Name: balloon-based injury to induce myointimal hyperplasia in the mouse abdominal aorta
Uploaded: 2018-02-07T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta at JoVE.com

Yazarlar Christiane Pahrmann onun teknik yardım için teşekkür ederiz.
D.W. Max Kade Vakfı tarafından desteklenmiştir. Alınan T.D. hibe başka Kröner Fondation (2012_EKES.04) ve Deutsche Forschungsgemeinschaft (DE2133/2-1_. S. S. araştırma hibe Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG; aldı. SCHR992/3-1, SCHR992/4-1).

Hayvan insana ilişkin Bakım Kılavuzu laboratuvar hayvanlarının ilkeleri için uygun olarak alınan, Enstitüsü ile laboratuvar hayvan kaynakları tarafından hazırlanan ve ulusal sağlık Enstitüleri tarafından yayınlandı. Tüm hayvan iletişim kuralları sorumlu yerel otorite ('' Amt für Gesundheit und Verbraucherschutz, Hansestadt (Office sağlık ve tüketici koruma) Hamburg'') tarafından kabul edildi.
1. kateter hazırlık
Not: kateter ile ilgili bilgi için Malzemeler tablo bakın.
<ol><li>Kateter kateter sahibinden al.</li>
	<li>Distal bağlantı noktası Lümen den embolisinin iyileşiyorsun.</li>
	<li>Siyanoakrilat yapıştırıcı kateter distal ucunda bir damla koymak. Dikkat: lateks veya nitril eldiven giymek.</li>
	<li>Kateter RX limanda embolisinin yerleştirin ve Lümen distal bağlantı noktasına ilerlemek. Daha sonra embolisinin biraz sonuna kadar ~ 5 mm boşluk bırakmayı çekin.</li>
	<li>Kuru yapışkan izin vermek için 5 dakika bekleyin.</li>
	<li>Embolisinin hareket, sabit olmalıdır. Eğer hala mobil, adımları 1.3-1.6 yineleyin.</li>
	<li>3-mL şırınga 1,5 mL % 0,9 serum doldurmak ve balon enflasyon bağlantı noktasına bağlayın.</li>
	<li>Balon enflasyon sınamak için şırınga pistonu itin. 0.6 mL serum fizyolojik şırıngada bırakın.</li>
</ol>2. fare hazırlık
<ol><li>Erkek farelerin 14 yaklaşık 30 gram ağırlığında haftalık yaşta elde edilir. Not: Biz laboratuvar Enstitüsü hayvanlardan elde edilen hayvanlar kullanılır. Biz burada C57BL/6J kullanılır.</li>
	<li>Bir indüksiyon odası fare 2.0-%2.5 isofurane (500 mL/dk oksijen akış hızı) ile uyuşturan için kullanın.</li>
	<li>Sırtında bir Isıtma yastık üzerinde fareyi getirin ve anestezi ağız ve burun fare kapsayan bir sağlamlılık ile korumak. Anestezi yeterli derinlik için arka ayak ve kuyruk refleksleri olmayışı doğrulamak için pinching tarafından kontrol edin.</li>
	<li>Karın saç saç makası kullanarak kaldırın.</li>
	<li>Arka ayakları yaymak ve konumlarını bant kullanarak düzeltin.</li>
	<li>Karın bölgesi povidone-iyot, % 80'i etanol tarafından takip kullanarak dezenfekte. Bu işlemi iki kez daha tekrarlayın.</li>
	<li>Cerrahi sitesi değil kontamine emin olmak için bir cerrahi örtüsü kullanın. Açık cilt ve kas katmanları boyunca linea alba karın organları ortaya çıkarmak için bir makas (veya neşter).</li>
	<li>Bağırsak % 0,9 serum fizyolojik nemli eldiven içinde yatıyordu ve onları nemli tutmak için sarın.</li>
	<li>İki iyi forseps yağ dokusu karın aortu yukarıda kaldırmak için kullanın.</li>
	<li>Bir insülin şırınga (30 G) kullanarak, heparin çözüm (50 U/mL) 250 µL Inferior Vena kava (IVC) içine enjekte ve sistemik dağıtımı için 3 dakika bekleyin. Heparin hemostaz bastırmak ve ameliyat sırasında istenmeyen pıhtılaşma önlemek.</li>
	<li>İki forseps kullanarak, infrarenal aortada aşağı onun çatallanma ve onun giden şube damarları incelemek.</li>
	<li>Klempe bir bölge, bir yüksek sıcaklık cauterizer yerleştirilmesi için beklenen yan damarlara ligate.</li>
	<li>Hemen altındaki renal arterler infrarenal aortada sıkma tarafından kan akışını durdurmak.</li>
	<li>İkinci bir klemp hemen üstünde aort çatallanma distal bir konuma yerleştirin.</li>
	<li>Küçük bir yatay kesi kelepçeler gemi boyunca arasındaki orta nokta itibariyle makas kullanarak gerçekleştirin. Not: Belgili tanımlık kesme boyutu 1/3 kap çevresi'e eşdeğer olmalıdır.</li>
	<li>Bir şırınga (30 G) iğne ile belgili tanımlık kesme yerleştirin ve aort 250 µL heparin çözüm (50 U/mL) ile yıkayın.</li>
	<li>10-0 dikişler kullanarak, bir tek düğüm belgili tanımlık kesme her yanına koyun.</li>
	<li>Aorta belgili tanımlık kesme bir gemi DİLATÖR ekleyerek genişletmek ve gemi biraz yayıldı. Dilatasyon 2-3 kere tekrar edin.</li>
	<li>% 0,9 serum fizyolojik ile balon kateter nemlendirir.</li>
	<li>Düzleştirilmiş balon katater aort yerleştirin ve aort üzerinde proksimal klemp doğru ilerlemek.</li>
	<li>Proksimal klemp ulaşan, dikkatle proksimal klemp açın ve ~0.6 mL serum enjekte edilerek kan kaçağı önlemek için balon şişirmek. Not: 1.5:1 gemisine şişirilmiş balon oranıdır.</li>
	<li>Yaklaşık 2 cm retrograd kateter ilerlemek.</li>
	<li>Genişletilmiş kateter geri, balon biraz şırınga serbest bırakarak deflate ise çek.</li>
	<li>Katater aort kesi ulaştığında proksimal klemp takın. Balon tamamen boşaltmak ve çıkarın.</li>
	<li>30 G kullanarak aort 250 µL heparin çözüm (50 U/mL) ile yıkayın.</li>
	<li>10-0 dikişler kullanarak aort kesi kapatın. Yer dikiş ventral tarafta bir ya da iki dikiş tarafından takip her yan tarafında kesildi.</li>
	<li>Distal klempi aç. Kanama, durumunda kelepçe tekrar kapatın ve ek dikiş yerleştirin.</li>
	<li>Proksimal klemp dikkatlice açın.</li>
	<li>İki temizleme bezi destek ve herhangi bir kanama durdurmak için dikiş üzerinde yerleştirin.</li>
	<li>Absorbe hemostats Bunu sürdürebilmek için dikiş üzerinde yerleştirin. Not: Aortik nabız klemple kesi görünür olmalıdır.</li>
	<li>Bağırsak karın geri yerleştirin.</li>
	<li>Karın boşluğu ile steril % 0,9 serum, 37 ° C'ye Önceden ısıtılmış olduğu durulama</li>
	<li>6-0 çalışan dikiş kullanarak karın kas katman kapatın.</li>
	<li>5-0 çalışan dikiş ile cilt kapatın.</li>
	<li>4-5 mg/kg Carprofen subkutan uyanmak için fareyi izin vermeden önce enjekte et. O bilinç kazanmıştır kadar hayvan izle, sternal recumbency korumak. Hayvan yalnız bir kafes içinde tam kurtarma kadar tutun.</li>
	<li>Metamizole 3 gün ağrı kesici olarak içme suyu (50 mg/100 mL) ekleyin ve hayvan her gün izlemek. Genellikle fareler gibi tatlı metamizole tat ve ameliyattan hemen sonra içki başlatın. Tercih edilen sürekli salınım enjekte edilebilir maddeleri metamizole yerine kullanılabilir. Not: Bu model için gözlem süresi 28 gün olur.</li>
</ol>3. histopatoloji
<ol><li>Balon yaralı aort 2.2-2,9 adımlarda açıklandığı gibi farelerin hazırlayarak 28 gün sonra hasat.</li>
	<li>Makas (çatallanma ve böbrek damarlarının yukarıda 0.3 mm arasında) balon yaralı aort kaldırmak ve kalbini keserek fare ötenazi için kullanın.</li>
	<li>% 0,9 ile gemi Lümen sifonu NaCl.</li>
	<li>Gecede %4 paraformaldehyde (PFA) hasat gemi tamir ve 5 saat süreyle etanol, 2 saat, bir saat için % 80 etanol, % 95 etanol için 2 saat boyunca % 70 etanol ile başlayan ve % 100 etanol konsantrasyonları artan kurutmak. O zaman, Ksilen örneklerinde 2 saat boyunca parafin örnekleriyle infiltre daha önce 3 kez, kuluçkaya. Not: % 0,9 ile hasat gemi kızarma yerine NaCl, %4 ile temizlenip PFA. Dikkat: PFA ve Ksilen zehirlidir ve özen ile ele alınmalıdır.</li>
	<li>Örnek parafin içinde katıştırabilir ve bir microtome kullanarak 5 µm kalınlığında dilimler halinde kesin.</li>
	<li>Ksilen ile slaytlar için 3 kere 5 dakika deparaffinize.</li>
	<li>Etanol azalan bir dizi kullanarak doku slaytlar rehydrate. 2 kez 5 min, % 95, % 80 ve % 70 etanol tarafından 3 dakika takip için % 100 etanol ile başlayın.</li>
	<li>Slaytları Masson'ın açıklanan18trichrome boyama ile leke.</li>
	<li>% 100 etanol 10 min için 2 kez lekeli slaytları kurutmak. Ksilen 10 min için 2 kez ile temizleyin ve montaj ortamda monte edin.</li>
	<li>Slaytları parlak alan mikroskopla görüntüleyin. Bir genel bakış resim veya 0.35 detaylı gözlem için sayısal bir diyafram ile 20 x büyütme ile bir lens için 5 x büyütme ve 0.12 sayısal bir diyafram ile bir lens kullanmak.</li>
</ol>4. ayirt mikroskobu
<ol><li>Etanol azalan bir dizi kullanarak doku slaytlar rehydrate. 2 kez 5 min, % 95, % 80 ve % 70 etanol 3 min tarafından takip için % 100 etanol ile başlayın.</li>
	<li>Antijen-alma slaytlar bir gemi 20 dk için antijen-alma çözümde Isıtma tarafından gerçekleştirin.</li>
	<li>Oda sıcaklığında aşağı slaytlar soğumaya bırakın.</li>
	<li>Slaytları fosfat tamponlu tuz (PBS) ile üç kez yıkadıktan sonra antijen engelleme çözüm bölümlerinde 30 dk için geçerli.</li>
	<li>Slaytlar PBS ile 5 min için üç kez yıkayın.</li>
