יצירת מודל חולדה לאוסטאוסרקופניה באמצעות כריתת שחלות

פרוטוקול נוכחי זה מתאר הליך ליצירת מודל חולדה של אוסטאוסרקופניה באמצעות כריתת שחלות.

אוסטאוסרקופניה (OS), הפרעה ניוונית מורכבת, מאופיינת בירידה בו-זמנית במסת שריר השלד ובצפיפות המינרלים בעצם (BMD), מה שמהווה סכנה בריאותית עצומה לאוכלוסייה המבוגרת. למרות הרלוונטיות הקלינית שלו, המנגנונים הפתופיזיולוגיים העומדים בבסיס OS אינם מובנים במלואם, מה שמדגיש את הצורך בהבנה עמוקה יותר של האטיולוגיה שלו כדי להקל על אסטרטגיות טיפול יעילות. פיתוח מודל אמין של בעלי חיים הוא מרכזי במאמץ זה. מחקר זה מציג פרוטוקול מעודן לאינדוקציה של אוסטאוסרקופניה לאחר גיל המעבר בחולדות באמצעות כריתת שחלות דו-צדדית, שיטה הידועה כמאיצה את הופעת אובדן שרירים ועצם הקשור לגיל. במחקר זה, חולדות בגילאי 12 שבועות חולקו לפי משקל גוף והוקצו באופן אקראי לקבוצת ניתוח דמה או לקבוצת שחלות (OVX). דגימות רקמה משרירי הארבע ראשי והתלת ראשי של הגפה האחורית השמאלית, כמו גם מעצם הירך השמאלית, נאספו באופן שיטתי בשבועות 4, 8 ו-12 שבועות לאחר הניתוח. גישה שיטתית זו מבטיחה הערכה מקיפה של ההשפעות של כריתת שחלות על בריאות השרירים והעצמות. הערכה היסטולוגית של ניוון סיבי שריר ומורפולוגיה של עצם הירך בוצעה באמצעות צביעת המטוקסילין ואאוזין (HE), בעוד שצפיפות המינרלים בעצם כומתה באמצעות ספיגת קרני רנטגן באנרגיה כפולה (DXA). ההתקדמות הזמנית של OS נוטרה בקפידה במרווחים שהוזכרו לעיל, וסיפקה תובנות לגבי יחסי הגומלין הדינמיים בין ניוון שרירים ועצמות. מודל זה לא רק משקף במדויק את הביטויים הקליניים של מערכת ההפעלה, אלא גם משמש כפלטפורמה חזקה לחקירת גישות טיפוליות חדשות והמנגנונים העומדים בבסיסן.

אוסטאוסרקופניה היא מצב ניווני רב-פנים המקפל את הביטויים הקליניים של אוסטאופורוזיס וסרקופניה 1,2,3,4. אוסטאופורוזיס, הפרעת שלד נפוצה, מאופיינת בירידה במסת העצם, מיקרו-ארכיטקטורה פגומה ורגישות מוגברת לשברים. סרקופניה, המכונה לעתים קרובות תסמונת בזבוז שרירים, מאופיינת בירידה בכוח השריר ובמסה ^5,6. ⁷ הממצאים של מרים גילו כי אוסטאוסרקופנייה העלתה את הסיכון למוות ב-30% על סרקופניה בלבד וב-8% על BMD נמוך בלבד. מחקרים הראו כי 16.4% מהאנשים המתגוררים בקהילה בגילאי 60 ומעלה סובלים מאוסטאוסרקופניה. בדרום קוריאה, שכיחות האוסטאוסרקופנייה בקרב קשישים בני 60 ומעלה שסבלו משברים בירך מדווחת על 27.2%⁹. אנשים עם OS מתמודדים עם סיכונים גבוהים יותר לנפילות, שברים, אשפוז ואשפוז, מה שמכביד על מערכת הבריאות והחברה^10,11. בהתחשב בחומרת ההשלכות הללו, חיוני לפתח וליישם אמצעים יעילים למניעה וטיפול במערכת הפעלה. למרות הדחיפות, המחקר בתחום זה נותר בחיתוליו, עם ויכוחים מתמשכים סביב קריטריונים לאבחון ויעילותן של שיטות טיפול שונות. פיתוח מודלים אמינים של בעלי חיים חיוני אפוא לניתוח הפתוגנזה של OS וחשיפת היסודות המולקולריים שיכולים להודיע על גישות טיפול יעילות יותר.

