Name: in vivo electrophysiological measurement of compound muscle action potential from the forelimbs in mouse models of motor neuron degeneration
Uploaded: 2018-06-15T14:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 35 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Electrophysiological Measurement of Compound Muscle Action Potential from the Forelimbs in Mouse Models of Motor Neuron Degeneration at JoVE.com

이 연구는 구 루벤에 의해 지원 되었습니다 ('여는 미래'와 C1), 과학 연구 플랑드르 (FWO-삼기엔), 티에리 Latran 재단 협회 안테나 contre 레 Maladies 신경-Musculaires (ABMM), 근 위축 증에 대 한 기금 협회 (MDA)는 ALS 협회와 ALS 리가 (벨기에). PVD는 FWO 삼기엔의 수석 investigatorship 보유 하고있다. RP 중앙 치료 클리닉 (CRC) 아일랜드에서 교부 금에 의해 지원 되었다와 현재 지원 되는 FWO 아일랜드 (누이)의 국가 대학.

모든 동물 표준 조건 하에서 지침에 따라 구 루벤-의 루벤 대학 및 관련된 유럽 지침 (유럽 연합 지침 2010/63/EU 동물 실험에 대 한) 보관 되어 있었다. 모든 동물 실험 구 루벤의 로컬 윤리 위원회에 의해 승인 되었다.
1. 동물 준비와 마 취
<ol><li>마우스 isoflurane/산소 흡입으로 마 취를 유도. 마 취의 유도 isoflurane의 4%와 2-3%를 사용 하 여 산소의 2.5 L/min 흐름에서 유지 보수에 대 한. 즉,마우스의 상태에 따라 마 취의 유지 보수에 대 한 isoflurane 비율 조정, 작고 약한 쥐 덜 마 취약을 필요로 합니다. 고통 철수 반사의 부재를 확인 하는 패드를 걷고 hindlimb에 가벼운 압력을 적용 하 여 적절 한 마 취 예를 들어, 확인 합니다.</li>
	<li>마 취 동안 체온의 감소를 방지 하기 위해 37 ° C에서 온도 조절 난방 격판덮개를 사용 하 여 마우스 몸 온도 제어 합니다.</li>
	<li>마 취의 유지 보수를 위해 nosecone와 마우스에 맞게. 동물은 nosecone 기도 차단 하지 않습니다 및 동물 꾸준히 호흡을 확인 하 여 산소의 충분 한 공급을가지고 있는지 확인.</li>
	<li>녹음을 하는 동안 마우스 충분히 호흡 속도 (마 취에서 약 1 Hz)와 가벼운 압력에 철수 반사의 부재를 관찰에 의해 마 취 여부를 모니터링 합니다. 마 취가 충분히 깊은 경우 수동으로 isoflurane 농도 증가.</li>
	<li>측정 후 복구 난방 격판덮개에는 적외선 램프의 온 정에서 sternal recumbency, 약 2-5 분을 유지 하기 위해 충분 한 의식 회복 될 때까지 마우스를 둡니다. 두지 마십시오 마우스 무인과 다른 생쥐의 회사에서 그것은 완전히 마 취에서 복구 될 때까지.</li>
</ol>2. 뒷 다리와 앞 발에 CMAP의 측정
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57741/57741fig1.jpg"> 그림 1입니다. CMAP 측정을 위한 전극의 위치. 전극의 위치는 뒷 다리-(A) 및 (B)의 앞 발에 대 한 제공 됩니다. 전극 다음과 같이 열거 된다: 1: 양극과 2: 음극 자극 전극, 3: 활성 기록 전극, 4: 참조 전극 및 5: 접지 전극. <a href="/files/ftp_upload/57741/57741fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<ol><li>27 G 바늘 전극을 사용 하 여 hindlimb 및 forelimb CMAP 측정. 관광지의 전극 위치 그림 1 을 참조 하십시오.</li>
	<li>전극 배치는 hindlimb에 다음과 같습니다.<ol>
<li>경향이 위치에서 생리대에 마우스를 놓습니다. 무릎에 hindlimb를 확장 하 고 접착 테이프 (그림 1A)를 사용 하 여 작업 표면에 발을 첨부.</li>
		<li>약 2 cm의 거리와 좌 골 노치의 양쪽에 피하 자극 전극 배치 (1 = 양극 및 2 = 음극) 전극 사이. 기본 근육 puncturing 없이 피부와 푸시 피부 아래 바늘의 약 5 m m 통해 수직으로 바늘을 삽입 하려면 피부를 들어올립니다.</li>
		<li>마찬가지로, 피하 gastrocnemius 근육 정렬 기록 전극 (3) 장소. 30도 각도에서 아 킬 레 스 힘 줄 옆 피하 참조 전극 (4)를 삽입 하 고 피부 아래 바늘의 2-5 m m를 두고. 비슷한 방식으로 자극 전극, 피하는 마우스 측면 접지 전극 (5) 배치 하지만이 전극의 위치 측정에 대 한 중요 하지 않습니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>다음과 같이 앞 발에 전극 배치 합니다.<ol>
<li>부정사 위치 및 몸 (그림 1B)의 측면에 두 앞 발을 확장 하는 사용 접착 테이프에 생리대에 마우스를 놓습니다.</li>
		<li>자극 전극 배치 (1 양극 2 = = 음극) 상 완 총 신경으로 forelimb의 양쪽에 피하. 기본 근육 puncturing 없이 피부와 푸시 피부 아래 바늘의 약 5 m m 통해 수직으로 바늘을 삽입 하려면 피부를 들어올립니다.</li>
		<li>피부를 들어올려이 두 근 brachii 근육 위에 피하 기록 전극 (3)를 배치 합니다. 30도 각도로 3 m m 깊이에서 걷는 패드에 참조 전극 (4)를 놓으십시오. 접지 전극 (5) 피하는 마우스 측면에 놓습니다. 참고: 전극이이 설정에서 서로 가까이에 있습니다. 이 기록을 왜곡으로 서로 감동에서 전극을 방지 합니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 데이터 수집
<ol><li>컨트롤러 단위에서 재발 자극 버튼을 눌러 자극을 시작 하 고 증가 자극의 강도 컨트롤러 노브. 1 펄스/s 0.1 ms 자극 기간을 사용 하 여 모든 축 삭 자극. 소프트웨어에 드롭다운 메뉴에서 올바른 주파수 및 기간을 선택 합니다.</li>
	<li>Supramaximal 자극에 도달 (5-20 mA; demyelinating에 조건 최대 60 mA), 증가 자극 CMAP 응답의 진폭을 증가 중단 때까지 강도 컨트롤러 노브를 설정 하 여 적용. 거기에서 CMAP 진폭 그것의 극대 응답에 도달 했습니다 수 있도록 20% 자극 증가 추가. 끝 재발 자극 버튼을 다시 누르면 자극.</li>
	<li>녹음에 다음 사항을 나타내는 표식 도구를 사용 하 여: 자극, 응답, 최대 긍정적인 최대 및 최대 부정적인 피크 (그림 2)의 개시의 개시.</li>
	<li>(그림 2) 응답의 개시에 자극의 개시에서 지연으로는 대기 시간 (밀리초)을 결정 합니다. 진폭 증가 하기 시작 하는 초기 점으로 응답의 개시를 정의 합니다. 대기 시간을 사용 하 여 축 삭에 있는 demyelination 평가.</li>
	<li>최대 긍정적인 피크 (그림 2) 최대 부정에서 진폭 (mV)를 측정 합니다. 진폭의 크기를 사용 하 여 기능 축 삭의 수 상관.</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57741/57741fig2.jpg"> 그림 2입니다. CMAP 응답의 대표 이미지. 설명 CMAP 응답 진폭 및 대기 (A) 시간 계산에 사용 하는 포인트를 나타내는. 대기 시간 CMAP 응답의 발병에 자극에서 지연에 의해 결정 됩니다. 피크 대 피크 진폭에 복 형 파의 최대 긍정적인 피크 최대 부정에서 측정 됩니다. 건강 한 비-유전자 변형 동물 (B) 및 장시간된 대기 시간 및 감소 된 진폭 (C)와 병에 걸린 동물의 대표 기록. <a href="/files/ftp_upload/57741/57741fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<ol start="6"><li>전극의 정확한 배치 기록의 결과 값에 영향을 미칠 수 있습니다, 이후 전극 교체와 같은 신경 세 번 측정 supramaximal 자극을 사용 하 여 큰 반응을 얻을 수 있도록. 기록의 평균을 사용 합니다.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Brown, R. H., Al-Chalabi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyotrophic+Lateral+Sclerosis.">Amyotrophic Lateral Sclerosis.</a> N Engl J Med. 377 (2), 162-172 (2017).</li><li>Prior, R., Van Helleputte, L., Benoy, V., Van Den Bosch, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defective+axonal+transport:+A+common+pathological+mechanism+in+inherited+and+acquired+peripheral+neuropathies.">Defective axonal transport: A common pathological mechanism in inherited and acquired peripheral neuropathies.</a> Neurobiol Dis. , 300-320 (2017).</li><li>de Carvalho, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrodiagnostic+criteria+for+diagnosis+of+ALS.">Electrodiagnostic criteria for diagnosis of ALS.</a> Clin Neurophysiol. 119 (3), 497-503 (2008).</li><li>Krajewski, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurological+dysfunction+and+axonal+degeneration+in+Charcot-Marie-Tooth+disease+type+1A.">Neurological dysfunction and axonal degeneration in Charcot-Marie-Tooth disease type 1A.</a> Brain. 123 (Pt 7), 1516-1527 (2000).</li><li>Raynor, E. M., Ross, M. H., Shefner, J. M., Preston, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+between+axonal+and+demyelinating+neuropathies:+identical+segments+recorded+from+proximal+and+distal+muscles.">Differentiation between axonal and demyelinating neuropathies: identical segments recorded from proximal and distal muscles.</a> Muscle Nerve. 18 (4), 402-408 (1995).</li><li>Zielasek, J., Martini, R., Toyka, K. 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J., Talbot, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenics,+toxicity+and+therapeutics+in+rodent+models+of+mutant+SOD1-mediated+familial+ALS.">Transgenics, toxicity and therapeutics in rodent models of mutant SOD1-mediated familial ALS.</a> Prog Neurobiol. 85 (1), 94-134 (2008).</li><li>Manganelli, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nerve+conduction+velocity+in+CMT1A:+what+else+can+we+tell.">Nerve conduction velocity in CMT1A: what else can we tell.</a> Eur J Neurol. 23 (10), 1566-1571 (2016).</li><li>Cornett, K. 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D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+Biomarkers+in+Spinal+Muscular+Atrophy:+Preclinical+Proof+of+Concept.">Electrophysiological Biomarkers in Spinal Muscular Atrophy: Preclinical Proof of Concept.</a> Ann Clin Transl Neurol. 1 (1), 34-44 (2014).</li></ol>

