Name: murine distal colostomy, a novel model of diversion colitis in c57bl/6 mice
Uploaded: 2018-07-12T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 20 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Distal Colostomy, A Novel Model of Diversion Colitis in C57BL/6 Mice at JoVE.com

Tüm yöntem tanımlamak burada hayvan hastalıklarıyla ilgili hükümet yetkilisi (Landesamt für Landwirtschaft, Lebensmittelsicherheit und Fischerei Mecklenburg-Vorpommern, (LALLF M-V)) tarafından onaylanmış olması.
1. ameliyat öncesi bakım ve hayvan hazırlanması
<ol><li>Hayvan tesisi vardıklarında, hayvanlar (C57Bl/6) benzer boyutta gruplara ayırmak, her grup birlikte kafes ve gruplar deneyler sabit tutmak. Not: hayvanlar aynı cinsiyetten kullanın. Açıklanan sonuçlar erkek fare ile elde edilmiştir. Not: erkek hayvanlar, böylece bir hiyerarşi kurulan olduklarında 7 hafta-in yaş birlikte başlayan kafes grupları kullanılıyorsa, böylece deneyler sırasında saldırgan davranış riskini en aza.</li>
	<li>En az bir hafta önce ameliyat, yüksek bir enerji geçiş (> 14 MJ/kg) ve yüksek protein (> % 20) tüm temel eser elementler ve vitamin içeren yem (ayrıntılı bilgi için bkz: malzeme listesi). Not: tüm fareler tartmak en az 25 g ameliyat yapıldığında sizi temin ederim.</li>
	<li>Anestezi ve analjezi ketamin (87 mg/kg ı.p.) ve xylazine hidroklorür (13 mg/kg ı.p.) mayi enjeksiyonu ile ikna etmek. Mekanik stimülasyon, örneğin ayak adım, motor yanıt olmadan fare tahammül kadar bekleyin.</li>
	<li>Narcotized fareyi bantları istikrarlı işlemi sırasında konumlandırma ve ezici bir vücut ısı kaybı kaçınarak güvence altına alınması operasyon masasında konumlandırılmış bir ısı altlık üzerine sırtüstü pozisyonda güvenli. Not: Isı temelini yüzey sıcaklığı 36 ° c ile 40 ° C arasında olmalıdır; Ameliyathane sıcaklık 21 ° c olmalıdır</li>
</ol>2. distal kolostomi işlemi
<ol><li>Karın saç tıraş. Ameliyat başlamadan önce dezenfekte işlemi alanını kullanarak üç kez alkol % 70 ve bir iodophor. Aseptik koşullar için güvence altına almak için operasyon alanı asmak.</li>
	<li>Karın kasları ve linea boyunca karın zarını incising tarafından 15-mm medyan laparatomi gerçekleştirmek alba, böylece kan kaybını en aza.</li>
	<li>İki DeBakey atravmatik forseps kullanın, dikkatle çekum, terminal ileum ve artan ve enine kolon periton boşluğundan çek. Not: kesinlikle mezenterik yapıları için yaralanma önlemek için bağırsak mekanik işleme sınırlamak için dikkatli olun.</li>
	<li>Cecal pole, artan kolon ve ince bağırsak (Şekil 1a ve 1b) tanımlayın. Not: Doğru artan kolon kolostomi doğru yerleşimini temel tanımlamasıdır. İleocecal bölge anatomisi belirsiz olduğu durumlarda Peyer's yamalar varlığı bağırsağın tanımlar ve iki nokta üst üste kurulan dışkı varlığını karakterize.</li>
	<li>Gelecekteki kolostomi konumunu belirlemek için bir cetvel kullanın. Bu 20 mm distal ileocecal Vana distal kolostomi için yer almalıdır.</li>
	<li>Sağ üst kadranda Karın duvarındaki bir ikinci 3 mm kesi yapmak. Önceden tanımlanan iki nokta üst üste segment döngü bozmaya değil dikkatli olmak bir döngü oluşturmak için bu kesi yoluyla çek.</li>
	<li>Dikkatli bir 22'lik esnek IV Kanül mesocolon üzerinden geçmek. Mezenterik damar yapıları zarar vermemesi için dikkat ediniz.</li>
	<li>Bağırsak periton boşluğuna dönün.</li>
	<li>Basit dikiş ve tekrar emilebilen dikiş (Örneğin, polyglactin 910 veya polyfil 4-0 1/2 c) kullanarak cilt esnek tüp her iki ucunu düzeltmek.</li>
	<li>Laparotomi kapatmadan önce sıvı resüsitasyon mayi iğne 0,5 mL % 0,9 serum kullanarak gerçekleştirin.</li>
	<li>Karın zarını ve kas katmanı Tekrar Emilebilen dikiş (Örneğin, polyglactin 910 veya polyfil 4-0 1/2 c) kullanarak sürekli dikiş ile kapatın. Cilt Tekrar Emilebilen dikiş (örneğin, polyglactin 910 veya polyfil 4-0 1/2 c) kullanarak sürekli dikiş ile kapatın.</li>
	<li>Exteriorized kolon döngü iyi makas kullanarak bir alt toplam transeksiyon gerçekleştirerek açın. Bıçaklanmasından tüm yaralanma kaçının. İki nokta üst üste tamamen transect değil.</li>
	<li>Karın zarını için üç tek tam-kalınlık dikiş kullanarak her kolostomi açılış saptamak ve monofil, absorbe dikiş kullanarak cilt (Örneğin, polydioxanone veya monofil 6-0 3/8s). Fonksiyonel bir bitiş kolostomi olduğunu, afferent döngü ve müköz fistül olan efferent döngünün açıkça bu noktada (Şekil 1 c) ayrılır. Not: Operasyon süresi 20 dakikadan daha az sıvı, ısı kayıpları sınırlamak için olması gerekir.</li>
	<li>Sonra ameliyat, bitirme bir ultrasonik banyo üretici yönergelerine uygun bir dezenfeksiyon aldehit içermeyen çözüm kullanarak aletler dezenfekte.</li>
</ol>3. sahte işlem (Colotomy)
<ol><li>1.1 adımları gerçekleştirin. 2.4.</li>
	<li>Gelecekteki colotomy konumu belirlemek için bir cetvel kullanın. Colotomy ileocecal Vana aynı mesafe kolostomi deneysel grubunda olarak yerleştirilmiş olmalıdır.</li>
	<li>İki nokta üst üste açık en az 2/3 iyi makas kullanarak onun çevresi.</li>
	<li>Yakın colotomy tek bir katman ile tam kalınlıkta bir kullanarak monofil, absorbe dikiş dikiş kesintiye (Örneğin, polydioxanone, monofil 6-0 3/8s). Not: Operasyon süresi 20 dakikadan daha az sıvı ve termal kayıp sınırlayan bir experimented cerrah olmalıdır.</li>
	<li>2.10 adımları gerçekleştirin. , 2.11. ve 2.14.</li>
</ol>4. ameliyat sonrası bakım
<ol><li>Hayvanlar için onların kafes dönmek. 37 ° C (Örneğin, bir kızılötesi lamba ile) iyi bir atmosfer sağlar fare tam olarak uyanık olana. Daha sonra fareler bir sıcaklık ve nem düzenlenir ortamda (21 ° C; % 30 ± % 10 bağıl nem) tutmak. Yiyecek ve içme suyu ücretsiz erişim sağlar. Sıvı alımını kolaylaştırmak için suya batırılmış ek hayvan yemi sağlar.</li>
	<li>0.1 mg/kg vücut ağırlığı buprenorfin enjekte edilerek ameliyat sonrası analjezi başlatmak hayvanlar mekanik stimülasyon yanıtı gösterdiğinizde SC. Solunum depresyon önlemek dikkatli olun.</li>
	<li>İçme suyu ile 1 mg/mL tramadol sürekli analjezi için ameliyat sonrası ilk haftasında ek.</li>
	<li>Hareketlilik nedeniyle azalan sıvı alımı için telafi etmek için azaltılmış, ameliyat sonrası ilk haftasında bir katı iç yastık içinde belgili tanımlık kafes kaynağı.</li>