נכון לעכשיו, מודלים נפוצים למחקרים פרה-קליניים על אוסטאוסרקופניה כוללים את מודל ההזדקנות, המדמה את תהליך ההזדקנות האנושי ללא התערבות תרופתית. גישה זו קרובה יותר לתהליך הטבעי והיא חסכונית; עם זאת, זה דורש השקעה משמעותית של זמן להתבגרות¹². שיטת הזרקת התרופות הכימיות מציעה יתרונות מסוימים, כגון מחזור דוגמנות קצר, תוצאות יציבות ועלות נמוכה. עם זאת, הוא מציב גם אתגרים, כולל קביעה מדויקת של מינון ההורמונים, המיומנות הטכנית הנדרשת להזרקה וההשפעות המשתנות של התערבויות הורמונליות^13,14. מודלים של הנדסה גנטית עשויים לכלול אורגניזמים מהונדסים גנטית שיכולים להיות פגומים גנטית ויקרים כאחד. למרות שדגמים אלה ספציפיים מאוד, הם מורכבים ויקרים יותר לייצור¹⁵. מודלים של חוסר שימוש מדמים את ההשפעות של מנוחה ממושכת במיטה על חולים קליניים¹⁶. מודלים של חוסר שימוש הם יעילים וחסכוניים לטיפול באובדן שרירים, אך קשורים לסיבוכים כמו קרישי דם ופצעי לחץ. מודלים אלה מנוטרים באופן שגרתי כדי למנוע נמק גפיים^17,18 ומודלים חסרי הורמונים; קיימת הסכמה רווחת בקהילה המדעית כי כריתת שחלות דו-צדדית משמשת כשיטה יעילה לביסוס מודל בעלי חיים של אוסטאופורוזיס^19,20.

מחקרים מצביעים על כך שרקמות עצם ושריר יכולות גם לקיים אינטראקציה זו עם זו באמצעות מנגנונים אוטוקריניים, אנדוקריניים^{ופרקריניים 21}. הצטברות רקמת שומן בשריר ובמח העצם משמשת אינדיקטור לירידה במסת העצם והשריר בהקשר של אוסטאוסרקופניה². סרקופניה אצל מבוגרים קשורה ישירות לירידה בצפיפות העצם ולהידרדרות המיקרו-ארכיטקטורת העצם. בנוסף, מסת שריר מופחתת משמשת כגורם סיכון עצמאי לפירוק מבנה העצם²². מתודולוגיה זו הוכרה כאסטרטגיה בת קיימא למידול של סרקופניה^23,24, שיכולה לשמש כמודל משולב לשני המצבים²⁵. למרות גוף המחקר המוגבל הנוגע ליישום כריתת שחלות כאמצעי לגרימת אוסטאוסרקופניה, גישה זו מדגימה יעילות פוטנציאלית. היתרונות של שימוש בכריתת שחלות במחקרים פרה-קליניים כוללים תהליך מידול מהיר, ביטול התערבויות פרמקולוגיות, יצירת מודל ניסיוני יציב, יישום פשוט וחסכוניות.

המחקר הנוכחי נועד לשרטט את ההליך ליצירת מודל פרה-קליני בחולדות נקבות באמצעות הסרת מקטע של חצוצרות ושחלות אצל אנשים שאינם בהריון. גישה זו משמשת ככלי רב ערך לחקירת היסודות המולקולריים של OS ולהערכת היתרונות הטיפוליים של התערבויות בסביבה ניסויית מבוקרת.