저자는 공개 없다.

중요 한 기록 방법을 질병의 진행과 특히 신경 질환의 동물 모델에서 치료의 효능을 평가 하기 위한 필수적입니다. Cmap을 결정 하는 것은 일상적으로 사용 클리닉에서 및 실험 설정에 neuropathic 신경 근육 학 장애3,18에 신경 전도 평가 하는 최소 침 습 electrophysiological 기술입니다. 여기, 우리는 CMAP forelimb의 상 완 신경 총 신경의 신경 전도 측정 하기 위하여 쥐에 기록에 대 한 새로운 응용 프로그램을 설명 합니다. 제시 방법 마우스 모델을 neurodegeneration의 신경 기능을 더 다양 하 고 상세한 경도 평가 있습니다.
바늘 전극 반지 전극 보다 약간 더 침략 적 이며 경도 연구에서 특히 주의 해야 한다 조직 피해를 최소화 하기 위해. 방법의 1 개의 가능한 결점은 신경이 나 근육을 피어 싱에서 결과 부상이 다. 그러나, 전극의 주의 피하 배치, 후 부상 및 근육과 신경의 막을 수 있습니다. 대조적으로, 반지 전극을 사용 하 여 메서드 여기에 제시 된 방법에서는 신체의 큰 부분에서 모피의 면도 필요 하지 않습니다. 결과적으로, 아무 불편 또는 동물에 대 한 체온 조절에 효과 있다.
전극의 위치는 CMAP 진폭 및 대기의 정확 하 고 일관 된 기록에 대 한 중요 하다. 그것은 전극 위치를 변경 하 고 최대한 자극을 확인 하는 각 사이트에서 2 ~ 3 측정을 수행 하는 것이 좋습니다 그리고 응답 달성 된다. 정확한 녹음 복 형 곡선 그림 2에서 같이 생산 한다. 방법 표준화, 신경 손상 없이 비-유전자 변형 쥐 적절 하 고 일관 된 전극 최적의 자극에 대 한 위치를 설정 하려면 최고의 모델은. 재사용 가능한 바늘 전극 반복된 사용을 위해 적당 한 그들은 정기적으로 살 균 된다, 예를 들어 동물, 20 분에 대 한 글을 하는 경우 그리고 선명도 대 한 검사.
건강 한 성인 쥐에 제시 방법으로 기록 하는 CMAP 진폭은 일반적으로 좌 골 신경 및 상 완 신경 총 자극 후 80-100 mV. 이 20-40 mV8,,1920의 결과 생산 하는 반지 전극에 대 한 피부에 의해 발생 하는 높은 임피던스 때문에 특히 반지 전극으로 측정 응답 보다 큽니다. ALS 마우스 모델에서 좌 골 신경 또는 상 완 신경 총 마비 사지에 자극 후 CMAP 진폭 10-30 mV 감소. CMAP 진폭의 크기는 CMAP 진폭 개발21동안 증가 때문에 젊은 동물에 더 작다.
우리가 여기에 설명 하는 메서드는 ALS, denervation, 그리고 후속 모터 적자, 앞 발13보다 hindlimbs에서 이전 발생의 마우스 모델에 특히 유용 합니다. Denervation, 뿐만 아니라 메서드는 CMAP 진폭에 방해 또는 저 능 아 거부로 결정 되는 reinnervation를 검출할 수 있었다. 추가 질병 진행;의 후속을 방해 하는 증상 발병의 나이에 이미는 hindlimbs의 근육에 CMAP 진폭에 있는 극적인 감소 CMAP 진폭 질병의 초기 단계에 매우 낮은 값을 도달, 질병 과정에서 더 감소 하지 않습니다 그들은. 반면, axonal 손실 상 완 신경 총 신경의 앞 발에 더 느린 걸음에 진행 하 고 질병의 더 긴 기간 동안 질병 진행을 측정 하기 위한 더 민감한 옵션을 선물 한다. 또한, 덜 퇴 화 앞 발 axonal 기능 향상을 목표로 하는 치료 접근을 평가 하기 위한 더 유력한 사이트를 제공할 수 있습니다.
그것은 분명 그 제시 기법 제공 소설 마우스의 특성에 대 한 신경 근육 학 장애의 모델입니다. 좌 골 신경 및 상 완 신경 총에서 바늘 전극 가진 CMAP 녹음 axonal 손실을 평가 하 고 뒷 다리-또한 앞 발 처럼 demyelination를 신속 하 고 재현할 수 방법입니다. 주목할 만한 모터 적자 기록 될 수, 따라서 이러한 결함의 초기 정량화를 허용 하기 전에 방법의 감도 axonal 적자도 있습니다. 또한, 반복 테스트의 가능성 필요한 동물의 수를 감소 하 고 개별 동물에 다른 사이트에서 신경 근육 학 및 neuropathic 질병의 진행에 대 한 자세한 개요를 제공 합니다.

전기 생리학 등 모터 신경 장애, plexopathies, neuropathies, 신경 근육 접합 질환 myopathies 신경 근육 학 장애에서 진단 도구로 사용 됩니다. 루 경화 증 (ALS), 모터 신경에 주로 영향을 받습니다에 axonal 손상과 근육 마비1 에 반영 됩니다 감소 CMAP 진폭 신경 유도 학문 (NCS)에. Charcot Marie이 질병 (CMT) axonal 변성 및 demyelination NCS2를 사용 하 여 주변 신경에서 추정 될 수 있습니다. 이 기술은 질병 진행3,4평가로 확인 진단 뿐만 사용할 수 있습니다. NCS는 활동 전위의 진폭5의 크기에서 추론, axonal 병리학의 평가 및 demyelination-감소 전도 속도에 결과의 범위 연장 원심 대기 시간, 또는 유도 블록 6.
CMAP 측정 모두 인간과 쥐에서 신경 전도 평가 하는 신속 하 고 중요 한 방법입니다. 반면 환자는 NCS 수행 정기적으로 다른 신경 및 근육, 마우스에 기록 하는 다양 한 사이트에서 CMAP 측정은 일반적으로 hindlimbs에 신경 기능을 평가 하기 위해 좌 골 신경에 대해서만 수행 됩니다. 그러나, 몇몇 동물 연구에서 것 기록에서 앞-hindlimbs, CMAP 예를 들어 앞-와 ALS 마우스 모델에서 hindlimbs 사이 차동 질병의 진행에 따라.
여기, 바늘 전극을 사용 하 여 쥐의 앞 발에서 Cmap을 기록 하는 방법을 소개 합니다. 또한, 우리는 Cmap 바늘 전극과 마찬가지로 hindlimbs에서 측정 하는 방법을 제공 합니다. 반지 전극과 hindlimbs에서 Cmap의 측정 이전7,8발표 되었습니다. Cmap 바늘 전극을 사용 하 여 녹음 빠른 측정 방법, 그것의 모피, 면도 필요 하지 않습니다 이며 뒷 다리-와 앞 발을 측정 하기 위한 절차는 숙련 된 연구원에 대 한 동물 당 불과 10 분 걸립니다. 또한,이 최소한 침략 적 접근은 동물에서의 여러 신경 경도 후속 수 있도록 반복 측정 가능 합니다.