	<li>İlk hafta, ilk ay kalan sırasında her iki günde ve üçüncü hergün Kleinwort vd içinde açıklanan hastalık şiddeti puanı kullanarak ayın ikinci sırasında günlük sırasında hayvanlar ve skor hayvan davranışları tartmak 6.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Glotzer, D. J., Glick, M. E., Goldman, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proctitis+and+colitis+following+diversion+of+the+fecal+stream.">Proctitis and colitis following diversion of the fecal stream.</a> Gastroenterology. 80, 438-441 (1981).</li><li>Morson, B., Dawson, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Gastrointestinal Pathology. , (1972).</li><li>Whelan, R. L., Abramson, D., Kim, D. S., Hashmi, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diversion+colitis.+A+prospective+study.">Diversion colitis. A prospective study.</a> Surg Endosc. 8, 19-24 (1994).</li><li>Haas, P. A., Fox, T. A., Szilagy, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoscopic+examination+of+the+colon+and+rectum+distal+to+a+colostomy.">Endoscopic examination of the colon and rectum distal to a colostomy.</a> Am J Gastroenterol. 85, 850-854 (1990).</li><li>Valatas, V., Bamias, G., Kolios, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+colitis+models:+Insights+into+the+pathogenesis+of+inflammatory+bowel+disease+and+translational+issues.">Experimental colitis models: Insights into the pathogenesis of inflammatory bowel disease and translational issues.</a> Eur J Pharmacol. 759, 253-264 (2015).</li><li>Kleinwort, A., D&#246;ring, P., Hackbarth, C., Heidecke, C. D., Schulze, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deviation+of+the+Fecal+Stream+in+Colonic+Bowel+Segments+Results+in+Increased+Numbers+of+Isolated+Lymphoid+Follicles+in+the+Submucosal+Compartment+in+a+Novel+Murine+Model+of+Diversion+Colitis.">Deviation of the Fecal Stream in Colonic Bowel Segments Results in Increased Numbers of Isolated Lymphoid Follicles in the Submucosal Compartment in a Novel Murine Model of Diversion Colitis.</a> Biomed Res Int. 2017, 13 (2017).</li><li>Tangjarukij, C., Navasumrit, P., Zelikoff, J. T., Ruchirawat, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+pyridoxine+deficiency+and+supplementation+on+hematological+profiles,+lymphocyte+function,+and+hepatic+cytochrome+P450+in+B6C3F1+mice.">The effects of pyridoxine deficiency and supplementation on hematological profiles, lymphocyte function, and hepatic cytochrome P450 in B6C3F1 mice.</a> J Immunotoxicol. 6, 147-160 (2009).</li><li>Soave, O., Brand, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coprophagy+in+animals:+a+review.">Coprophagy in animals: a review.</a> Cornell Vet. 81, 357-364 (1991).</li><li>Ebino, K. Y., Yoshinaga, K., Suwa, T., Kuwabara, Y., Takahashi, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+prevention+of+coprophagy+on+pregnant+mice--is+coprophagy+beneficial+on+a+balanced+diet.">Effects of prevention of coprophagy on pregnant mice--is coprophagy beneficial on a balanced diet.</a> Jikken Dobutsu. 38, 245-252 (1989).</li><li>Babickova, J., Tothova, L., Lengyelova, E., Bartonova, A., Hodosy, J., Gardlik, R., Celec, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+Differences+in+Experimentally+Induced+Colitis+in+Mice:+a+Role+for+Estrogens.">Sex Differences in Experimentally Induced Colitis in Mice: a Role for Estrogens.</a> Inflammation. 38, 1996-2006 (2015).</li><li>Lee, S. M., Kim, N., Son, H. J., Park, J. H., Nam, R. H., Ham, M. H., Choi, D., Sohn, S. H., Shin, E., Hwang, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effect+of+Sex+on+the+Azoxymethane/Dextran+Sulfate+Sodium-treated+Mice+Model+of+Colon+Cancer.">The Effect of Sex on the Azoxymethane/Dextran Sulfate Sodium-treated Mice Model of Colon Cancer.</a> J Cancer Prev. 21, 271-278 (2016).</li><li>Angele, M. K., Pratschke, S., Hubbard, W. J., Chaudry, I. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gender+differences+in+sepsis:+cardiovascular+and+immunological+aspects.">Gender differences in sepsis: cardiovascular and immunological aspects.</a> Virulence. 5, 12-19 (2013).</li><li>Brown, R. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+Behaviour,+reproduction,+and+population+changes+in+the+house+mouse+(Mus+musculus+L).">Social Behaviour, reproduction, and population changes in the house mouse (Mus musculus L).</a> Eccological Monographs. 23, 788-795 (1953).</li><li>Poole, T. B., Morgan, H. D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+aggressive+behaviour+betweeen+male+mice+(Mus+musculus+L.)+in+colonies+of+different+sizes.">Differences in aggressive behaviour betweeen male mice (Mus musculus L.) in colonies of different sizes.</a> Animal Behaviour. 21, 788-795 (1973).</li><li>Pasquarelli, N., Voehringer, P., Henke, J., Ferger, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+a+change+in+housing+conditions+on+body+weight,+behavior+and+brain+neurotransmitters+in+male+C57BL/6J+mice.">Effect of a change in housing conditions on body weight, behavior and brain neurotransmitters in male C57BL/6J mice.</a> Behav Brain Res. 333, 35-42 (2017).</li><li>Langgartner, D., Foertsch, S., Fuchsl, A. M., Reber, S. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light+and+water+are+not+simple+conditions:+fine+tuning+of+animal+housing+in+male+C57BL/6+mice.">Light and water are not simple conditions: fine tuning of animal housing in male C57BL/6 mice.</a> Stress. 20, 10-18 (2017).</li><li>Nicholson, A., Malcolm, R. D., Russ, P. L., Cough, K., Touma, C., Palme, R., Wiles, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+response+of+C57BL/6J+and+BALB/cJ+mice+to+increased+housing+density.">The response of C57BL/6J and BALB/cJ mice to increased housing density.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 48, 740-753 (2009).</li><li>Buchler, G., Wos-Oxley, M. L., Smoczek, A., Zschemisch, N. H., Neumann, D., Pieper, D. H., Hedrich, H. J., Bleich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain-specific+colitis+susceptibility+in+IL10-deficient+mice+depends+on+complex+gut+microbiota-host+interactions.">Strain-specific colitis susceptibility in IL10-deficient mice depends on complex gut microbiota-host interactions.</a> Inflamm Bowel Dis. 18, 943-954 (2012).</li><li>Nakanishi, M., Tazawa, H., Tsuchiya, N., Sugimura, T., Tanaka, T., Nakagama, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+strain+differences+in+inflammatory+responses+of+colonic+mucosa+induced+by+dextran+sulfate+sodium+cause+differential+susceptibility+to+PhIP-induced+large+bowel+carcinogenesis.">Mouse strain differences in inflammatory responses of colonic mucosa induced by dextran sulfate sodium cause differential susceptibility to PhIP-induced large bowel carcinogenesis.</a> Cancer Sci. 98, 1157-1163 (2007).</li><li>Mahler, M., Bristol, I. J., Leiter, E. H., Workman, A. E., Birkenmeier, E. H., Elson, C. O., Sundberg, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+susceptibility+of+inbred+mouse+strains+to+dextran+sulfate+sodium-induced+colitis.">Differential susceptibility of inbred mouse strains to dextran sulfate sodium-induced colitis.</a> Am J Physiol. 274, 544-551 (1998).</li><li>Mekada, K., Abe, K., Murakami, A., Nakamura, S., Nakata, H., Moriwaki, K., Obata, Y., Yoshiki, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+differences+among+C57BL/6+substrains.">Genetic differences among C57BL/6 substrains.</a> Exp Anim. 58, 141-149 (2009).</li><li>Sellers, R. S., Clifford, C. B., Treuting, P. M., Brayton, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunological+variation+between+inbred+laboratory+mouse+strains:+points+to+consider+in+phenotyping+genetically+immunomodified+mice.">Immunological variation between inbred laboratory mouse strains: points to consider in phenotyping genetically immunomodified mice.</a> Vet Pathol. 49, 32-43 (2012).</li><li>Mills, C. D., Kincaid, K., Alt, J. M., Heilman, M. J., Hill, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=M-1/M-2+macrophages+and+the+Th1/Th2+paradigm.">M-1/M-2 macrophages and the Th1/Th2 paradigm.</a> J Immunol. 164, 6166-6173 (2000).</li></ol>