נקבות חולדות Sprague Dawley (n = 36), בנות 12 שבועות ובמשקל של כ-200-240 גרם, שוכנו בנפרד בכלובים מאווררים בחדר בעלי חיים נטול פתוגנים ספציפיים (SPF) עם מחזור אור/חושך של 12 שעות. הייתה להם גישה חופשית להזנת SPF ומים סטריליים. החולדות הורשו להתאקלם בסביבה במשך שבוע לפני הניסויים. באמצעות הקצאה אקראית, החולדות חולקו לקבוצות שחלות (OVX) (כל אחת עם 6 חולדות) וקבוצות דמה (כל אחת עם 6 חולדות) במשך 4, 8 ו-12 שבועות לאחר הניתוח. כל ההליכים בבעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות שאושרו על ידי הוועדה לרווחת בעלי חיים באוניברסיטת ליאונינג לרפואה סינית מסורתית (מס' 21000042021040).

1. כריתת שחלות בחולדות

הערה: המנגנון הכירורגי המשמש בפרוטוקול זה נמצא באיור 1.

1. שמור את החולדות בחדר בעלי החיים SPF ופעל לפי כל ההליכים הדרושים באמצעות ציוד מעוקר בסביבה סטרילית.
2. מערבבים נתרן פנטוברביטל, אבקה לבנה, עם מים מזוקקים או תמיסת מלח רגילה של 0.9% ליצירת תמיסת הרדמה. המינון הסטנדרטי הוא 30 מ"ג/ק"ג; מלאו את המזרק בהתאם.
   הערה: חשוב לציין שהתמיסה אינה יציבה ויש להשתמש בה באופן מיידי. הכן את הכמות הנדרשת לניסוי אחד בכל פעם.
3. הרם את בטן החולדה מעל ראשה כדי להעביר את הקרביים לבטן העליונה. בעזרת היד הדומיננטית, מקמו מזרק 1-1.5 ס"מ מהצד השמאלי (או הימני) של קו האמצע של הבטן והכניסו אותו בזווית של 45 מעלות לגוף החולדה. לאחר מתן תמיסת התרופה, סובב את המחט ולאחר מכן משוך.
4. לאחר מתן ההרדמה, עקוב בקפידה אחר נשימת החולדה וצבט את אצבעות רגליה כדי לוודא שהיא מורדמת לחלוטין.
   הערה: אם יש סימנים של עוויתות או עוויתות, רצוי להמתין זמן רב יותר לפני שתמשיך.
5. מקמו את החולדה על שולחן הניתוחים, אבטחו את הגפיים שלה והסירו את השיער משני צידי הגב שלה באמצעות גוזם (איור 2A).
   הערה: אם אפקט הסרת השיער אינו אידיאלי, ניתן להשתמש בקרם להסרת שיער להסרת שיער.
6. יש לחטא את האזור בו הוסר השיער באמצעות כדורי צמר גפן ספוגים ביוד.
   הערה: תהליך החיטוי הכירורגי כולל התחלה מהמרכז ותנועה החוצה בדפוס מעגלי, בדרך כלל חוזר על עצמו שלוש פעמים.
