Bu protokolde, hastalığı taklit etmek için çok önemli olan lokal patofizyolojik ortamda ilk kez bukkal mukoza grefti kullanılarak üretral rekonstrüksiyon geliştirilmiştir. Bu teknik, yenilikçi tedaviler geliştirmemize ve moleküler mekanizmalarını ve klinik avantajlarını translasyonel bir şekilde incelememize olanak tanır. Başlamak için, anestezi uygulanan sıçanın her iki gözüne de koruyucu göz jeli uygulayın.
Hayvanı bir ısı yastığı üzerinde dorsal dekübit pozisyonuna yerleştirin ve cerrahi prosedür için sıçanın üzerine bir diseksiyon mikroskobu yerleştirin. Penisin sünnet derisini geri çektikten sonra, dorsal olarak penis bezlerine yüzeysel yedi sıfırlı bir dikiş yerleştirin. Penisi geri çekmek için bir iğne tutucuyu yerinde bırakın.
Kayganlaştırıcı jel kullanarak kateterizasyon için üretraya 22 gauge venöz kateter yerleştirin. Cerrahi neşter bıçağı ile penis derisinde bir santimetre uzunluğunda ventral kesi yapın. Penis dokusu katmanlarını, üretra orta şaft seviyesine maruz kalana kadar forseps ve yaylı makasla inceleyin.
Üretranın bir yan tarafına ve ventral olarak penis orta şaftına bir elektrokoter cihazı ile akım uygulayın. Kesiyi altı sıfır emilebilir koşu dikişi ile kapatın. Üretral kateteri ve penil traksiyon sütürünü çıkarın.
Sıçanı ventral dekübit pozisyonuna yerleştirin ve anti-yatıştırıcı solüsyonun deri altı enjeksiyonunu uygulayın. Anestezi uygulanmış bir sıçanın alt dudağını, bukkal mukozasını, penisini ve karın derisini povidon iyot ile temizleyin. Alt dudağın her iki tarafına ve ortasına üç adet yedi sıfırlı dikiş yerleştirin.
Dudağı geri çekmek ve iç mukozayı ortaya çıkarmak için her birine bir sivrisinek yerleştirin. Yaylı makas ve sivri uçlu forseps kullanarak, alt dudağın iç bukkal mukozasından dört milimetrelik bir greft alın. Grefti steril% 0.9 salin içeren küçük bir alıcıya yerleştirin.
Donör bölgeyi bir süngerle sıkıştırın. Alt dudağın önceden yerleştirilmiş askı dikişlerini çıkarın ve penisi ortaya çıkarın. Kayganlaştırıcı bir jel kullanarak koterizasyon için üretraya 22 gauge venöz kateter yerleştirin.
Yaylı makas kullanarak, çevresel bir subkoronal insizyon yapın ve penisi tabana doğru deglovize edin. Üretrayı ortaya çıkarmak için kalan katmanları inceleyin. Koronal sulkusun yaklaşık üç milimetre distalinde dört milimetre uzunlamasına ventral bir kesi yapın ve üretrayı darlık seviyesinde spatula haline getirin.
Spatulasyonun her iki tarafına iki adet yedi sıfırlı dikiş yerleştirin. Üretrayı geri çekmek için her birine bir sivrisinek bırakın. Spatulasyonun her iki ucuna iki adet emilmeyen yedi oh sütür yerleştirin.
Bukkal mukoza greftini, mukoza tarafı üretral lümene bakacak şekilde ventral onley şeklinde yerleştirin. Dikişlerden birini greftin içinden geçirin ve akan bir sütürle yarım elips yapın. Üretral kateteri çıkarın ve penis derisini yeniden konumlandırın.
Çevresel subkoronal insizyonu altı sıfır emilebilir kesintili sütür ile kapatın. Penil traksiyon sütürünü çıkarın, ardından daha önce gösterildiği gibi anti-yatıştırıcı solüsyonu uygulayın. Darlık indüksiyonuna tabi tutulan sıçan, greft üretroplastisinden iki hafta sonra 1.59 milimetreye yükselen 0.92 milimetrelik bir üreter çapı gösterdi.
Üretroplasti sonrası ortalama kan akımı, üretroplasti öncesi hayvanlara kıyasla önemli ölçüde azaldı. Çok fazla akım üretral kapanma riskine yol açabilir. Greft, fistülleri önlemek için mukoza üretral lümene bakacak şekilde su geçirmez bir dikiş ile yerleştirilmelidir.
Greft ile her türlü üretroplasti yapılabilir, farklı greft tipleri değerlendirilebilir. Bu deneysel model, greftlerin kullanımını optimize etmemize ve klinik ihtiyaçlara uyacak şekilde translasyonel araştırmalar üzerinde etkisi olan doku mühendisliği malzemeleri gibi yeni terapötik stratejileri keşfetmemize olanak tanır.
