이 작품은 지원 하 고 CNRS Mecabio도 전에 의해 자금.
저자는 절차를 통해 동물의 동물 보호 기술자 감사. 저자는 또한 IVTV 중앙 리 용, 티에리 Hoc 통해 인정합니다. 감사 마 저리 Sweetko 언어 버전에 대 한입니다.
우리는이 실험 연구에 그들의 기여에 대 한 Marylène Lallemand, 세 실 Génovésio, 및 패트릭으로 랑 감사 합니다.

설명 하는 모든 절차는 대학의 엑스-마르세유 기관 동물 관리 및 사용 위원회 프랑스 연구 사역에 의해 승인 되었고 마르세유 의료 학부 (기존의 동물 하우스에서 수행 프랑스).
 1.는 외부 Fixator 지침에 따라 다음의 기능 사양 정의 <ol><li>최적화 뼈 앵커리지.
	<ol><li>절반 스레드 (스레드 섹션)의 직경 1 m m의 핀을 이식.</li>
	</ol></li> <li>동물에 대 한 불편을 줄이기 위해 디자인 선택.
	<ol><li>7,723 mm 3 (19 m m x 12.7 m m x 32)의 볼륨에 맞는 작은 크기의 외부 fixator를 선택 하십시오.</li>
		<li>선택 된 외부 fixator 낮은 무게, 동물을 방해 하지 않으려면 핀 없이 미만 13 g &#39; 걸음 걸이. 그것의 저밀도 때문에 두 개의 블록에 대 한 소재로 알루미늄을 선택. 
		참고: 블록의 모따기 상당히 두 부품의 무게 감소.</li>
	</ol></li> <li>장력의 방향으로 뼈의 방향에 평행 하 게 유지 되도록는 fixator의 움직임을 제어 하 고 순수 인장 힘 보장.
	<ol><li>사용 두 블록은 그 바 슬라이딩. 그루브 하 고 각각 2 개의 핀을 견딜 수 있도록 블록을 엽니다.</li>
		<li>블록에 자유롭게 그 부드러운 한쪽으로는 신장 나사를 사용 하 고 수 수 의해 사로 잡혔다 손가락으로 하 고 두 번째 블록을 전치 하는 스레드 측면으로 회전. 뼈 골절, 장력의 방향으로 뼈의 방향에 평행 하 게 유지의 각 측에 2 개의 핀을 앵커. 핀에 긴장의 좋은 배포를 허용 하도록 경도 축에 인장 세력을 유지 합니다. 잠금 스크류가 있는 4 핀을 확보.</li>
	</ol></li> <li>알루미늄, 티타늄, 그리고 살 균 온도 견딜 수 있는 강철 같은 재료 선택.</li>
	<li>외부 fixator 형상에 해당 하는 핀 배치 확인 ( 그림 1 -B).
	<ol><li>시추 위치를 유지 하기 위해 뼈에 강화 클램프 포함 된 드릴링 가이드를 사용 하 여.</li>
		<li>낮은 클램핑 힘에 대 한 클램프의 레버 팔 단축. 측면을 지우려면 미래의 골절 위에 장치 가운데 클램프 위치.</li>
	</ol></li> <li>확인 설명서를 쉽게 주의 강화 하 고 모바일 블록 해제 널드 나사를 추가 하 여 조정.
	<ol><li>충분히 혼자 손가락으로 조작 하는 넓은 나사를 사용 하 여.</li>
		<li>신장 나사 쉽게 산만 수 있도록 두 개의 블록 사이의 중간 드릴된 사각 너트 추가.</li>
		<li>얇은 핀을 가진 수동 사용을 허용 하도록 두 개의 블록 또는 개체의 모든 종류 보다 더 큰이 사각형 너트 (각 측에 8 m m)를 확인 합니다. 회전 스크류 ¼ 0.125 m m 길이 허용 하도록 설정.</li>
	</ol></li></ol> 2. 수술 참고: 조 수는 모든 수술 과정에 대 한 필요. 4 12 주 된 남성 Sprague Dawley 쥐 표준 실험실 다이어트 광고 libitum 지 루 했다.
<ol><li>수술 도구 준비.
	<ol><li>다음 모든 수술 기구를 소독: 1 rugine, 2 Senn &#39; s 견인 기, 1 마이크로 올 슨 Hegar 바늘 홀더, 1 마요네즈 Hegar 바늘 홀더, 1 마요네즈 시저, 그리고 1 메스.</li>
		<li>외부 fixator 드릴링 가이드, 4 절반 스레드 핀, 4 나사, 끝, 훈련, 및 팁 및는 piezotome의 문자열 소독. 18 분 135 ° C에서 압력가 마로 소독 하 여이 계측기를 소독</li>
		<li>수술 테이블에 메 마른 분야 아래 난방 패드를 설치합니다. 모든 도구 또는 도구 다른 살 균 분야에 배치.</li>
	</ol></li> <li>Anesthetize 동물 준비.
	<li>마 취 및 진통 혼합물 준비 하 쥐 무게</li> <ol><li>확인 계산 Bupremorphine 및 Carprofen 임기 진통 혼합물을 준비 하 고. 0.05 mg/kg와 5mg/kg. Buprenorphine (0.03 mg/mL)와 Carprofen (5 mg/mL)를 각각 사용</li>
		<li>쥐 억제 피하 주사 진통 혼합물. 잠깐 몇 초, 그리고 주사 마 취 혼합물 intraperitoneally.</li>
		<li>전기 면도기와 오른쪽 뒷 다리를 면도 하 고 소독 povidone-요오드 솔루션 사지.</li>
		<li>동물을 옆으로 누워 (오른쪽 위로) 입장 축 외부 fixator의 정확한 위치 수 있도록 메 마른 분야에.</li>
		<li>수술 하는 동안 그것의 눈을 보호 하기 위해 그것의 머리에 무 균 압축 넣어.</li>
	</ol></li> <li>퇴에 외부 fixator 이식.
	<li>랜드마크 피부 절 개 <ol>입니다. 표시와 함께 화살 비행기에서 중간 라인을 따라 인접 부분 (엉덩이)의 원심 부분 (무릎)에서 포인트와 2 포인트를 그립니다. 다음이 2 점 사이 선을 그립니다.</li>
		<li>메스를 사용 하 여 드로잉 라인을 따라 뻗어 피부 incise.</li>
		<li>잘라 팔 뚝 femoris와 vastus lateralis 대 퇴 골은 완전히 노출, 메스의 도움으로 때까지. 사용 2 Senn &#39; s 견인 기 (보조 필요할 수 있음)을 촉진 근육 절 개.</li>
		<li>는 고는 rugine의 도움으로 뼈에서 부드러운 조직 분리.</li>
		<li>노출된 대 퇴 골은 충분히 확인 하십시오.