7. בצע חתך בגב, במרחק של כ -1.0 ס"מ מקו האמצע. בצע את החתך קרוב לצומת שבין עקמומיות כלוב הצלעות לגבול עמוד השדרה, מעט נמוך יותר ב-0.5-1 ס"מ על ידי הפרדת העור, הפאשיה והשריר משני הצדדים (איור 2B).
   הערה: לגישה לחלל הבטן דרך שכבת השרירים החלשה יותר של דופן הבטן האחורית, החתך נשמר מינימלי ככל האפשר.
8. מציאת השחלה יכולה להיות מאתגרת בהתחלה. התחל באיתור צינור הביצית ומעקב אחריו עד לקצה הסופי של השחלה, העטוף בשכבה של רקמת שומן רופפת.
   הערה: השחלה הימנית ממוקמת בצד החוליות המותניות הרביעית עד החמישית, 7-12 מ"מ מאחורי הכליה ובמרחק של 15 מ"מ מקו האמצע. השחלה השמאלית ממוקמת בצד החוליות המותניות 5 עד 6, 3-5 מ"מ מאחורי הכליה ו-11 מ"מ מקו האמצע.
9. הרם בזהירות את השחלה ואת קצה צינור הביצית מהגוף (איור 2C). יש למרוח את המלקחיים ההמוסטטיים באזור המצומצם ביותר בין קצה הרחם לשחלה. השתמש בחוט כירורגי כדי לקשור אותו, ולאחר מכן כרת את השחלה לחלוטין בעזרת מספריים.
   הערה: חשוב להיות עדין בעת הטיפול בצינור הביצית וברחם במהלך ההליך, ולהימנע ממשיכה מוגזמת. הקשירה המשמשת לפני כריתת השחלות חייבת להיות מאובטחת היטב, מכיוון שרקמת השומנים הרכה סביב השחלה עלולה לגרום לה בקלות להשתחרר. אמצעי זהירות זה הכרחי כדי למנוע דימום לאחר הניתוח, שעלול לגרום למוות של החולדות. בקבוצת הדמה נכרתה רקמת שומן בנפח ובגודל שווים הסמוכה לשחלה, ואחריה תפירה של השריר והעור.
10. שחררו את המלקחיים ההמוסטטיים והחזירו בעדינות את הרחם לחלל הבטן.
11. תן פניצילין לפצעי הבטן שבהם השחלות והחצוצרות קשורות כדי למנוע זיהום.
    הערה: יש לתת פניצילין 80,000 יחידות לחולדה פעם ביום במשך 3 ימים רצופים.
12. תפר בנפרד (גודל 3-0) את שכבות העור והשריר (איור 2D).
    הערה: יש לבצע עיקור 24-48 שעות לאחר הניתוח, במרווחים של 1-2 ימים זה מזה.
13. החזירו את החולדה לכלוב מחוטא ועקבו אחריה עד שהיא חוזרת להכרה לחלוטין מההרדמה.
    הערה: המשך לספק תמיכה בחום במהלך ההליך עד שהחיה תתאושש לחלוטין מההרדמה.
14. כדי למנוע זיהום בפצע, יש לתת לחולדות בכל קבוצה זריקה תוך שרירית של נתרן פניצילין 80,000 יחידות לחולדה פעם ביום במשך 3 ימים רצופים²⁶.