<table><tbody><tr><td>Resuable subdermal needle electrode, Pl/Ir</td><td>Technomed</td><td>TE/S61-434</td><td>The Needle is 13 mm (0.51&quot;) in length, 0.4 mm (27G) in diameter</td></tr><tr><td>Natus electrodiagnostic system</td><td>Natus Neurology</td><td>UltraPro S100</td><td>EMG device</td></tr><tr><td>Synergy</td><td>Natus Neurology</td><td>version 20.1.0.100</td><td>EMG software for UltraPro S100</td></tr><tr><td>Physitem Controller</td><td>Rothacher-Medical GmbH</td><td>TCAT-2LV</td><td>Heating pad</td></tr><tr><td>combi-vet Base Anesthesia System Digital Flowmeter with TEC 3 Vaporize</td><td>Rothacher &amp;amp; Partner</td><td>CV 30-301-D</td><td>Isoflurane Vaporizer and flowmeter</td></tr><tr><td>Iso-Vet 1000 mg/g&amp;nbsp;</td><td>Piramal Healthcare UK Limited</td><td>AP/DRUGS/220/96</td><td>Isoflurane</td></tr><tr><td>SOD1-G93A mice</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>#002726</td><td>ALS tg and non-tg control littermates, only females</td></tr><tr><td>PrP-hFUS-WT3 mice</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>#017916&amp;nbsp;</td><td>ALS tg and non-tg control littermates, all groups balanced for males and females</td></tr><tr><td>C57BL/6Jax mice</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>#000664</td><td>Non-tg mice for axotomy, male and female</td></tr><tr><td>C61-PMP22 mice</td><td>Mouse line was generously donated&amp;nbsp; by Prof. M. Sereda (The Max Planck Institute of Experimental Medicine, G&amp;ouml;ttingen, Germany).</td><td></td><td>CMT tg and non-tg control littermates, all groups balanced for males and females</td></tr></tbody></table>

in vivo electrophysiological measurement of compound muscle action potential from the forelimbs in mouse models of motor neuron degeneration

신경 축 삭의 기능을 평가 신경 근육 학 질환의 진행에 자세한 정보를 제공 합니다. Electrophysiological 녹음 인간과 설치류 모델에서 신경 전도 측정 하는 중요 한 접근 방식을 제공 합니다. 쥐에 전도 대 한 기술적 가능성을 확대, 복합 근육 활동 전위 (Cmap) 바늘 전극을 사용 하 여 forelimb에 상 완 총 신경에서의 측정은 여기 설명 합니다. Hindlimbs에서 좌 골 신경 자극 후 CMAP 녹음 이전 설명 되었습니다. 새로 도입된 된 방법 여기 추가 사이트에서 신경 전도도의 평가 가능 하며 따라서 신경 근육 기능에 대 한 더 깊은 개요를 제공 합니다. 기술 기능 축 삭의 상대 번호와 myelination 수준 모두에 대 한 정보를 제공합니다. 따라서,이 방법은 axonal 질병 뿐만 아니라 demyelinating 조건 평가에 적용할 수 있습니다. 이 최소 침 습 방법 신경의 추출 필요 하지 않습니다 이며 따라서 같은 동물에 경도 후속에 대 한 반복된 측정에 적합. 비슷한 기록 방법의 변환 관련성을 강조 하기 위해 임상 설정에서 수행 됩니다.