Tüm yazarlar onlar rakip hiçbir ilgi alanlarına sahip bildirin.

Bu protokol için güvenilir bir şekilde sunulan DC fare modeli insan DC (Örneğin, iltihaplı barsak segmentleri, crypt kısalma ve indirimleri submukoza içinde lenfoid folikül gelişimi de novo histopatolojik özellikler üretir goblet hücre sayıları). Bu avantaj, kenara bu model çok benzer bir tetikleyici faktör tarafından indüklenen ve en çok etkilenen insanlarda olduğu gibi klinik seyir için hafif önem derecesi Orta olarak sunar.
Tekrarlanabilir sonuçlar ve kabul edilebilir perioperatif ölümcül elde etmek için biraz pratik mikrocerrahi tekniklerinde gereklidir. Ancak, kolostomi ve sham işlem (colotomy) çok düşük perioperatif Scotlan ile gerçekleştirilebilir (< % 10). Büyük önem operasyonel bazı adımlar vardır: 1) kolon ve terminal ileum kimliğini tam olarak teşhis. Nerede ileocecal bölge anatomisi açık durumda, iki nokta üst üste terminal ileum ve kurulan dışkı varlığı tarafından Peyer's yamalar varlığı ile belirlenebilir. 2) zaman kolostomi döngü exteriorizing, bıçaklanmasından, böylece mezenterik iskemi ve mekanik Ileus kaçınarak kıvranan değil emin olun. 3) zaman bıçaklanmasından esnek tüp ile delinme, böylece kanama ve mezenterik iskemi engelleyen bir gemi-Alerjik sektör seçilir sizi temin ederim. 4) Karın duvarındaki küçük kesi oluşturma için yeterli hemostaz denetle. Gerekirse, Termo-koagülasyon kas gemileri kanamayı durdurmak için kullanın. 5) kolon döngü en az üçte onun çevresi açıktır ve posterior duvar yeterince, böylece tam tıkanma dışkı geçiş distal barsak segmentleri için garanti exteriorized olduğunu temin ederim. 6) iki kolostomi ucu açık bir pasaj dışkı akışı çıkılamıyor çünkü daha yüksek enfeksiyon riskleri bir mekanik Ileus sonuçlanabilecek periton boşluğuna önlemek için cilt için de sabitlenir sizi temin ederim. Normalde, tüm cerrahi işlemler Büyüteç gözlük veya cerrahi mikroskoplar yapılabilir. Genel olarak, bu cihazların kullanımı eğitim gerektirir.
Cerrahi işlemler karmaşıklığı sadece orta olduğunda bile, birçok temel operatif ve perioperatif sorunu başarılı bir şekilde tekrarlanabilir sonuçlar ile deneme sonlandırmak için dikkate alınması gereken vardır.
Fareler sağlam bir çekum var bir kalıcı kolostomi ile uzun vadeli hayatta kalmak için gereklidir. Bir deney grubu ile proksimal değiştirmem ileocecal Vana bitişik bir ölüm oranı % 100 geri dönüşü olmayan kilo kaybı (veri gösterilmez) nedeniyle ameliyat sonrası ilk haftasında gösterdi. Bu nedenle, kolostomi site en az 20 mm distal Bauhin'ın Vana dan seçmek için son derece önem taşıyor. Bu gözlem kemirgen Sindirim fizyolojisi nedeniyle olabilir. Retrograd proksimal kolon çekum için taşıma bu türler oluşur. Çekum nerede bakteriyel mikrofloranın occurs8 tarafından besin sentezi. Distal değiştirmem hayvanlarla önemli vitamin eksiklikleri muzdarip musunuz uzun takip sonuçları sırasında normal MCV ve MCH değerleri gösterir. Ayrıca, hoşlanıp kemirgenler doğal ortamlarında beslenme davranışını önemli bir parçasıdır. Model oluşturma, biz son derece ilgili kalıcı kolostomi varlığı sonucu olarak hoşlanıp perturbing neden olabilir ki beslenme eksikliği (Örneğin, B vitamini doğumlu) vardı. Bu koşullar altında bir sorun besin erişimin sınırlı nerede olsa da, ancak, bu daha önce o hoşlanıp ücretsiz aşırı su ve beslenme dengelenmiş gıda9 ile deneysel koşullar altında beslenme önemini kaybeder gösterilmiştir . Bizim deneysel koşullar altında ameliyat sonrası besin alımı şartları optimize etmek için önemlidir. Biz yüksek protein içeriği vardı, protein kalitesi en iyi duruma getirilmiş ve enerji yoğunluğu artan hayvan yemi kullanılır. Hayvanlar bu diyet için en az iki hafta önce ameliyat acclimatized. Postoperatively, suya batırılmış besleme reklam libidum kolaylaştırmak gıda ve sıvı alımı için teklif edildi.
Fareler aynı cinsiyetten deneysel ve sahte gruplar halinde kullanmak çok önemlidir. Seks önemli ölçüde ders sadece sistemik inflamasyon aynı zamanda çeşitli kimyasal kaynaklı kolit modelleri10,11,12bağırsak iltihabı etkisi olduğu gösterilmiştir. Genel olarak, Erkek hayvanlar büyük inflamasyon, daha fazla crypt zararı, daha az yeniden oluşturma işlemi, daha yüksek düzeyde pro-inflamatuar sitokinlerin ve ağırlık kaybı10dan daha yavaş iyileşme ile daha belirgin hastalık geliştirecektir. Erkek hayvanlar kullanmanın bir diğer avantajı daha iyi tazminat ilk ameliyat sonrası kilo kaybı dönemin önde gelen daha iyi yaş eşlemeli preoperatif vücut ağırlıkları olduğunu. Yine de, dişi fareler iletişim kuralında belirli þebekeniz veya soru (Örneğin, seks hormonları DC tezahürü vardır ele alınması etkisi. Erkek fare kullanarak kararlı konut koşullarını korumak daha fazla çaba gerektirir. Erkek farelerin daha Agresif etkileşimleri yaralanma ve ölüm önde gelen yatkındır. Erkek farelerin bir baskın erkek ile kurulan hiyerarşileri yaşıyoruz. Grup hiyerarşisinde kurulduktan sonra sürekli kavga daha az yaygın13,14yaşında. Bu nedenle, farelerin girişte deneysel grupları hayvan tesisimizde en az iki hafta önce ameliyat oluşturuldu ve deneyler sona kadar bu gruplar saklanır. Genel olarak, 5-7 hayvanlar deneysel grupları bir kafeste tutulmuştu. Kararlı sosyal ve koşullar konut bakım sadece deneysel hayvan saldırgan davranış en aza indirmek için çok önemli oldu. Konut koşulları kilo alımı gibi immünolojik parametreleri15,16,17etkisi gösterilmiştir.
Kimyasal kaynaklı ve genetiği değiştirilmiş kolit modelleri duyarlılık fare suşları18,19,20arasında önemli ölçüde değişir. Mevcut iletişim kuralı C57Bl/6 fare, fare gerilme ile iyi tanımlanmış genetik arka plan ve güçlü için ara gösterir iyi karakterize bağışıklık sistemi21,22,23 yılında kurulmuştur inflamatuar dextran yanıtta sodyum kaynaklı kolit model20 sülfat ve bir prototip Th1 zorlanma23olarak kabul edilir. Diğer fare suşları kullanımı daha şiddetli hastalık faaliyetleri veya Th2 çevre gerekli olduğunda kabul edilebilir.
Özet olarak, bizim iletişim kuralı çeşitli bağışıklık hücre tiplerinin, sitokinler, kemokinler ve diğer sinyalleme molekülleri DC patogenezinde rolü değerlendirmek için değerli bir araç teşkil etmektedir. Genetik olarak değiştirilmiş fare modelleri çok sayıda C57BL/6 arka plan ile kullanılabilir ve modelimiz ile birleştirilebilir (Örneğin, fare IL-17 için eksik IL-10, kemokin CXCL13, kemokin-reseptörleri CXCR5 ve CCR7 ve sphingosine-1-fosfat reseptör 4). Congenic fare suşları C57BL/6 arka plan üzerinde kullanılabilirliğini büyük ölçüde farklı hücre türleri içinde etyoloji dahil DC rolü kurmak için transfer deneyler kolaylaştırmak. Son olarak, model etkilenen ve etkilenmeyen barsak segmentleri mukozal bağışıklık ve sistemik (Örneğin, yerel microbiome ve yerel anti-inflamatuar terapi değişiklik) yerel müdahalelerin etkisi değerlendirme imkanı sunmaktadır bağışıklık homeostazı.

