Questo sistema di tecniche misura l'efficacia dei pesticidi contro gli insetti vettori della malattia sul campo e fornisce un modo unico per visualizzare l'efficacia utilizzando le mappe. Un vantaggio chiave di questo sistema è che è un processo uniforme che può essere applicato e confrontato in più ambienti rispetto a una gamma di insetti bersaglio. Al centro di questo sistema c'è l'uso di una serie di piccole gabbie con zanzare sentinella allevate da colonie strategicamente disposte in habitat naturali ed esposte a spray antiparassitario.
I modelli spaziali e temporali di efficacia dei pesticidi derivano dalla mortalità percentuale nelle gabbie sentinelle e quindi mappati e visualizzati in un sistema di informazione geografica. Per costruire le gabbie sentinelle per adulti, usa prima una taglierina a disco rotante, un bordo dritto e un tagliere per preparare due quadrati in rete di tulle da cinque per cinque pollici per gabbia sentinella dal yardage in tulle sfuso e conserva i quadrati in rete di tulle in lotti di 50 in sacchetti di plastica richiurabili da un quarto. Successivamente, spingere i dischi di cartone piatti fuori dal fondo di nuove tazze gelato di cartone da mezza pinta per creare cilindri aperti da due per tre pollici e rimuovere i dischi di cartone da due coperchi della tazza di gelato per creare una lunetta aperta per ogni estremità del cilindro.
Quindi intrappolare un quadrato in rete di tulle sotto una lunetta per fissare saldamente la rete al cilindro. Per ogni gabbia sentinella, fissare una fascetta del cavo a gancio e passante a un elastico e fissare l'elastico intorno alla lunetta con il quadrato in rete. Insacca le gabbie sentinella in lotti da 50 con un sacchetto separato contenente 50 lunetta e 50 quadrati in rete di tulle.
Quando le gabbie sentinella sono pronte, agitare con cura 80 zanzare anestetizzate da una camera di anestesia di anidride carbonica uniformemente su un foglio di carta bianco pulito da 11 1/2 per 17 pollici e impostare un timer per quattro minuti. Utilizzando un aspiratore di pistole, seleziona e trasferisci rapidamente lotti di 20 femmine adulte in singole gabbie sentinelle aperte. Posizionare immediatamente un quadrato in rete di tulle con una lunetta sopra l'estremità superiore aperta del cilindro della gabbia e spingere verso il basso per completare l'assemblaggio della gabbia sentinella.
Le zanzare possono morire di stress. Pertanto, per una valutazione accurata della tossicità dei pesticidi, è importante avere personale sufficientemente addestrato per produrre e caricare rapidamente le gabbie sentinella nei refrigeratori di stoccaggio per ridurre al minimo lo stress ambientale. Una volta che il tulle è in posizione, ruotare l'elastico in modo che giace su entrambe le estremità della rete della gabbia sentinella con la fascetta del cavo hook-and-loop posizionata sul lato del cilindro.
Quindi spremere la maggior parte di una soluzione di saccarosio al 10% da un batuffolo di cotone in modo che sia ancora umido, poco prima del punto di gocciolare liberamente, e infilare delicatamente il batuffolo di cotone sotto il elastico contro la rete di tulle su un lato della gabbia sentinella in modo che sia facilmente accessibile alle zanzare. Quando tutte le femmine sono state rimosse, utilizzare un aspiratore meccanico separato per raccogliere tutte le zanzare maschili rimanenti per congelare e caricare da 10 a 12 gabbie in quattro o cinque strati in un refrigeratore da picnic isolato da 48 litri per ogni 45-50 gabbie sentinella, compensando leggermente ogni strato in modo che le gabbie non coprano completamente la gabbia sottostante per promuovere il flusso d'aria. Quindi coprire lo strato superiore con un sacchetto della spazzatura piegato da 13 galloni e un asciugamano bagnato e utilizzare il nastro adesivo per fissare un pezzo di cartone piegato all'angolo anteriore del labbro superiore del dispositivo di raffreddamento per promuovere lo scambio d'aria e prevenire il surriscaldamento.
Per stabilire la griglia sentinella e l'area di controllo, progettare una griglia di posizioni per le gabbie sentinella che catturi variazioni nella distanza dallo spruzzatore, distanza lungo la linea di spruzzatura, vegetazione e ostacoli alla penetrazione dello spray e altezza dal suolo. Utilizzare una bobina a nastro di misura di 300 piedi per contrassegnare intervalli convenienti dallo spruzzatore e lungo la linea di spruzzatura. Installare pali di montaggio della gabbia sentinella nel terreno secondo il design della griglia con almeno 48 pollici del palo sopra terra ed etichettare chiaramente ogni palo con un codice per la sua posizione unica con un marcatore permanente.
Se l'habitat non fornisce naturalmente problemi di vegetazione o ostacoli alla dispersione dello spray antiparassitario, prendi in considerazione la possibilità di posizionare una scatola di cartone di un piede cubo su un lato con la parte superiore aperta accanto a ciascun palo della gabbia sentinella per fornire una posizione sentinella aggiuntiva all'interno della refugia simulata. Il flusso d'aria attraverso le scatole può essere regolato forando fori da 1/2 pollice in uno o più lati, e ogni scatola deve anche essere etichettata con il suo codice di posizione unico e in un marcatore permanente. La lunghezza di base della linea di spruzzatura dovrebbe corrispondere alle dimensioni della griglia, anche se i punti di inizio e di arresto devono essere impostati ben prima e ben dopo la griglia.
