استعداد تحتوي B. السنجابية عند 25 درجة مئوية في الظلام. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اكتساب B. xylophilus البيض <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع أنبوب المطاط فرضت دون قمع وعقد قمع مستعد في رف لتجميعجهاز قمع بيرمان. وضع طبقتين من ورق الترشيح بدلا من الشاش في الفم من القمع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الثقافات الفطرية لإعداد قمع ويضاف الماء حتى يتم مغمورة حصيرة الفطرية. الانتظار 2 ساعة، وسوف يخرج الديدان من ثقافة فطرية، عبر ورقة الترشيح، ويستقر في أدنى جزء من قمع بيرمان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع أول زوجين من قطرات من الماء من أسفل أنبوب في أنبوب 15 مل وجمع الديدان الخيطية عن طريق الإفراج عن ببطء المشبك على الأنبوب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أجهزة الطرد المركزي المجموعات المذكورة أعلاه في 3000 x ج لمدة 2 دقيقة في RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الطبقة العليا من المياه مع ماصة و resuspend مع 1 مل من معقم مزدوج المقطر (دد) H 2 O. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع ماصة، ونقل إعادة تعليق أعلاه إلى زجاج جديد طبق بتري (6 سم القطر). إضافة 3 مل من معقم د د H 2 O إلى طبق بيتري للتأكد من أن الديدان الخيطية هي قادرة على السباحة بحرية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حفاظ على الديدان الخيطية في الزجاجق طبق بيتري لمدة 10 دقيقة في درجة حرارة 25 درجة مئوية في الظلام. سيتم وضع البيض من قبل الإناث الحوامل. بسبب سطح بروتين سكري، وسوف البيض التمسك السفلي من الزجاج طبق بيتري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الماء والديدان بعناية، من دون إزعاج البيض. إضافة 3 مل من معقم د د H 2 O على الزجاج طبق بيتري على الفور لمنع البيض من الجفاف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوة 1.2.8 3X لإزالة جميع اليرقات والكبار، والحصول على البيض النقية. إضافة اضافي 2 مل (5 مل في المجموع) من المعقم د د H 2 O إلى طبق بيتري. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الاستحواذ على الأحداث الرابعة من مرحلة (اليرقات J4) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يفقس البيض التي تم جمعها لمدة 24 ساعة في الظلام عند 25 درجة مئوية للحصول على J2 اليرقات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل اليرقات J2 مع ماصة إلى 15 مل أنبوب، الطرد المركزي في 3000 x ج لمدة 2 دقيقة، وإزالة الطبقة العليا من المياه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Resuspend واليرقات J2 مع 200 ميكرولتر من العقيمة د د H 2 O، ومن ثم نقلها إلىلوحة PDA يحتوي B. السنجابية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثقافة اليرقات J2 لمدة 52 ساعة عند درجة حرارة 25 درجة مئوية في الظلام. عند هذه النقطة الزمن، وتطورت معظم اليرقات J2 في مرحلة مبكرة من J4 اليرقات. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحصول على الديدان الخيطية الكبار البكر <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد إبرة لالتقاط الديدان الخيطية عن طريق رسم الزجاج الشعرية بعد تسخينه على موقد الكحول. ملاحظة: غيض من هذه الإبرة الشعرية تحتاج عادة لتكون 50 ميكرون في القطر، ما يقرب من العرض الجسم من الديدان الخيطية الكبار، بحيث يمكن استخدامه كأداة لالتقاط الديدان الخيطية واحدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجميع قمع بيرمان واستخراج الديدان الخيطية من الثقافات الفطرية لمدة 2 ساعة، كما هو موضح في الخطوات 1.2.1 - 1.2.3. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل J4 مع الماء في طبق بيتري نظيفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة الديدان الخيطية تحت مجهر تشريحي والتمييز بين الذكور والإناث من قبل التشكل الأعضاء التناسلية، كما وصفها ماميا وKiyohara 8 (الشكل 1 </stronز&gt;). التقاط الديدان الخيطية من الجنس المطلوب مع إبرة الشعرية الجاهزة وتحويلها إلى لوحة الفطرية الثقافة المناسبة للذكور أو الإناث. ملاحظة: هناك أكثر من الإناث أكثر من الذكور، مع نسبة الإناث في 60-70٪. الفرج الإناث مختلف كليا من الشوكة الذكور. بالمقارنة مع البالغين، والشوكة أو الفرج في مرحلة مبكرة J4 أصغر، لكنها ما زالت قائمة يمكن بسهولة رأيت وتميزا. الديدان الخيطية يتحرك دائما في الماء، مما يزيد في بعض الأحيان صعوبة في التمييز الذكور والإناث. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثقافة اليرقات J4 لمدة 24 ساعة أخرى في درجة حرارة 25 درجة مئوية في الظلام. ملاحظة: يجب على جميع النيماتودا تتطور إلى البالغين، ولكن لأنها unmated، أنها تعتبر البالغين البكر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجميع اثنين بيرمان مداخل واستخراج البالغين البكر من الثقافات الفطرية لمدة 2 ساعة، كما هو موضح في الخطوات 1.2.1 - 1.2.3، ونقل الذكور البالغين البكر والإناث إلى قسمين، أطباق بتري نظيفة منفصلة. </li></oل&gt; </li></ol> 2. رصد وتسجيل الفيديو من سلوك التزاوج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد عدة شرائح مقعرة وإضافة 200 ميكرولتر من العقيمة د د H 2 O لكل من آبارهم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التقاط استعداد البكر الذكور البالغين أو والإناث مع إبرة الشعرية ووضع الديدان الخيطية واحد فقط في الماء من كل شريحة مقعرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إبقاء البالغين البكر داخل البئر لمدة 1 ساعة للسماح لهم التكيف مع البيئة المائية الجديدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> زوج من الذكور والإناث البكر عن طريق نقل واحد منهم من بئر واحد إلى آخر باستخدام ماصة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة سلوك التزاوج من 1♀ + 1♂ الجمع في الشريحة المقعرة تحت مجهر تشريحي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتحليل كفاءة التزاوج من البالغين البكر، وحساب نسبة نجاح التزاوج (R) ومقارنتها مع أن من الأزواج الكبار تم اختيارها عشوائيا. حساب R كنسبة مئوية من مكررات حيث لوحظ الجماع مقارنة مع العدد الإجمالي للمكررات دراستها. </li><li&gt; لتحقيق خيار التزاوج والمنافسة intrasexual، مجموعة ومراقبة الديدان الخيطية العذراء اثنين من مجموعات مختلفة: 1♀ + 3♂ و3♀ + 1♂. