הקלטה בסיבים בודדים ממלאת תפקיד חשוב בהקלטת הפעילות של סיבי עצב. במיוחד פעילויות המשדרות תחושה היקפית משדות פתוחים לנוירונים בגנגליון שורש הגבי. בגל של הקלטת סיבים, מספק משך זמן עם היכולת להקליט תגובות לגירויים בטבע, ומאוחר יותר היה הפרעה של הסביבה הבין תאית.
בהקלטת סיבים אחת דורש נויטרונים אוטומטי טוב למצב. המטפל קורא את הדרישה להכנת בדיקות DRG משולב העצב הסיאטי משולב. התוצאה של מצב הדגמה מראה כמעט את כל הפרטים של עצבים בשלב מדבקה טובה, פיזית.
ושלישית, הכנת DRG כולה כפי שהם משולבים. כדי להתחיל בהליך זה, להכין ולחטא את כל המכשירים הכירורגיים לפני הניתוח. לאחר מכן הכינו 1-2 ליטר מהתסכול החוץ-תאי הרגיל של רינגר ואחסנו בארבע מעלות צלזיוס עד לשימוש.
כדי לחשוף את גזע העצב הסיאטי להקלטה, ראשית, לחתוך לפתוח את העור של החולדה הרדמה ושרירים על החלק הגבי של הירך. לאחר מכן, לבצע ניתוח קהה לאורך שרירי הירך. מבודדים בזהירות את גזע העצב הסיאטי באמצעות מספריים עיניים ומחט הפרדת זכוכית, ולשמור על הרקמה לחה באמצעות הפתרון של רינגר.
לאחר מכן, לתקן את החיה על חישוק מתכת תוצרת בית על ידי תפירת העור לתוך החריץ סביבו. משוך את העור מעט למעלה כדי להקים אמבטיית נוזלים. חשוף סנטימטר אחד של גזע עצבי סיאטי בצד הפרוקסימלי.
מניחים פלטפורמה קטנה וח חומה מתחת לתא המטען העצבי כדי לשפר את הניגודיות על מנת להתבונן בבירור בתא המטען העצבי המשובח. לאחר מכן, להחיל קצת פרפין נוזלי חם על החלק העליון של תא המטען של העצב כדי למנוע ייבוש של משטח הסיבים. הסר את הנוזל אם יש exudation סביב גזע העצב.
כדי לבצע הקלטה, בחר את תריס הפלטינה כאלקטרודה ההקלטה. לאכול וליצור וו קטן ממש בסוף. לאחר מכן, חבר את האלקטרודה למיקרומניפולטור.
באמבטיה, מניחים אלקטרודה התייחסות ליד הרקמה התת עורית. לפצל את דורא עמוד השדרה ואת פיא מאטר ולקבל את העצב הסיאטי. תחת מיקרוסקופ סטריאו בהגדלה של 25%, הרם fascicle בסדר ולהשעות את הקצה המשוער של האקסון על הקרס של האלקטרודה הקלטה.
זהה את השדה הקליטה של סיב c יחיד, לא פתוח באמצעות סימולי מכני וגירוי תרמי. אם הירי של סיבי העצב מגיב לגירויים מכניים ומים חמים, אז לשקול את זה כמו פולימוטו, סיבים c לא פתוחים. לאחר מכן, הכנס שתי אלקטרודות גירוי מחט עם מרווח של שני מילימטר לתוך העור של השדה לזהות עבור משלוח של גירויים חשמליים.
הצג את צורת הגל של פוטנציאל פעולה על oscilloscope, ומעסיקים מחשב d-board עם קצב דגימת אות של 20 קילוהרץ. לאחר מכן, להקליט את הקוצים באמצעות תוכנה לרכישת נתונים ולנתח אותו מאוחר יותר עם תוכנה מקצועית. כדי למדוד כשל בהוליכות, ספק את גירויי האלקטרודה החוזרים בתדרים שונים לסיבים c למשך 60 שניות.
אפשר מרווח של 10 דקות לסיבים להירגע בין גירויים. לאחר מכן, לחשב את היחס של מספר הכשלים למספר פולסים גירוי חוזר שנמסרו להכפיל ב 100%, כדי לקבל את מידת כשל בהוליכים. כדי לחשוף את גנגליון השורש הגבי, ראשית לחתוך לפתוח את העור מקו האמצע של החלק האחורי בקטע l4 כדי l5.
לאחר מכן, להסיר את השרירים תהליך עמוד השדרה בור חולייתי ותהליך רוחבי באמצעות rongeur עצם, ולחשוף את גוף NDRG חוט השדרה. מכסים את חוט השדרה החשוף, NDRG, עם כותנה ספוגה בתתא החוץ-תאי הרגיל של רינגר לשמירה על פעילות עצבית. לעצור את הדימום ולהסיר את הדם לפי הצורך.