	<li>Bölümler ile birincil antikor birincil antikor Dilüent seyreltilmiş kuluçkaya. Not: Konsantrasyon ve kuluçka zamanı ayrı ayrı her antikor için seçilmelidir.</li>
	<li>Slaytlar ilişkisiz antikor kaldırmak için PBS ile 5 min için üç kez yıkayın.</li>
	<li>Bölümler ile önceden konjuge bir ikincil antikor ikincil antikor Dilüent seyreltilmiş kuluçkaya. Not: Konsantrasyon ve kuluçka zamanı ayrı ayrı her antikor için seçilmelidir.</li>
	<li>İlişkisiz antikorlar üç kez 5 min için slaytlar yıkayarak çıkarın.</li>
	<li>4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) kullanarak 15dk için hücre çekirdeği counterstain; son DAPI konsantrasyon-meli var olmak 350 nM.</li>
	<li>Slaytlar ayirt çözüm montaj uyumlu bağlayın. Not: Yanlış montaj çözümü kullanarak Floresans sinyal belirsiz.</li>
	<li>Slaytlar floresan mikroskop ile görüntüleyin. 40 x büyütme objektif 1.3 sayısal bir diyafram ile kullanın.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Kochanek, K. D., Xu, J., Murphy, S. L., Minino, A. M., Kung, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deaths:+final+data+for+2009.">Deaths: final data for 2009.</a> Natl Vital Stat Rep. 60 (3), 1-116 (2011).</li><li>Austin, G. E., Ratliff, N. B., Hollman, J., Tabei, S., Phillips, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+proliferation+of+smooth+muscle+cells+as+an+explanation+for+recurrent+coronary+artery+stenosis+after+percutaneous+transluminal+coronary+angioplasty.">Intimal proliferation of smooth muscle cells as an explanation for recurrent coronary artery stenosis after percutaneous transluminal coronary angioplasty.</a> J Am Coll Cardiol. 6 (2), 369-375 (1985).</li><li>Greenwald, S. E., Berry, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+vascular+grafts:+the+importance+of+mechanical+and+haemodynamic+properties.">Improving vascular grafts: the importance of mechanical and haemodynamic properties.</a> J Pathol. 190 (3), 292-299 (2000).</li><li>Majesky, M. W., Schwartz, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Smooth+muscle+diversity+in+arterial+wound+repair.">Smooth muscle diversity in arterial wound repair.</a> Toxicol Pathol. 18 (4 Pt 1), 554-559 (1990).</li><li>Owens, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+differentiation+of+vascular+smooth+muscle+cells.">Regulation of differentiation of vascular smooth muscle cells.</a> Physiol Rev. 75 (3), 487-517 (1995).</li><li>Owens, G. K., Kumar, M. S., Wamhoff, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+regulation+of+vascular+smooth+muscle+cell+differentiation+in+development+and+disease.">Molecular regulation of vascular smooth muscle cell differentiation in development and disease.</a> Physiol Rev. 84 (3), 767-801 (2004).</li><li>Kleemann, R., Zadelaar, S., Kooistra, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytokines+and+atherosclerosis:+a+comprehensive+review+of+studies+in+mice.">Cytokines and atherosclerosis: a comprehensive review of studies in mice.</a> Cardiovasc Res. 79 (3), 360-376 (2008).</li><li>Karas, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+intimal+proliferation+after+balloon+injury+and+stenting+in+swine:+an+animal+model+of+restenosis.">Coronary intimal proliferation after balloon injury and stenting in swine: an animal model of restenosis.</a> J Am Coll Cardiol. 20 (2), 467-474 (1992).</li><li>Ip, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+platelets,+thrombin+and+hyperplasia+in+restenosis+after+coronary+angioplasty.">The role of platelets, thrombin and hyperplasia in restenosis after coronary angioplasty.</a> J Am Coll Cardiol. 17 (6 Suppl B), 77B-88B (1991).</li><li>Mason, R. G., Read, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Some+species+differences+in+fibrinolysis+and+blood+coagulation.">Some species differences in fibrinolysis and blood coagulation.</a> J Biomed Mater Res. 5 (1), 121-128 (1971).</li><li>Lafont, A., Faxon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Why+do+animal+models+of+post-angioplasty+restenosis+sometimes+poorly+predict+the+outcome+of+clinical+trials?.">Why do animal models of post-angioplasty restenosis sometimes poorly predict the outcome of clinical trials?.</a> Cardiovasc Res. 39 (1), 50-59 (1998).</li><li>Matter, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+balloon-induced+inflammation,+proliferation,+and+neointima+formation+in+apolipoprotein+E+(ApoE)+knockout+mice.">Increased balloon-induced inflammation, proliferation, and neointima formation in apolipoprotein E (ApoE) knockout mice.</a> Stroke. 37 (10), 2625-2632 (2006).</li><li>Lindner, V., Fingerle, J., Reidy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+arterial+injury.">Mouse model of arterial injury.</a> Circ Res. 73 (5), 792-796 (1993).</li><li>Simon, D. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+neointimal+formation+in+Mac-1(-/-)+mice+reveals+a+role+for+inflammation+in+vascular+repair+after+angioplasty.">Decreased neointimal formation in Mac-1(-/-) mice reveals a role for inflammation in vascular repair after angioplasty.</a> J Clin Invest. 105 (3), 293-300 (2000).</li><li>Sata, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+vascular+injury+that+induces+rapid+onset+of+medial+cell+apoptosis+followed+by+reproducible+neointimal+hyperplasia.">A mouse model of vascular injury that induces rapid onset of medial cell apoptosis followed by reproducible neointimal hyperplasia.</a> J Mol Cell Cardiol. 32 (11), 2097-2104 (2000).</li><li>Moroi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+genetic+deficiency+of+endothelial+nitric+oxide,+gender,+and+pregnancy+in+vascular+response+to+injury+in+mice.">Interaction of genetic deficiency of endothelial nitric oxide, gender, and pregnancy in vascular response to injury in mice.</a> J Clin Invest. 101 (6), 1225-1232 (1998).</li><li>Painter, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myointimal+hyperplasia:+pathogenesis+and+implications.+2.+Animal+injury+models+and+mechanical+factors.">Myointimal hyperplasia: pathogenesis and implications. 2. Animal injury models and mechanical factors.</a> Artif Organs. 15 (2), 103-118 (1991).</li><li>Stubbendorff, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducing+myointimal+hyperplasia+versus+atherosclerosis+in+mice:+an+introduction+of+two+valid+models.">Inducing myointimal hyperplasia versus atherosclerosis in mice: an introduction of two valid models.</a> J Vis Exp. (87), e51459 (2014).</li><li>Deuse, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dichloroacetate+prevents+restenosis+in+preclinical+animal+models+of+vessel+injury.">Dichloroacetate prevents restenosis in preclinical animal models of vessel injury.</a> Nature. 509 (7502), 641-644 (2014).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Bu yazı myointimal Hiperplazi gelişimini incelemek için bir fare modeli gösterir ve altta yatan patolojik süreçlerin araştırma ve test yeni ilaçlar veya tedavi olanakları sağlar.
Bu iletişim kuralı en kritik aort denudation adımdır. Aşırı denudation anevrizma oluşumu ve modeli başarısızlık için yol açacak gibi özel bakım bu adımı sırasında ödenmesi gerekmektedir. Öte yandan, denudation yeterince gerçekleştirilirse, çok az myointima geliştirecek. Bu nedenle, denudation adım yoğunluğunu sonucu ve hayvan bu modelin başarısı için çok önemlidir.
Cerrahi müdahale ile ilgili olarak, bu gemi iki duvar gemi a_ılabilinirse erken başarısızlıkla sonuçlanabilir dikiş ayarlayarak deldi değil önemlidir. Hangi biz fareler18abdominal aort damar darlığı indüklenen bir fare modeli daha önce anlatmıştık. Ancak, bu ve çoğu diğer modeller sadece çok az miktarda doku analizi için sağlar. Bu yöntemin bir avantajı (~ 1 cm gemi kesim) alınan doku nispeten büyük miktarda var. Bir tek damar grefti böylece birden çok bölüme ayrılmıştır ve etkili deneysel hayvan gerekli sayısını azaltarak çeşitli analizler için kullanılır.
Ayrıca, uygun knock-out hayvanlar myointima Hiperplazi farklı hastalık koşullarında gelişimi çalışma için kullanılabilir. Genetik arka planlar da çeşitli ayarları veya bazı genler etkisini myointimal Hiperplazi mekanizmaları anlamak için bu hayvan modeli ile kombine edilebilir.
Özetle, burada açıklanan model tekrarlanabilir, gerçekleştirmek, kolay ve hızlı ve güvenilir bir şekilde kurulabilir. Başarıyla test edilmiş tedavi seçenekleri bu modelde daha da büyük hayvan onaylanabilir19modelleri.

