시차 주사 열량계와 X선 회절의 조합은 지질 기반 의약품의 고체 상태 변화를 조사하기 위한 황금 표준입니다. 결합된 방법론은 지질 매트릭스를 사용한 약물의 다형성, 결정 성장 및 얼굴 전이를 스크리닝, 말단 거동 및 가시성과 결합된 지질의 스크리닝을 위한 강력한 도구입니다. 이 방법론은 지질의 고체 상태와 그의 제약 제품의 성능 사이의 상호 작용을 이해하는 데 사용할 수 있습니다.
이러한 생성물은 나노지질 제형으로부터 매트릭스 정제에 이르기까지 다양할 수 있다. 절차는 Gerfried Luschin-Ebengreuth가 수행합니다. Gerfried는 우리 연구실의 과학자입니다.
시작하려면 질소 가스 공급 스위치를 켜고 압력을 0.2와 0.5 bar 사이로 설정하십시오. 시차 주사 열량계 또는 DSC 기기와 자동 시료 주입기의 전원을 켭니다. 소프트웨어를 열고 예 버튼을 클릭하여 대기 모드를 활성화 한 다음 신호보기를 클릭하십시오.
최소 1시간 동안 장치를 보정할 수 있습니다. 퍼니스를 질소로 퍼지하십시오. 새 메서드 아이콘을 클릭하고 메서드 정의로 이동합니다.
개요 창이 열리면 온도 변조 옵션을 활성화합니다. 헤더 탭으로 이동하여 샘플을 클릭하여 방법을 선택하십시오. 탭 온도 프로그램으로 이동하십시오.
분당 50밀리리터로 두 개의 MFC와 보호 MFC 퍼지를 선택합니다. 섭씨 20도에서 대기를 설정하고 섭씨 20도에서 이 온도에서 지질 등온 유지의 용융 온도 이상까지 분당 5켈빈으로 가열 주기를 설정합니다. 분당 5켈빈에서 섭씨 0도까지 냉각 주기.
최종 비상 재설정 온도를 프로그램의 최고 온도보다 섭씨 10도 높은 온도로 설정하고 최종 대기 온도를 섭씨 20도로 설정합니다. 보정 탭으로 이동하여 적절한 온도 및 감도 파일을 선택합니다. 메서드를 저장합니다.
각 샘플의 3-4 밀리그램을 알루미늄 팬에 넣고 각 도가니에 적재 된 정확한 무게를 기록합니다. 알루미늄 팬을 피어싱 된 뚜껑으로 밀봉하십시오. 자동 샘플러 트레이에 팬을 놓고 소프트웨어에서 자동 샘플러 모드를 활성화하고 각 샘플에 대한 관련 방법을 로드합니다.
샘플 트레이 보기 창에서 샘플 위치, 각 샘플의 샘플 이름 및 무게, 참조 도가니의 위치를 입력합니다. 측정을 시작합니다. 데이터 분석용 소프트웨어를 사용하여 원시 데이터를 열고 X 시간, X 온도 버튼을 클릭하여 온도 대 열 흐름을 심습니다.
팝업 창에서 등온 세그먼트 숨기기를 클릭합니다. 화면 왼쪽에서 분석할 곡선만 선택합니다. 지질의 열 거동을 온도의 함수로서 각각 열의 형태로 흡수되거나 방출된 에너지의 흡열 및 발열 이벤트로 확인합니다.
곡선을 클릭한 다음 평가 및 면적을 클릭합니다. 융합 엔탈피를 흡열 곡선 아래의 면적으로 계산합니다. 피크의 시작과 끝점 전후에 수직선을 섭씨 2-3도 정도 이동하여 적분 경계를 선택합니다.
피크 적분을 위한 선형 기준선을 선택합니다. 곡선과 기준선 사이의 면적은 엔탈피의 변화에 비례합니다. 적용을 클릭하여 계산을 완료합니다.
유사하게, 결정화 엔탈피를 발열 곡선 아래의 면적으로 계산합니다. 분석할 곡선을 클릭하여 용융 온도 또는 T-시작의 시작을 결정합니다. 그리고 평가와 발병에.
수직선을 곡선의 가장 직선 섹션으로 이동하여 수량화 경계를 선택합니다. 이것은 일반적으로 피크 전후에 섭씨 5도에서 10도 정도입니다. 그런 다음 분석할 곡선을 클릭하여 용융 온도 또는 TM을 결정합니다.
평가 및 피크가 뒤 따르며, 얻어진 값은 피크 최대 값입니다. 밀봉된 튜브 X선 발생기에 고정되고 제어 장치 및 관련 소프트웨어가 장착된 포인트 포커싱 카메라로 구성된 X선 산란 시스템을 사용하십시오. 선형으로 배치된 두 개의 민감한 검출기를 사용하여 소각 및 광각 X선 산란 영역을 모두 커버합니다.
제어 장치, 진공 펌프, 가스 밸브, 전원 및 안전 제어 시스템의 냉각수 시스템을 켭니다. 그런 다음 분당 10-20 밀리리터의 가스 흐름에서 검출기의 전압 제어 및 퍼지 밸브를 켭니다. 엑스레이 튜브와 대기 옵션을 켜고 약 10분 동안 기다립니다.
대기 모드를 끄고 X선관의 전원을 50킬로볼트 이상의 최대 전력으로 켭니다. 30분 이상 기다립니다. 제어 소프트웨어를 시작하고 TPF 재설정을 클릭하십시오.
그런 다음 텅스텐 필터를 선택하고 위치를 설정하십시오. 위치로 이동하여 텅스텐 필터의 위치를 고정합니다. 샘플을 약 2mm의 외경을 가진 특수 유리 모세관에 채워 모세관에 공기가 끼지 않도록 합니다.