Son yıllarda klasik iltihabi bağırsak hastalıkları (IBDs; farklı olmayan bulaşıcı kolit varlıkların önemli bir sayı i.e., Crohn hastalığı veya kolit ulcerosa) klinik ve histopathologically insanlarda karakterize. Uygun hayvan modeller kıt olduğundan bu kolit formları gelişimine lider patofizyolojik mekanizmaları tamamen kısmen anlaşılır değil. Saptırma kolit son zamanlarda açıklanan bu varlıklar biridir. Her ne kadar terimi 1980 yılında Glotzer1tarafından icat edildi, benzer bir fenotip ilk açıklaması Morson2tarafından 1972 yılında verildi. Hastalık enterostomy aktarma ile hastaların % %50 91 olarak gelişir ve3,4klinik şiddeti değişir. Amerika Birleşik Devletleri yaklaşık 120.000 kolostomi hastalarda yıllık insidansı göz önüne alındığında, bu hastalık varlık bir önemli sağlık sorunu teşkil etmektedir.
Bu iletişim kuralı geliştirme genel amacı bu kolit tetikleyici içinde insan DC görülen benzer kullanır ve bu birincil histopatolojik özellikler insan hastalık üretir fare bir DC modeli sağlamaktı. Fare kolit modellerin aksine, genetiği değiştirilmiş hayvanlar (Örneğin, 7 Il-transgenik fareler, N-cadherin baskın olumsuz fareler veya TGFβ- / - fareler), kolit indüksiyon bizim modelindeki gerektirmez uygulanması kimyasal maddeler (Örneğin, dextran sülfat sodyum (DSS) - bağlı kolit veya trinitrobenzene sülfonik asit (TNBS) - bağlı kolit) veya belirli hücre popülasyonlarının (olduğu gibi CD45RByüksek aktarım bağışıklık eksik farelerde transferini rahatsız edici kolit model) (bir reklam için bkz:5). Modellerin aksine, bizim DC modelinin sağlam bağışıklık sistemi bağışıklık mekanizması değerlendirilmesi dahil DC geliştirme sağlar. Hariç tutulan barsak bölümüne mukozal inflamasyon sınırlandırılması onun yankısı değerlendirilmesi üzerinde bağırsak bağışıklık diğer bölmeleri bağışıklık homeostazı gastrointestinal sistem diğer bölgelerinde mukozal bağışıklık sağlar (Örneğin , Peyer's yamalar ve mesenteriale lenf bezleri) ve tüm organizmanın bağışıklık homeostazı. Son olarak, bizim model hem yerel microbiome hem de beslenme antijenleri için normal yerel ortamdaki değişikliklerden kaynaklanan yerel inflamatuar uyaranlara kontrol mekanizmaları araştıran için uygun bir araç teşkil etmektedir.

<table><tbody><tr><td>&lt;em&gt;Operation material&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>heat underlay, 6 watt</td><td>ThermoLux, Witte + Sutor GmbH</td><td>461265</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol 70% (with methylethylketon)</td><td>Pharmacie of the University Hospital Greifswald</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Wooden applicators, small cotton head onesided, wooden stick, 150 mm length</td><td>Centramed GmbH, Germany</td><td>8308370</td><td>for disinfection of operation field</td></tr><tr><td>Scissor</td><td>Aesculap (BRAUN)</td><td>BC064R</td><td></td></tr><tr><td>Atraumatic DeBakey forceps</td><td>Aesculap (BRAUN)</td><td>OC021R</td><td></td></tr><tr><td>Needle holder</td><td>Aesculap (BRAUN)</td><td>BM012R</td><td></td></tr><tr><td>Vasofix Safety &lt;em&gt;i.v.&lt;/em&gt; cannula 22G</td><td>Braun Melsungen AG, Germany</td><td>4268091S-01</td><td></td></tr><tr><td>VICRYL Plus 4-0 violet braided; V-5 17 m 1/2c; 70 cm</td><td>ETHICON, Inc.</td><td>VCP994H</td><td></td></tr><tr><td>PDS II 6-0 monofil; V-18 13 mm 3/8c; 70 cm</td><td>ETHICON, Inc.</td><td>Z991H</td><td></td></tr><tr><td>BD Plastipak 1 mL (Syringes with needle with sterile interior)</td><td>BD Medical</td><td>305501</td><td></td></tr><tr><td>Triacid-N (N-Dodecylpropan-1,3-diamin)</td><td>ANTISEPTICA, Germany</td><td>18824-01</td><td>disinfection of surgical instruments in ultrasonic bath</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Medications&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ketamine 10%, 100 mg/mL (ketamine hydrochloride)</td><td>selectavet, Dr. Otto Fischer GmbH</td><td>9089.01.00</td><td>87 mg/kg &lt;em&gt;i.p.&lt;/em&gt;</td></tr><tr><td>Xylasel, 20 mg/mL (xylazine hydrochloride)</td><td>selectavet, Dr. Otto Fischer GmbH</td><td>400300.00.00</td><td>13 mg/kg &lt;em&gt;i.p.&lt;/em&gt;</td></tr><tr><td>NaCl 0.9%</td><td>Braun Melsungen AG, Germany</td><td>6697366.00.00</td><td></td></tr><tr><td>Buprenovet 0.3 mg/mL (buprenorphine)</td><td>Bayer, Germany</td><td>PZN: 01498870</td><td>0.1 mg/kg &lt;em&gt;s.c.&lt;/em&gt;</td></tr><tr><td>Tramal Drops, 100 mg/mL (tramadol hydrochloride)</td><td>Gr&amp;uuml;nenthal GmbH, Germany</td><td>10116838</td><td>1 mg/mL drinking water</td></tr><tr><td>Ceftriaxon-saar 2 g (ceftriaxone)&amp;nbsp;</td><td>Cephasaar GmbH, Germany</td><td>PZN: 08844252</td><td>25 mg/kg body weight &lt;em&gt;i.p.&lt;/em&gt;</td></tr><tr><td>metronidazole 5 mg/mL</td><td>Braun Melsungen AG, Germany</td><td>PZN: 05543515</td><td>12.5 mg/kg body weight &lt;em&gt;i.p.&lt;/em&gt;</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Food&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ssniff M-Z Ereich</td><td>ssniff, Germany</td><td>&amp;nbsp;V1184-3</td><td></td></tr><tr><td>Solid Drink Dehyprev Vit BIO, pouches</td><td>TripleATrading, the Netherlands</td><td>SDSHPV-75</td><td></td></tr><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nikon Eclipse Ci-L</td><td>Nikon Instruments Europe BV, Germany</td><td></td><td>light microscopy</td></tr><tr><td>VetScan HM 5&amp;nbsp;</td><td>Abaxis, USA</td><td>770-9000</td><td>Veterinary hematology analyzer of 50 &amp;micro;l venous EDTA-blood</td></tr><tr><td>Bandelin SONOREX (Ultrasonic bath)</td><td>Bandelin electronics, Germany</td><td>RK 100 H</td><td>disinfection of surgical instruments</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Software&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>NIS-Element BR4 software</td><td>Nikon Instruments Europe BV, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism Version 6</td><td>GraphPad Software, Inc.</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