Aggiungere circa il 10% della lunghezza di base della linea di spruzzatura all'inizio e alla fine per aumentare la possibilità di esposizione dell'intera griglia, dati gli inevitabili spostamenti e imperfezioni nei modelli di vento. Utilizzare la fascetta del cavo hook-and-loop per apporre le gabbie sentinella sui pali, facendo in modo che i batuffoli di cotone sicuri con soluzione di saccarosio al 10% siano ancora in posizione sotto gli elastici ed etichettare ogni gabbia con il codice di posizione del palo e la mortalità pre-spray della gabbia. Posiziona le gabbie per le scatole sui loro lati nelle scatole in modo che entrambe le estremità in rete di tulle siano perpendicolari al terreno ed etichettano le gabbie della scatola nello stesso modo.
Quando tutte le gabbie sono state etichettate e dispiegate sia nelle aree di trattamento che in quella di controllo e tutto il personale chiave ha comunicato prontezza, fare in modo che l'operatore di spruzzatura conduca un controllo finale sulla velocità e la direzione del vento e avvii l'applicazione di pesticidi per spruzzatori aerei, terrestri o portatili dalla linea di spruzzatura designata o dalla linea di spruzzatura alternativa, se necessario. È fondamentale avere applicatori esperti che aiutino a progettare le prove sul campo e avere una profonda consapevolezza di eventuali cambiamenti meteorologici per garantire che l'area target riceva una dose appropriata di pesticidi. Immediatamente dopo il tempo di detenzione post-spray, registrare la mortalità post-spray delle zanzare in ogni gabbia sentinella con un marcatore permanente mentre viene raccolta.
Sei ore dopo lo spray, usa guanti di nitrile usa e getta per raccogliere e osservare le gabbie una per una dai vassoi di stoccaggio, chiamando il codice di localizzazione unico, il conteggio della mortalità pre e post-spray e il conteggio della mortalità di sei ore da ogni gabbia per la registrazione dei dati. Una volta registrati tutti i dati post-spray, utilizzare un sistema di informazioni geografiche per mappare tutte le posizioni univoche della gabbia sentinella dai dati del codice per ogni gabbia e creare quattro colonne per la mortalità corretta da Abbott per i quattro periodi di tempo di mortalità nella tabella degli attributi per queste posizioni. Creare una copertura interpolata per la mortalità per ciascuno dei quattro periodi di tempo di mortalità in tutte le posizioni sentinelle uniche nell'area di trattamento e aggiungere queste coperture interpolate alla mappa utilizzando una legenda di colore allungata su uno spettro blu-rosso e contrassegnando le posizioni della gabbia sentinella con etichette.
Migliorare la mappa dell'area di trattamento con un'immagine satellitare sottostante e aggiungere gli elementi mappa appropriati, ad esempio una freccia nord, una barra di scala, una legenda e un titolo. Quindi aggiungere inserti di un grafico meteorologico e di un grafico polare della rosa del vento separato per mostrare vento prevalente, velocità del vento e variabilità durante tutto il periodo di spruzzatura, nonché una rampa di colore della mortalità in modo che la copertura di mortalità interpolata possa essere interpretata, quindi esportare un'immagine della mappa finita per ogni superficie del periodo di tempo di mortalità. In questa serie rappresentativa di spray, lo spruzzatore di pesticidi per nebbia termica, il pesticida e l'ambiente sono stati mantenuti costanti, variando solo il diluente del pesticida in modo tale che l'acqua, il diesel e l'olio minerale BVA13 sono stati utilizzati come solvente a loro volta durante le tre prove.
In particolare, non è stata osservata quasi alcuna mortalità quando il pesticida è stato diluito con BVA13, mentre una mortalità di quasi il 100% è stata osservata quando il pesticida è stato diluito in acqua, con gli effetti del diesel come diluente che sembrano essere influenzati dalla posizione geografica delle gabbie sentinella. Va notato che il diagramma della rosa del vento inserito per questo esperimento ha rivelato un angolo di vento che corrispondeva perfettamente all'angolo della mortalità spaziale nella griglia ovest, indicando che il camion spray avrebbe dovuto iniziare più a est in modo che il pesticida avrebbe avuto l'opportunità di raggiungere tutte le gabbie sentinella. Se i dati sulla mortalità sono considerati solo in forma tabellare, può essere facile perdere questa debolezza nella progettazione sperimentale e assegnare un'efficacia complessiva inferiore a quell'apparecchiatura di applicazione dei pesticidi distorta dai valori di mortalità zero provenienti da aree non contattate dal pesticida.
Per i dati sulla mortalità di altissima qualità, prestare attenzione quando si conservano e maneggiano le gabbie sentinella prima e dopo lo spray e allo stesso modo assicurarsi che le gabbie delle aree di trattamento e controllo siano ugualmente esposte all'ambiente. Per le tabelle di dati di buona qualità, è fondamentale incollare attentamente i dati in modo che le informazioni corrette siano allineate ai punti corrispondenti nelle colonne etichettate correttamente, in particolare i dati per ogni periodo di tempo di mortalità. Abbiamo dimostrato questo sistema usando zanzare vettoriali adulte come sentinelle, ma le zanzare immature possono anche essere posizionate come sentinelle in piccole tazze di plastica da 400 ml piene d'acqua per raccogliere e valutare i siti di larve spruzzate in una varietà di ambienti.
Il sistema sentinella e sesso non è una misura assoluta dell'efficacia, ma dimostra la capacità di confrontare l'efficacia relativa di un pesticida in condizioni diverse o di confrontare diversi pesticidi nelle stesse condizioni.