Koroner ve periferik arter arter stenoz morbidite ve mortalite hastalarda1üzerinde büyük bir etkiye sahiptir. Bir altta yatan patolojik myointima Hiperplazi (MH), artan nükleer silahların yayılmasına karşı geçiş ve vasküler düz kas hücreleri (SMC)2hücre dışı matriks proteinlerinin sentezi ile karakterize bir mekanizmadır. SMC gemi media tabakası bulunur ve Lümen yüzeye stimülasyon geçirilir. Uyarıcı sinyalleri ve büyüme faktörleri, sitokinler, hücre-hücre iletişim, lipitler, hücre dışı matriks bileşenleri ve mekanik makas içerir Kuvvetleri3,4,5,6germek. Yaralanma damar duvarının, patolojik veya iyatrojenik, endotel hücre ve düz kas hücre hasarı neden ve inflamatuar reaksiyonları teşvik ve böylece MH7' ye yol.
Farklı hayvan modelleri Arteryel yaralanma ve myointima Hiperplazi çalışmaya şu anda kullanılabilir. Veya büyük hayvanlar domuzlar gibi köpekler benzer arter ve koroner anatomi insanlarla paylaşma avantajına sahip ve özellikle anjiyoplasti teknikleri, yordam ve aygıtları8araştıran çalışmalar için uygundur. Köpekler sadece gemi yaralanma11hafif bir yanıt ancak, domuz modelleri daha yüksek thrombogenicity9,10, dezavantajı vardır. Buna ek olarak, tüm büyük hayvan modellerinde özel konut, ekipman ve personel, yüksek maliyetleri ile bağlı olan ve her zaman bir kurum olarak mevcut değildir gerektirir. Sıçanlar ve fareler küçük hayvan modelleri içerir. Fareler için karşılaştırıldığında, fareler daha düşük maliyet avantajları ve knock out modelleri çeşitli varlığı var. Bu videoda açıklanan model ApoE-/-Batı bir diyetle beslenen yakından anjiyoplasti aterosklerotik gemiler12klinik ayarını taklit etmek için fareler ile kombine edilebilir. Önceki misal yolu ile tel yaralanma13, sıvı kuruma14, Bahar15ya da kol yaralanması16vasküler yaralanma indüklenen. Yaralanma doğası büyük ölçüde geliştirme ve MH Anayasası etkisi olacaktır beri gemi yaralanma ikna etmek için bir balon kateter kullanarak klinik ayarını taklit etmek için en iyi yoldur.
Bu makalede MH farelerde bir balon kateter ile ikna etmek için bir roman yöntemi açıklanmaktadır. İntimal katmanın ve aynı zamanda bir overdistension gemi indüksiyon kazıma bir RX-Port (şekil 1A) ile bir balon kateter (1.2 mm x 6 mm) kullanımına izin verir. Bu faktörlerin her iki MH gelişimi için önemli Tetikleyiciler vardır. 28 gün17bu model gözlem zamanı.

