Эта методология помогает решать ключевые вопросы в области аллергии и иммунологии, в частности те, которые касаются фенотипов, которые могут быть связаны с изменениями температуры тела. Основными преимуществами этой методики являются то, что она недорогая, неинвазивная и не требует анестезии. Последствия этого метода позволяют исследователям уменьшить стресс и боль мышей во время измерения температуры, устраняя при этом последствия анестезии, и / или визуализировать поведенческие фенотипы.
Чтобы измерить температуру тела мыши после анестезии, подтвердите седацию по частоте дыхания или неподвижности и схватьте мышь за затылок указательным пальцем и большим пальцем и хвостом с мизинцем. Удерживая мышь параллельно поверхности лабораторной скамейки, поместите инфракрасный датчик термометра ниже нижней части живота с внешней плоской поверхностью термометра на два-пять миллиметров от поверхности живота между двумя верхними сосками. Затем угнетают спусковой крючок термометра, чтобы измерить температуру животного, заботясь, чтобы держать мышь и термометр устойчивым.
Чтобы измерить температуру тела мыши без анестезии, возьмите мышь вверх по середине хвоста и разоблачить живот. Позвольте мыши держаться за прямую поверхность края с передними лапами и удерживайте спусковой крючок для измерения температуры. Кроме того, позвольте мыши держаться за верхний прямой край термометра и заставить мышь сидеть на внешней плоской поверхности термометра с его животом чуть более инфракрасного датчика во время измерения температуры.
Для пассивной системной сенсибилизации анафилаксии используйте один миллилитр шприц, оснащенный 26 калибровочной иглой, чтобы ввести 200 микролитров свежеприготовленного антидинитрофенола, или DNP, IgE в PBS, в перитонеум каждого животного-реципиента, просто боковой к средней линии между самыми низкими и вторыми самыми низкими сосками. Через 24 часа после инъекции, измерить температуру тела каждого животного-получателя, как попродемонстрировано, и загрузить один миллилитр шприц оснащен 30 калибровочной иглы с 100 микролитров свежеприготовленного DNP человеческой сыворотки альбумин. Чтобы вызвать пассивную системную анафилаксию, вставьте иглу на медиальной стороне глаза под мелким углом, направленным за глазом, и ввит весь объем раствора внутривенно в ретро-орбитальную венозную пазуху.
Затем поместите мышь в одиночку в клетку восстановления с мониторингом до полной лежачих, и измерить температуру тела и активность каждые 10 минут в течение 70 минут. IgE сенсибилизированных мышей демонстрируют максимальное падение температуры на три градуса по Цельсию на 20 минут в то время как PBS контроля мышей экспонат максимальное падение 1,1 градуса по Цельсию в течение того же периода времени после вызова. Поведенческие наблюдения также могут быть выполнены у неазестетизированных животных для оценки взаимосвязи между наблюдаемым перепадом температуры и активностью мыши.
В этой репрезентативной мыши пищевой аллергии вызов, контрольная группа PBS продемонстрировала значительное падение температуры через 10 минут после вызова по сравнению с 2CA ингибитор лечение группы. Оценка оценки активности и перепадов температуры от этой проблемы пищевой аллергии выявила статистически значимую корреляцию между двумя наборами данных. После этой процедуры, другие эксперименты, связанные с измерением температуры тела мыши могут быть выполнены, чтобы ответить на дополнительные вопросы, касающиеся поведенческих фенотипов, которые связаны с изменением температуры тела.
