폐 고혈압 과 우심 심실 부전을 위한 대형 동물 모델: 왼쪽 폐 동맥 리깅 및 양에 있는 진보적인 주요 폐 동맥 밴딩

이 프로토콜은 우심실 적응과 실패를 연구하기위한 대규모 동물 모델입니다. 따라서이 모델은 폐 고혈압을 치료하기위한 RV 표적 치료제 개발에 필수적입니다. 이 모델은 로드 후 오른쪽 RV를 점진적으로 증가시키며, 이는 RV 적응을 적정하기 위한 전략으로 사용될 수 있다.

이전의 어떤 대형 동물 모델도 RV 표현형에 대한 이러한 통제권을 가지고 있지 않다. 외과 수술이 실험실 책임자 인 Matthew Bacchetta 박사와 외과 동료 의사 John Stokes, Kelly Wu 및 Yatrik Patel이 될 것임을 보여줍니다. 폐동맥 밴딩 절차를 시연하겠습니다.

마취 후, 양들의 목에서 상복부까지 수술장을 면도하는 것으로 시작하십시오. 비누 또는 스크럽 브러시를 사용하여 먼지 및 기타 오염 물질로부터 수술 현장을 청소하십시오. 가슴에 클로르헥시딘 또는 베타 인 용액으로 목을 준비하고 멸균 된 방식으로 수술 현장을 드레이프하십시오.

미디어 스타일 노출을 얻으려면 절개 길이가 여덟 센티미터 미만인 왼쪽 네 번째 늑간 공간에서 근육 절약 미니 흉부 절제술을 수행하십시오. 작은 또는 중간 Finochietto 리트랙터를 사용하여 늑간 공간 내의 피노치에토에 수직으로 앉기 위해 터피어 리트랙터에서 갈비뼈를 분리하여 늑간 공간 내의 연조직을 수축시켜 회절신경을 손상시키지 않고 노출을 개선하여 심낭 내부를 절개하고 2/0 실크 봉합사로 심낭 우물을 만들어 주요 폐동맥과 우심실을 노출시킵니다. 노출 내의 왼쪽 심방 부속기를 주요 폐동맥 주위의 폐동맥 분기 해부 수준에 대한 랜드 마크로 확인하고 탯줄 테이프로 분리하십시오.

왼쪽 폐동맥의 심낭 내 해부를 수행하고 탯줄 테이프로 둘러 쌉니다. 주요 폐동맥 주위에 무거운 의무 실리콘 혈관 폐색기를 놓습니다. Keith 바늘에 0 실크 봉합사를 사용합니다.

U-스티치와 함께 혈관 폐색기의 끝을 고정시킵니다. 일단 주요 폐동맥 주위에 고정되면 폐색기를 주요 폐동맥을 따라 원거리로 밀어 넣는다. 우심실 압력 라인을 구축하려면 먼저 선택된 위치를 둘러싸고있는 서약서가있는 5/0 모노 필라멘트 비 흡수성 폴리 프로필렌 지갑 봉합사를 배치하고 혈관 올무를보십시오.

심근을 통한 삽입을 용이하게 하기 위해 멸균된 36인치 압력 튜브의 수컷 말단을 30도 각도로 절단하여 우심실 압력라인을 준비한다. 그런 다음 2/0 실크 타이를 사용하여 압력 라인을 우심실 내에 배치하기위한 최적의 깊이로 표시하십시오. 생검 펀치를 사용하여 우심실 유출관 또는 이전에 배치 된 추적기 끈 봉합사 내의 RVOT 자유 벽에 작은 심장 절제술을 만드십시오.

수동 압력으로 출혈을 제어하거나 추적기 봉합사의 올무를 조여서 출혈을 제어하십시오. 압력 튜브의 절단 단부를 RVOT에 삽입하고 고정합니다. 지갑 끈을 묶은 다음 지갑 끈을 압력 튜브에 고정하여 압력 라인을 고정하십시오.

추가 압력 튜브를 RVOT 압력 라인에 연결하여 RVOT 튜브를 확장합니다. 기준선, 우심실 압력의 측정을 모니터링합니다. 왼쪽 폐동맥 주위를 조심스럽게 해부하여 왼쪽 폐동맥을 탯줄 테이프로 감싸서 그것을 감싸십시오.

RVOT 압력선과 폐동맥 폐색 튜브를 흉부 절개 아래 늑간 공간 중 하나에서 꺼내십시오. 내주 항구를위한 장소를 표시하기 위해 양들의 왼쪽 도섬에있는 근막 층을 따라 멸균 된 들판 내에서 가능한 한 척추쪽으로 후방으로 두 개의 경막 주머니를 형성하십시오. 흉부 튜브 폴라를 사용하여 RVOT 압력선과 폐색 튜브를 흉부 절개에서 왼쪽 도섬 포트 부위로 터널링하십시오.

오클루더 튜브와 우심실 압력 라인을 포트의 바브 연결부에 고정하십시오. 추가 타이를 사용하여 오클루더 및 압력 튜브를 포트 커넥터 주위에 고정합니다. 포트 이동을 방지하기 위해 림 주변의 3 위치에 있는 포트를 3/0 폴리프로필렌 봉합사로 하부 근막에 앵커링합니다.

피하 조직 진피와 피부를 polyglactin 910 봉합사로 층으로 재근사합니다. RVOT 포트를 다섯 밀리리터의 헤파린 나트륨으로 플러시하십시오. 여덟 개의 숫자 두 개의 폴리글락틴 910 봉합사의 그림으로 흉부 절제술을 닫은 다음 실행 번호 0 polyglactin 910으로 가슴 근육층을 닫으십시오.

마지막으로, 실행 번호 2/0 폴리글락틴 910 봉합사의 층으로 피하 조직을 닫고 피부를 스테이플링하십시오. 모니터링을 위해 두 개의 압력 트랜스듀서, 우심실 및 오클루더 커프 압력을 준비합니다. 동물이 약간 억제 된 후 후버 바늘을 우심실 압력 변환기에서 우심실 포트로 삽입하십시오.

다섯 밀리리터 주사기를 삼방 정지 수탉에 부착하고 오른쪽 심실 포트에서 주사기로 혈액을 다시 끌어 오십시오. 우심실 압력 라인이 설정되면 폐동맥 커프 트랜스듀서에서 Huber 바늘을 연결하십시오. 찢어진 심실 및 폐동맥 커프 압력의 시작 값을 캡처하여 이전 판독 값의 급격한 변화를 주목하십시오.

천천히 3 % hypertonic 식염수를 폐색 포트에 주입하면서 찢어진 심실 및 커프 압력에주의를 기울이십시오. 일단 PA 커프가 원하는 양으로 팽창되면 커프 포트로부터 후버 바늘을 제거한다. 10 밀리리터의 식염수로 오른쪽 심실 포트를 플러시 한 다음 헤파린 나트륨 밀리리터 당 1000 단위의 다섯 밀리리터로 포트를 플러시하십시오.

12 마리의 양 중에서. 평균 폐동맥 커프 압력은 첫 번째 주에서 아홉 번째 주까지 시간이 증가함에 따라 증가했습니다. 더 빠른 폐동맥 밴딩은 정맥 산소 포화도의 더 빠른 감소로 이어집니다.

대조적으로, 보다 점진적인 폐동맥 밴딩 전략을 경험한 사람들은 폐동맥 커프 압력을 조절함으로써 70 내지 80% 사이의 정맥 산소 포화도의 생리학적 범위를 유지한다. 이 모델은 승차 심실 적응 및 표현형을 제어하고 적정하는 능력을 가지고 있습니다.