11.1 : طرق الكروماتوغرافيا: المصطلحات

الكروماتوغرافيا هي تقنية تحليلية تستخدم على نطاق واسع في مجالات مثل الكيمياء، وعلم الأحياء، وعلوم البيئة، والمستحضرات الصيدلانية لفصل مكونات الخليط وتحديد المواد الموجودة بينها. تعتمد عملية الكروماتوغرافيا على التفاعلات بين طورين متميزين: الطور الثابت والطور المتحرك. يتم تثبيت الطور الثابت في موضعه باستخدام مادة داعمة، بينما يتحرك الطور المتحرك فوقه حاملًا المواد المذابة. وخلال انتقال الطور المتحرك عبر الطور الثابت، تتفاعل مكونات الخليط بشكل مختلف مع كل طور وفقًا لخصائصها الكيميائية، مما يؤدي إلى فصلها.

يمكن تصنيف الكروماتوغرافيا إلى عدة أنواع بناءً على طبيعة الطور المتحرك والثابت، مثل كروماتوغرافيا الغاز (GC)، وكروماتوغرافيا السائل (LC)، وكروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة (TLC). كل نوع مناسب لتطبيقات محددة، اعتمادًا على الحالة الفيزيائية للمواد التي يتم تحليلها والدقة المطلوبة للفصل.

يتدفق السائل الخارج من عمود الكروماتوغرافيا عبر كاشف، والذي ينشئ إشارة عندما يكتشف فصل المذاب. ثم يتم رسم هذه الإشارة مقابل وقت الإيلوشن أو حجم المحلول المغسول، مما يؤدي إلى سلسلة من القمم المعروفة باسم الكروماتوجرافيا.

في الكروماتوجرافيا، تُستخدم العديد من المصطلحات الرئيسية في وصف العملية والنتائج. يشير حجم الاحتفاظ إلى كمية الطور المتحرك المطلوبة لنقل المحلل من نقطة الحقن إلى الحد الأقصى للذروة في الكروماتوجرافيا. يرتبط ارتباطًا وثيقًا بوقت الاحتفاظ، وهو المدة الزمنية التي يستغرقها المحلل للمرور عبر النظام. يتم حساب ذلك عن طريق قسمة حجم الاحتفاظ على معدل تدفق الطور المتحرك. مفهوم مهم آخر هو عامل الاحتفاظ (يُطلق عليه غالبًا عامل السعة)، والذي يقيس نسبة الوقت الذي يقضيه المحلل في الطور الثابت مقارنة بالوقت الذي يقضيه في الطور المتحرك.

بالإضافة إلى ذلك، يشير وقت الفراغ إلى الوقت اللازم لإزالة المذابات غير المحتجزة من النظام. حجم الفراغ المقابل هو كمية الطور المتحرك اللازم لإزالة هذه المواد المذابة غير المحتجزة. عند مناقشة القمم في مخطط كروماتوغرام، يتم تعريف عرض القمة، المعروف أيضًا باسم عرض خط الأساس، على أنه عرض القمة عند خط الأساس، والذي يتم قياسه من النقطة التي تبدأ فيها القمة بالارتفاع وحتى عودتها إلى خط الأساس. أخيرًا، تقيس الدقة درجة الانفصال بين قمتين متجاورتين، مما يعكس مدى تميز مكونات الخليط عن بعضها البعض.