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من أجل جمع البيانات للتحليل الكمي والكيفي، تصوير سلوك التزاوج باستخدام المجهر الفيديو. عادة، يتم الانتهاء من عملية التزاوج كلها، من الوقت الذي يتم وضعها النيماتودا في بئر الشريحة المقعرة لحظة عندما تتحرك بعيدا بعد الجماع، في غضون 2 ساعة. ولذلك، تسجيل عملية التزاوج مستمر لمدة 2 ساعة على الأقل كما مكررة واحدة. كاملة لا يقل عن 30 مكرر مجموع لكل تركيبة. ملاحظة: إضافة أكثر عقيمة ي H 2 O (عادة 50 ميكرولتر) كل 0.5 ساعة إلى البئر لتعويض التبخر أثناء عملية التسجيل. </li></ol> 3. جمع البيانات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عرض جميع مقاطع الفيديو بدقة على شاشة الكمبيوتر وتوصيف سلوكيات الفرعية نوعيا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس مدة عشر التزاوج باستخدامه وظيفة الإطار حسب الإطار من مسجل الفيديو. طرح الوقت بدءا من نقطة النهاية يدويا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لمزيج 1♀ + 1♂، تحليل كل تسجيل الفيديو وقياس مدة من الأحداث التالية: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس مدة من البحث (أي وقت من عند إدخال الإناث والذكور في البئر من الشريحة المقعرة لحظة التي يواجهونها والاتصال بعضها البعض). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس مدة الاتصال (أي وقت من أول اتصال لحظة عندما يتم وضع الذكور على وجه التحديد في الفرج الأنثى للجماع الأول). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس مدة جماع (أي الوقت من عند الذكور يتم وضع على وجه التحديد في الفرج الأنثى حتى تنزلق من جسم الأنثى بعد القذف). ملاحظة: يمكن لبعض الديدان الخيطية التزاوج عدة مرات في 2 ساعة. في مثل هذه الحالات، وقياس مدة الجماع من الجماع الأول إلى نهاية لاسر واحد، بما في ذلك الوقت بين بين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس مدة العالقة (أي فترة ما بعد الجماع حتى السباحة الذكور والإناث بعيدا عن بعضها البعض وتفصل بينها مسافة أكثر من طول الجسم النيماتودا &quot;(في الغالب 1 مم)). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عد من وتيرة الجماع ومدة كل الجماع ومتوسط مدة كل copulations في 2 ساعة لكل من مجموعات مختلفة (أي 1♀ + 1♂، 3♀ + 1♂، و1♀ + 3♂). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب نسبة نجاح التزاوج لأول اتصال (P) لمجموعات مختلفة مثل نسبة نجاح التزاوج بعد الاتصال الأول الذي يجرى على الفور ودون أي انقطاع. في مرحلة الاتصال، يمكن ملاحظة عدة اتصالات قبل الجماع الفعلي. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عندما تكون المسافة بين شخصين هي أكثر من طول الجسم، والنظر في جهة اتصال واحدة لتكون أكثر. لتكرار واحد، سجل P إلى 100٪ عند الجماع طلاحظ الصورة على الفور بعد أول اتصال، دون انقطاع، أو ما يعادل 0.00٪ إذا لم يلاحظ أي الجماع أو إذا كان هناك الجماع ولكن بعد يومين أو مزيد من الاتصالات. ملاحظة: كان هناك 30 مكررات لكل تركيبة هو موضح هنا. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Tokushige, Y., Kiyohara, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bursaphelenchus+sp.+in+the+wood+of+dead+pine+trees.">Bursaphelenchus sp. in the wood of dead pine trees.</a> J. Jap. For. Soc. 51, 193-195 (1969).</li><li>Sun, Y. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bursaphelenchus+xylophilus+was+discovered+in+Sun+Yet-sen's+mausoleum+in+Nanjing.">Bursaphelenchus xylophilus was discovered in Sun Yet-sen's mausoleum in Nanjing.</a> J. Jiangsu Fore. Sci. Tech. (in Chinese). 4, 47 (1982).</li><li>Mota, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+report+of+Bursaphelenchus+xylophilus+in+Portugal+and+in+Europe.">First report of Bursaphelenchus xylophilus in Portugal and in Europe.</a> Nematology. 1, 727-734 (1999).</li><li>Robertson, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+the+pine+wood+nematode+Bursaphelenchus+xylophlius+Steiner+&amp;+Buhrer,+1934+(Nickle,+1970)+in+Spain.">Incidence of the pine wood nematode Bursaphelenchus xylophlius Steiner &amp; Buhrer, 1934 (Nickle, 1970) in Spain.</a> Nematology. 13, 755-757 (2011).</li><li>Vicente, C., Espada, M., Vieira, P., Mota, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pine+wilt+disease:+a+threat+to+European+forestry.">Pine wilt disease: a threat to European forestry.</a> Euro. J. Plant Path. 133, 89-99 (2012).</li><li>Jones, J. T., Moens, M., Mota, M., Li, H., Kikuchi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bursaphelenchus+xylophilus:+opportunities+in+comparative+genomics+and+molecular+host-parasite+interactions.">Bursaphelenchus xylophilus: opportunities in comparative genomics and molecular host-parasite interactions.</a> Mol. Plant. Path. 9, 357-368 (2008).</li><li>Mamiya, Y., Furukawa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fecundity+and+reproduction+of+Bursaphelenchus+lignicolus.">Fecundity and reproduction of Bursaphelenchus lignicolus.</a> Jap. J. Nemat. 7, 6-9 (1977).</li><li>Mamiya, Y., Kiyohara, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Description+of+Bursaphelenchus+lignicolus.+n.+sp.+(Nematoda:+Aphelenchoididae)+from+pine+wood+and+histophathology+of+nematode-infested+trees.">Description of Bursaphelenchus lignicolus. n. sp. (Nematoda: Aphelenchoididae) from pine wood and histophathology of nematode-infested trees.</a> Nematologica. 18, 120-124 (1972).</li><li>Liu, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioural+features+of+Bursaphelenchus+xylophilus+in+the+mating+process.">Behavioural features of Bursaphelenchus xylophilus in the mating process.</a> Nematology. 16, 895-902 (2014).</li><li>Simon, J. M., Sternberg, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+of+a+mate+finding+cue+in+the+hermaphrodite+nematode+Caenorhabditis+elegans.">Evidence of a mate finding cue in the hermaphrodite nematode Caenorhabditis elegans.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 99, 1598-1603 (2002).</li><li>Barr, M. M., Garcia, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Male+mating+behaviour.">Male mating behaviour.</a> The C. elegans Research Community Wormbook. , (2006).</li><li>Shinya, R., Chen, A., Sternberg, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+attraction+and+mating+in+Bursaphelenchus+okinawaensis+and+B.+xylophilus.">Sex attraction and mating in Bursaphelenchus okinawaensis and B. xylophilus.</a> J. Nematol. 47 (3), 176-183 (2015).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