<table><tbody><tr><td>10-0 Ethilon suture</td><td>Ethicon</td><td>2814G</td><td></td></tr><tr><td>3 mL Syringe</td><td>BD Medical</td><td>309658</td><td></td></tr><tr><td>37% HCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H1758</td><td></td></tr><tr><td>5-0 prolene suture</td><td>Ethicon</td><td>EH7229H</td><td></td></tr><tr><td>6-0 prolene suture</td><td>Ethicon</td><td>8706H</td><td></td></tr><tr><td>Acid Fuchsin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F8129-25G</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Antigen retrieval solution</td><td>Dako</td><td>S1699</td><td></td></tr><tr><td>Azophloxin</td><td>Waldeck</td><td>1B-103</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Bepanthen Eye and Nose ointment</td><td>Bayer</td><td>1578675</td><td>Eye ointment</td></tr><tr><td>Betadine Solution</td><td>Betadine Purdue Pharma</td><td>NDC:67618-152</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J</td><td>Charles River</td><td>Stock number 000664</td><td></td></tr><tr><td>Clamp applicator</td><td>Fine Science Tools</td><td>18056-14</td><td>JAW DIMS: 4 x 0.75 mm
LENGTH: 13 mm</td></tr><tr><td>Collagen 3</td><td>abcam</td><td>ab7778</td><td>Antibody</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Thermo Fischer</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>Donkey anti-Goat IgG AF555</td><td>Invitrogen</td><td>A21432</td><td>Secondary antibody</td></tr><tr><td>Donkey anti-Rabbit IgG AF488</td><td>Invitrogen</td><td>A21206</td><td>Secondary antibody</td></tr><tr><td>Donkey anti-Rabbit IgG AF488</td><td>Invitrogen</td><td>A11055</td><td>Secondary antibody</td></tr><tr><td>Donkey anti-Rabbit IgG AF555</td><td>Invitrogen</td><td>A31572</td><td>Secondary antibody</td></tr><tr><td>Ethanol 70%</td><td>Th. Geyer</td><td>2270</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol 96%</td><td>Th. Geyer</td><td>2295</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol absolute</td><td>Th. Geyer</td><td>2246</td><td></td></tr><tr><td>FAP</td><td>abcam</td><td>ab28246</td><td>Antibody</td></tr><tr><td>Forceps fine</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Forceps standard</td><td>Fine Science Tools</td><td>11023-10</td><td></td></tr><tr><td>Glacial Acetic Acid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>537020</td><td></td></tr><tr><td>Hair clipper</td><td>WAHL</td><td>8786-451A ARCO SE</td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Rotexmedica</td><td>PZN 3862340</td><td>25.000 I.E./mL</td></tr><tr><td>High temperature cautery kit</td><td>Bovie</td><td>18010-00</td><td></td></tr><tr><td>Image-iT FX Signal Enhancer</td><td>Invitrogen</td><td>I36933</td><td>Blocking solution</td></tr><tr><td>Light Green SF</td><td>Waldeck</td><td>1B-211</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Microsurgical clamp</td><td>Fine Science Tools</td><td>18055-04</td><td>Micro-Serrefine - 4mm</td></tr><tr><td>MINI TREK Coronary Dilatation Catheter 1.20 mm x 6 mm / Rapid-Exchange</td><td>Abbott</td><td>1012268-06U</td><td></td></tr><tr><td>Molybdatophosphoric acid hydrate</td><td>Merck</td><td>1.00532.0100</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>NaCl 0,9%</td><td>B.Braun</td><td>PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160</td><td></td></tr><tr><td>Needle holder</td><td>Fine Science Tools</td><td>12075-14</td><td></td></tr><tr><td>Novaminsulfon</td><td>Ratiopharm</td><td>PZN 03530402</td><td>Metamizole</td></tr><tr><td>Orange G</td><td>Waldeck</td><td>1B-221</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Paraffin</td><td>Leica biosystems</td><td>REF 39602004</td><td></td></tr><tr><td>PBS pH 7,4</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>PFA 4%</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>#157135S</td><td></td></tr><tr><td>Ponceau S solution</td><td>Serva Electrophoresis</td><td>33427</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Primary antibody diluent</td><td>Dako</td><td>S3022</td><td></td></tr><tr><td>Prolong Gold Mounting solution</td><td>Thermo Fischer</td><td>P36930</td><td>Mounting solution for immunofluorescence stained slides</td></tr><tr><td>Replaceable Fine Tip</td><td>Bovie</td><td>H101</td><td></td></tr><tr><td>Resorcin-Fuchsin Weigert</td><td>Waldeck</td><td>2E-30</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Rimadyl</td><td>Pfizer</td><td>400684.00.00</td><td>Carprofen</td></tr><tr><td>Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>Scissors Vannas-style</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-03</td><td></td></tr><tr><td>Secondary antibody diluent</td><td>Dako</td><td>S0809</td><td></td></tr><tr><td>Fast acting Adhesive MINIS 3x1g</td><td>UHU</td><td>45370</td><td>Cyanoacrylate</td></tr><tr><td>Slide Rack</td><td>Ted Pella</td><td>21057</td><td></td></tr><tr><td>SM22</td><td>abcam</td><td>ab10135</td><td>Antibody</td></tr><tr><td>SMA</td><td>abcam</td><td>ab21027</td><td>Antibody</td></tr><tr><td>Staining dish</td><td>Ted Pella</td><td>21075</td><td></td></tr><tr><td>Surgical microscope</td><td>Leica</td><td>M651</td><td></td></tr><tr><td>Tabotamp fibrillar</td><td>Ethicon</td><td>431962</td><td>Absorbable hemostat</td></tr><tr><td>Transpore Surgical Tape</td><td>3M</td><td>1527-1</td><td></td></tr><tr><td>U-100 Insulin syringe</td><td>BD Medical</td><td>324825</td><td></td></tr><tr><td>Vessel Dilator</td><td>Fine Science Tools</td><td>18603-14</td><td></td></tr><tr><td>Vitro-Clud</td><td>Langenbrinck</td><td>04-0001</td><td></td></tr><tr><td>Weigerts iron hematoxylin Kit</td><td>Merck</td><td>1.15973.0002</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Xylene</td><td>Th. Geyer</td><td>3410</td><td></td></tr></tbody></table>