murine distal colostomy, a novel model of diversion colitis in c57bl/6 mice

Saptırma kolit (DC) hastalarda aktarma enterostomy bir sonucu olarak dışkı akışından hariç barsak segmentleri ile meydana gelen sık bir klinik durumdur. Bu hastalığın etyolojisinde kötü tanımlanmış kalır ama bu klasik iltihabi bağırsak hastalıkları Crohn hastalığı ve ülseratif kolit gibi farklı görünüyor. Bu hastalık gelişimine lider patofizyolojik mekanizmaları çözmeye yönelik araştırma ciddi bir şekilde uygun bir fare modeli eksikliği tarafından engel olmuştur. Bu iletişim kuralı, bağışıklık sisteminin rolü ve microbiome DC geliştirilmesi ile etkileşimi kolaylaştırır DC fare modeli oluşturur. C57BL/6 hayvanlar kullanarak bu modelde, distal kolostomi oluşturma, hariç tutulan barsak segmentleri iltihap orta hafif gelişimi tetikleme ve hallmark lezyonlar insan üreme dışkı akışından distal kolon parçaları hariç tutulur DC ile ılımlı bir sistemik inflamatuar yanıt. Fare modeli aksine, genetik olarak değiştirilmiş fare modelleri C57BL/6 arka plan üzerinde çok sayıda kullanılabilir. Bu hayvanlar modelimiz ile kombinasyonu bireysel sitokinler, kemokinler veya (Örneğin, interlökin (IL) -17; biyoaktif moleküllerin reseptörleri potansiyel rolleri sağlar Il-10, kemokin CXCL13, kemokin reseptörleri CXCR5 ve CCR7 ve sphingosine-1-fosfat reseptör 4) DC patogenezinde değerlendirilmek için. Congenic fare suşları C57BL/6 arka plan üzerinde kullanılabilirliğini büyük ölçüde farklı hücre türleri içinde etyoloji dahil DC rolleri kurmak için transfer deneyler kolaylaştırır. Son olarak, model mukozal bağışıklık etkilenen ve etkilenmeyen barsak segmentleri üzerinde etkileri (Örneğin, yerel microbiome veya yerel anti-inflamatuar terapi modifikasyonu) yerel müdahalelerin değerlendirme imkanı sunmaktadır ve Tarih sistemik bağışıklık homeostazı.