الاختبارات السلوكية تشكل جانبا أساسيا من البيئة الكيميائية، بيولوجيا الأعصاب وعلم الأحياء الجزيئية، وعلم الوراثة. الديدان الخيطية، وبخاصة C. ايليجانس، وتستخدم على نطاق واسع للدراسات في هذه المجالات. وقد تم التحقيق في سلوك التزاوج من جيم ايليجانس سابقا 10-11. ومع ذلك، B. xylophilus هو كثير البيض ومختلفة من C. ايليجانس خنثوي، وعملية التزاوج لله عدة مظاهر سلوكية 9. مؤخرا، تم الإبلاغ عن سلوك التزاوج من Bursaphelenchus okinawaensis، وهي من الأنواع الشقيقة خنثوي باء xylophilus، 12. على الرغم من واستخدمت أساليب تجريبية مختلفة، وأظهرت هذه الأنواع خنثوي انجذاب جنسي مشابه لب xylophilus، ولوحظ جذب بين الأنواع بينهما. يمكن استخدام هذا النوع شقيقة خنثوي كنموذج لإجراء مزيد من التحقيقات في بيولوجيا Bursaphelenchus. وينص هذا البروتوكول على المبادئ التوجيهية بشأن كيفية مراقبة والتحقيق الميزات السلوكية باء xylophilus أثناء التزاوج. وأظهرت النتائج التي توصلنا إليها أن استخدام الديدان الخيطية الكبار البكر أمر بالغ الأهمية لزيادة فرصة مراقبة عملية التزاوج (الشكل 1) بنجاح. الحصول على J4 اليرقات والتمييز بدقة بين الجنسين هم خطوتين الأساسية الهامة لاقتناء البالغين البكر. تحت ظروف تجريبية لدينا (أي، عند 25 درجة مئوية في الظلام)، في الفترة من 52 ساعة هو الوقت المناسب للحصول على J4 من J2 اليرقات. ومع ذلك، مع التمييز الجنسي في مرحلة مبكرة J4 يعتمد في الغالب على تجربة شخصية. لضمان الدقة، فمن الضروري لأشخاص مختلفين لمضاعفة التحقق من تخصيص الجنس. الميزات السلوكية باء xylophilus أثناء عملية التزاوج يمكن وصف نوعي وتحليل كمي عن طريق تسجيل المدد من أربعة تختلفمراحل الأنف والحنجرة، ونسبة نجاح التزاوج بعد أول اتصال، وتيرة الجماع، ومدة الجماع من تركيبات مختلفة. ومن المثير للاهتمام، للمرة الأولى، لاحظنا اختيار التزاوج من الإناث والمنافسة داخل جنسية قوية في كل من الذكور والإناث. لم يكن هناك أي اختلاط. ومع ذلك، فإن هذا قد يكون راجعا إلى عدد محدود من الديدان الخيطية المستخدمة في تحقيقنا. هذا البروتوكول لا يمكن أن تستخدم إلا للتحقيق في سلوك التزاوج باء xylophilus، ولكن يمكن أيضا أن تكون مفيدة وقيمة كمرجع لالديدان الخيطية أخرى.

The pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus (Steiner and Buhrer) Nickle, is one of the most destructive invasive species, causing the wilting and eventual death of pine trees. This pathogenic nematode is believed to be native to the USA, but it was transported to several countries, including China, Japan, South Korea, and Portugal. Recently, it has also been reported in Spain, killing millions of pine trees at huge economic losses and threatening forest production and ecological stability1-5.
Once a host pine tree is infected by pinewood nematodes, thousands of millions of offspring are propagated rapidly within the trunk. This causes xylem dysfunction, resulting in wilting and eventually in the death of the host tree6. However, there is currently no efficient way to control this disease. Mating behavior might play an important role in the high fecundity of this nematode7. We therefore investigated the mating behavior of B. xylophilus in the laboratory, trying to find an effective way of disturbing its mating and decreasing its fecundity. 
This protocol is intended to introduce the detailed methods of how to obtain the virgin adults of B. xylophilus and how to observe and analyze the mating behavior using a video recorder and a stereomicroscope. This protocol can also be used as a reference for behavioral studies of other nematodes.

<table><tbody><tr><td>&lt;em&gt;B. xylophilus&lt;/em&gt; isolate &lt;em&gt;Nxy61&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td>Extracted from &lt;em&gt;Pinus massoniana&lt;/em&gt; in Ningbo area of China</td></tr><tr><td>Grey mold strain</td><td></td><td></td><td>Obtained from Forestry Academy of China</td></tr><tr><td>Baermann funnels</td><td>Sengong</td><td></td><td></td></tr><tr><td>falcon tubes</td><td>Sengong</td><td></td><td></td></tr><tr><td>centrifuge</td><td>Sengong</td><td></td><td></td></tr><tr><td>pipette</td><td>Sengong</td><td></td><td></td></tr><tr><td>sterile dd H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O</td><td></td><td></td><td>Sterilized by high pressure of steam at 121 &amp;deg;C for 30 min.</td></tr><tr><td>Petri dishes</td><td>Sengong</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PDA medium</td><td>Huankai Bio.</td><td>021050</td><td></td></tr><tr><td>incubator</td><td>Sengong</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Laminar flow</td><td>Sengong</td><td></td><td></td></tr><tr><td>glass capillary</td><td>Sengong</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stereoscope</td><td>Leica</td><td>LED5000 RL</td><td></td></tr><tr><td>inverted stereo microscope</td><td>Zeiss</td><td>A1</td><td></td></tr><tr><td>concave slides</td><td>Sengong</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

observation and quantification of mating behavior in the pinewood nematode, bursaphelenchus xylophilus

وهناك طريقة لمراقبة وقياس سلوك التزاوج من الديدان الخيطية خشب الصنوبر، Bursaphelenchus xylophilus، وقد تم تأسيسها تحت مجهر تشريحي. لتحسين كفاءة التزاوج باء Xylophilus وزيادة فرص الملاحظة التزاوج، كان الكبار البكر مثقف وتستخدم للتحقيق. وقد تم الحصول على البيض عن طريق الحفاظ على الديدان في الماء والسماح للإناث لوضع البيض لمدة 10 دقيقة. وقد تزامن الأحداث في المرحلة الثانية (J2) التي يحتضنها البيض لمدة 24 ساعة عند درجة حرارة 25 درجة مئوية في الظلام، والتي تم الحصول عليها في وقت مبكر J4 من زراعة وJ2 مع العفن الرمادي، السنجابية المعنقدة، لمدة 52 ساعة أخرى. عند هذه النقطة الزمن، يمكن أن معظم الديدان الخيطية J4 تمييزها بوضوح عن كونه ذكرا أو أنثى باستخدام التشكل التناسلية. تم جمع الذكور والإناث J4 ومثقف بشكل منفصل في اثنين من أطباق بتري مختلفة لمدة 24 ساعة للحصول على الديدان الخيطية الكبار البكر. تم إقران وذكر البكر وأنثى العذراء في قطرة من واتإيه في البئر شريحة مقعرة. وقد تم تصوير سلوك التزاوج مع جهاز تسجيل الفيديو تحت مجهر تشريحي. وكانت الفترة كلها من عملية التزاوج 82.8 ± 3.91 دقيقة (يعني ± SE) ويمكن تقسيمها إلى 4 مراحل مختلفة: البحث، والاتصال، جماع، والعالقة. وكانت الدقائق المتوسطة لمدة 21.8 ± 2.0، 28.0 ± 1.9، 25.8 ± 0.7 و 7.2 ± 0.5، على التوالي. وقد وصفت إحدى عشرة السلوكيات الفرعية: المبحرة، تقترب، ويواجه، لمس، التطويق، وتحديد مكان، ربط، والقذف، وفصل، هدوء، والتجوال. ومن المثير للاهتمام، وقد لوحظ المنافسة داخل جنسية واضحة عندما تم تجميعها أنثى واحدة مع 3 ذكور أو ذكر واحد مع 3 إناث. هذا البروتوكول هو مفيد وقيم، وليس فقط في التحقيق في سلوك التزاوج باء xylophilus، ولكن أيضا في العمل كمرجع للدراسات علم السلوك من الديدان الخيطية أخرى.