Cmap 바늘 전극을 사용 하 여의 electrophysiological 측정 시간이 지남에 신경 근육 기능에 따라 최소한 침략 적 하 고 매우 민감한 방법입니다. 설명 하는 기술은 여기 쥐, forelimb 신경 전도의 평가 허용 하 고 따라서 신경의 기능에 대 한 통찰력을 제공 합니다.
CMAP 진폭 및 대기 시간 측정 뒷 다리와 앞 발에서 ALS, SOD1 G93A9 와 PrP-hFUS-WT310 (그림 3)의 두 개의 마우스 모델에서 CMT, C61 PMP2211,12의 마우스 모델에서 질병 과정 (그림 4). ALS 마우스 모델 ALS 관련 인간 유전자, 즉 중 돌연변이 SOD1 또는 야생 타입 FUS의 overexpression에 의해 창조 되었다. 두 모델 마우스 개발 ALS 마비에 지도 진보적인 모터 신경 퇴보를 닮은. 비-유전자 변형 littermate 컨트롤에서 뒷 다리-와 앞 발 CMAP 진폭 (그림 3A) 동안 변화 하지 않았다. 다른 한편으로는 hindlimb에서 좌 골 신경의 CMAP 진폭 극적으로 감소 했다 60 일의 나이 주위 증상 발병 전에 SOD1 G93A 쥐에 (반면 첫번째 모터 증 후는 일반적으로 3 개월의 나이에 관찰)13 . 진폭은 90 mV 유전자 변형 비 (비-tg) littermates에 그 나이에 반면 SOD1 G93A 쥐에 그것만 30 mV. 있었습니다만 최소한의 추가 하락 진폭에서 질병 진행 증상 단계 150 일의 나이에. CMAP 진폭에 있는 감소 및 따라서 축 삭의 퇴보는 hindlimbs에서 좌 골 신경에 비해 앞 발의 상 완 총 신경에 연기 되었다. 앞 발에 질병의 진행은 또한는 CMAP로 더 눈에 띄는 진폭 감소 70에서 30 mV mV이이 쥐에 모터 적자의 전후 측정 될 때.
ALS의 PrP-hFUS-WT3 마우스 모델에서 모터 적자의 발병 시작 약 28 일 세10, CMAP 진폭에 있는 감소의 개시와 일치 합니다. 이것은 더 가속된 질병 모델 생쥐 약 65 일의 나이에 말기 도달입니다. CMAP 진폭에 있는 감소 (그림 3D) hindlimbs에는 이전 axonal 변성을 나타내는 forelimb에 상 완 총 신경에 비해 hindlimb의 좌 골 신경에 더 급속 하 게 발생 했습니다. 이 관찰에서 hindlimbs 특히 이전 질병 과정의 후반 단계까지 기능적 남아 있는 앞 발 보다 마비 모두 이러한 마우스 모델에서 임상 관찰을 지원 합니다.
일반적으로, 활동 전위의 개시에 자극에서 대기 시간이 짧은 hindlimbs (그림 3B, E)에 비해 앞 발에 했다. 이것은 단순히는 자극 및 기록 전극 사이의 짧은 거리입니다. 대기 시간 축 삭의 myelination 레벨의 표시를 제공합니다. 우리의 관측은 ALS의 마우스 모델에서 질병의 진행 동안 CMAP 대기 시간 장기화는 ALS demyelinating 질병 아니다. 빨리 모터 축 삭을 실시,의 손실로 인해 가장 높습니다.
인간의 PMP22의 3-4 부 overexpressing C61 PMP22 마우스와 heterozygote 마우스는 아주 약한 CMT1A 질병 표현 형 가벼운 demyelination와 감소 Cmap, 하지만 아무 표시 형11,12정리. 세 C61 PMP22 쥐의 1.5-2 년에서 CMAP 진폭은 감소 하 고 대기 시간 연장 모두 hindlimbs에 앞 발 (그림 4). 저하 진폭 및 건강 한 주제에서 기록에 비해 지연 된 응답을 표시 하는 대표적인 녹음 그림 2CB, 각각 표시 됩니다. 앞 발에 CMAP 대기 시간으로 뒷 다리 사지에에서 적용 되지 않습니다. 이것은 더 자주 환자에 있는 심각한 감소 또는 탐지 Cmap 길이 종속 장애14CMT의 병 태 생리 특성상 낮은 사지로 CMT1A 환자와 일치. 또한, 질병 엄격의 정도 axonal 무결성14,15정도 연관 진폭으로 CMAP 진폭 보다는 대기 시간이 나 전도 속도와 상관 된다. 그럼에도 불구 하 고,이 메서드는 검색 demyelinating CMT1A에서 관찰 한 것과 같은 과정을 충분히 중요 한 결과 나타냅니다.
진폭 및 대기 시간에 변화 했다 유전자 변형 비 그룹에서 가장 낮은 (계수 변화 2-15%, 1-13%, 각각). 모든 유전자 변형 경우에 가장 가능성이 있는 동물 중 질병의 진행에 차이 의해 발생 (계수 변형 진폭 8-51% 및 대기 시간 1-21%), 측정에서 더 많은 유사가 했다. 모든 경우에, 변화는 뒷 다리와 앞 발에 유사 했다. 바늘과 표면 전극의 사용에 있는 변이 비슷한16수 보고 되었습니다.
필요한 자극 강도 아닌 유전자 변형 사이 크게 다양 하지 않았다 및 ALS 모델 (그림 3C, F). 마찬가지로, 이러한 경우 supramaximal 자극을 도달 필요한 자극 물 및 hindlimbs에 대 한 유사 했다와 5-12 mA 사이 다양 한. CMT에서 증가 자극 강도 대 한 요구 사항이 인식된17 되었으며 동일한 표현 형 C61 PMP22 생쥐 (그림 4C)에서 보였다. 현상은 hypertrophic endoneurial 변경17에서 증가 전기 임피던스에 의해 설명 되었다.
