Agro-infiltration forcée sous vide pour la transformation in planta de plantes récalcitrantes : le cacao comme étude de cas

Des méthodes génétiques in vivo sont nécessaires pour étudier la fonction biologique des gènes chez les espèces vivaces tropicales et les cultures arboricoles horticoles. Cependant, beaucoup de ces espèces sont récalcitrantes à la transformation à chaque génération. L’objectif de cette recherche est de développer une méthode de transformation génétique simple et efficace applicable aux plantes de grande taille.

Je vais illustrer les choses. La transformation génétique médiée par Agrobacterium de plantes dont les tissus sont difficiles à infiltrer a été rendue possible par infiltration forcée à l’aide d’une pompe à vide. Cependant, les protocoles actuellement utilisés sont limités aux usines de petite taille en raison des contraintes physiques et économiques liées à l’envoi d’installations de grande taille à une chambre à vide.

La taille des chambres à vide, qui sont généralement des dessiccateurs de laboratoire, empêche l’infiltration sous vide de plantes trop grandes pour tenir dans des dessiccateurs, comme c’est le cas des plantes ligneuses tropicales. Nous avons développé un protocole d’infiltration sous vide localisée efficace des plantes ligneuses tropicales, rendant possible des études de transformation génétique in vivo de grandes espèces végétales. Ce protocole nous a permis de surmonter les limites de taille des plantes pour l’infiltration sous vide médiée par Agrobacterium dans les cultures horticoles telles que le cacao et l’avocat.

La transformation sans culture tissulaire des feuilles attachées par Agrobacterium par infiltration sous vide localisée peut être effectuée de manière rapide, simple et rentable par les laboratoires qui utilisent déjà l’infiltration sous vide, car la même pompe et la même chambre à vide peuvent être utilisées sans avoir besoin d’ajouter d’équipement coûteux.