وكان معدل نجاح التزاوج (R) من البالغين البكر 86.67٪ في المتوسط، وهو أعلى بكثير من البالغين تم اختيارها عشوائيا: 13.33 ± 4.65٪ (F = 1301.71، مدافع = 1، P = 0.0001) (الشكل 2). وتشير هذه النتيجة أنه من الأسهل لمراقبة سلوك التزاوج باء xylophilus مع الكبار البكر من وبالغين مختارين عشوائيا. عندما يقترن ذكر واحد مع أنثى واحدة، واستمرت عملية التزاوج بالكامل 82.8 دقيقة في المتوسط. ويمكن وصف العملية برمتها من خلال أربع مراحل مختلفة: البحث، والاتصال، جماع، والعالقة. وكانت مدة هذه المراحل الأربع 21.8 ± 2.0 دقيقة، 28.0 ± 1.9 دقيقة، 25.8 ± 0.7 دقيقة، و 7.2 ± 0.5 دقيقة، على التوالي (الشكل 3). في منشور صدر مؤخرا، وصفنا 11 السلوكيات الفرعية كما المبحرة، تقترب، encounteriنانوغرام، ولمس، التطويق، وتحديد مكان، ربط، والقذف، وفصل، هدوء، والتجوال 9. عندما اجتمع رجل واحد اثنين أو أكثر من الإناث في نفس الوقت، يبدو أن الذكور للتزاوج عشوائي مع واحد منهم، دون أي اختيار. ومع ذلك، لوحظ اختيار التزاوج واضح لxylophilus B. الإناث. عندما اتصلت امرأة من الذكور، تميل الإناث إلى لمس رأس الذكر، والجسم، والذيل، والمنطقة التناسلية بلطف مع رأسها ويبدو أن تقييم لها شريك محتمل. إذا لم الأنثى تقبل الذكور، تركت الأنثى له بسرعة وسبح إلى ذكر آخر لتقييم المقبل. ثم اختيار واحد من الذكور قبل الإناث للتزاوج. التزاوج معدلات النجاح بعد أول اتصال (ف) من 1♀ + 1♂، 3♀ + 1♂، و1♀ كانت + 3♂ مجموعات 46.7 ± 9.3٪، 80.0 ± 7.4٪، و 23.4 ± 7.4٪، على التوالي، والخلافات بينهما وره كبير (F = 8.21، DF = 2، P = 0.0124) (الشكل 4). وقد لوحظ المنافسة Intrasexual في كل من الذكور والإناث. عندما كانت مختلطة واحدة أنثى عذراء مع 3 ذكور البكر، حاولت ذكور الاقتراب والاتصال الأنثى قدر الإمكان للحصول على فرصة للتزاوج معها. عندما احتلت الفرج من قبل رجل واحد، حاولت الذكور الأخرى للتشويش على التزاوج من الذكور باستخدام يتأرجح الجسم عنيفة أو سحب للفصل بينهما. وقد شهدت المسابقة intrasexual الإناث إلى أن تكون أكثر أو أقل على غرار المنافسة intrasexual الذكور. نجاح التزاوج تعتمد أساسا على الأنثى. عندما قبلت الأنثى الذكر، انتقل الذكور أكثر ببطء وكرة لولبية أو حتى تشكيل طوق، ونقل الأنثى إلى الأمام بنشاط لجعل الأمر أكثر سهولة للذكور لتحديد الفرج لها ولتفادي أي تشويش من الذكور الأخرى. لو كانت امرأة لم تقبل من الذكور،حاولت الأنثى لزعزعة قبالة له، حتى لو كان الذكور قد شنت وضعه نفسه الفرج لها. بسبب المنافسة intrasexual، كانت ترددات الجماع من 1♀ + 1♂، 3♀ + 1♂، و1♀ + 3♂ تركيبات 1.43 ± 0.091، 1.17 ± 0.074 و 1.83 ± 0.074 على التوالي، وكانت الخلافات بينهما كبير (F = 14.50، مدافع = 2، P = 0.0001) (الشكل 5). في تحقيقنا، تفاوتت مدة الجماع إلى حد كبير، مع حد أدنى من 20 ثانية وبحد أقصى 42 دقيقة. وفقا لمعلوماتنا، ومدة الجماع يمكن التفريق الواضح إلى مجموعتين: copulations على المدى القصير، والتي استمرت أقل من 5 دقائق، وcopulations على المدى الطويل، والتي استمرت لفترة أطول من 10 دقيقة. وقد لوحظت اختلافات واضحة بين المجموعات المختلفة للمتوسط مدة الجماع على المدى القصير (F = 3.81، DF = 2، P </em&gt; = 0.0296)، الجماع على المدى الطويل (F = 179.52، مدافع = 2، P = 0.0001)، وجميع copulations (F = 2.93، DF = 2، P = 0.0367) (الشكل 6). <img alt="شكل 1" src="/files/ftp_upload/54842/54842fig1.jpg" /> الشكل 1: الأعضاء التناسلية للذكر وأنثى ب Xylophilus. (أ) الشوكة من الذكور (السهم الأزرق). (ب) الفرج من الإناث (السهم الأحمر). <a href="https://ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54842/54842fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/54842/54842fig2.jpg" /> الشكل 2: التزاوج نسبة نجاح الأزواج العذراء الكبار وتم اختيارها عشوائيا الأزواج الكبار باء xylophilus. يحسب متوسط ​​القيم هي من 30 مكررات. شريط العرض الرأسيق الخطأ المعياري. وتشير أحرف صغيرة مختلفة فروق ذات دلالة إحصائية عند P &lt;0.05 بالمقارنة بواسطة اختبار توكي و. <a href="https://ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54842/54842fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/54842/54842fig3.jpg" /> الرقم 3: مدة 4 مراحل في عملية التزاوج باء xylophilus. يحسب متوسط ​​القيم هي من 30 مكررات. ويظهر الشريط العمودي الخطأ المعياري. وتشير أحرف صغيرة مختلفة فروق ذات دلالة إحصائية عند P &lt;0.05 بالمقارنة بواسطة اختبار توكي و. متوسط ​​مدة المرحلة جماع هو 25.80 ± 0.71 دقيقة، وهو 31.17٪ من عملية التزاوج كلها. <a href="https://ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54842/54842fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا التين</a>لدى عودتهم. <img alt="الشكل (4)" src="/files/ftp_upload/54842/54842fig4.jpg" /> الشكل 4: التزاوج النجاح لأول اتصال باء xylophilus. يحسب متوسط ​​القيم هي من 30 مكررات ± SE. يعني مع حرف صغير نفسه داخل كل عمود ليست مختلفة كثيرا في P &lt;0.05 بالمقارنة بواسطة اختبار الاختلاف الهام صادق توكي و. <a href="https://ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54842/54842fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الرقم 5" src="/files/ftp_upload/54842/54842fig5.jpg" /> الرقم 5: الجماع التردد باء xylophilus في المجموعات المختلفة. يحسب متوسط ​​القيم هي من 30 مكررات ± SE. يعني بنفس الحرف الصغير لا تختلف كثيرا في P &lt;0.05 عندما شركاتعرب كورب بواسطة اختبار الاختلاف الهام صادق توكي و. <a href="https://ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54842/54842fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الشكل (6)" src="/files/ftp_upload/54842/54842fig6.jpg" /> الشكل (6): الجماع مدة B. xylophilus. يعني مع حرف صغير نفسه داخل كل مجموعة من الأعمدة التي لا تختلف كثيرا في P &lt;0.05 بالمقارنة بواسطة اختبار الاختلاف الهام صادق توكي و. <a href="https://ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/54842/54842fig6large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Observation and Quantification of Mating Behavior in the Pinewood Nematode, Bursaphelenchus xylophilus at JoVE.com