2. אוסף רקמות עצם ורקמות שריר

הערה: חולדות הומתו עם מנת יתר של נתרן פנטוברביטל (100-200 מ"ג/ק"ג) לאחר 4, 8 ו-12 שבועות לאחר ניתוח הדוגמנות. בסך הכל נאספו 36 דגימות.

1. חשוף את שרירי התלת ראשי, הזרוע והארבע ראשי של השוק השמאלי. זהה ונתח בזהירות את השרירים הללו בנקודות המוצא והקצה שלהם כדי לשמור על שלמותם. לאחר מכן, רשום וחשב את ממוצע המשקלים הרטובים של השרירים כדי לקבוע את מקדמי המשקל הרטוב של השרירים.
   הערה: משקל גוף בעל חיים ומקדם משקל רטוב של שרירי השלד = משקל רטוב של שריר חולדה / משקל גוף.
2. נתק לחלוטין את עצם הירך על ידי חיתוך קפסולת המפרק כלפי מעלה לאורך עצם הירך. לאחר מכן, הסר את רקמת השריר והרצועה הסמוכה.

3. בדיקה פתולוגית

1. טבלו את רקמות השריר בכלי קיבול המכיל תמיסת פורמלין ניטרלית של 10% למשך 24 שעות. לאחר מכן, יש לשטוף את רקמות השריר בהרחבה תחת מים זורמים כדי להסיר את הקיבוע.
2. מניחים את עצם הירך השמאלית בתמיסת פרפורמלדהיד של 4% למשך שבוע, ואז משרים אותה בכמות מספקת של תמיסת הסרת אבדן של חומצה אתילנדיאמינטטראצטית (EDTA) כדי להסיר משקעי סידן, כאשר המאגר מוחלף מדי יום.
3. מדוד את ערכי צפיפות המינרלים בעצם באמצעות מד צפיפות עצם של ספיגת קרני רנטגן (DXA) באנרגיה כפולה. הנח את עצם הירך בצילום רנטגן באנרגיה כפולה. הגדר את דיוק המדידה ל-Fine, התאם את המצב למצב ספציפי לבעלי חיים קטנים, ונתח את ה-BMD של עצם הירך של חולדות באמצעות תוכנת ניתוח ה-BMD הנלווית.
4. מניחים את הדגימה בשעוות פרפין. חתך את הדגימות לבדיקה ההיסטולוגית השגרתית²⁷.

4. ניתוח סטטיסטי

1. הצג את המשתנים הרציפים כממוצע ±± סטיית תקן (SD) והשווה בין שתי הקבוצות באמצעות מבחן t של מדגם בלתי תלוי. כל הניתוחים הסטטיסטיים עקבו אחר גישה דו-צדדית, עם מובהקות סטטיסטית שנקבעה ב-P <-0.05. השתמש בתוכנה מתאימה לניתוח נתונים כדי לבצע ניתוחי נתונים.

פרוטוקול זה מספק תיאור מפורט של הליך כריתת השחלות הדו-צדדית לביסוס מודל חולדה של אוסטאוסרקופניה. איור 3 מדגים ירידה במקדם המשקל הרטוב של שריר הארבע ראשי בקבוצת OVX בהשוואה לקבוצת הדמה. למרות שלא הייתה שונות מובהקת סטטיסטית ב-BMD בין שתי הקבוצות 4 שבועות לאחר הניתוח, ה-BMD בקבוצת ה-OVX היה נמוך משמעותית מזה בקבוצה שנותחה בדמה ב-8 ו-12 שבועות לאחר הניתוח.

באיור 4, נצפתה ניוון משמעותי של שריר התלת ראשי בקבוצת OVX, עם פער סיבי שריר גדול יותר בהשוואה לקבוצת הדמה ב-12 שבועות לאחר הדוגמנות. איור 5 מדגים כי ב-4 שבועות לאחר הניתוח, הצפיפות הטרבקולרית של ראש הירך הן בקבוצות ה-OVX והן בקבוצות ניתוחי הדמה הייתה דומה, והראתה סידור קבוע וצפוף עם קישוריות טובה. עם זאת, עד 8 שבועות לאחר הניתוח, הטרבקולות בקבוצת ה-OVX החלו לרדת במספרן, והפכו מסודרות בדלילות עם אזור מוגדל של חלל מח העצם. כמות האדיפוציטים בחלל מח העצם הייתה גבוהה יותר מאשר בקבוצת הדמה. ב-12 שבועות לאחר הניתוח, הטרבקולות ב-OVX הראו ירידה ניכרת, והציגו קשרים הדדיים לא שלמים, התרחבות ניכרת באזור חלל מח העצם וספירת אדיפוציטים מוגברת משמעותית בהשוואה לקבוצת הדמה.