확인 하 고 앞 발에서 기록 하는 CMAP 진폭 신경 자극 및 하지 근육 자극 했다, 우리 5 개월 된 비-유전자 변형 C57BL/6Jax 마우스 (남성과 여성) ( 에서에서 상 완 총 신경에 일방적인 부분 axotomy를 수행 그림 5). Axotomy 90에서 CMAP 진폭 감소 20 mV 뮤직 비디오, 축 삭의 대부분 작업에서 분리 했다 나타내는. hindlimbs 또는 contralateral forelimb에 진폭에 아무런 변화가 없었다. 이 결과 강하게이 두 근 brachii에 검색 응답 신경 자극 때문 이었다 고 근육 자극에서 발생 하지 않은 나타냅니다.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57741/57741fig3.jpg"> 그림 3입니다. CMAP 진폭, 대기 시간 및 필요한 자극에 뒷 다리-질병 과정 및 ALS에 앞 발 마우스 모델. SOD1 G93AA-(C)와 PrP-hFUS-WT3 (D-F) 유전자 변형 (tg) 쥐와 유전자 변형 비 (비-tg) littermates 모터 증상에서 증상 단계에서 측정 되었다는 질병의 징후 늦은 단계 처리, SOD1 G93A와 PrP-hFUS-WT3 마우스, 29, 38, 및 53 일 또는 나가 57, 91, 147 일 (d)에서 각각. 블랙: 비-유전자 변형 hindlimb, 검은 점선: 비-유전자 변형 forelimb, 회색: 유전자 변형 hindlimb 회색 점선: 유전자 변형 forelimb. 결과 ± sd. 진폭을 의미 하는 대로 표시 됩니다 (A, D) 비-유전자 변형 동물 모두 뒷 다리와 앞 발에에서 시간이 지남에 안정 됐다. 유전자 변형 동물, 진폭은 질병 과정에서 감소. 대기 시간 (B, E)는 질병에 의해 덜 영향 되었고 주요 차이 유전자 형에 앞 발 및 뒷 다리-사이 관찰 했다. (C, F) 필요한 자극에 변화가 했다 모든 그룹에서 최소한의. SOD1 G93A N = tg 147 d, N 제외한 모든 그룹에서 4 = 3. PrP-hFUS-WT3 마우스 29, 38, 및 53 연령 그룹에서 N는 비-4, 5, 및 4, 안내에 대 한 안내 7, 5, 및 3, 각각. 기호 다음과 같이 그룹 간의 차이 나타냅니다: *: tg hindlimb, # 대 비 안내 hindlimb: tg forelimb 대 비 안내 forelimb ¤: 비 안내 forelimb, 회색 대 비 안내 hindlimb *: tg hindlimb tg forelimb 대. 양방향 ANOVA와 Tukey의 다중 비교 테스트, *: p < 0.05, * *: p < 0.01, * * *: p < 0.001, * * *: p < 0.0001. #: p < 0.05, # #: p < 0.01, # # #: p < 0.001, # # # : p < 0.0001. ¤: p < 0.05, ¤¤: p < 0.01, ¤¤¤: p < 0.001, ¤¤¤: p < 0.0001. <a href="/files/ftp_upload/57741/57741fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57741/57741fig4.jpg"> 그림 4입니다. CMAP 진폭, 대기 시간, 그리고 뒷 다리-필요한 자극 CMT1A 쥐의 앞 발. C61 PMP22 유전자 변형 (tg) 쥐와 유전자 변형 비 (비-tg) littermates 1.5-2 세에서 측정 되었다. 진폭 (A)는 모두 뒷 다리 및 유전자 변형 쥐의 앞 발에 감소 했다. 대기 시간 (B) CMT 마우스에 모든 사지에서 연장 했다 그리고이 측정으로 앞 발에도 미묘한 변화가 감지 되었습니다. 자극 강도 (C)에 대 한 요구 사항은 CMT1A 환자에서 검출 된 표현 형을 닮는 C61 PMP22 생쥐에서 증가 되었다. 결과 ± SD, 의미 하는 대로 표시 됩니다 비 안내 N = 4 그리고 안내 N = 3. Sidak와 양방향 ANOVA의 여러 비교 테스트, * *: p < 0.01, * * *: p < 0.0001. <a href="/files/ftp_upload/57741/57741fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57741/57741fig5.jpg"> 그림 5입니다. Forelimb 활동 전위는 신경 자극에 의해 발생 됩니다. 관찰된 CMAP 응답 근육 자극 기인 했다 가능성을 제외 하려면 (부분) axotomy 상 완 총 신경에서 수행 되었다. CMAP 진폭 (A) 및 (B) 대기 (전) 전에 기록 된 성인 비 유전자 변형 생쥐에서 4 일 후 (게시) 상 완 신경 총의 axotomy. Axotomy는 CMAP 진폭 나타내는 반응은 신경 자극으로 인해 감소 됩니다. 블랙: hindlimb, 회색: contralateral forelimb 회색 점선: 동측 forelimb. 결과 평균 ± SD, N으로 표시 = 2. <a href="/files/ftp_upload/57741/57741fig5large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>