Observation and Quantification of Mating Behavior in the Pinewood Nematode, Bursaphelenchus xylophilus

A protocol for investigating the mating behavior of the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, is presented. Behavioral features of B. xylophilus are described in the mating process.

المراقبة والقياس الكمي للسلوك التزاوج في غابة الصنوبر نيماتودا،<em&gt; Bursaphelenchus xylophilus</em

A method for observing and quantifying the mating behavior of the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, was established under a stereomicroscope. ...

observation-quantification-mating-behavior-pinewood-nematode

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Biology

Observation and Quantification of Mating Behavior in the Pinewood Nematode, Bursaphelenchus xylophilus

9.3K Views.  Zhejiang Agricultural & Forestry University. A protocol for investigating the mating behavior of the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, is presented. Behavioral features of B. xylophilus are described in the mating process.

Video: Observation and Quantification of Mating Behavior in the Pinewood Nematode, Bursaphelenchus xylophilus

A Noninvasive Method For In situ Determination of Mating Success in Female American Lobsters (Homarus americanus)

Despite being one of the most productive fisheries in the Northwest Atlantic, much remains unknown about the natural reproductive dynamics of American lobsters. Recent work in exploited crustacean populations (crabs and lobsters) suggests that there are circumstances where mature females are unable to achieve their full reproductive potential due to sperm limitation. To examine this possibility in different regions of the American lobster fishery, a reliable and noninvasive method was developed for sampling large numbers of female lobsters at sea. This method involves inserting a blunt-tipped needle into the female&#39;s seminal receptacle to determine the presence or absence of a sperm plug and to withdraw a sample that can be examined for the presence of sperm. A series of control studies were conducted at the dock and in the laboratory to test the reliability of this technique. These efforts entailed sampling 294 female lobsters to confirm that the presence of a sperm plug was a reliable indicator of sperm within the receptacle and thus, mating. This paper details the methodology and the results obtained from a subset of the total females sampled. Of the 230 female lobsters sampled from George&#39;s Bank and Cape Ann, MA (size range = 71-145 mm in carapace length), 90.3% were positive for sperm. Potential explanations for the absence of sperm in some females include: immaturity (lack of physiological maturity), breakdown of the sperm plug after being used to fertilize a clutch of eggs, and lack of mating activity. The surveys indicate that this technique for examining the mating success of female lobsters is a reliable proxy that can be used in the field to document reproductive activity in natural populations.

A Noninvasive Method For In situ Determination of Mating Success in Female American Lobsters Homarus americanus

Fishery-induced changes to exploited crustacean fisheries, such as the American lobster fishery, could potentially influence their reproductive dynamics, leading to a reduction in mating success. This study&#39;s goal was to develop a noninvasive method for ascertaining the mating success of female lobsters that may be physiologically or functionally mature.

والطريقة موسع لل<em&gt; في الوضع الطبيعي</em&gt; تحديد النجاح في التزاوج أنثى الكركند الأمريكية (<em&gt; Homarus americanus</em&gt;)

Despite being one of the most productive fisheries in the Northwest Atlantic, much remains unknown about the natural reproductive dynamics of American ...

Environment

Field Experiments of Pollination Ecology: The Case of Lycoris sanguinea var. sanguinea

Plant-pollinator interactions have been studied for approximately one hundred years. During that time, many field methods have been developed to clarify the pollination effectiveness of each pollinator for visited flowers. Pollinator observations have been one of the most common methods to identify pollinators, and bagging and cage experiments have been conducted to show the effectiveness of specific pollinators. In a previous study of Lycoris sanguinea var. sanguinea, its effective pollinators, the visitation frequencies of each floral visitor, and its reproductive strategies were not identified. This study reports the observation that small bees visited flowers that were partially opened (breaking buds). To the best of our knowledge, this phenomenon has not been reported previously. Further, this study investigates the hypothesis that small bees can pollinate at that flowering stage. This study demonstrates the basic methods of field experiments in pollination ecology using L. sanguinea var. sanguinea. Pollinator observations and digital video showed the visitation frequencies of each floral visitor. Bagging and cage experiments revealed that these flowers could be pollinated fully and that breaking-bud pollination could be important for the pollination of this plant species. The advantages and disadvantages of each method are discussed, and recent developments, including laboratory experiments, are described.

