Этот протокол предоставляет подробную информацию о том, как планировать, осуществлять и анализировать нажмите и тон-взрыв вызвал слуховые реакции ствола мозга у мышей. Основным преимуществом этой методики является то, что она позволяет сложное и быстрое слуховое профилирование фармакологических и мутантных моделей мышей. Новые идеи в alt-er-ed раннего APP и связанные с этим изменения в слуховой обработки у мышей и крыс могут быть переведены на людей.
Таким образом, этот метод имеет центральное значение в характеристике и фенотипирование слуховых, неврологических и заболеваний. Этот метод является наиболее важным для выявления дисакуса, гипоакусиса и анакусиса. Например, в возрастной, вызванной шумом метаболической, врожденной и аспи-мет-акуриной потере слуха, а также при дефиците слуха из-за деформаций или пороков развития, травм и неоплазм.
Пользователям, новым для техники, следует обратить особое внимание на правильное электрорас размещение и доимо экспериментальную калибровку системы. Визуальная демонстрация метода имеет решающее значение для иллюстрации анестезии, записи ABR, процессов фильтрации ABR и автоматизированных ABR neur-o-lass-es. Начните с предварительного усилителя, подключенного к микрофону, по крайней мере за пять минут до калибровки, чтобы обеспечить равновесие системы.
Включите осциллоскоп. Затем расположите микрофон, подключенный к предварительному усилителю внутри звуковой затухающих кубических, чтобы имитировать экспериментальное ухо мурина. Далее откройте коммерчески доступные программы обработки и приобретения и запрограммировать протоколы стимулов для кликов и очередей тона.
Начните с нажмите стимулом лица для анализа и определения пороговых значений кликов. Затем ABR симметрии левого и правого уха. И АМплуды ИБР позже.
Далее, используйте то же программное обеспечение для проверки протокола стимуляции всплеска тона с помощью программного обеспечения sig-Gen RZ. И проверяет настройки стимулов, в соответствии с программным обеспечением для приобретения Bio-Sig РЗ. Программа соответствующего диапазона частот, которые будут протестированы, в зависимости от научного вопроса, и убедитесь, что частотные диапазоны, которые будут применяться отвечают техническим возможностям громкоговорителя.
Для усреднения установите количество последовательных стимулов акустики, кликов или очередей тона, например, в 300 раз, со скоростью 20 в секунду; в среднем продолжительность 25 миллисекунд и коэффициент усиления предварительного усилителя, 20 раз. Затем проясняйте соответствующую скорость выборки для получения данных ABR, а затем пройте фильтр с помощью фильтра стоимостью в шесть опросов. При необходимости активируйте фильтр выемки.
Начните калибровку всплеска тона, выбрав калибровку:CAL200K файл;в программном обеспечении, чтобы активировать режим конфигурации калибровки. И выбирать периметры в соответствии с экспериментальными условиями. Используйте процессорную систему для выполнения процедуры калибровки.
Убедитесь, что технические характеристики микрофона и громкоговорителя, с точки зрения уровня звукового давления или пределов SPL, частотного диапазона и распределения гармонизированы. Затем выберите и запустите заранее определенный протокол стимуляции кликов. Выполнить один клик SPL, чтобы убедиться, что спектр звуковых стимулов анализируется онлайн быстро четыре-ай преобразования осциллоскопа, соответствует требованиям.
Выберите и запустите заранее определенный протокол стимуляции всплеска тона, в пределах от одного до 42 килогерц. Подтвердите частотный спектр записанных акустических тестовых стимулов, используя осциллоскоп и онлайн FFT. Наконец, завершите калибровку всплеска тона, загрузив созданный файл калибровки на протокол стимула взрыва тона.
Начните с размещения обезболивающей мыши внутри звукоуместимой кабины, облицованной акустической пеной. Для записи monaural ствол мозга вызвал слуховые потенциалы, вставить суб-дермальной нержавеющей стали электродов на вершине, ось пин-глаз и брюшной боковой правой или левой пинна в зависимости от уха, которые будут измерены. С другой стороны, для бинауральных записей, поместите отрицательные электроды как в правую, так и в левую пину.
Располагаем наземным электродом на бедре животного. Перед вставкой, сформировать форму крючка на кончике электрода из нержавеющей стали, что суб-дермальной фиксации электродов гарантируется. А после вставки правильно поместите трибуну мыши на 10 сантиметров напротив громкого динамика.
Подключите все электроды к головной сцене и проверьте их неприступенность. Затем, выполнить измерения невыполнения всех электродов, до каждой записи, чтобы проверить надлежащее позиционирование электродов и проводимости. Запись ABRs в условиях свободного поля с помощью одного громкого динамика.
Наконец, провести анализ ABR с помощью автоматизированного обнаружения пороговых значений и анализа задержки волн для определения положительных пиков и отрицательных волн. В качестве первого шага в анализе общей производительности слуха, клик-вызванных ABRs для различных SPLs, между нулем и 90, были исследованы с помощью автоматизированной системы обнаружения порога ABR. Были проанализированы потенциальные изменения пороговых уровней ABR, вызванные различными частотами всплеска тона.
В образцовых линиях мыши, Cav3.2 плюс, минус и Cav3.2 минус, минус выставлены увеличение щелчка и тон взрыв связанных порогов слуха по сравнению с управления. Наконец, функция роста амплитуды ABR и анализ задержки волновой формы ABR проводились с помощью волнового подхода. Последнее позволяет понять возможное спасио-временное влияние гена интереса на слуховую обработку информации внутри внутреннего уха и ствола мозга.
Правильное размещение электродов ABR в измерении Пинна и калибровка системы имеют важное значение для выполнения этой техники. Представленный здесь слуховой подход также может быть использован в сочетании с системой телеметрии для анализа сложных, среднесрочных и поздних слуховых потенциалов. Это помогает в характеристике и в фенотипирование слуховых, неврологических и неврологических заболеваний.