לאחר מכן, באמצעות מספריים עיניים, להסיר l4 כדי s1 מבנה העצם מעל אבות החוליות על מנת לחשוף את DRG ואת עצב השדרה מחובר. לעשות חתך על העור כדי לחשוף את העצב הסיאטי בירך האמצעית. להפריד ולנתק את העצב הסיאטי מהקץ הדיסטלי של העצב שבו הוא נכנס לתוך השריר.
וללקט את גזע העצב עם קו כירורגי בסוף העצב לפני החיתוך. לאחר מכן, להפריד את העצב הסיאטי מן רקמת החיבור הבסיסית על ידי הרמת נקודת הקשירה העצבית. הסר עבור דורה מן חוט השדרה, ולהפריד את DRG מן רקמת החיבור הבסיסית עד שהוא מגיע לחלק הסמוך של העצב הסיאטי.
לכן, לבודד את כל ההכנה של DRG עם עצב sciatic מצורף. כדי לנקות את פני השטח של DRG, בהגדלה 4x, להסיר בזהירות את דורה בעמוד השדרה על פני השטח של l4 כדי l6 DRG באמצעות פינצטה. מניחים את DRG עם עצב sciatic מחובר בצינור זכוכית המכיל מיליליטר אחד של אנזימים מעורבים.
לעכל באמבט מים 37 מעלות צלזיוס במשך 15 דקות. לאחר 15 דקות, להרים את סוף הקו הכירורגי ולהזיז את ההכנה לצלחת מלאה בתסרון חוץ תאי של רינגר רגיל לשטוף את האנזים. לאחר מכן, להעביר את DRG מתעכל למיכל מלא פתרון חוץ תאי מחומצן של רינג'ר להקלטה.
כדי לבצע הקלטה, להכין פתרון תאי, ולאחסן אותו באפס מעלות צלזיוס עד השימוש. בעזרת עוגן פרוסה, מייצבים את הגנגליה ומחברים את קצה העצבים לאלקטרודה מגרה יניקה. בהגדלה של פי 40, דמיינו ובחרו נוירון DRG עם מטרה של אמרסיון מים.
מקפלים אלקטרודה וממלאים אותה בתתיחה תאית. חבר את האלקטרודה על המחזיק, והפעיל לחץ חיובי בצינור עם התנגדות סופית של ארבעה עד שבעה מגה-אוהמים. לאחר מכן, הבא את האלקטרודה אל פני התא.
לאחר מכן, להחיל לחץ שלילי על הצינור כדי ליצור חותם. לאחר חותם gigaohm הוא הגיע, להגדיר את פוטנציאל הממברנה על מינוס 60 millivolts ולהקים את כל מצב הקלטת התא. לאחר מכן, לספק גירויים חוזרים של 5 עד 50 הרץ לעצב sciatic דרך אלקטרודה יניקה למסך עבור כשל בהוליכות.
למדוד את משרעת של AHP מקו הבסיס לשיא ואת משך 80%AHP. נתון זה מציג את ההקלטות הרצופות המקוריות של ירי מחדש c5 יחיד של חולדות בתגובה 10 הרץ גירוי חשמלי. כל סריקה עשרים מוצגת ומוצגת מלמעלה למטה.
ההוספה מציגה פוטנציאל פעולה מייצג. הנה הקלטות של סיבים c יחיד מן החולדות מוזרק CFA בתגובה לגירוי זהה הפאנל הקודם. נתון זה מראה את ההקלטות המתמשכות של תגובות ירי סדרה לחמש גירוי הרץ בתנאי שליטה, או ניהול של ריכוז שונה של ZD7288 בנוירון DRG בקוטר קטן מעכברושים בדירוג CFA.
הערכות Insets מציגות מעקבים מורחבים עבור תקופות ההקלטה שצוינו. כתמים כהים מייצגים כשלי ספייק. ה- AHP הראה שיפוע עולה גדול יותר בפקד.
בעוד מדרון עולה קטן יותר נצפתה לאחר 125 micromolars ביישום ZD7288. כאשר הקלטת חמישייה אחת בזמן, אני חושב שזה חשוב לחתוך את הסיבים יהיה שמירה על בעלי החיים הוא טוב כל מצב בטיחות. ומיקרו-וירוס סביב הנויטרונים.
השילוב של הקלטת סיבים בודדים ויישום של DRG שלם המחובר עם העצב הסיאטי, שיפר את ההבנה שלנו של מערכת העצבים ההיקפית הנוגעת לכאב.