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In Vivo Electrophysiological Measurement of Compound Muscle Action Potential from the Forelimbs in Mouse Models of Motor Neuron Degeneration

Vivo에서 모터 신경 퇴보의 마우스 모델에서 앞 발에서 복합 근육 활동 전위의 electrophysiological 측정

신경 유도의 측정 neurodegeneration의 마우스 모델을 평가 하는 유용한 도구 이지만 그것은 자주 hindlimbs에 좌 골 신경을 자극에 적용 됩니다. 여기, 복합 근육 활동 전위 (CMAP) vivo에서 상 완 신경 총에 의해 innervated 마우스 forelimb 근육에서 측정 하는 기술을 설명 합니다.

Assessing the functionality of the nerve axon provides detailed information on the progression of neuromuscular disorders. Electrophysiological recordings ...

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Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In Vivo Electrophysiological Measurement of Compound Muscle Action Potential from the Forelimbs in Mouse Models of Motor Neuron Degeneration

19.1K 조회수.  KU Leuven - University of Leuven. 신경 유도의 측정 neurodegeneration의 마우스 모델을 평가 하는 유용한 도구 이지만 그것은 자주 hindlimbs에 좌 골 신경을 자극에 적용 됩니다. 여기, 복합 근육 활동 전위 (CMAP) vivo에서 상 완 신경 총에 의해 innervated 마우스 forelimb 근육에서 측정 하는 기술을 설명 합니다.

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Electrophysiological Motor Unit Number Estimation (MUNE) Measuring Compound Muscle Action Potential (CMAP) in Mouse Hindlimb Muscles

Compound muscle action potential (CMAP) and motor unit number estimation (MUNE) are electrophysiological techniques that can be used to monitor the functional status of a motor unit pool in vivo. These measures can provide insight into the normal development and degeneration of the neuromuscular system. These measures have clear translational potential because they are routinely applied in diagnostic and clinical human studies. We present electrophysiological techniques similar to those employed in humans to allow recordings of mouse sciatic nerve function. The CMAP response represents the electrophysiological output from a muscle or group of muscles following supramaximal stimulation of a peripheral nerve. MUNE is an electrophysiological technique that is based on modifications of the CMAP response. MUNE is a calculated value that represents the estimated number of motor neurons or axons (motor control input) supplying the muscle or group of muscles being tested. We present methods for recording CMAP responses from the proximal leg muscles using surface recording electrodes following the stimulation of the sciatic nerve in mice. An incremental MUNE technique is described using submaximal stimuli to determine the average single motor unit potential (SMUP) size. MUNE is calculated by dividing the CMAP amplitude (peak-to-peak) by the SMUP amplitude (peak-to-peak). These electrophysiological techniques allow repeated measures in both neonatal and adult mice in such a manner that facilitates rapid analysis and data collection while reducing the number of animals required for experimental testing. Furthermore, these measures are similar to those recorded in human studies allowing more direct comparisons.

Electrophysiological Motor Unit Number Estimation MUNE Measuring Compound Muscle Action Potential CMAP in Mouse Hindlimb Muscles

We present refined protocols that allow in vivo monitoring of motor unit function in the mouse. Techniques to measure compound muscle action potential (CMAP) and motor unit number estimation (MUNE) in the mouse hind limb muscles innervated by the sciatic nerve are described.

Compound muscle action potential (CMAP) and motor unit number estimation (MUNE) are electrophysiological techniques that can be used to monitor the ...

연구

행동분석학

Simultaneous Intracellular Recording of a Lumbar Motoneuron and the Force Produced by its Motor Unit in the Adult Mouse In vivo

The spinal motoneuron has long been a good model system for studying neural function because it is a neuron of the central nervous system with the unique properties of (1) having readily identifiable targets (the muscle fibers) and therefore having a very well-known function (to control muscle contraction); (2) being the convergent target of many spinal and descending networks, hence the name of "final common pathway"; and (3) having a large soma which makes it possible to penetrate them with sharp intracellular electrodes. Furthermore, when studied in vivo, it is possible to record simultaneously the electrical activity of the motoneurons and the force developed by their muscle targets. Performing intracellular recordings of motoneurons in vivo therefore put the experimentalist in the unique position of being able to study, at the same time, all the compartments of the "motor unit" (the name given to the motoneuron, its axon, and the muscle fibers it innervates1): the inputs impinging on the motoneuron, the electrophysiological properties of the motoneuron, and the impact of these properties on the physiological function of the motoneurons, i.e. the force produced by its motor unit. However, this approach is very challenging because the preparation cannot be paralyzed and thus the mechanical stability for the intracellular recording is reduced. Thus, this kind of experiments has only been achieved in cats and in rats. However, the study of spinal motor systems could make a formidable leap if it was possible to perform similar experiments in normal and genetically modified mice.
For technical reasons, the study of the spinal networks in mice has mostly been limited to neonatal in vitro preparations, where the motoneurons and the spinal networks are immature, the motoneurons are separated from their targets, and when studied in slices, the motoneurons are separated from most of their inputs. Until recently, only a few groups had managed to perform intracellular recordings of motoneurons in vivo2-4 , including our team who published a new preparation which allowed us to obtain very stable recordings of motoneurons in vivo in adult mice5,6. However, these recordings were obtained in paralyzed animals, i.e. without the possibility to record the force output of these motoneurons. Here we present an extension of this original preparation in which we were able to obtain simultaneous recordings of the electrophysiological properties of the motoneurons and of the force developed by their motor unit. This is an important achievement, as it allows us to identify the different types of motoneurons based on their force profile, and thereby revealing their function. Coupled with genetic models disturbing spinal segmental circuitry7-9, or reproducting human disease10,11, we expect this technique to be an essential tool for the study of spinal motor system.