Cerrahi, hem deneysel (kolostomi) ve bunu sham (colotomy) iyi tolere edilir. Cerrahi ve perioperatif yönetimi doğru yapıldığında perioperatif mortalite % 10 fazla olmamalıdır. Ameliyat sonrası ilk haftasında her iki deneysel ve sahte gruplarında önemli kilo kaybı görülür. Sham grubunun hayvanlar onların ağırlık nadir genellikle dördüncü ameliyat sonrası gün doğru ulaşmak ama bir günde daha sonra deney grubu oluşur. Kilo kaybı daha ilk vücut ağırlığının % 21.7 ulaşan deney grubu telaffuz edilir. Buna ek olarak, sham hayvanlar onların ilk vücut ağırlığı (Şekil 2)6%10,8 kaybetmek. Ameliyat sonrası ilk hafta kilo nadir sonra vücut ağırlığı sürekli olarak deneysel her iki grup, ama daha yavaş eğimli deney grubu içinde yükselir. İşaretler ve belirtiler şiddetli bağırsak iltihabı (yani, kanlı akıntı veya sıvı barsak hareketleri ne deneysel ne de sahte grup6oluşur). İlk 60 gün boyunca toplam mortalite postoperatively kolostomi grubunda % 40 ve colotomy grubunda yaklaşık % 10 civarındadır. En fazla ölüm ilk ameliyat sonrası hafta (deneysel grubunda % 61, sham grubunda % 66) sırasında ortaya çıkar. Ölüm nedenleri Şekil 3' te gösterilmektedir.
Farelerde distal kolostomi ağırlıklı olarak Lenfositik kolit hallmark histolojik özellikler insan DC üreten gelişiminde sonuçlanır. Bu değişiklikler bağırsak hariç tutma süresi ile artırın. Crypt uzunluğu önemli ölçüde dışlanan bağırsak segmentlerinde kısaltılır. Bu kısalma istatistiksel anlamlılık dışkı saptırma (Şekil 3a) 14 gün sonra ulaşır. Goblet hücre taşıyan crypt uzunluğu hariç tutulan barsak segmentleri (Şekil 3b) 30 gün sonra azalır. Mutlak goblet hücre sayıları 14 ameliyat sonrası gün (Şekil 3 c) sonra kriptalarının dışlanan barsak segmentindeki içinde de önemli ölçüde azaltılır. DC, mukozasında, lenfoid folikül gelişimi hallmark lezyon dışkı sapma daha uzun bir süre gerektirir. Lenfoid folikül sayısının artmasına iki hafta gibi erken görülebilir rağmen farklılıklar iki ay sonra (rakamlar 5a-c) önemli çıkıyor. Daha önce açıklanan tüm histopatolojik değişiklikleri daha içinde belirgin dışlanan barsak segmentlerinin proksimal bölgelerde distal. Akut iltihap belirtisi olarak tipik bir nötrofilik infiltrat genellikle (rakamlar 5 d-e) gözlenen değil.
Yerel bağırsak iltihabı sistemik bir yankısı belirtisi olarak nötrofil sayısı önemli ölçüde kolostomi hayvanlarda ameliyattan sonra 14 gün kadar erken artmıştır. Bu fark (60 gün) gözlem döneminin sonuna kadar korunur. Trombosit sayımları biraz sonra 60 gün (Şekil 6) kolon saptırma ile hayvanlarda artmıştır. Hemoglobin düzeyi ve hematokrit 14 gün sonra kolostomi grubu operasyonda sahte grubuna kıyasla azalmıştır.
Vitamin eksikliği kemirgenler neden oluyor demek corpuscular birim (MCH) azaltılmış ve corpuscular hemoglobin (MCV) değerleri7demek gösterilmiştir. Bizim modelinde, her iki bu parametre ilk artışlar 14 ve 30 gün sonra görüyoruz. MCV ve MCH için normal değerler uzun takip (Şekil 7) sonra verir. Bu o distal kolostomi klinik olarak anlamlı vitamini eksikliği uzun süreli takip sırasında yol açmadığını gösterir.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig1.jpg"> Resim 1: cecal bölge ve cerrahi anatomisi. (a) ameliyat sonrası anatomi grafik gösterimi. (b) topografya cecal pol ve anatomik yapılar. kolostomi açıklıklar (c) grafik gösterimi. Şekil 1a Kleinwort vd.6' dan değiştirildi. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig2.jpg"> Şekil 2: vücut ağırlığı geliştirme. Vücut ağırlığı preoperatif vücut ağırlığının yüzde olarak gösterilir. Vücut kolostomi eğrileri ağırlık ve ilk ameliyat sonrası kilo kaybı (p < 0.001) sham grubuna göre kolostomi grubunda daha yüksek (colotomy) hayvanlar ortaya sham. Değerleri arasında 21-26 hayvanlar grubu başına ortalama ± standart hataları anlamına gelir (21 hayvanlar alınan değiştirmem; 26 hayvanlar vardı sahte grup). Bu rakam Kleinwort vd.6' dan değiştirildi. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig3.jpg"> Şekil 3: ölüm nedenleri. Komplikasyonlar all-neden ölüm oranının yüzde olarak gösterilir ve bir pasta grafiği (kolostomi (a) grubu, sham (b) grubu) gösterilmiştir. Ameliyat sonrası komplikasyonlar Ģunları Nekropsi tarafından belirlenmiştir. İsraf sendromu sürekli kilo kaybı ilk vücut ağırlığı ve no Nekropsi diğer bulgular % 33 daha büyük olarak tanımlanmıştır. Ileus ve anastomoz kaçağı Nekropsi tanısı konuldu. Stoma komplikasyonlar peristomal apse ve mukokutanöz ayırmalar tanımlanmış. Diğer komplikasyonlar yara yırtılması laparotomi çekum, iskemi, oluşan ve durumlarda Nekropsi belli değil. Ameliyat sonrası komplikasyonlar Ģunları dağılımında önemli farklılıklar gruplar arasında görüldü (p = 0.021, Fisher kesin testi için ilâ 6 × 6 acil durum tablo iki taraflı analizi kullanılarak analiz). Kolostomi grubunda 39 hayvanlar ve 29 sham grubunda vardı. Bu rakam Kleinwort vd.6' dan değiştirildi. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig4.jpg"> Şekil 4: Crypt uzunluğu ve goblet hücre nüfus. Crypt uzunluğu ve goblet hücre sayıları periyodik asit Schiff boyama sonra rektum bölümlerini parafin kullanılarak belirlenmiştir. (a) crypt uzunluğu önemli ölçüde saptırma kolit (DC) hayvanlarla rektum azalma. (b) crypt goblet hücre taşıyan bölgenin uzunluğu ölçülür ve bir oranı tam crypt uzunluğa ayarlayın. 30 ve 60 gün postoperatively, DC grubunda crypt uzunluğu taşıyan goblet hücrelerinin yüzde azalma. (c) Goblet hücre sayıları DC hayvanlarda sham grubuna göre önemli ölçüde azaltıldı. Grafikler (a) ile (c) grubu başına 5-9 hayvanlar arasında anlamına gelir ve standart hataları göster (kolostomi 14 ve 30 gün, sham 14 gün: n = 8; kolostomi 60 gün: n = 5; 30 ve 60 gün sham: n = 9); ∗p < 0,05; ∗∗p < 0,01. Bu rakam Kleinwort vd.6' dan değiştirildi. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig5.jpg"> Şekil 5: lenfoid follikül ve inflamatuar infiltratlar. (a) lenfoid folikül yönlendirilir iki nokta üst üste ve sham hayvanların Hematoksilen ve eozin ile lekeli rektum parafin bölümlerinde sayıldı. 5-9 hayvanlar grubu başına grafik anlamına gelir ve standart hataları gösterir (kolostomi 14 ve 30 gün, sham 14 gün: n = 8; kolostomi 60 gün: n = 5; 30 ve 60 gün kontrol: n = 9), ∗p < 0,05; ∗∗p < 0,01. (b) ve (c) temsilcisi örnek olarak rektum kolostomi (b) ve (c) sham hayvanların 60 gün bölümlerini postoperatively Hematoksilen ve eozin ile lekeli. Önemli bir lenfoid folikül (∗) kolostomi fare mukoza içinde mevcut. Ölçek çubukları temsil 100 µm. (d) ve (e) chloroacetate ile boyama esteraz tepki parafin bölümlerinde nötrofil granülosit algılamak için gerçekleştirildi. Yönlendirilir rektum kesit üzerinde bir akut enflamatuar nötrofilik infiltrat ne kolostomi grubunda (d) ne de sahte hayvanlarda (e) kadar 60 gün postoperatively gözlendi. Ölçek çubuklar 100 µm gösterir. Bu rakam Kleinwort vd.6' dan değiştirildi. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig6.jpg"> Şekil 6: nötrofil ve trombosit sayımları. Kan sayımı venöz kan örneklerinin bir veteriner Hematoloji Çözümleyicisi tarafından belirlenmiştir. (a) nötrofil sayısı önemli ölçüde sahte hayvanlar için 60 gün postoperatively kadar karşılaştırıldığında kolostomi grubunda artış. (b) trombosit sayımları biraz kolostomi grubunda 60 gün postoperatively yüksek. 5-9 hayvanlar grubu başına grafik anlamına gelir ve standart hataları gösterir (kolostomi 14 ve 30 gün, sham 14 gün: n = 8; kolostomi 60 gün: n = 5; 30 ve 60 gün sham: n = 9), ∗p < 0,05; ∗∗p < 0,01. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57616/57616fig7.jpg"> Şekil 7: kırmızı kan hücresi parametreleri. Kan sayımı venöz kan örneklerinin bir veteriner Hematoloji Çözümleyicisi tarafından belirlenmiştir. (a) hemoglobin ve hematokrit (b) önemli ölçüde sahte grubuna göre kolostomi grubunda azalma. (c) corpuscular birim (MCH) önemli ölçüde yükseltilmiş 14 ve 30 günde postoperatively kolostomi grup sham grubuna kıyasla ama 60 gün sonra normale döndü demek. (d) ortalama corpuscular hemoglobin (MCV) değerleri 30 gün sonra ama sonra artık postoperatively kolostomi grubunda 60 gün hayvanlar sham kıyasla yüksek. 5-9 hayvanlar grubu başına grafik anlamına gelir ve standart hataları gösterir (kolostomi 14 ve 30 gün, sham 14 gün: n = 8; kolostomi 60 gün: n = 5; 30 ve 60 gün sham: n = 9), ∗p < 0,05; ∗∗p < 0,01. <a href="/files/ftp_upload/57616/57616fig7large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Murine Distal Colostomy, A Novel Model of Diversion Colitis in C57BL/6 Mice at JoVE.com

Murine Distal Colostomy, A Novel Model of Diversion Colitis in C57BL/6 Mice

Fare Distal kolostomi, C57BL/6 farelerde saptırma kolit roman modeli

Fare distal kolostomi insan saptırma kolit, ağırlıklı olarak Lenfositik kolit dışkı akışından hariç iki nokta üst üste segmentinde için bir fare modeli sağlar.

Diversion colitis (DC) is a frequent clinical condition occurring in patients with bowel segments excluded from the fecal stream as a result of a ...

murine-distal-colostomy-novel-model-diversion-colitis-c57bl6

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

12.8K Görüntüleme.  Universitätsmedizin Greifswald. Fare distal kolostomi insan saptırma kolit, ağırlıklı olarak Lenfositik kolit dışkı akışından hariç iki nokta üst üste segmentinde için bir fare modeli sağlar.