איור 1: מכשירים כירורגיים. (A) מחזיק מחט ישר. (B) מספריים ישרים של מיונז. (ג) מגש החלפת תרופות חד פעמי. (ד) מזרקי צמר גפן סטריליים (E). (ו) יוד. (ז) מחט תפרים. (ח) קו תפר. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 2: הקמת מודל OVX. (A) הסרת שיער. (B) פתח כירורגי באורך 1 ס"מ נוצר מהעור לשכבה התת-עורית. (ג) קשירה הכרוכה בהסרת שחלות וחלק מהחצוצרות. (ד) פצע סגור. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 3: שריר/משקל גוף ארבע ראשי וצפיפות מינרלים בעצם. (A) מקדם משקל רטוב של שרירי הארבע ראשי. (B) צפיפות מינרלים בעצם (בהשוואה לקבוצת הדמה, * P<0.05, ** P<0.01, *** P<0.001). אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 4: צביעת HE של קטעי רקמה מסיבי השריר של שריר התלת ראשי של השוק. (A) מורפולוגיה של שרירים 4 שבועות לאחר הליך המידול בקבוצת הדמה. (B) מורפולוגיה של שרירים 8 שבועות לאחר הליך המידול בקבוצת הדמה. (C) מורפולוגיה של שרירים 12 בעקבות הליך המידול בקבוצת הדמה. (D) מורפולוגיה של שרירים 4 שבועות לאחר הדוגמנות בקבוצת OVX. (E) מורפולוגיה של שרירים 8 שבועות לאחר הדוגמנות בקבוצת OVX. (F) מורפולוגיה של שרירים 12 שבועות לאחר הדוגמנות בקבוצת OVX. מוטות קנה מידה: 1000 מיקרומטר. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 5: צביעת HE של קטעי רקמה מראש עצם הירך. (A) מורפולוגיה של עצם הירך 4 שבועות לאחר המידול בקבוצת הדמה. (B) מורפולוגיה של עצם הירך 8 שבועות אחרי המודלים בקבוצת הדמה. (C) עצם הירך 12 שבועות לאחר הדוגמנות בקבוצת הדמה. (D) מורפולוגיה של עצם הירך 4 שבועות אחרי הדוגמנות בקבוצת OVX. (E) מורפולוגיה של עצם הירך 8 שבועות לאחר הדוגמנות בקבוצת OVX. (F) מורפולוגיה של עצם הירך 12 שבועות לאחר הדוגמנות בקבוצת OVX. פסי קנה מידה: 1000 מיקרומטר. (G) אזור שומן מכומת. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

המודל הדו-צדדי של בעלי חיים עם שחלות הוא חיוני בהבהרת המנגנונים העומדים בבסיס אוסטאוסרקופניה, ובהערכת התערבויות טיפוליות פוטנציאליות. אוסטאופורוזיס הנגרמת על ידי כריתת שחלות בחולדות, המשקפת את הירידה הפתאומית ברמות האסטרוגן שנצפתה אצל נשים לאחר גיל המעבר, משמשת בדרך כלל כמודל למחקר אוסטאופורוזיס. יתר על כן, מחקרים הדגישו קשר משמעותי בין אוסטאופורוזיס לסרקופניה אצל אנשים מבוגרים, כאשר אובדן שרירים ועצם נצפה לעתים קרובות. כתוצאה מכך, מחקרים רבים השתמשו במודל זה כדי לחקור סרקופניה^28,29. כתוצאה מכך, המחקר הנוכחי מבסס בהצלחה מודל של בעלי חיים של אוסטאוסרקופניה.

יש לקחת בחשבון מספר גורמים חשובים בעת הקמת מודל אמין. דגם חיה מתאים חייב להיות מאופיין בנוחות, רלוונטיות וספציפיות³⁰. חולדות SD הן החיות הנפוצות ביותר במודלים של אוסטאופורוזיס. לאחר הסרת השחלות, מנגנון טרנספורמציה זה המתרחש בעצמות של חולדות דומה מאוד לתהליך של אובדן עצם לאחר גיל המעבר שנצפה בבני אדם^31,32. מחקרים מצביעים על כך שחולדות בגילאי 11 שבועות עד 36 שבועות הן אופטימליות לשכפול מודלים של אוסטאופורוזיס או סרקופניה 33,34,35,36. מבחינת מגדר, השכיחות של אוסטאוסרקופנייה בקרב נשים הייתה גבוהה יותר ועמדה על 28% מאשר בקרב גברים ב-14%²¹; לכן, בחרנו חולדות נקבות. חולדות מתבגרות מינית בגיל⁶ שבועות בערך, לכן בחרנו חולדות בנות 12 שבועות. מחקר מצא כי נפחי שרירי הארבע ראשי הופחתו משמעותית אצל מבוגרים בהשוואה לאנשים צעירים יותר, מה שמצביע על כך שלהזדקנות יש השפעה מזיקה יותר על נפח^{הארבע ראשי 38}. אוסטאופורוזיס משתמשת בצפיפות המינרלים בעצם הירך כתקן הזהב³². לכן, בחרנו את שריר הארבע ראשי ואת עצם הירך.