		<ol><li>외부 fixator의 가장 인접 하 고 원심 구멍에 핀을 삽입.</li>
			<li>외부 fixator를 놓고 두 핀 대 퇴 골에 고정 될 수 있다 확인 하십시오.</li>
		</ol></li> <li>이식 4 병렬 1mm 절반 스레드 핀 대 퇴 골.
		<ol><li>드릴링 가이드를가지고 고 2 Senn와 근육 떨어져 이동 &#39; s 견인 기. 대 퇴 골의 중간 드릴링 가이드의 클램프를 조여.</li>
			<li>드릴 4 중 대 퇴 골에 구멍. 0.6 m m 직경의 금속 드릴 비트 4 가이드 구멍을 통해 전달 하 여 2000 rpm의 속도로 구멍을 드릴 전기 드릴을 사용 하 여.
			<ol><li>가장 인접 하 고 원심 시작 구멍 및 두 끝 중간 가이드의 것 들. 하지만 두 외피가 통과 하지 바로 대 퇴 골 아래 부드러운 조직 손상 조심.</li>
			</ol></li> <li>드릴링 가이드 벗고.</li>
			<li>절반 스레드 핀 0.8 m m 4 전 구멍을 확대.
			<ol><li>일 앞뒤로 통해 0.6 m m 핀 구멍. 대 퇴 골 두 외피가 통해 싱크를 수직 유지 조심.</li>
			</ol></li> <li>절반 스레드 핀 1 m m 임 플 란 트.
			<ol><li>바늘 홀더를 가진 1 절반 스레드 핀의 머리 그립.</li>
				<li>사전 구멍을 확대 하려면 핀 싱크. 핀 두 외피가 침투는 Senn로, 1mm 이상의 내 다 하지 않습니다 확인 &#39; s 견인.</li>
			</ol></li> <li>외부 fixator 4 절반 스레드 핀에 연결. 있는지 확인 오프셋 (는 fixator 사이의 거리 &#39; s 두 블록 및 뼈 표면)는 쉽게 바늘 및 시스템 18의 좋은 강성 수 있도록 약 6 m m.</li>
			<li>외부 fixator 핀에 잠겨 있도록 4 잠금 나사를 확보.</li>
		</ol></li></ol></li> <li>퇴 osteotomize.
	<ol><li>수행 하는 piezotome와 2 중앙 핀 사이 뼈.</li>
		<li>닫습니다 wound resorbable 봉합 스레드 (5.0)와 마요네즈 Hegar 바늘 홀더 연속 스티치를 사용 하 여. 피부만 물 렸 다는 것을 확인 하지 근육.</li>
	</ol></li> <li>수술 모니터 동물을 확인 합니다.
	<li>수행 동안 동물 여전히 마 취, 수술 후 엑스레이 <ol>. 모든 핀의 깊이 확인 하 고 osteotomized 사지 긴 축을 따라 정렬 됩니다.</li>
		<li>확인 진통 및 Buprenorphine (0.03 mg/mL)와 각각 0.05 mg/kg에 10 mg/kg. Enrofloxacine (50 mg/mL)의 피하 주입에 의해 antibioprophylaxy</li>
		<li>결정 하 고 마 취를 antipamezole의 양을 계산. 1 mg/kg에서 antipamezole를 사용 하 고 제품 관리를 피하 주사를 할. 식을 회복 하 고 그것의 감 금에 반환을 동물 허용.</li>
		<li>피하는 수술 후 6 시간 주입 0.05 mg/kg와 5mg/kg에서 각각 진통 혼합물 (Buprenorphine 및 Carprofen)의 두 번째 복용량. 
		다음 3 일 이상, 줄이 주사 진통 혼합물에 대 한 하루에 두 번 하 고는 antibioprophylaxy에 대 한 하루에 한 번. 정기적인 임상 시험 진통의 효과 평가 하기 위해 수행 해야 하 고 각 동물의 행동 징후에 따라 수정 해야 합니다. </li> <li>동물 수술 다음 날에 일반적으로 그들의 운영된 뒷 다리를 사용 하 여 걸을 수 있는 확인.</li>
	</ol></li></ol> 3. 산만 1 주에 대 한 <ol><li>중립에 두고 외부 fixator 고정. 이 단계의 끝에서 다리를 x 선. 뼈 세그먼트의 맞춤 핀의 위치를 확인 하십시오.</li>
	<li>수동으로 차례 사각형 너트 1/2 회전 (0.25 mm) 시계 방향으로 모든 12 h 주의 수행. 12% 운영된 뼈 세그먼트의 초기 길이 기준으로 길이 5mm 뼈 길이에 지도 해야 하는 10 일 동안 즐겁게.
	<ol><li>가이 단계 동안 동물을 anesthetize 하지 않습니다. 절반 방법을 통해 고 핀 뼈 세그먼트의 맞춤의 위치 확인이 기간의 끝에 다리를 x 선.</li>
	</ol></li> <li>47 일 동안 외부 fixator를 유지. 산만된 갭 석 회화의 진행 상태를 확인 하려면 매주 사지 x 선. 하루 64에 외부 fixator를 제거 하 고 2 일 (하루 66) 자유롭게 동물 산책 하자. 총 통합 기간 지속 7 주.</li>
	<li>흡입된 sevoflurane의 과다와 함께 통합의 7 주 후 모든 쥐를 안락사.</li>
	<li>주변 조직 없이 산만 하 고 contralateral 화관 resect.
	<ol><li>만들 흉터에 피부 절 개를 메스의 도움으로 화살 비행기 다음 중간 줄에 위치 해 있습니다. 무릎의 앞에 엉덩이의 위에서 절을 실행.</li>
		<li>퇴 완전히 노출 될 때까지 팔 뚝 femoris와 vastus lateralis 메스로 잘라. 최대한, 뼈에 부착 된 근육을 분리 하십시오.</li>
		<li>무릎의 모든 인 대를 절단 하 고 조음 철거.</li>
		<li>엉덩이의 공동 캡슐을 잘라.</li>
		<li>절반 스레드 핀을 제거 하지 않고 철저 하 게 뼈를 청소. 메스와 모든 부드러운 조직을 제거.</li>
	</ol></li> <li>Contralateral 대 퇴 골에 대 한 3.5.5 3.5.1에서 단계를 반복.</li>
	<li>엑스레이 산만 하 고 contralateral 화관. 4 반 스레드 핀을 제거 하 고 마이크로-ct 분석 (10 µ m 해상도)-20 ° C에서 모든 화관 저장.</li>
</ol>

<ol>
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저자는 공개 없다.