balloon-based injury to induce myointimal hyperplasia in the mouse abdominal aorta

Hayvan modelleri kullanımını daha iyi MH, Arteryel stenoz için bir önemli neden anlamak için önemlidir. Bu makalede, biz kurulan Gemi yaralanma modelleri büyük hayvanlarda ile karşılaştırılabilir bir fare balon denudation model göstermek. Aort denudation model balon kateter ile klinik ayarını taklit eder ve karşılaştırılabilir pathobiological ve fizyolojik değişikliklere yol açar. Kısaca, yatay bir kesi içinde aorta abdominalisgerçekleştirdikten sonra bir balon kateter olacak geminin eklenen, şişirilmiş ve retrogradely tanıttı. Enflasyon balon intima yaralanma ve geminin overdistension yol açacaktır. Kateter kaldırdıktan sonra aort kesi ile tek dikiş kapalı olacaktır. Bu makalede gösterilen modeli tekrarlanabilir, gerçekleştirmek, kolay ve hızlı ve güvenilir bir şekilde kurulabilir. Ekonomik bir biçimde uygulanabilir pahalı deneysel tedavi edici ajanlar değerlendirmek için özellikle uygundur. Farklı nakavt-fare suşları kullanarak, farklı genler MH gelişimi üzerine etkisi tespit edilebilir.

Balon denudation MH geliştirme farelerde çalışmaya uygun bir modeldir. Hayvanlar cerrahiden de yeniden elde etmek ve mükemmel fiziksel durumu sonrası ameliyat göster. Bu model ile % 3 ölüm oranı cerrahi işlem nedeniyle daha az 50 farelerde kurduk. Şekil 1B -C temel cerrahi adımı göster. Bir cilt kesi sonra linea alba, aorta abdominalistanımlamak. Mikrocerrahi kelepçeler (şekil 1B) yerleştirin. Aort ortasında küçük bir kesi yapmak, gemi ve retrograd kan akımı (şekil 1 c) yönünü karşı slayt içine bir balon kateter ayarlayın. Şişirilmiş balon hareketin intima ve aynı zamanda, overdistension gemi kazıma için yol açar. Aort kesi ile tek dikiş kapalı olacaktır. Aortik nabız klemple kesi görünür olmalıdır.
MH kademeli greft zaman içinde gelişir. Histolojik Masson's ile boyama trichrome myointima oluşumu içinde iç elastik lamina (şekil 2A) gösterir. Myointimal lezyonlar özellikle hücresel bileşenleri olumlu SM22 ve bazı hücre dışı matriks bileşenler (şekil 2B) oluşuyordu. Myointimal hücreleri daha fazla ayirt boyama tarafından değerlendirilir. Myointima ana kalabalıkta düz kas (düz kas aktin (SMA) pozitif) hücreleri ve (myofibroblasts fibroblast harekete geçirmek protein (FAP) pozitif) hücreleri (şekil 2B) oluşur.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56477/56477fig1.jpg"> Şekil 1. Kateter ve onun implantasyon şemaları. (A) kateterin detaylı haritası açılıyor. Distal port, balon, hızlı bağlantı noktası (RX-port), embolisinin, RX-noktasına tek Lümen çift Lümen RX-bağlantı noktasından balon, hub, balon enflasyon bağlantı noktası. (B) cerrahi işlem şematik gösterimi. Aorta abdominalis kan akışının iki mikro kelepçeler ile durdurulur ve küçük bir kesi yapılır. C. şişirilmiş kateter aorta abdominalisiçinde. <a href="https://cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56477/56477fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56477/56477fig2.jpg"> Şekil 2. Myointima oluşumu iç elastik lamina içinde. (A) aortas hasat Denuded fare parafin gömülü ve temsili bir kesit trichrome boyama gösterilir. (B) Çift Kişilik ayirt balon yalanlarım aortae boyama gösterilir. Üst satır SM22 ve kollajen III için lekeli myointimal lezyonlar gösteriyor. Alt satırda, damarları SMA ve FAP lekeli. <a href="https://cloudflare-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56477/56477fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta at JoVE.com

Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta

Bu makalede, aortik balon yaralanma sonra myointimal Hiperplazi (MH) gelişimini incelemek için bir fare modeli gösterilmektedir.

Fare Abdominal aort Myointimal Hiperplazi ikna etmek için balon tabanlı yaralanma

The use of animal models is essential for a better understanding of MH, one major cause for arterial stenosis.In this article, we demonstrate a murine ...

balloon-based-injury-to-induce-myointimal-hyperplasia-mouse-abdominal

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

9.5K Görüntüleme.  University Heart Center. Bu makalede, aortik balon yaralanma sonra myointimal Hiperplazi (MH) gelişimini incelemek için bir fare modeli gösterilmektedir.

Video: Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta

Inducing Myointimal Hyperplasia Versus Atherosclerosis in Mice: An Introduction of Two Valid Models

Various in vivo laboratory rodent models for the induction of artery stenosis have been established to mimic diseases that include arterial plaque formation and stenosis, as observed for example in ischemic heart disease. Two highly reproducible mouse models&#160;&#8211;&#160;both resulting in artery stenosis but each underlying a different pathway of development&#160;&#8211; are introduced here. The models represent the two most common causes of artery stenosis; namely one mouse model for each myointimal hyperplasia, and atherosclerosis are shown. To induce myointimal hyperplasia, a balloon catheter injury of the abdominal aorta is performed. For the development of atherosclerotic plaque, the ApoE -/- mouse model in combination with western fatty diet is used. Different model-adapted options for the measurement and evaluation of the results are named and described in this manuscript. The introduction and comparison of these two models provides information for scientists to choose the appropriate artery stenosis model in accordance to the scientific question asked.

This video shows two models of intimal plaque development in murine arteries and emphasizes the differences in myointimal hyperplasia and atherosclerosis.

Farelerde Ateroskleroz Karşı miyointimal hiperplazide uyaran: İki Geçerli Modellerinin An Introduction

Various in vivo laboratory rodent models for the induction of artery stenosis have been established to mimic diseases that include arterial plaque ...

Tıp

Vascular Balloon Injury and Intraluminal Administration in Rat Carotid Artery

The carotid artery balloon injury model in rats has been well established for over two decades. It remains an important method to study the molecular and cellular mechanisms involved in vascular smooth muscle dedifferentiation, neointima formation and vascular remodeling. Male Sprague-Dawley rats are the most frequently employed animals for this model. Female rats are not preferred as female hormones are protective against vascular diseases and thus introduce a variation into this procedure. The left carotid is typically injured with the right carotid serving as a negative control. Left carotid injury is caused by the inflated balloon that denudes the endothelium and distends the vessel wall. Following injury, potential therapeutic strategies such as the use of pharmacological compounds and either gene or shRNA transfer can be evaluated. Typically for gene or shRNA transfer, the injured section of the vessel lumen is locally transduced for 30 min with viral particles encoding either a protein or shRNA for delivery and expression in the injured vessel wall. Neointimal thickening representing proliferative vascular smooth muscle cells usually peaks at 2 weeks after injury. Vessels are mostly harvested at this time point for cellular and molecular analysis of cell signaling pathways as well as gene and protein expression. Vessels can also be harvested at earlier time points to determine the onset of expression and/or activation of a specific protein or pathway, depending on the experimental aims intended. Vessels can be characterized and evaluated using histological staining, immunohistochemistry, protein/mRNA assays, and activity assays. The intact right carotid artery from the same animal is an ideal internal control. Injury-induced changes in molecular and cellular parameters can be evaluated by comparing the injured artery to the internal right control artery. Likewise, therapeutic modalities can be evaluated by comparing the injured and treated artery to the control injured only artery.

This protocol uses a balloon catheter to cause an intraluminal injury on the rat carotid artery and henceforth elicit neointimal hyperplasia. This is a well-established model for studying the mechanisms of vascular remodeling in response to injury. It is also widely used to determine the validity of potential therapeutic approaches.

Sıçan Karotis Arter Vasküler Balon Yaralanma ve intraluminal İdaresi

The carotid artery balloon injury model in rats has been well established for over two decades. It remains an important method to study the molecular and ...

A Murine Model of Arterial Restenosis: Technical Aspects of Femoral Wire Injury

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to atherosclerotic plaque development or the rupturing of established plaques, interrupts normal blood flow leading to various morbidities such as myocardial infarction and stroke. In the clinic endovascular procedures such as angioplasty are commonly performed to reopen the lumen. However, these treatments inevitably damage the vessel wall as well as the vascular endothelium, triggering an excessive healing response and the development of a neointimal plaque that extends into the lumen causing vessel restenosis (re-narrowing). Restenosis remains a major cause of failure of endovascular treatments for atherosclerosis. Thus, preclinical animal models of restenosis are vitally important for investigating the pathophysiological mechanisms as well as translational approaches to vascular interventions. Among several murine experimental models, femoral artery wire injury is widely accepted as the most suitable for studies of post-angioplasty restenosis because it closely resembles the angioplasty procedure that injures both endothelium and vessel wall. However, many researchers have difficulty utilizing this model due to its high degree of technical difficulty. This is primarily because a metal wire needs to be inserted into the femoral artery, which is approximately three times thinner than the wire, to generate sufficient injury to induce prominent neointima. Here, we describe the essential surgical details to effectively overcome the major technical difficulties of this model. By following the presented procedures, performing the mouse femoral artery wire injury becomes easier. Once familiarized, the whole procedure can be completed within 20 min.