Simultaneous Intracellular Recording of a Lumbar Motoneuron and the Force Produced by its Motor Unit in the Adult Mouse In vivo

This new method permits the simultaneous intracellular recording of a single adult mouse motoneuron and the measurement of the force produced by its muscle fibers. The combined investigation of the electrical and mechanical properties of motor units in normal and genetically modified animals is a breakthrough for the study of the neuromuscular system.

성인 마우스에서의 모터 단위 제작 룸버 Motoneuron과 포스의 동시 세포 녹화<em&gt; 생체에</em

The  spinal motoneuron has long been a good model system for studying neural  function because it is a neuron of the central nervous system with the ...

신경과학

In Vivo Electrophysiological Measurements on Mouse Sciatic Nerves

Electrophysiological studies allow a rational classification of various neuromuscular diseases and are of help, together with neuropathological techniques, in the understanding of the underlying pathophysiology1. Here we describe a method to perform electrophysiological studies on mouse sciatic nerves in vivo.
The animals are anesthetized with isoflurane in order to ensure analgesia for the tested mice and undisturbed working environment during the measurements that take about 30 min/animal. A constant body temperature of 37 &#176;C is maintained by a heating plate and continuously measured by a rectal thermo probe2. Additionally, an electrocardiogram (ECG) is routinely recorded during the measurements in order to continuously monitor the physiological state of the investigated animals.
Electrophysiological recordings are performed on the sciatic nerve, the largest nerve of the peripheral nervous system (PNS), supplying the mouse hind limb with both motoric and sensory fiber tracts. In our protocol, sciatic nerves remain in situ and therefore do not have to be extracted or exposed, allowing measurements without any adverse nerve irritations along with actual recordings. Using appropriate needle electrodes3 we perform both proximal and distal nerve stimulations, registering the transmitted potentials with sensing electrodes at gastrocnemius muscles. After data processing, reliable and highly consistent values for the nerve conduction velocity (NCV) and the compound motor action potential (CMAP), the key parameters for quantification of gross peripheral nerve functioning, can be achieved.

In Vivo Electrophysiological Measurements on Mouse Sciatic Nerves

Measurements of nerve conduction properties in vivo exemplify a powerful tool to characterize various animal models of neuromuscular diseases. Here, we present an easy and reliable protocol by which electrophysiological analysis on sciatic nerves of anesthetized mice can be performed.

마우스 좌골 신경에 생체 전기 생리 측정에서

Electrophysiological studies allow a rational classification of various neuromuscular diseases and are of help, together with neuropathological ...

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of primary afferent fibers mediated by GABAergic axo-axonal synapses (primary afferent depolarization). The strength of primary afferent depolarization can be measured by recording of volume-conducted potentials at the dorsal root (dorsal root potentials, DRP). Pathological changes of presynaptic inhibition are crucial in the abnormal central processing of certain pain conditions and in some disorders of motor hyperexcitability. Here, we describe a method of recording DRP in vivo in mice. The preparation of spinal cord dorsal roots in the anesthetized animal and the recording procedure using suction electrodes are explained. This method allows measuring GABAergic DRP and thereby estimating spinal presynaptic inhibition in the living mouse. In combination with transgenic mouse models, DRP recording may serve as a powerful tool to investigate disease-associated spinal pathophysiology. In vivo recording has several advantages compared to ex vivo isolated spinal cord preparations, e.g. the possibility of simultaneous recording or manipulation of supraspinal networks and induction of DRP by stimulation of peripheral nerves.

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

GABAergic presynaptic inhibition is a powerful inhibitory mechanism in the spinal cord important for motor and sensory signal integration in spinal cord networks. Underlying primary afferent depolarization can be measured by recording of dorsal root potentials (DRP). Here we demonstrate a method of in vivo recording of DRP in mice.

배근 잠재적 기록하여 생쥐의 척수 시냅스 억제를 측정<em&gt; 생체</em

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of ...

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

Muscle sensory neurons innervating muscle spindles and Golgi tendon organs encode length and force changes essential to proprioception. Additional afferent fibers monitor other characteristics of the muscle environment, including metabolite buildup, temperature, and nociceptive stimuli. Overall, abnormal activation of sensory neurons can lead to movement disorders or chronic pain syndromes. We describe the isolation of the extensor digitorum longus (EDL) muscle and nerve for in vitro study of stretch-evoked afferent responses in the adult mouse. Sensory activity is recorded from the nerve with a suction electrode and individual afferents can be analyzed using spike sorting software. In vitro preparations allow for well controlled studies on sensory afferents without the potential confounds of anesthesia or altered muscle perfusion. Here we describe a protocol to identify and test the response of muscle spindle afferents to stretch. Importantly, this preparation also supports the study of other subtypes of muscle afferents, response properties following drug application and the incorporation of powerful genetic approaches and disease models in mice.

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

Muscle sensory neurons are involved in proprioceptor signaling and also report on metabolic state and injury related events. We describe an adult mouse in vitro muscle-nerve preparation for studies on stretch-activated muscle afferents.

<em&gt; 체외</em근육의 구 심성의 소성 특성을 연구&gt; 성인 마우스 근육 - 신경 준비

Muscle sensory neurons innervating muscle spindles and Golgi tendon organs encode length and force changes essential to proprioception. Additional ...

Measuring Neuromuscular Junction Functionality

Neuromuscular junction (NMJ) functionality plays a pivotal role when studying diseases in which the communication between motor neuron and muscle is impaired, such as aging and amyotrophic lateral sclerosis (ALS). Here we describe an experimental protocol that can be used to measure NMJ functionality by combining two types of electrical stimulation: direct muscle membrane stimulation and the stimulation through the nerve. The comparison of the muscle response to these two different stimulations can help to define, at the functional level, potential alterations in the NMJ that lead to functional decline in muscle.
Ex vivo preparations are suited to well-controlled studies. Here we describe an intensive protocol to measure several parameters of muscle and NMJ functionality for the soleus-sciatic nerve preparation and for the diaphragm-phrenic nerve preparation. The protocol lasts approximately 60 min and is conducted uninterruptedly by means of a custom-made software that measures the twitch kinetics properties, the force-frequency relationship for both muscle and nerve stimulations, and two parameters specific to NMJ functionality, i.e. neurotransmission failure and intratetanic fatigue. This methodology was used to detect damages in soleus and diaphragm muscle-nerve preparations by using SOD1G93A transgenic mouse, an experimental model of ALS that ubiquitously overexpresses the mutant antioxidant enzyme superoxide dismutase 1 (SOD1).