이 연구는 쥐 다리 길이, 외부 fixator의 제거 후에 동물에 의해 생리 적 체중 부하를 허용 상세한 외과 기술에 대 한 적절 한 외부 fixator 디자인 구성 재현 가능한 프로토콜을 설명 합니다. 우리의 할 프로토콜 기능 재생성된 뼈 이끌어 냈다. 통합의 47 일 후 제거 만든 외부 fixator와 동물에 의해 생리 적 체중 부하의 2 일 재생 굳은 살의 골절을 유도 하지 않았다. 마이크로-CT 개조 덕분에 완전 한 브리징의 증거 확인 재생성 된 굳은 살 기능 했다. 이전 연구는 명확 하 게 석 회화 브리지의 존재 재생성 된 굳은 살19유지할 수 있는 부하 사이 긍정적인 상관 관계를 설명 했다. 또한, 재생성 된 굳은 살에 대 한 발견 하는 vBMD vBMD controlateral 다리20에서 대 퇴 골의 diaphysis 부분에 대 한 발견의 약 67% 이었다. 우리는 또한 이전21을 설명 하는 값 주변 재생성 된 굳은 살의 평균 vBMD 발견. 이것 만든 외부 fixator 효율적인 뼈 수리 선도 의해 만들어진 안정적인 환경을 강조 한다. 또한,는 fixator 동물에 의해 잘 용납 되었다. 위치와 외부 fixator의 가벼운 무게는 동물의 보행자 세, 방해 하지 않았다 그래서 그들은 수술 후 바로 걸을 수 있었다.
프로토콜을 통해 아무 위반 또는 핀의 완화 발생, 스레딩 절차 보장 한 효과적이 고 안정적인 고정 대 퇴 골에 핀의 증거. 그것은 중요 한 핀은 잘 할 마이크로-환경 좋은 안정성에 대 한 고정: 하나의 핀을 완화 장치18반 강성 감소를 표시 되었습니다. 또한, 쥐 외부 fixator를 연결에서 동물을 방지 하기 위해 특별히 설계 된 플랫 커버 장에 홀로 지 내게 될 해야 합니다. 재생 굳은 살의 수동 및 수행 산만 핀을 풀면 제한 하지만 또한 하 게 몇 일 동안 모든 12 h 동물을 진정 하는 것을 방지 하 고 안정성과 만든 외부 fixator의 효율성에 기여 한다. 확인을 또 다른 중요 한 점은 핀 두 외피가 관통 하 고 1 m m 이상 내 다 하지 않습니다. 이 단계는 중요 한, 그리고 x-선 검사 핀의 적절 한 위치를 확인 하지 않습니다 경우이 동물 여전히 마 취 동안 수동으로 마요네즈 Hegar 바늘 홀더를 사용 하 여 수정 될 필요가 있다. 프로토콜에는 몇 가지 제한이 있습니다. 그것은에 사용 될 수 있는 동물의 수를 제한 시간과 제한 프로토콜입니다. 또한, 주어진 필요 손 재주는 수술의 꼼 꼼 함, 절차 걸릴 수 있습니다 연습 실행 몇 마스터.
할 절차에 걸쳐 osteotomized 사지의 맞춤 유지 되었다. 대 퇴 골에 핀을 이식 하는 경우 그것은 매우 절반 스레드 핀은 병렬, 산만 하 고 통합 전체 전단 응력의 생산 없이 기계적 스트레스의 좋은 배포 되도록 드릴링 가이드를 사용 하는 것이 중요 단계입니다. 그것은 또한 매우 osteotomized 사지의 맞춤 및 핀의 적절 한 고정에 영향을 미칠 수 있는 것이 어렵게 수동 산만, 사각형 너트의 어떤 차단 방지 하기 위해 매일 상처를 청소 하는 것이 중요. 뼈에 진행 하는 방법 재생에 대 한 마지막 주요 지점을 나타냅니다. 뼈는 균일 하 고 일반 뼈가 있는 섹션을 확인 하 고 주변 부드러운 조직 유도 thermic 괴 사 및 피해를 방지 하기 위해 piezotome로 수행 되어야 합니다. 또한, 과도 한 열은 사전 구멍을 시추 하는 경우에 가끔 생성 된다. 전기 드릴 함께 관개 시스템 thermic 유도 괴 사를 방지 하기 위해 사용할 수 있습니다.
결론, 우리 기능 재생성된 뼈 리드에 대 한 쥐 대 퇴 모델에서 효율적이 고 재현 가능한 프로토콜을 설명 합니다. 생성 하 고 생리를 지원 하기 위해 충분히 통합 했다 석 회 질된 재생성 된 굳은 살의 형성을 허용 하는 안정적인 환경을 사용 만든 외부 fixator 쥐 대 퇴 골의 해부학 적 특성에 따라 설계 동물에 의해 무게 베어링입니다. 우리의 다음 목표 기능 재생성 된 뼈와 호환 짧은 통합 기간을 결정 하기 위해이 재현 가능한 프로토콜을 사용 하는 것입니다. 다음 목표는 특히 통합 기간을 단축 하는 방법을 모색 할 기술을 향상 될 것입니다. 이 재현 가능한 프로토콜 식별 메커니즘 뼈 수리에 관련 된 또한 유용할 수 있었다. 마지막으로, 집에서 만든 외부 fixator의 특성 인간 손가락 신장에 대 한 임상 연습에서 사용할 수 있도록.