The mouse femoral artery wire injury model of restenosis is technically challenging. In this protocol we show the key technical details essential for successfully performing wire injury to induce consistent&#160;neointima for studies of restenosis.

Arter Restenozun bir fare modeli: Femur Tel Yaralanma Teknik Yönleri

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. Moreover, by rupture of the defective vascular wall, atherosclerosis induces occlusive thrombus formation, which represents the main cause of myocardial infarction or stroke and the most frequent cause of death. Despite the advances in the cardiovascular field, many questions remain unanswered, and additional basic research is essential to improve our understanding of the molecular mechanisms during atherosclerosis and its effects. Due to limited clinical studies, there is a need for representative animal models recreating atherosclerotic conditions such as neointima formation after stent implantation, balloon angioplasty, or endarterectomy. Since the mouse presents many advantages and is the most frequently used model for studying molecular processes, the current study proposes an invasive procedure of endothelial denudation, also known as the wire-injury model, which is representative of the human condition of neointima formation in arteries after revascularization procedures.

This study describes an invasive procedure for the induction of accelerated atherosclerosis in mice. In comparison to other methods using electric- or cryo-induced injury, mechanical-induced injury mimics the human condition of restenosis after revascularization therapies and is ideal for the study of the molecular mechanisms involved.

Farelerde Hızlandırılmış Ateroskleroz Indüksiyonu: "Tel-Yaralanma" Modeli

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Reproducible Arterial Denudation Injury by Infrarenal Abdominal Aortic Clamping in a Murine Model

Percutaneous vascular interventions uniformly result in arterial denudation injuries that subsequently lead to thrombosis and restenosis. These complications can be attributed to impairments in re-endothelialization within the wound margins. Yet, the cellular and molecular mechanisms of re-endothelialization remain to be defined. While several animal models to study re-endothelialization after arterial denudation are available, few are performed in the mouse because of surgical limitations. This undermines the opportunity to exploit transgenic mouse lines and investigate the contribution of specific genes to the process of re-endothelialization. Here, we present a step-by-step protocol for creating a highly reproducible murine model of arterial denudation injury in the infrarenal abdominal aorta using external vascular clamping. Immunocytochemical staining of injured aortas for fibrinogen and &#946;-catenin demonstrate the exposure of a pro-thrombotic surface and the border of intact endothelium, respectively. The method presented here has the advantages of speed, excellent overall survival rate, and relative technical ease, creating a uniquely practical tool for imposing arterial denudation injury in transgenic mouse models. Using this method, investigators may elucidate the mechanisms of re-endothelialization under normal or pathological conditions.

Understanding the cellular and molecular mechanisms of re-endothelialization following arterial denudation injury is of paramount importance in preventing thrombosis and restenosis of arteries. Here we describe a protocol for reproducible arterial denudation injury of the infrarenal abdominal aorta. The procedure was developed to investigate the underlying mechanisms that regulate endothelial regeneration using mouse models.

Bir Fare Modelinde İnfrarenal Abdominal Aort Bağlama Ekipmanları tarafından tekrarlanabilir Arter denüdasyon Yaralanma

Percutaneous vascular interventions uniformly result in arterial denudation injuries that subsequently lead to thrombosis and restenosis. These ...

The Rabbit Model of Accelerated Atherosclerosis: A Methodological Perspective of the Iliac Artery Balloon Injury

Acute coronary syndrome resulting from coronary occlusion following atherosclerotic plaque development and rupture is the leading cause of death in the industrialized world. New Zealand White (NZW) rabbits are widely used as an animal model for the study of atherosclerosis. They develop spontaneous lesions when fed with atherogenic diet; however, this requires long time of 4 - 8 months. To further enhance and accelerate atherogenesis, a combination of atherogenic diet and mechanical endothelial injury is often employed. The presented procedure for inducing atherosclerotic plaques in rabbits uses a balloon catheter to disrupt the endothelium in the left iliac artery of NZW rabbits fed with atherogenic diet. Such mechanical damage caused by the balloon catheter induces a chain of inflammatory reactions initiating neointimal lipid accumulation in a time dependent fashion. Atherosclerotic plaque following balloon injury show neointimal thickening with extensive lipid infiltration, high smooth muscle cell content and presence of macrophage derived foam cells. This technique is simple, reproducible and produces plaque of controlled length within the iliac artery. The whole procedure is completed within 20 - 30 min. The procedure is safe with low mortality and also offers high success in obtaining substantial intimal lesions. The procedure of balloon catheter induced arterial injury results in atherosclerosis within two weeks. This model can be used for investigating the disease pathology, diagnostic imaging and to evaluate new therapeutic strategies.

Animal models of atherosclerosis are essential to understand the mechanism and to investigate newer approaches to prevent plaque development or rupture, a leading cause of death in the industrialized world. This protocol uses a combination of balloon injury and cholesterol rich diet to induce atherosclerotic plaques in rabbit iliac artery.

Tavşan modeli hızlandırılmış ateroskleroz: iliyak arter balon yaralanma bir metodolojik açıdan

Acute coronary syndrome resulting from coronary occlusion following atherosclerotic plaque development and rupture is the leading cause of death in the ...

A Rat Carotid Artery Pressure-Controlled Segmental Balloon Injury with Periadventitial Therapeutic Application

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the luminal surface area in arteries thereby reducing adequate blood flow to organs and distal tissues. Clinically, revascularization procedures such as balloon angioplasty with or without stent placement aim to restore blood flow. Although these procedures reestablish blood flow by reducing plaque burden, they damage the vessel wall, which initiates the arterial healing response. The prolonged healing response causes arterial restenosis, or re-narrowing, ultimately limiting the long-term success of these revascularization procedures. Therefore, preclinical animal models are integral for analyzing the pathophysiological mechanisms driving restenosis, and provide the opportunity to test novel therapeutic strategies. Murine models are cheaper and easier to operate on than large animal models. Balloon or wire injury are the two commonly accepted injury modalities used in murine models. Balloon injury models in particular mimic the clinical angioplasty procedure and cause adequate damage to the artery for the development of restenosis. Herein we describe the surgical details for performing and histologically analyzing the modified, pressure-controlled rat carotid artery balloon injury model. Additionally, this protocol highlights how local periadventitial application of therapeutics can be used to inhibit neointimal hyperplasia. Lastly, we present light sheet fluorescence microscopy as a novel approach for imaging and visualizing the arterial injury in three-dimensions.