A functional assessment of the neuromuscular junction (NMJ) can provide essential information on the communication between muscle and nerve. Here we describe a protocol to comprehensively evaluate both the NMJ and muscle functionality using two different muscle-nerve preparations, i.e. soleus-sciatic and diaphragm-phrenic.

Neuromuscular junction (NMJ) functionality plays a pivotal role when studying diseases in which the communication between motor neuron and muscle is ...

In Vivo Electrophysiological Measurement of the Rat Ulnar Nerve with Axonal Excitability Testing

Electrophysiology enables the objective assessment of peripheral nerve function in vivo. Traditional nerve conduction measures such as amplitude and latency detect chronic axon loss and demyelination, respectively. Axonal excitability techniques &#34;by threshold tracking&#34; expand upon these measures by providing information regarding the activity of ion channels, pumps and exchangers that relate to acute function and may precede degenerative events. As such, the use of axonal excitability in animal models of neurological disorders may provide a useful in vivo measure to assess novel therapeutic interventions. Here we describe an experimental setup for multiple measures of motor axonal excitability techniques in the rat ulnar nerve.
The animals are anesthetized with isoflurane and carefully monitored to ensure constant and adequate depth of anesthesia. Body temperature, respiration rate, heart rate and saturation of oxygen in the blood are continuously monitored. Axonal excitability studies are performed using percutaneous stimulation of the ulnar nerve and recording from the hypothenar muscles of the forelimb paw. With correct electrode placement, a clear compound muscle action potential that increases in amplitude with increasing stimulus intensity is recorded. An automated program is then utilized to deliver a series of electrical pulses which generate 5 specific excitability measures in the following sequence: stimulus response behavior, strength duration time constant, threshold electrotonus, current-threshold relationship and the recovery cycle.
Data presented here indicate that these measures are repeatable and show similarity between left and right ulnar nerves when assessed on the same day. A limitation of these techniques in this setting is the effect of dose and time under anesthesia. Careful monitoring and recording of these variables should be undertaken for consideration at the time of analysis.

In Vivo Electrophysiological Measurement of the Rat Ulnar Nerve with Axonal Excitability Testing

Axonal excitability techniques provide a powerful tool to examine pathophysiology and biophysical changes that precede irreversible degenerative events. This manuscript demonstrates the use of these techniques on the ulnar nerve of anesthetized rats.

Vivo에서 Axonal 흥분 테스트 쥐 척 골 신경의 electrophysiological 측정

Electrophysiology enables the objective assessment of peripheral nerve function in vivo. Traditional nerve conduction measures such as amplitude and ...

<meta charset="utf8"></head><body>Electroporation and nerve injury in mouse levator auris longus muscle(마우스 거근 오리스 장근의 전기천공법과 신경 손상)

Combined In Vivo Electroporation and Short&#45;Term Reinnervation of the Cranial Levator Auris Longus Skeletal Muscle

The neuromuscular junction (NMJ) is the peripheral synapse controlling the contraction of skeletal muscle fibers to allow the coordinated movement of many organisms. At the NMJ, a presynaptic motor axon terminal contacts a muscle postsynaptic domain and is covered by terminal Schwann cells. The integrity and function of the NMJ is compromised under several conditions, including aging, neuromuscular diseases, and traumatic injuries. To analyze the potential contribution of muscle-derived proteins to NMJ maintenance and regeneration, an in vivo gene transfer strategy has been combined with the denervation of the cranial levator auris longus (LAL) muscle after mechanical nerve injury. Previous findings showed that the forced expression of control fluorescent proteins does not alter NMJ organization or neurotransmission. This procedure aims to describe a detailed method of in vivo electroporation of the LAL muscle followed by transection or crushing of the specific branch of the facial nerve innervating cranial muscles, leading to NMJ denervation and reinnervation, respectively. The combination of these experimental strategies in the convenient LAL muscle constitutes an efficient method to study the potential contribution of muscle protein overexpression or silencing in the context of short-term NMJ reinnervation.

<meta charset="utf8"></head><body>저자 스포트라이트: 신경근 접합부에서 신경 손상 후 근육 단백질의 재생 역할

Here, we present a protocol that combines in vivo electroporation and denervation of the cranial levator auris longus (LAL) muscle. This procedure enables the study of the potential role of muscle-derived proteins in the regeneration of the neuromuscular synapse.

In Vivo Electroporation과 Cranial Levator Auris Longus Skeletal Muscle의 단기 신경 재생이 결합되었습니다.

The neuromuscular junction (NMJ) is the peripheral synapse controlling the contraction of skeletal muscle fibers to allow the coordinated movement of many ...

Vivo에서 모터 신경 퇴보의 마우스 모델에서 앞 발에서 복합 근육 활동 전위의 electrophysiological 측정

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Electrophysiological Motor Unit Number Estimation (MUNE) Measuring Compound Muscle Action Potential (CMAP) in Mouse Hindlimb Muscles

성인 마우스에서의 모터 단위 제작 룸버 Motoneuron과 포스의 동시 세포 녹화

마우스 좌골 신경에 생체 전기 생리 측정에서

배근 잠재적 기록하여 생쥐의 척수 시냅스 억제를 측정

Measuring Neuromuscular Junction Functionality

Vivo에서 Axonal 흥분 테스트 쥐 척 골 신경의 electrophysiological 측정

In Vivo Electroporation과 Cranial Levator Auris Longus Skeletal Muscle의 단기 신경 재생이 결합되었습니다.

In Vivo Electroporation과 Cranial Levator Auris Longus Skeletal Muscle의 단기 신경 재생이 결합되었습니다.

In Vivo Electroporation과 Cranial Levator Auris Longus Skeletal Muscle의 단기 신경 재생이 결합되었습니다.