주의 골 (마)는 수술 기법 널리 사용 임상1,2,,34 인 간에 있는 낮은1,2 , 상단3 다리 길이, 없앤, 뼈 또는 악 안 면 재건4에서 뿐만 아니라 뼈 종양 절단에 대 한 수술은 뼈의 재생 후 치료. 뼈와 뼈에서 외부 fixator의 배치 후 재생을 뼈를 리드 할. Osteotomized 사지 이동 서로 떨어져 점진적 산만2 원하는 신장에 도달 합니다. 통합 기간 동안 더 더 신장은 다음과 같습니다.
할 절차는 3 가지 단계로 나누어져: 대기 시간, 주의 및 통합. 일반적으로, 7 일 대기 시간 뼈4직후 시작합니다. 뼈 치유 과정4의 초기 단계를 시작 하려면 수리를 수 있습니다. 대기 시간 뒤 끄는 기간 견인 힘 재생성 된 굳은 살 및 주변 부드러운 조직1,,24에 적용 됩니다. 원하는 신장에 도달 하면 산만 중지 되 고 통합 기간 시작 됩니다. 이 기간 동안 외부 fixator 재생성 된 뼈의 제거를 지원 하기 위해 충분히 기능적 될 때까지 유지 됩니다.
다양 한 매개 변수 길이 및 속도 외부 fixator의 길이, 종류, 주의 산만의 주파수, 통합 기간, 또는 산만된 굳은 살에 적용 되는 기계적 스트레스의 종류의 길이 같은 뼈 복구에 영향을 미칠지 않습니다. 예를 들어, 속도 주파수의 길이 될 수 있습니다 조 통합5 또는 프로세스의 중단 괴 사 성 조직이 나 굳은 살6,7안에 cysts 같은 복구할 수 없는 피해를 만들어.
많은 할 프로토콜 적용된 다른 동물 모델8,,910 뼈 복구 프로세스를 공부 하 고 뼈 통합을 최대화 하기 위해 되었습니다. 쥐, 대부분 연구11,12,13,,1415 굳은 살 통합을 가속화 하 여 할 프로토콜을 단축 하는 방법에 집중 했다. 이러한 실험적인 연구 중 일부는 인간의 임상 응용 프로그램5,13,,1516외부 클램프 이미 상업적으로 사용할 수를 사용. 그러나, 이러한 유형의 외부 fixator 쥐 대 퇴 골, 인간의 대 퇴 골에서 다른 해부학 적 특성을 전시에 대 한 적합 하지 않습니다. 또한, 몇 가지 연구는 명확 하 게 기능 재생성된 뼈7,16취득에 그들의 프로토콜의 효율성을 보여 줍니다. 따라서 그들의 서로 다른 프로토콜 외부 fixator12,13,,1417에 대 한 정보의 부족으로 다양 한 할 연구에서 결과 비교 하기가 어렵습니다.
따라서,이 연구의 목표는 쥐 모델에서 기능 재생성된 뼈에 이르게 하는 대 퇴 골에 효율적이 고 재현 가능한 프로토콜에 대 한 설명 했다. 이 위해, 우리는 특히 쥐 대 퇴 골, 우리는이 프로토콜에 자세히 설명 되어 있는 대 한 수 제 하 고 사용 하기 쉬운 외부 fixator 설계 되었습니다. 이 장치에 대 한 기술 사양의 초안에 우리 계정에 기계적인 긴장 및 잔류 응력의 생산을 피하는 좋은 분포에 대 한 모든 근본적인 제약 했다. 기술 사양 포함 뼈와 주변 조직에 순수한 견인 힘을 허용 하는 장치에 대 한 적절 한 형상, 동물, 뼈 신장의 길이 그리고 뼈 세그먼트의 좋은 정렬의 제어의 걸음 걸이 대 한 적절 한 체중 없이 핀과 뼈의 교차로에서 전단 응력의 생산. 또한,이 장치는 산만, 생체, 그리고 손상 없이 sterilizable 동안 동물의 진정 작용 하지 않고 사용할 수 했다. 통합의 7 주 후 쥐의 대 퇴 골에 대 한이 프로토콜 외부 fixator의 제거 후 재생성 된 굳은 살의 골절 없이 동물의 생리 적 체중-베어링에 의해 증명 기능 재생성 된 뼈, 이끌어 냈다. 동물의 생리 적인 걸음 걸이 재생성 된 굳은 살의 마이크로-CT 분석 및 x 선 분석에서 얻은 건축 매개 변수 일치 했다.

<table><tbody><tr><td>K&amp;eacute;tamine</td><td>Renaudin</td><td>578 540-2</td><td>Supply by animal house</td></tr><tr><td>M&amp;eacute;d&amp;eacute;tomidine</td><td>Virbac</td><td>6799091</td><td>Supply by animal house</td></tr><tr><td>Sevoflurane</td><td>Centravet</td><td>567 477-2</td><td>Supply by animal house</td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>Indivor France</td><td>3400932731060</td><td>Supply by animal house</td></tr><tr><td>Enrofloxacine</td><td>ChannelPharmaceutical Facturing</td><td>FR/V/4955220</td><td>Supply by animal house</td></tr><tr><td>Piezotome</td><td>Satelec Acteon</td><td>F57510</td><td></td></tr><tr><td>Heating pet pad</td><td>Therasage</td><td>AL8365936</td><td>Supply by the animal house</td></tr><tr><td>Dental X-ray</td><td>S.A.R.L Innovation m&amp;eacute;dicales et dentaires</td><td>WYZ - BLUEX</td><td></td></tr><tr><td>Winiwix Software</td><td>Softys Dental</td><td>PFT</td><td></td></tr><tr><td>Micro-CT system</td><td>nanoScan SPECT/CT</td><td>GEIT-31105EN (05/14)</td><td>Subcontract by IVTV central Lyon</td></tr><tr><td>Micro-CT analysis Software</td><td>phoenix datos X2 reconstruction</td><td>none</td><td>Free software</td></tr><tr><td>Electric razor</td><td>Brawn</td><td>GT415</td><td>Supply by animal house</td></tr><tr><td>Senn&amp;rsquo;s retractors</td><td>Word Precision Instruments</td><td>501718</td><td>Blunt version</td></tr><tr><td>Betadine Solution</td><td>Mundipharma Medical Company</td><td>D08AG02</td><td>Supply by animal house</td></tr><tr><td>Resorbable suture thread (5.0)</td><td>Ethicon</td><td>JV1023</td><td>Supply by animal house</td></tr><tr><td>Rugine</td><td>Word Precision Instruments</td><td>503406</td><td></td></tr><tr><td>Mayo-Hegar needle holder</td><td>Word Precision Instruments</td><td>V503382</td><td></td></tr><tr><td>Metal drill</td><td>Beuterlock</td><td>V020944018003</td><td></td></tr><tr><td>Micro Olsen-Hegar Needle-holder</td><td>Word Precision Instruments</td><td>501989</td><td></td></tr><tr><td>Mayo scissor</td><td>Word Precision Instruments</td><td>501752</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel</td><td>Word Precision Instruments</td><td>500236</td><td></td></tr><tr><td>Sprague-Dawley</td><td>Janvier</td><td>none</td><td>12 weaks and male</td></tr></tbody></table>

an efficient and reproducible protocol for distraction osteogenesis in a rat model leading to a functional regenerated femur