Video: Murine Distal Colostomy, A Novel Model of Diversion Colitis in C57BL/6 Mice

Modeling Colitis-Associated Cancer with Azoxymethane (AOM) and Dextran Sulfate Sodium (DSS)

Individuals with inflammatory bowel disease (IBD), such as Crohn's disease (CD) or ulcerative colitis (UC) are at increased risk of developing colorectal cancer (CRC) over healthy individuals. This risk is proportional to the duration and extent of disease, with a cumulative incidence as high as 30% in individuals with longstanding UC with widespread colonic involvement.1 Colonic dysplasia in IBD and colitis associated cancer (CAC) are believed to develop as a result of repeated cycles of epithelial cell injury and repair while these cells are bathed in a chronic inflammatory cytokine milieu.2 While spontaneous and colitis-associated cancers share the quality of being adenocarcinomas, the sequence of underlying molecular events is believed to be different.3 This distinction argues the need for specific animal models of CAC.
Several mouse models currently exist for the study of CAC. Dextran sulfate sodium (DSS), an agent with direct toxic effects on the colonic epithelium, can be administered in drinking water to mice in multiple cycles to create a chronic inflammatory state. With sufficient duration, some of these mice will develop tumors.4 Tumor development is hastened in this model if administered in a pro-carcinogenic setting. These include mice with genetic mutations in tumorigenesis pathways (APC, p53, Msh2), as well as mice pre-treated with genotoxic agents (azoxymethane [AOM], 1,2-dimethylhydrazine [DMH]).5 
The combination of DSS with AOM as a model for colitis associated cancer has gained popularity for its reproducibility, potency, low price, and ease of use. Though they have a shared mechanism, AOM has been found to be more potent and stable in solution than DMH. While tumor development in other models generally requires several months, mice injected with AOM and subsequently treated with DSS develop adequate tumors in as little as 7-10 weeks.6, 7 Finally, AOM and DSS can be administered to mice of any genetic background (knock out, transgenic, etc.) without cross-breeding to a specific tumorigenic strain. Here, we demonstrate a protocol for inflammation-driven colonic tumorigenesis in mice utilizing a single injection of AOM followed by three seven-day cycles of DSS over a 10 week period. This model induces tumors with histological and molecular changes closely resembling those occurring in human CAC and provides a highly valuable model for the study of oncogenesis and chemoprevention in this disease.8

Modeling Colitis-Associated Cancer with Azoxymethane AOM and Dextran Sulfate Sodium DSS

We demonstrate a protocol in which administration of the genotoxic agent azoxymethane (AOM) followed by three cycles of the pro-inflammatory agent dextran sulfate sodium (DSS) rapidly and consistently generates colon tumors in mice with morphologic and molecular similarities to those seen in human colitis-associated cancer.

Azoxymethane (AOM) ve Dekstran Sülfat Sodyum (DSS) ile Modelleme Kolit-İlişkili Kanser

Individuals with inflammatory bowel disease (IBD), such as Crohn's disease (CD) or ulcerative colitis (UC) are at increased risk of developing colorectal ...

Tıp

The Citrobacter rodentium Mouse Model: Studying Pathogen and Host Contributions to Infectious Colitis

This protocol outlines the steps required to produce a robust model of infectious disease and colitis, as well as the methods used to characterize Citrobacter rodentium infection in mice. C. rodentium is a gram negative, murine specific bacterial pathogen that is closely related to the clinically important human pathogens enteropathogenic E. coli and enterohemorrhagic E. coli. Upon infection with C. rodentium, immunocompetent mice suffer from modest and transient weight loss and diarrhea. Histologically, intestinal crypt elongation, immune cell infiltration, and goblet cell depletion are observed. Clearance of infection is achieved after 3 to 4 weeks. Measurement of intestinal epithelial barrier integrity, bacterial load, and histological damage at different time points after infection, allow the characterization of mouse strains susceptible to infection.
The virulence mechanisms by which bacterial pathogens colonize the intestinal tract of their hosts, as well as specific host responses that defend against such infections are poorly understood. Therefore the C. rodentium model of enteric bacterial infection serves as a valuable tool to aid in our understanding of these processes. Enteric bacteria have also been linked to Inflammatory Bowel Diseases (IBDs). It has been hypothesized that the maladaptive chronic inflammatory responses seen in IBD patients develop in genetically susceptible individuals following abnormal exposure of the intestinal mucosal immune system to enteric bacteria. Therefore, the study of models of infectious colitis offers significant potential for defining potentially pathogenic host responses to enteric bacteria. C. rodentium induced colitis is one such rare model that allows for the analysis of host responses to enteric bacteria, furthering our understanding of potential mechanisms of IBD pathogenesis; essential in the development of novel preventative and therapeutic treatments.

The Citrobacter rodentium Mouse Model: Studying Pathogen and Host Contributions to Infectious Colitis

Citrobacter rodentium infection provides a valuable model to study enteric bacterial infections as well as host immune responses and colitis in mice. This protocol outlines the measurement of barrier integrity, pathogen load and histological damage allowing for the thorough characterization of pathogen and host contributions to murine infectious colitis.

<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Mouse Model: Bulaşıcı Kolit için çalışılması Patojen ve Host Katılımlar

This protocol  outlines the steps required to produce a robust model of infectious disease and  colitis, as well as the methods used to characterize ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Murine Colitis Modeling using Dextran Sulfate Sodium (DSS)

Colitis can occur from viral or bacterial infections, ischemic insult, or autoimmune disorders; most notably Ulcerative Colitis and the colonic variant of Crohn&rsquo;s Disease - Crohn&rsquo;s Colitis. Acute colitis may present with abdominal pain and distention, malabsorption, diarrhea, hematochezia and mucus in the stool. We are beginning to understand the complex interactions between the environment, genetics, and epithelial barrier dysfunction in Inflammatory Bowel Disease and animal models of colitis have been essential in advancing our understanding of this disease. One popular model involves supplementing the drinking water of mice with low-molecular weight Dextran Sodium Sulfate (DSS), resulting in epithelial damage and a robust inflammatory response in the colon lasting several days 1.Variations of this approach can be used to model acute injury, acute injury followed by repair, and repeated cycles of DSS interspersed with recovery modeling chronic inflammatory diseases 2. After a single four-day treatment of 3% DSS in drinking water, mice show signs of acute colitis including weight loss, bloody stools, and diarrhea. Mice are euthanized at the conclusion of the treatment course and at necropsy dissected colons are processed and can be 'Swiss rolled" 3 to allow microscopic analysis of the entire colon or infused with formalin as "sausages" to allow macroscopic analysis. Tissue is then embedded in paraffin, sectioned, and stained for histologic review.

Murine Colitis Modeling using Dextran Sulfate Sodium DSS

Dextran sulfate sodium (DSS) administered in the drinking water is an established murine inflammatory injury model of acute colitis. This protocol outlines the method for DSS treatment and the preparation of tissues.

Dekstran Sülfat Sodyum (DSS) kullanarak murin Kolit Modelleme

Colitis can occur from viral or bacterial infections, ischemic insult, or autoimmune disorders; most notably Ulcerative Colitis and the colonic variant of ...

Biyoloji

Murine Ileocolic Bowel Resection with Primary Anastomosis

Intestinal resections are frequently required for treatment of diseases involving the gastrointestinal tract, with Crohn&#8217;s disease and colon cancer being two common examples. Despite the frequency of these procedures, a significant knowledge gap remains in describing the inherent effects of intestinal resection on host physiology and disease pathophysiology. This article provides detailed instructions for an ileocolic resection with primary end-to-end anastomosis in mice, as well as essential aspects of peri-operative care to maximize post-operative success. When followed closely, this procedure yields a 95% long-term survival rate, no failure to thrive, and minimizes post-operative complications of bowel obstruction and anastomotic leak. The technical challenges of performing the procedure in mice are a barrier to its wide spread use in research. The skills described in this article can be acquired without previous surgical experience. Once mastered, the murine ileocolic resection procedure will provide a reproducible tool for studying the effects of intestinal resection in models of human disease.