Field Experiments of Pollination Ecology: The Case of Lycoris sanguinea var. sanguinea

To reveal the pollinator effectiveness of a given plant species, multiple methods of field experiments have been developed. This study demonstrates the basic methods of field experiments for pollination ecology using the case study of Lycoris sanguinea var. sanguinea and the novel pollination mechanism, breaking-bud pollination.

التجارب مجال التلقيح البيئة: حالة<em&gt; المذئبة الدموية لل</em&gt; فار.<em&gt; الدموية لل</em

Plant-pollinator interactions have been studied for approximately one hundred years. During that time, many field methods have been developed to clarify ...

Induction and Evaluation of Inbreeding Crosses Using the Ant, Vollenhovia Emeryi

The genetic and molecular components of the sex-determination cascade have been extensively studied in the honeybee, Apis mellifera, a hymenopteran model organism. However, little is known about the sex-determination mechanisms found in other non-model hymenopteran taxa, such as ants. Because of the complex nature of the life cycles that have evolved in hymenopteran species, it is difficult to maintain and conduct experimental crosses between these organisms in the laboratory. Here, we describe the methods for conducting inbreeding crosses and for evaluating the success of those crosses in ant Vollenhovia emeryi. Inducing inbreeding in the laboratory using V. emeryi, is relatively simple because of the unique biology of the species. Specifically, this species produces androgenetic males, and female reproductives exhibit wing polymorphism, which simplifies identification of the phenotypes in genetic crosses. In addition, evaluating the success of inbreeding is straightforward as males can be produced continuously by inbreeding crosses, while normal males only appear during a well-defined reproductive season in the field. Our protocol allow for using V. emeryi as a model to investigate the genetic and molecular basis of the sex determination system in ant species.

Induction and Evaluation of Inbreeding Crosses Using the Ant, Vollenhovia Emeryi

In this protocol, methods for conducting inbreeding crosses, and for evaluating the success of those crosses, are described for the ant Vollenhovia emeryi. These protocols are important for experiments aimed at understanding the genetic basis of sex determination systems in Hymenoptera.

الاستقراء والتقييم من الصلبان الاستيلاد استخدام النمل، عمري فولينهوفيا

The genetic and molecular components of the sex-determination cascade have been extensively studied in the honeybee, Apis mellifera, a hymenopteran model ...

Genetics

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors remains poorly understood. In Drosophila melanogaster, environmental cues, such as food availability, affect mating activity offering a tractable system to investigate the mechanisms modulating sexual behavior. In D. melanogaster, environmental cues are often sensed via the chemosensory gustatory and olfactory systems. Here, we present a method to test the effect of environmental chemical cues on mating behavior. The assay consists of a small mating arena containing food medium and a mating couple. The mating frequency for each couple is continuously monitored for 24 h. Here we present the applicability of this assay to test environmental compounds from an external source through a pressurized air system as well as manipulation of the environmental components directly in the mating arena. The use of a pressurized air system is especially useful to test the effect of very volatile compounds, while manipulating components directly in the mating arena can be of value to ascertain a compound's presence. This assay can be adapted to answer questions about the influence of genetic and environmental cues on mating behavior and fecundity as well as other male and female reproductive behaviors.

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

We demonstrate an assay to analyze the environmental and genetic cues that influence mating behavior in the fruit fly Drosophila melanogaster.

وهناك طريقة لاختبار تأثير الإشارات البيئية على سلوك التزاوج في<em&gt; ذبابة الفاكهة ميلانوغاستر</em

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors ...

Behavior

Individual Culturing of Tigriopus Copepods and Quantitative Analysis of Their Mate-guarding Behavior

Copepods of the genus Tigriopus, which are common zooplankton in rocky tide pools, show precopulatory mate-guarding behavior where a male clasps a potential mate to form a pair. While this phenomenon has attracted interest of researchers, methods for its analysis have not been well described. Here we describe procedures for: 1) individual culturing and staging of Tigriopus juveniles and adults, and 2) video-based analysis of their mate-guarding behavior. The culturing method enables experimental control of paring experience of animals as well as the ability to track their development before behavioral tests. The analysis method allows quantitative evaluation of several aspects of the mate-guarding behavior, including capturing attempts by males and swimming trajectory of mate-guarding pairs. Although these methods were originally established for ethological studies on Tigriopus, with proper modifications they can also be applied to studies of other zooplankton in different research fields, such as physiology, toxicology, and ecological genetics.

Individual Culturing of Tigriopus Copepods and Quantitative Analysis of Their Mate-guarding Behavior

Mate-guarding behavior plays an important role in reproduction of intertidal copepods of the genus Tigriopus. However, methods for studying this behavior have not been well described. Here we describe methods for: 1) individual culture of virgin Tigriopus animals, and 2) quantitative analysis of their mate-guarding behavior.

استزراع الفردية الكانفاس تيجريوبوس والتحليل الكمي لسلوكهم حراسة ماتي

Copepods of the genus Tigriopus, which are common zooplankton in rocky tide pools, show precopulatory mate-guarding behavior where a male clasps a ...