עקביות בטכניקה הכירורגית היא קריטית, כאשר מומלץ שאותו אדם יבצע את כל ההליכים כדי להבטיח אחידות במיקום החתך ובגודלו. ההליך כולו מורכב מכמה שלבים מכריעים. ראשית, הזרקה תוך-צפקית של חומר הרדמה אמורה להימנע מניקוב איברים פנימיים. לפני מתן התרופה, חיוני לשאוף כדי לוודא שהמחט לא נכנסה לכלי דם, לדחוף את בוכנת המזרק בצורה מדויקת ולשמור על יציבות ומהירות לאורך כל התהליך. שנית, זיהוי השחלה במהירות לאחר חיתוך הצפק יכול להיות מאתגר, ומחייב הבנה מקיפה של אנטומיה של חולדות על ידי המפעיל. לאחר איתור השחלה, קשירה והסרה של חלק מצינור הביצית והשחלה היא צעד חיוני להישרדות החולדה לאחר הניתוח. בשל רקמת השומן הרכה ליד השחלה, התפר עלול להשתחרר בקלות לאחר הקשירה, מה שמוביל לדימום ואולי למוות לאחר הניתוח. לבסוף, לפני התפירה, מומלץ למרוח פניצילין על אתר הניתוח, עם מתן תוך שרירי נוסף 3 ימים לאחר הניתוח כאמצעי מניעה נגד זיהום.

כתוצאה מהליכים כירורגיים ומתן הרדמה, חולדות עלולות לחוות כאבים עזים או אפילו מוות, מה שמחייב את הצבתן בסביבה חמה, היגיינית ומאווררת היטב עד שהן חוזרות להכרה. ניטור ערני הוא הכרחי במהלך השבוע הראשוני שלאחר הניתוח, עם תשומת לב לפעילות ההתנהגותית של החולדות לאורך כל המחקר.

היתרונות של מודל זה כוללים את אופיו הידידותי למשתמש, יכולות המידול היעילות, העלות-תועלת והיכולת לחקות את ההתפתחות הטבעית של אוסטאופורוזיס ואובדן שרירים. עם זאת, ישנם אילוצים מסוימים הקשורים למודל זה, כגון הירידה המהירה ברמות האסטרוגן לאחר ניתוח להסרת שחלות, כאשר אסטרוגן אינו מוכר כתורם ישיר לסרקופניה. הניסוי הנוכחי נערך על חולדות נקבות ולא כלל חולדות זכרים. למרות מגבלות אלה, מודל בעלי החיים לכריתת שחלות דו-צדדית התגלה כמשאב רב ערך לחקר מערכת ההפעלה ולחקר דרכים להתקדמות מחלות.

כל מחבר מצהיר שאין אינטרסים פיננסיים מתחרים.

עבודה זו נתמכת על ידי מענקים מ-(1) הקרן הלאומית למדעי הטבע (82305275). (2) תוכנית קרן מדעי הטבע המחוזית של ליאונינג (2022-YGJC-80 ו-2022-YGJC-79). (3) פרויקט בניית משמעת מפתח ברפואה סינית ברמה גבוהה של המינהל הלאומי של הרפואה הסינית המסורתית (zyyzdxk-2023040).