The rat carotid artery balloon injury mimics the clinical angioplasty procedure performed to restore blood flow in atherosclerotic vessels. This model induces the arterial injury response by distending the arterial wall, and denuding the intimal layer of endothelial cells, ultimately causing remodeling and an intimal hyperplastic response.

Periadventitial Terapötik Uygulama ile Sıçan Karotis Arter Basınç Kontrollü Segmental Balon Yaralanması

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the ...

Murine Aortic Crush Injury: An Efficient In Vivo Model of Smooth Muscle Cell Proliferation and Endothelial Function

Arterial reconstruction, whether angioplasty or bypass surgery, involves iatrogenic trauma causing endothelial disruption and vascular smooth muscle cell (VSMC) proliferation. Common murine models study small vessels such as the carotid and femoral arteries. Herein we describe an in vivo system in which both VSMC proliferation and endothelial barrier function can be simultaneously assessed in a large vessel. We studied the infrarenal aortic response to injury in C57BL/6 mice. The aorta was injured from the left renal vein to the aortic bifurcation by 30 transmural crushes of 5-seconds duration with a cotton-tipped applicator. Morphological changes were assessed with conventional histology. Aorta wall thickness was measured from the luminal surface to the adventitia. EdU integration and counter staining with DAPI and alpha-actin was used to demonstrate VSMC proliferation. Activation of ERK1/2, a known moderator of intimal hyperplasia formation, was determined by Western Blot analysis. The effect of inflammation was determined by immunohistochemistry for B-cells, T-cells, and macrophages. En face sections of endothelium were visualized with scanning electron microscopy (SEM). Endothelial barrier function was determined with Evans Blue staining. Transmural injury resulted in aortic wall thickening. This injury induced VSMC proliferation, most prominently at 3 days after injury, and early activation of ERK1/2 and decreased p27kip1 expression. Injury did not result in increased B-cells, T-cells, or macrophages infiltration in the vessel wall. Injury caused partial endothelial cell denudation and loss of cell-cell contact. Injury resulted in a significant loss of endothelial barrier function, which returned to baseline after seven days. The murine transmural blunt aortic injury model provides an efficient system to simultaneously study both VSMC proliferation and endothelial barrier function in a large vessel.

Murine Aortic Crush Injury: An Efficient In Vivo Model of Smooth Muscle Cell Proliferation and Endothelial Function

Restenosis following cardiovascular procedures (bypass surgery, angioplasty, or stenting) is a significant problem reducing the durability of these procedures. An ideal therapy would inhibit smooth muscle cell (VSMC) proliferation while promoting regeneration of the endothelium. We describe a model for simultaneous assessment of VSMC proliferation and endothelial function in vivo.

Murin Aort Kırma Yaralanması: Verimli<emIn vivo</em&gt; Düz Kas Hücresi çoğalması ve Endotel Fonksiyon Modeli

Arterial reconstruction, whether angioplasty or bypass surgery, involves iatrogenic trauma causing endothelial disruption and vascular smooth muscle cell ...

Biyoloji

<meta charset="utf8"></head><body>Murin abdominal aort anevrizmasının altında yatan moleküler mekanizmaların araştırılması

A Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model by Periadventitial Calcium Chloride and Elastase Infiltration

Abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening disease associated with high mortality rates. It is characterized by the permanent dilation of the abdominal aorta with at least a 50% increase in arterial diameter. Various animal models of AAA have been introduced to mimic the pathophysiological changes and study the underlying mechanisms of AAA. Among these models, the calcium chloride (CaCl2)- and elastase-induced AAA models are commonly used in mice. However, these methods have certain limitations. Traditional intraluminal porcine pancreatic elastase (PPE) perfusion is associated with high technical difficulty and a high rupture rate, while periadventitial administration of PPE yields inconsistent results. In addition, the CaCl2-induced AAA model lacks human AAA features, such as atherothrombosis and aneurysm rupture. Therefore, the combined application of CaCl2 and PPE has been proposed as an approach to enhance success rates and induce greater diameter increases in AAA animal models. This manuscript presents a comprehensive protocol for establishing a mouse AAA model through periaortic infiltration of PPE and CaCl2 in the infrarenal segment of the abdominal aorta. By following this protocol, we can achieve an AAA formation rate of approximately 90% with technical simplicity and reproducibility. Further ultrasound and histological experiments confirm that this model effectively replicates the morphological and pathological changes observed in human AAA.

<meta charset="utf8"></head><body>Yazar Spotlight: Abdominal Aort Anevrizması için Bir Fare Modelinin Geliştirilmesi ve Karakterizasyonu

This manuscript presents a protocol for establishing a mouse abdominal aortic aneurysm model using calcium chloride and elastase, combining the advantages of previous modeling methods. This model can be utilized to investigate the pathophysiological mechanisms underlying abdominal aortic aneurysms.

Periadventitial Kalsiyum Klorür ve Elastaz İnfiltrasyonu ile Bir Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli

Abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening disease associated with high mortality rates. It is characterized by the permanent dilation of the ...

Fare Abdominal aort Myointimal Hiperplazi ikna etmek için balon tabanlı yaralanma

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Farelerde Ateroskleroz Karşı miyointimal hiperplazide uyaran: İki Geçerli Modellerinin An Introduction

Sıçan Karotis Arter Vasküler Balon Yaralanma ve intraluminal İdaresi

Arter Restenozun bir fare modeli: Femur Tel Yaralanma Teknik Yönleri

Farelerde Hızlandırılmış Ateroskleroz Indüksiyonu: "Tel-Yaralanma" Modeli

Bir Fare Modelinde İnfrarenal Abdominal Aort Bağlama Ekipmanları tarafından tekrarlanabilir Arter denüdasyon Yaralanma

Tavşan modeli hızlandırılmış ateroskleroz: iliyak arter balon yaralanma bir metodolojik açıdan

Periadventitial Terapötik Uygulama ile Sıçan Karotis Arter Basınç Kontrollü Segmental Balon Yaralanması

Murin Aort Kırma Yaralanması: Verimli

Periadventitial Kalsiyum Klorür ve Elastaz İnfiltrasyonu ile Bir Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli

Periadventitial Kalsiyum Klorür ve Elastaz İnfiltrasyonu ile Bir Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli