Фракционирование клеток U937 клеток в отсутствие высокоскоростной центрифуги

Этот протокол позволяет исследователям получить различные фракции клетки без использования специализированного оборудования, дорогих реагентов или сложных методов. Основным преимуществом этого протокола является простота методов, которые делают его изменяемым и простым в работе. Демонстрация процедуры будет Мэтт Deragon, Роб Haluska и Alexa Hodges.Three аспирантов из моей лаборатории. Для начала центрифуги подготовленная клеточная подвеска для создания гранулы. Удалите супернатант и повторно приостановит гранулы при комнатной температуре PBS. Центрифуга клеточной подвески при 400 xg в течение десяти минут. Затем удалите супернатант и повторно приостановит гранулы клетки в буфере ледяного холода. Подготовка буферного решения A в соответствии с текстовым протоколом. Центрифуга подвески клетки на 400 xg в течение десяти минут и удалить супернатант. Повторно приостанавливайте гранулы в буферном растворе до конечной концентрации 200 миллионов клеток на мл, и пипетка осторожно, чтобы разбить любые сгустки. После этого инкубировать подвеску клетки на конце над концом ротатора на 4