유리 모세관을 왁스로 밀봉하고 모세관 홀더에 조심스럽게 넣으십시오. 샘플 회전을 위해 모터를 켜고 진공 밸브를 닫고 압력이 5밀리바 미만이 될 때까지 기다립니다. 소프트웨어에서 두 검출기 모두에 대해 1024의 위치 분해능을 선택하고 노출 시간을 1, 200 초로 설정하십시오.
탭 도구를 클릭하여 에너지 제한을 설정한 다음 에너지 제한 및 해상도 설정을 클릭하고 다시 시작하십시오. 에너지 제한을 400에서 900 사이의 적절한 범위로 설정하십시오. 안전 셔터를 열고 측정을 시작합니다.
측정 창에 초당 최대 80개의 카운트가 표시되는지 확인합니다. 이것이 주어지지 않으면 필터 위치를 조정하십시오. 데이터를 P00 파일로 내보냅니다.
데이터는 전송 및 흡수 강도 대 채널 번호로 구성됩니다. 평가를 위해 데이터를 통계 소프트웨어로 전송하고 텅스텐 필터로 측정한 산란 질량을 사용하여 강도를 정규화하여 데이터를 수정합니다. 정규화된 강도 대 회절각의 2배의 플롯을 생성합니다.
스크린 리더의 기능을 사용하여 소각 X선 산란 또는 SAXS와 광역 X선 산란 또는 WAXS 영역 모두에서 회절 피크를 찾을 수 있습니다. 자랑 방정식을 적용하여 최대 강도에 도달한 회절 피크를 상호 작용 또는 간격으로 계산합니다. SAXS 영역의 피크 위치의 비율을 계산하여 지질의 결정 대칭을 확인하고 SAXS 영역의 주 회절 피크를 사용하여 결정자 두께를 정량화합니다.
고전적인 임대 제곱을 통해 피크를 가우스 함수에 맞추고 분석 피크와 기준선, 피크 분석기, 열린 대화를 클릭하여 최대 절반의 전체 너비를 얻습니다. 팝업 창에서 피크 프로 맞춤 옵션을 선택합니다. Y가 0인 상수 기준선을 선택합니다.
SAXS 영역의 주요 회절 피크를 선택하십시오. fit 컨트롤을 클릭하여 피크 피팅 파라미터를 선택합니다. 가우스 앰프 기능을 선택합니다.
매개변수 Y 제로 XC1 및 A1을 고정으로 설정하고 데이터를 피팅합니다. 피팅에서 최대 절반의 전체 너비를 얻습니다. 마지막으로 surer 방정식을 사용하여 결정 두께를 계산합니다.
트리아실글리세롤 분자, 하위 세포, 라멜라 및 결정질 혈소판의 튠 포크 및 의자 구성이 여기에 표시됩니다. 대표 이미지는 트리팔미틴과 WAXS 및 SAXS 영역의 알파 형태의 짧은 간격과 긴 간격 패턴을 보여줍니다. 이 이미지에는 베타 양식에 대해서도 동일한 내용이 표시됩니다.
글리세롤 모노스테아레이트로 코딩된 활성 제약 성분 또는 API 결정은 코팅 직후 및 가속 조건에서 3개월 보관 후 DSC 및 X선을 통해 측정됩니다. 가속 상태에서 3개월 동안 보관한 후 샘플의 DSC 데이터는 T-onset 시 흡열이 섭씨 55.7도에 같고 나머지 알파 형태가 녹는 경우 섭씨 60.2도에서 두 개의 겹치는 이벤트가 있고 TM에서 베타 형태가 녹는 주요 이벤트로 섭씨 63.8도임을 보여줍니다. 다형성 전이는 분자 기울기로 인한 라멜라 두께의 감소와 결합된 베타 형태의 전형적인 짧은 D 간격을 감지하여 X선 데이터로 확인됩니다.
방출 프로파일의 현저한 변화가 또한 관찰되었으며, 이는 발수성 표면을 초래하는 더 조밀한 서브 세포 배열을 갖는 알파 형태의 베타 형태로의 명백한 다형성 변환에 의해 설명될 수 있다. DSC 데이터, X선 데이터 및 PG13C16C18 부분 코딩 직후 및 가속 조건에서 3개월 보관 후 부분적으로 코딩된 API 크리스탈의 API 릴리스 프로파일이 여기에 표시됩니다. 저장된 샘플의 DSC 분석 결과 변하지 않은 서모그램이 나타났으며, 이는 다형성 및 상 분리를 나타내지 않습니다.
PG3C16C18 부분의 안정적인 고체 상태를 엑스레이 패턴으로 확인하였다. WAXS 영역은 알파 형태와 연관된 저장된 샘플에서 4.15옹스트롬 및 T0와 동일한 D의 짧은 간격에 해당하는 피크를 나타낸다. SAXS 영역은 D의 긴 D 간격에서 변경되지 않은 주 피크를 나타 냈으며 2 개의 L 구성을 갖는 라멜라 구조에 해당하는 63.7 옹스트롬과 같습니다.
지질 매트릭스의 안정한 고체 상태는 코딩으로부터 API의 안정한 방출 프로파일을 초래한다. 고품질 X선 데이터를 제공하려면 모세관을 채울 때 입자 사이의 끼임을 방지하는 것이 중요합니다. 또한 샘플 유형 및 사용 가능한 장비에 따라 노출 시간을 선택합니다.
새로운 의약품을 개발하는 동안 고체 상태의 지질 및 API와의 상호 작용을 스크리닝하여 적합한 제조 공정을 선택하고 제품 안정성을 예측합니다.