이 프로토콜에서는 산만 골 쥐 대 퇴 모델에 대 한 새로 개발된 된 외부 fixator 사용 하 여를 설명합니다. 주의 골 (마)은 뼈는 뼈 후 재생 수술 기법을 선도. Osteotomized 사지 이동 서로 떨어져 점진적 산만 하 여 원하는 신장에 도달 합니다. 이 절차는 하위 및 상위 사지 길게 하 고는, 치료 후에 없앤, 뼈 또는 뼈 종양 절단에 대 한 뿐만 아니라 악 안 면 재건 수술은 뼈의 재생에 대 한 인간에서 널리 이용 된다. 몇 가지 연구는 명확 하 게는 기능 재생성 된 뼈, 즉, 뼈 외부 fixator의 제거 후 골절 없이 생리 적 체중 부하를 지 원하는 것을 얻기에 그들의 프로토콜의 효율성을 보여줍니다. 또한, 프로토콜에 대 한 변화 그리고 재현성 연구 어려운 사이 비교를 만드는 정보의 부족에 의해 제한 됩니다. 이 연구의 목적은 쥐 다리 길이, 외부의 제거 후에 동물에 의해 생리 적 체중 부하를 허용 상세한 외과 기술에 대 한 적절 한 외부 fixator 디자인 구성 재현 가능한 프로토콜을 개발 했다 fixator입니다.

통합의 끝에 수술의 끝에서 찍은 x 선 이미지 안정 앵커리지를 나타내는 대 퇴 골의 절반 스레드 핀의 아무 완화 했다. 핀 병렬 및 잘 보존 했다입니다. Osteotomized 사지 마 과정 (그림 2) 뼈의 경도 축에 잘 부합 했다. 대기 시간 기간의 끝에, 아무 석 회화 영역 표시 (그림 2B) 했다. 주의 기간의 끝에, 몇 가지 석 회 질된 분야 기존 외피가 (그림 2C) 가까이 보였다. 통합 (주 45)의 28 일 후 osteotomized 사지 사이 간격의 비 석 회화 지역 작은 고 periosteal 굳은 살 핀 (그림 2D)의 수준에서 뿐만 아니라 갭 근처 뿐만 아니라 관찰. 통합 (하루 64)의 47 일 후 재생 굳은 살은 완전히 다리를 (그림 2E). 외부 fixator의 제거, 생리 적 체중 부하의 2 일 후 동물 생리 적인 걸음 걸이 졌고 골절 (그림 2F)의 증거.
3 차원 마이크로-CT 분석 재생 굳은 살의 직렬 경도 섹션의 석 회화 브리지는 항상 증명 제시 (그림 3A-D). 지속적인 외부 외피 관찰 되었다 (그림 3C D) 재생 굳은 살의 주변에서. 경도 프로필에 따라 재생 굳은 살은 완전히 뼈 trabeculae의 네트워크에 의해 채워졌다. 통합 (하루 66)의 49 일 후 보다 적게 광물 화 된 지역 재생성 된 뼈 (그림 3E-F)의 센터에 남아 있었다. 마이크로-CT의 건축 매개 변수 표시 재생 굳은 살 및 contralateral 대 퇴 골에 대 한 평균 볼륨 분수 (BV/TV)는 각각 55% ± 13 및 97.85% ± 1.7 (표 1 및 표 2). 체적 뼈 미네랄 밀도 (vBMD) 재생 굳은 살의 평균값이 750 mg/cm3 ± 25 했다. 단면적의 평균 값은 재생 굳은 살 보다 contralateral 대 퇴 골 (17.23 m m2 ± 9.3 대 9.5 m m2 ± 1.2)에 대 한 (표 1 및 표 2)에 대 한 더 높았다. 말은 굳은 살 피 질 두께 (표 1 및 2) contralateral 대 퇴 골 (0.317 mm ± 0.04 vs 0.6 m m ± 0.05)의 대뇌 피 질의 두께 보다 얇은 했다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56433/56433fig1.jpg"> 
그림 1: 외부 fixator 및 드릴링 가이드의 컴퓨터 지원 설계 (CAD). (A) 핀 외부 fixator의 CAD. (B) 드릴링 가이드의 CAD. 눈금 막대 = 5 m m. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56433/56433fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56433/56433fig2.jpg"> 
그림 2: 다양 한 시간 점에서 쥐 대 퇴 골의 대표 엑스레이. 0, 7, 17, 45, 64, 66 일 산만된 굳은 살의 방사선 x 선. (A) x-레이 (0 일) 수술 후. (B) 7 일 대기 시간 후에 찍은 x 선 방사선 사진. 아니 석 회 질된 굳은 살은 명백한 osteotomized 사지 (OE) 근처. (C) 산만의 끝에, 작은, 가난 하 게 석 회화 영역은 명백한 osteotomized 사지 (직사각형 영역) 근처입니다. (D)의 28 일 통합 (주 45), osteotomized 사지 (*)와 두 번째 외피 사이의 격차는 명백한 (노란색 화살표) 후. (E) 통합 (하루 64) (F) x-선 방사선 사진 생리 적 체중 부하의 2 일의 통합 (하루 66), 49 일 후 촬영의 47 일 후 방사선 사진. 눈금 막대 = 1 m m. <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56433/56433fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56433/56433fig3.jpg"> 
그림 3: 쥐의 대 퇴 골의 산만된 굳은 살의 3 차원 마이크로-CT 재건. 뼈의 강화 작용은 파랑 노랑에서 배열 하는 색으로 나와 있습니다. (A, B) Anteroposterior 및 경도 축 산만된 굳은 살의 브리징 외피가의 표현입니다. (C, D) 공개 초기 대뇌 피 질의 뼈 (검은색 화살표)와 산만된 굳은 살 (노란색 화살표)의 브리징 외피가 인접 및 원심 횡단면 (E, F) 통합의 7 주 후 산만된 굳은 살의 3D 경도 프로필:는 굳은 살 배수 뼈의 네트워크에 의해 채워집니다. 눈금 막대 = 1000 µ m. 교정 바 = 0 2.54 g/cm3 (노란색 = 1.73 g/cm3, 핑크 = 0.84 g/cm3및 파랑 = 0.17 g/cm3). <a href="//ecsource-jove-com.bdigitaluss.remotexs.co/files/ftp_upload/56433/56433fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Table 1" src="/files/ftp_upload/56433/56433table1.jpg"> 
표 1: 통합의 49 일 후 산만된 대 퇴 골의 굳은 살. 관심 (투자 수익) 계산 하는 모든 매개 변수를 선택 영역 osteotomized 사지 사이 영역 이었다. 각 쥐 얻은 모든 값은 이미지 스택의 각 조각에 계산 했다. 결과 평균 ± 표준 편차로 표현 됩니다. BV/TV: 볼륨 분수; 체코: 단면적; vBMD: 뼈 미네랄 밀도; Ct.Th: 대뇌 피 질의 두께입니다.
<img alt="Table 2" src="/files/ftp_upload/56433/56433table2.jpg"> 
표 2: 통합의 49 일 후 그대로 대 퇴 골의 contralateral 매개 변수. 각 쥐 얻은 모든 값은 이미지 스택의 각 조각에 계산 했다. 결과 평균 ± 표준 편차로 표현 됩니다. BV/TV: 볼륨 분수; 체코: 단면적; Ct.Th: 대뇌 피 질의 두께입니다.