Methods to Assay Drosophila Behavior

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular disease and various neurological diseases1. We have optimized simple and robust behavioral assays for determining larval locomotion, adult climbing ability (RING assay), and courtship behaviors of Drosophila. These behavioral assays are widely applicable for studying the role of genetic and environmental factors on fly behavior. Larval crawling ability can be reliably used for determining early stage changes in the crawling abilities of Drosophila larvae and also for examining effect of drugs or human disease genes (in transgenic flies) on their locomotion. The larval crawling assay becomes more applicable if expression or abolition of a gene causes lethality in pupal or adult stages, as these flies do not survive to adulthood where they otherwise could be assessed. This basic assay can also be used in conjunction with bright light or stress to examine additional behavioral responses in Drosophila larvae. Courtship behavior has been widely used to investigate genetic basis of sexual behavior, and can also be used to examine activity and coordination, as well as learning and memory. Drosophila courtship behavior involves the exchange of various sensory stimuli including visual, auditory, and chemosensory signals between males and females that lead to a complex series of well characterized motor behaviors culminating in successful copulation. Traditional adult climbing assays (negative geotaxis) are tedious, labor intensive, and time consuming, with significant variation between different trials2-4. The rapid iterative negative geotaxis (RING) assay5 has many advantages over more widely employed protocols, providing a reproducible, sensitive, and high throughput approach to quantify adult locomotor and negative geotaxis behaviors. In the RING assay, several genotypes or drug treatments can be tested simultaneously using large number of animals, with the high-throughput approach making it more amenable for screening experiments.

Methods to Assay Drosophila Behavior

Drosophila melanogaster is a genetically and behaviorally tractable model system that has been used to understand the molecular and cellular basis of many important biological processes for over a century 1. Drosophila has been well exploited to gain insights into the genetic basis of fly behavior.

طرق الفحص ذبابة الفاكهة سلوك

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular ...

Neuroscience

تشريح لتحديد الحشرات المهاجرة عن طريق تحليل تكاثر المبيض

Dissection and Grading of Ovarian Development in Wild-Type Female Insects

Migratory insect pests pose serious challenges to food production and security all over the world. The migratory pests can be monitored and captured using searchlight traps. One of the most important techniques for migratory pest forecasting is to identify the migratory species. However, in most cases, it is difficult to get the information just by appearance. Therefore, using knowledge acquired by systematic analysis of the female reproductive system can help to understand the combined anatomic morphology of the ovarian mating sac and ovary developmental grading of wild-type migratory insects captured with searchlight traps. To demonstrate the applicability of this method, ovarian development status and egg grain development stages were directly assessed in Helicoverpa armigera, Mythimna separata, Spodoptera litura, and Spodoptera exigua for the ovarian anatomy, and the ovarian mating sacs were studied in Agrotis ipsilon, Spaelotis valida, Helicoverpa armigera, Athetis lepigone, Mythimna separata, Spodoptera litura, Mamestra brassicae, and Spodoptera exigua, to explore their relationships. This work shows the specific dissection method to predict wild-type migratory insects, comparing the unique reproductive system of different migratory insects. Then, both tissues, namely, the ovary and mating sacs, were further investigated. This method helps to predict the dynamics and the structural development of reproductive systems in wild-type female migratory insects.

تسليط الضوء على المؤلف: تحليل تشريح المبيض في الحشرات المهاجرة للتغلب على التحديات التجريبية 

The protocol demonstrates a simple and easy dissection method, suitable for wild-type migratory female insects captured with searchlight traps. This technique can significantly clarify the same species by comparing both reproductive tissues, namely the mating sac and ovarian development of wild-type female insects.

تشريح وتصنيف تطور المبيض في الحشرات الأنثوية البرية

Migratory insect pests pose serious challenges to food production and security all over the world. The migratory pests can be monitored and captured using ...

Dyeing Insects for Behavioral Assays: the Mating Behavior of Anesthetized Drosophila

Mating experiments using Drosophila have contributed greatly to the understanding of sexual selection and behavior. Experiments often require simple, easy and cheap methods to distinguish between individuals in a trial. A standard technique for this is CO2 anaesthesia and then labelling or wing clipping each fly. However, this is invasive and has been shown to affect behavior. Other techniques have used coloration to identify flies. This article presents a simple and non-invasive method for labelling Drosophila that allows them to be individually identified within experiments, using food coloring. This method is used in trials where two males compete to mate with a female. Dyeing allowed quick and easy identification. There was, however, some difference in the strength of the coloration across the three species tested. Data is presented showing the dye has a lower impact on mating behavior than CO2 in Drosophila melanogaster. The impact of CO2 anaesthesia is shown to depend on the species of Drosophila, with D. pseudoobscura and D. subobscura showing no impact, whereas D. melanogaster males had reduced mating success. The dye method presented is applicable to a wide range of experimental designs.

Dyeing Insects for Behavioral Assays: the Mating Behavior of Anesthetized Drosophila

This protocol describes a simple, cost effective way to individually identify Drosophila or other insects. Demonstration data investigating mating success across three species of Drosophila show that this method is comparable or better than the use of CO2 anaesthesia.

الصباغة الحشرات لفحوصات السلوكية: في سلوك التزاوج من تخدير<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

Mating experiments using Drosophila have contributed greatly to the understanding of sexual selection and behavior. Experiments often require simple, easy ...

المراقبة والقياس الكمي للسلوك التزاوج في غابة الصنوبر نيماتودا،

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

والطريقة موسع لل

التجارب مجال التلقيح البيئة: حالة

الاستقراء والتقييم من الصلبان الاستيلاد استخدام النمل، عمري فولينهوفيا

وهناك طريقة لاختبار تأثير الإشارات البيئية على سلوك التزاوج في

استزراع الفردية الكانفاس تيجريوبوس والتحليل الكمي لسلوكهم حراسة ماتي

طرق الفحص ذبابة الفاكهة سلوك

تشريح وتصنيف تطور المبيض في الحشرات الأنثوية البرية

تشريح وتصنيف تطور المبيض في الحشرات الأنثوية البرية

تشريح وتصنيف تطور المبيض في الحشرات الأنثوية البرية

الصباغة الحشرات لفحوصات السلوكية: في سلوك التزاوج من تخدير