Ileocolic resection is commonly performed in several human diseases; however, little is known regarding the impact of intestinal resection on surgical illnesses. This article provides instruction on executing the procedure in mice with high success, providing a means to study the effects of ileocolic resection in models of disease.

İlköğretim Anastomoza sahip fare ileokolonik Bağırsak Rezeksiyon

Intestinal resections are frequently required for treatment of diseases involving the gastrointestinal tract, with Crohn&#8217;s disease and colon cancer ...

Creation of Colonic Anastomosis in Mice

Intestinal anastomoses are commonly performed in both elective and emergent operations. Even so, anastomotic leaks are a highly feared complications of colonic surgeries and can occur in up to 26% of surgical anastomoses, with mortality being up to 39% for patients with such a leak. Currently, there remains a paucity of data detailing the cellular mechanisms of anastomotic healing. Devising preventative strategies and treatment modalities for anastomotic leak could be greatly potentiated by a better understanding of appropriate anastomotic healing.
A murine model is ideal as previous studies have shown that the murine anastomosis is the most clinically similar to the human case as compared with other animal models. We offer an easily reproducible murine model of colonic anastomosis in mice that will allow for further illustration of anastomotic healing.

Anastomotic leak or breakdown after surgery is a major cause of postoperative morbidity and mortality. Our surgery for creating a colonic anastomosis is a reliable and reproducible method for studying the healing mechanisms of anastomoses.

Farelerde kolon anastomoz oluşturulması

Intestinal anastomoses are commonly performed in both elective and emergent operations. Even so, anastomotic leaks are a highly feared complications of ...

Murine Appendectomy Model of Chronic Colitis Associated Colorectal Cancer by Precise Localization of Caecal Patch

The human appendix has been recently implicated to play important biological roles in the pathogenesis of various complex diseases, such as colorectal cancer, inflammatory bowel disease, and Parkinson&#8217;s disease. To study the function of the appendix, a gut disease-associated murine appendectomy model has been established and its step-by-step protocol is described here. This report introduces a facile protocol for caecal patch removal in mice followed by the chemical induction of chronic colitis-associated colorectal cancer using a combination of dextran sulfate sodium (DSS) and azoxymethane (AOM). IgA specific cells and IgA concentration were significantly reduced upon removal of the caecal patch in male C57BL/6 mice&#160;compared to those in the sham group. Simultaneously administering 2% DSS and AOM resulted in nearly 80% mice survival in both sham and appendectomy groups without significant body weight loss. Histological results confirmed colonic inflammation and different degrees of adenocarcinoma. This model can be used for the study of the functional role of the appendix in maintaining gut microbiota homeostasis and pathogenesis of gut colitis and malignancies, as well as for the potential development of drug targeting therapies.

The presented protocol describes a facile surgical removal of the appendix (caecal patch) in a mouse followed by the induction of inflammatory bowel disease-associated colorectal cancer. This murine appendectomy model enables investigation of the biological role of the appendix in the pathogenesis of human gastrointestinal disease.

Kaekal Patch Kesin Lokalizasyonu ile Kronik Kolit İlişkili Kolorektal Kanser Murine Apendektomi Modeli

The human appendix has been recently implicated to play important biological roles in the pathogenesis of various complex diseases, such as colorectal ...

<meta charset="utf8"></head><body>Bağırsak Manipülasyonu Yoluyla Postoperatif İleusun İncelenmesi için Murin Modeli

Postoperative Ileus Murine Model

Most patients experience postoperative ileus (POI) after surgery, which is associated with increased morbidity, mortality, and hospitalization time. POI is a consequence of mechanical damage during surgery, resulting in disruption of motility in the gastrointestinal tract. The mechanisms of POI are related to aberrant neuronal sensitivity, impaired epithelial barrier function, and increased local inflammation. However, the details remain enigmatic. Therefore, experimental murine models are crucial for elucidating the pathophysiology and mechanism of POI injury and for the development of novel therapies.
Here, we introduce a murine model of POI generated via intestinal manipulation (IM) that is similar to clinical surgery; this is achieved by mechanical damage to the small intestine by massaging the abdomen 1-3 times with a cotton swab. IM delayed gastrointestinal transit 24 h after surgery, as assessed by FITC-dextran gavage and fluorescence detection of the segmental digestive tract. Moreover, tissue swelling of the submucosa and immune cell infiltration were investigated by hematoxylin and eosin staining and flow cytometry. Proper pressure of the IM and a hyperemic effect on the intestine are critical for the procedure. This murine model of POI can be utilized to study the mechanisms of intestinal damage and recovery after abdominal surgery.

<meta charset="utf8"></head><body>Ameliyat Sonrası İleus Murin Modeli

We describe a murine model of postoperative ileus generated via intestinal manipulation. Gastrointestinal transit function, pathologic changes, and immune cell activation were assessed 24 h after surgery.

Ameliyat Sonrası İleus Murin Modeli

Most patients experience postoperative ileus (POI) after surgery, which is associated with increased morbidity, mortality, and hospitalization time. POI ...

Single-Anastomosis Duodeno-Ileal Bypass with Sleeve Gastrectomy Model in Mice

Obesity is a major health issue worldwide. As a response, bariatric surgeries have emerged to treat obesity and its related comorbidities (e.g., diabetes mellitus, dyslipidemia, non-alcoholic steatohepatitis, cardiovascular events, and cancers) through restrictive and malabsorptive mechanisms. Understanding the mechanisms by which these procedures allow such improvements often require their transposition into animals, especially in mice, because of the ease of generating genetically modified animals. Recently, the single-anastomosis duodeno-ileal bypass with sleeve gastrectomy (SADI-S) has emerged as a procedure that uses both restrictive and malabsorptive effects, which is being used as an alternative to gastric bypass in case of major obesity. Thus far, this procedure has been associated with strong metabolic improvements, which has led to a marked increase in its use in daily clinical practice. However, the mechanisms underlying these metabolic effects have been poorly studied as a result of a lack of animal models. In this article, we present a reliable and reproducible model of SADI-S in mice, with a special focus on perioperative management. The description and use of this new rodent model will be helpful for the scientific community to better understand the molecular, metabolic, and structural changes induced by the SADI-S and to better define the surgical indications for clinical practice.

Single-anastomosis duodeno-ileal bypass (SADI-S) is an emerging bariatric procedure with important metabolic effects. In this article, we present a reliable and reproducible model of SADI-S in mice.

Farelerde Sleeve Gastrektomi Modeli ile Tek Anastomoz Duodeno-İleal Bypass

Obesity is a major health issue worldwide. As a response, bariatric surgeries have emerged to treat obesity and its related comorbidities (e.g., diabetes ...

Fare Distal kolostomi, C57BL/6 farelerde saptırma kolit roman modeli

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Azoxymethane (AOM) ve Dekstran Sülfat Sodyum (DSS) ile Modelleme Kolit-İlişkili Kanser

Dekstran Sülfat Sodyum (DSS) kullanarak murin Kolit Modelleme

İlköğretim Anastomoza sahip fare ileokolonik Bağırsak Rezeksiyon

Farelerde kolon anastomoz oluşturulması

Kaekal Patch Kesin Lokalizasyonu ile Kronik Kolit İlişkili Kolorektal Kanser Murine Apendektomi Modeli

Ameliyat Sonrası İleus Murin Modeli

Ameliyat Sonrası İleus Murin Modeli

Ameliyat Sonrası İleus Murin Modeli

Farelerde Sleeve Gastrektomi Modeli ile Tek Anastomoz Duodeno-İleal Bypass