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An Efficient and Reproducible Protocol for Distraction Osteogenesis in a Rat Model Leading to a Functional Regenerated Femur

주의 골 기능 재생성 된 대 퇴 골으로 이어지는 쥐 모델에 대 한 효율적이 고 재현 가능한 프로토콜

이 연구는 재현 하 고 상세한 프로토콜 사용 하 여 새로 개발된 된 외부 fixator 산만 골에 대 한 (할) 대 퇴 쥐에 모델 외부 fixator의 제거 후에 동물에 의해 체중 베어링 생리는 허가 설명 합니다.

This protocol describes the use of a newly developed external fixator for distraction osteogenesis in a rat femoral model. Distraction osteogenesis (DO) ...

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Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Bioengineering

7.4K 조회수.  Aix Marseille Univ. 이 연구는 재현 하 고 상세한 프로토콜 사용 하 여 새로 개발된 된 외부 fixator 산만 골에 대 한 (할) 대 퇴 쥐에 모델 외부 fixator의 제거 후에 동물에 의해 체중 베어링 생리는 허가 설명 합니다.

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Use of Human Perivascular Stem Cells for Bone Regeneration

Human perivascular stem cells (PSCs) can be isolated in sufficient numbers from multiple tissues for purposes of skeletal tissue engineering1-3. PSCs are a FACS-sorted population of 'pericytes' (CD146+CD34-CD45-) and 'adventitial cells' (CD146-CD34+CD45-), each of which we have previously reported to have properties of mesenchymal stem cells. PSCs, like MSCs, are able to undergo osteogenic differentiation, as well as secrete pro-osteogenic cytokines1,2. In the present protocol, we demonstrate the osteogenicity of PSCs in several animal models including a muscle pouch implantation in SCID (severe combined immunodeficient) mice, a SCID mouse calvarial defect and a femoral segmental defect (FSD) in athymic rats. The thigh muscle pouch model is used to assess ectopic bone formation. Calvarial defects are centered on the parietal bone and are standardly 4 mm in diameter (critically sized)8. FSDs are bicortical and are stabilized with a polyethylene bar and K-wires4. The FSD described is also a critical size defect, which does not significantly heal on its own4. In contrast, if stem cells or growth factors are added to the defect site, significant bone regeneration can be appreciated. The overall goal of PSC xenografting is to demonstrate the osteogenic capability of this cell type in both ectopic and orthotopic bone regeneration models.

Human perivascular stem cells (PSCs) are a novel stem cell class for skeletal tissue regeneration similar to mesenchymal stem cells (MSCs). PSCs can be isolated by FACS (fluorescence activated cell sorting) from adipose tissue procured during standard liposuction procedures, then combined with an osteoinductive scaffold to achieve bone formation in vivo.

뼈 재생을위한 인적 Perivascular 줄기 세포의 이용

Human perivascular stem cells (PSCs) can be isolated in sufficient numbers from multiple tissues for purposes of skeletal tissue engineering1-3. PSCs are ...

연구

생체공학

Creating Rigidly Stabilized Fractures for Assessing Intramembranous Ossification, Distraction Osteogenesis, or Healing of Critical Sized Defects

Assessing modes of skeletal repair is essential for developing therapies to be used clinically to treat fractures. Mechanical stability plays a large role in healing of bone injuries. In the worst-case scenario mechanical instability can lead to delayed or non-union in humans. However, motion can also stimulate the healing process. In fractures that have motion cartilage forms to stabilize the fracture bone ends, and this cartilage is gradually replaced by bone through recapitulation of the developmental process of endochondral ossification. In contrast, if a bone fracture is rigidly stabilized bone forms directly via intramembranous ossification. Clinically, both endochondral and intramembranous ossification occur simultaneously. To effectively replicate this process investigators insert a pin into the medullary canal of the fractured bone as described by Bonnarens4. This experimental method provides excellent lateral stability while allowing rotational instability to persist. However, our understanding of the mechanisms that regulate these two distinct processes can also be enhanced by experimentally isolating each of these processes. We have developed a stabilization protocol that provides rotational and lateral stabilization. In this model, intramembranous ossification is the only mode of healing that is observed, and healing parameters can be compared among different strains of genetically modified mice 5-7, after application of bioactive molecules 8,9, after altering physiological parameters of healing 10, after modifying the amount or time of stabilization 11, after distraction osteogenesis 12, after creation of a non-union 13, or after creation of a critical sized defect. Here, we illustrate how to apply the modified Ilizarov fixators for studying tibial fracture healing and distraction osteogenesis in mice.

This article describes a method for stabilizing long bone fractures that is based on the application of modified Ilizarov external fixators 1-3. After application of the fixators and creation of the bone injury, healing can be assessed, distraction osteogenesis can be performed, or non-union or critical sized defect can be created and used to study therapeutic interventions.

산만 Osteogenesis, 또는 임계 크기의 결함의 치유는 Intramembranous 골화을 평가하기위한 Rigidly 안정 골절 만들기

Assessing modes of skeletal repair is essential for developing therapies to be used clinically to treat fractures. Mechanical stability plays a large role ...

의학

A Mouse Distraction Osteogenesis Model

Distraction osteogenesis (DO) is a surgical procedure that involves skeletal tissue regeneration without cell transplantation. A DO model consists of the following three phases: the latency phase after osteotomy and placement of the external distractor; the distraction phase, wherein the separated bone ends are gradually and continuously distracted; and the consolidation phase. This custom-made distractor used for DO is comprised of two incomplete acrylic resin rings and an expansion screw. The process was initiated by making a mold with silicone impression material and then creating the custom-made distractor. Dental resin was poured into the formwork made of silicone impression material, and it was allowed to polymerize to create the incomplete resin rings required for the custom-made distractor. These rings were fixed with an expansion screw using transparent resin. The custom-made distractor created via this approach was attached to the tibia of mice. The tibia was fixed to the device using one pair of 25 G needles proximally, one pair of 27 G needles distally, and acrylic resin. After a latency period of 5 days, distraction was initiated at a rate of 0.2 mm/12 h. The lengthening was continued for 8 days, resulting in a total gap of 3.2 mm. The mice were sacrificed 4 weeks after distraction. Bone formation in the distraction gap was confirmed using both radiography and histology.

We present a mouse tibial distraction osteogenesis model developed using a custom-made distractor. The use of a mouse as an analysis target is advantageous for advancing research.

마우스 산만 골 모델

Distraction osteogenesis (DO) is a surgical procedure that involves skeletal tissue regeneration without cell transplantation. A DO model consists of the ...

발생학

Adjustable Stiffness, External Fixator for the Rat Femur Osteotomy and Segmental Bone Defect Models

The mechanical environment around the healing of broken bone is very important as it determines the way the fracture will heal. Over the past decade there has been great clinical interest in improving bone healing by altering the mechanical environment through the fixation stability around the lesion. One constraint of preclinical animal research in this area is the lack of experimental control over the local mechanical environment within a large segmental defect as well as osteotomies as they heal. In this paper we report on the design and use of an external fixator to study the healing of large segmental bone defects or osteotomies. This device not only allows for controlled axial stiffness on the bone lesion as it heals, but it also enables the change of stiffness during the healing process in vivo. The conducted experiments have shown that the fixators were able to maintain a 5 mm femoral defect gap in rats in vivo during unrestricted cage activity for at least 8 weeks. Likewise, we observed no distortion or infections, including pin infections during the entire healing period. These results demonstrate that our newly developed external fixator was able to achieve reproducible and standardized stabilization, and the alteration of the mechanical environment of in vivo rat large bone defects and various size osteotomies. This confirms that the external fixation device is well suited for preclinical research investigations using a rat model in the field of bone regeneration and repair.

One constraint of preclinical research in the field of bone repair is the lack of experimental control over the local mechanical environment within a healing bone lesion. We report the design and use of an external fixator for bone repair with the ability to change fixator stiffness in vivo.

조정 강성, 쥐 대퇴골 절골술 부위 별 뼈 결함 모델에 대한 외고정

The mechanical environment around the healing of broken bone is very important as it determines the way the fracture will heal. Over the past decade there ...

Establishment of a Segmental Femoral Critical-size Defect Model in Mice Stabilized by Plate Osteosynthesis

The use of tissue-engineered bone constructs is an appealing strategy to overcome drawbacks of autografts for the treatment of massive bone defects. As a model organism, the mouse has already been widely used in bone-related research. Large diaphyseal bone defect models in mice, however, are sparse and often use bone fixation which fills the bone marrow cavity and does not provide optimal mechanical stability. The objectives of the current study were to develop a critical-size, segmental, femoral defect in nude mice. A 3.5-mm mid-diaphyseal femoral ostectomy (approximately 25% of the femur length) was performed using a dedicated jig, and was stabilized with an anterior located locking plate and 4 locking screws. The bone defect was subsequently either left empty or filled with a bone substitute (syngenic bone graft or coralline scaffold). Bone healing was monitored noninvasively using radiography and in vivo micro-computed-tomography and was subsequently assessed by ex vivo micro-computed-tomography and undecalcified histology after animal sacrifice, 10 weeks postoperatively. The recovery of all mice was excellent, a full-weight-bearing was observed within one day following the surgical procedure. Furthermore, stable bone fixation and consistent fixation of the implanted materials were achieved in all animals tested throughout the study. When the bone defects were left empty, non-union was consistently obtained. In contrast, when the bone defects were filled with syngenic bone grafts, bone union was always observed. When the bone defects were filled with coralline scaffolds, newly-formed bone was observed in the interface between bone resection edges and the scaffold, as well as within a short distance within the scaffold. 
The present model describes a reproducible critical-size femoral defect stabilized by plate osteosynthesis with low morbidity in mice. The new load-bearing segmental bone defect model could be useful for studying the underlying mechanisms in bone regeneration pertinent to orthopaedic applications.

Although mouse models are invaluable tools for bone tissue engineering, models of long bone defects are sparse. This need motivated development of the present protocol which uses a locking plate with four screws and a dedicated jig to perform and stabilize a reproducible, femoral, critical-size defect with low morbidity.

마우스의 분절 대퇴 임계 크기 결함 모델의 설립은 플레이트 고정술에 의해 안정화

The use of tissue-engineered bone constructs is an appealing strategy to overcome drawbacks of autografts for the treatment of massive bone defects. As a ...

A Reliable and Reproducible Critical-Sized Segmental Femoral Defect Model in Rats Stabilized with a Custom External Fixator

Orthopedic research relies heavily on animal models to study mechanisms of bone healing in vivo as well as investigate the new treatment techniques. Critical-sized segmental defects are challenging to treat clinically, and research efforts could benefit from a reliable, ambulatory small animal model of a segmental femoral defect. In this study, we present an optimized surgical protocol for the consistent and reproducible creation of a 5 mm critical diaphyseal defect in a rat femur stabilized with an external fixator. The diaphyseal ostectomy was performed using a custom jig to place 4 Kirschner wires bicortically, which were stabilized with an adapted external fixator device. An oscillating bone saw was used to create the defect. Either a collagen sponge alone or a collagen sponge soaked in rhBMP-2 was implanted into the defect, and the bone healing was monitored over 12 weeks using radiographs. After 12 weeks, rats were sacrificed, and histological analysis was performed on the excised control and treated femurs. Bone defects containing only collagen sponge resulted in non-union, while rhBMP-2 treatment yielded the formation of a periosteal callous and new bone remodeling. Animals recovered well after implantation, and external fixation proved successful in stabilizing the femoral defects over 12 weeks. This streamlined surgical model could be readily applied to study bone healing and test new orthopedic biomaterials and regenerative therapies in vivo.

In vivo mammalian models of critical-sized bone defects are essential for researchers studying healing mechanisms and orthopedic therapies. Here, we introduce a protocol for the creation of reproducible, segmental, femoral defects in rats stabilized using external fixation.

사용자 지정 외부 Fixator를 안정화 하는 쥐에서 안정적이 고 재현 가능한 크기의 중요 한 단편 대 퇴 결함 모델

Orthopedic research relies heavily on animal models to study mechanisms of bone healing in vivo as well as investigate the new treatment techniques. ...

