Dosage basé sur le transfert d’énergie par résonance de bioluminescence (BRET) pour mesurer les interactions de CRAF avec les protéines 14-3-3 dans les cellules vivantes

L’objectif principal de notre recherche est de découvrir de nouvelles vulnérabilités dans la voie de la kinase Ras-MAPK grâce à l’étude des mutations associées aux maladies rares à l’intérieur. Nous avons récemment mis au point un autre test basé sur BRET pour mesurer les activités auto-inhibitrices des kinases RAF dans les cellules vivantes. Il est important de noter que ce test était essentiel pour caractériser un groupe de mutations germinales rares dans le domaine riche en cystéine de BRAF, ce qui a démontré l’importance critique de ce domaine pour maintenir l’auto-inhibition de BRAF et pour prévenir l’activité biologique constitutive de BRAF.

Ce test mesure les interactions des protéines 1433 avec la kinase RAF CRAF, et ces interactions jouent un rôle essentiel dans la médiation de la fonction RAF dans le développement et la maladie. De plus, ce test, combiné à des tests précédemment établis pour mesurer l’auto-inhibition de la RAF et l’interaction RAF-RAF, constitue la base d’une boîte à outils permettant de disséquer les mécanismes de régulation des kinases de la RAF dans les cellules vivantes.