An Intramedullary Locking Nail for Standardized Fixation of Femur Osteotomies to Analyze Normal and Defective Bone Healing in Mice

Bone healing models are essential to the development of new therapeutic strategies for clinical fracture treatment. Furthermore, mouse models are becoming more commonly used in trauma research. They offer a large number of mutant strains and antibodies for the analysis of the molecular mechanisms behind the highly differentiated process of bone healing. To control the biomechanical environment, standardized and well-characterized osteosynthesis techniques are mandatory in mice. Here, we report on the design and use of an intramedullary nail to stabilize open femur osteotomies in mice. The nail, made of medical-grade stainless steel, provides high axial and rotational stiffness. The implant further allows the creation of defined, constant osteotomy gap sizes from 0.00 mm to 2.00 mm. Intramedullary locking nail stabilization of femur osteotomies with gap sizes of 0.00 mm and 0.25 mm result in adequate bone healing through endochondral and intramembranous ossification. Stabilization of femur osteotomies with a gap size of 2.00 mm results in atrophic non-union. Thus, the intramedullary locking nail can be used in healing and non-healing models. A further advantage of the use of the nail compared to other open bone healing models is the possibility to adequately fix bone substitutes and scaffolds in order to study the process of osseous integration. A disadvantage of the use of the intramedullary nail is the more invasive surgical procedure, inherent to all open procedures compared to closed models. A further disadvantage may be the induction of some damage to the intramedullary cavity, inherent to all intramedullary stabilization techniques compared to extramedullary stabilization procedures.

This protocol describes an osteosynthesis technique using an intramedullary locking nail for standardized fixation of femur osteotomies, which can be used to analyze normal and defective bone healing in mice.

대퇴골 절골술의 표준화 된 고정을위한 골수 내 잠금 네일은 마우스에 정상 및 결함 뼈 치유를 분석하기

Bone healing models are essential to the development of new therapeutic strategies for clinical fracture treatment. Furthermore, mouse models are becoming ...

Protocol for Developing a Femur Osteotomy Model in Wistar Albino Rats

Fracture healing is a physiological process resulting in the regeneration of bone defects by the coordinated action of osteoblasts and osteoclasts. Osteoanabolic drugs have the potential to augment the repair of fractures but have constraints like high costs or undesirable side effects. The bone healing potential of a drug can initially be determined by in vitro studies, but in vivo studies are needed for the final proof of concept. Our objective was to develop a femur osteotomy rodent model that could help researchers understand the development of callus formation following fracture of the shaft of the femur and that could help establish whether a potential drug has bone healing properties. Adult male Wistar albino rats were used after Institutional Animal Ethics Committee clearance. The rodents were anesthetized, and under aseptic conditions, complete transverse fractures at the middle one-third of the shafts of the femurs were created using open osteotomy. The fractures were reduced and internally fixed using intramedullary K-wires, and secondary fracture healing was allowed to take place. After surgery, intraperitoneal analgesics and antibiotics were given for 5 days. Sequential weekly x-rays assessed callus formation. The rats were sacrificed based on radiologically pre-determined time points, and the development of the fracture callus was analyzed radiologically and using immunohistochemistry.

Here, we present a protocol to iatrogenically fracture the shaft of the femur of Wistar albino rats and follow up on the development of the callus. This femur osteotomy model can help researchers evaluate the process of fracture healing and to study how a drug could influence fracture healing.

Wistar 알비노 쥐에서 대퇴골 절골술 모델을 개발하기 위한 프로토콜

Fracture healing is a physiological process resulting in the regeneration of bone defects by the coordinated action of osteoblasts and osteoclasts. ...

쥐 대퇴골 상자의 확립 및 평가: 공동 결함 모델

Creating a Box-Cavity Defect Model in the Cortical Bone of Rat Femora

Severe bone defects or complex fractures can result in serious complications such as nonunion or insufficient bone healing. Tissue engineering, which involves the application of cells, scaffolds, and cytokines, is considered a promising solution for bone regeneration. Consequently, various animal models that simulate bone defects play a crucial role in exploring the therapeutic potential of tissue engineering for bone healing. In this study, we established a box-shaped cortical bone defect model in the mid-femur of rats, which could serve as an ideal model for assessing the function of biomaterials in promoting bone healing. This box-shaped cortical bone defect was drilled using an oral low-speed handpiece and shaped by a lathe needle. Post-operative micro-CT analysis was immediately conducted to confirm the successful establishment of the box-cavity cortical bone defect. The femurs on the operated side of the rats were then harvested at multiple time points post-surgery (0 days, 2 weeks, 4 weeks, and 6 weeks). The healing process of each sample&#39;s defect area was evaluated using micro-CT, hematoxylin and eosin (H&#38;E) staining, and Masson trichrome staining. These results demonstrated a healing pattern consistent with intramembranous ossification, with healing essentially complete by 6 weeks. The categorization of this animal model&#39;s healing process provides an effective in vivo method for investigating novel biomaterials and drugs that target intramembranous ossification during bone tissue defect healing.

저자 스포트라이트: 생체 재료 및 뼈 재생의 향상된 평가를 위한 Box-Cavity Cortical Approach

Here, we present a protocol for creating a box-cavity defect in rat femoral diaphysis tissue. This model can assess biomaterial performance under biomechanical stress and explore mechanisms of bone regeneration related to intramembranous osteogenesis.

Rat Fetora의 피질 뼈에서 Box-Cavity Defect 모델 생성

Severe bone defects or complex fractures can result in serious complications such as nonunion or insufficient bone healing. Tissue engineering, which ...

주의 골 기능 재생성 된 대 퇴 골으로 이어지는 쥐 모델에 대 한 효율적이 고 재현 가능한 프로토콜

요약

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뼈 재생을위한 인적 Perivascular 줄기 세포의 이용

산만 Osteogenesis, 또는 임계 크기의 결함의 치유는 Intramembranous 골화을 평가하기위한 Rigidly 안정 골절 만들기

마우스 산만 골 모델

조정 강성, 쥐 대퇴골 절골술 부위 별 뼈 결함 모델에 대한 외고정

마우스의 분절 대퇴 임계 크기 결함 모델의 설립은 플레이트 고정술에 의해 안정화

사용자 지정 외부 Fixator를 안정화 하는 쥐에서 안정적이 고 재현 가능한 크기의 중요 한 단편 대 퇴 결함 모델

대퇴골 절골술의 표준화 된 고정을위한 골수 내 잠금 네일은 마우스에 정상 및 결함 뼈 치유를 분석하기

Wistar 알비노 쥐에서 대퇴골 절골술 모델을 개발하기 위한 프로토콜

Rat Fetora의 피질 뼈에서 Box-Cavity Defect 모델 생성

Rat Fetora의 피질 뼈에서 Box-Cavity Defect 모델 생성