Fractionnement de cellules des cellules U937 en l’Absence de Centrifugation à haute vitesse

Ce protocole permet aux chercheurs d’obtenir des fractions distinctes d’une cellule sans l’utilisation d’équipement spécialisé, de reagents coûteux ou de techniques complexes. Le principal avantage de ce protocole est la simplicité des techniques qui le rendent modifiable et facile à exécuter. La démonstration de la procédure sera Matt Deragon, Rob Haluska et Alexa Hodges.Trois étudiants diplômés de mon laboratoire. Pour commencer la centrifugeuse, la suspension cellulaire préparée pour créer une pastille. Retirer le supernatant et suspendre à nouveau la pastille à température ambiante PBS. Centrifuger la suspension cellulaire à 400 xg pendant dix minutes. Retirez ensuite le supernatant et suspendez la pastille cellulaire dans un tampon glacé. Préparer le tampon Une solution selon le protocole de texte. Centrifugez la suspension cellulaire à 400 xg pendant dix minutes et retirez le supernatant. Suspendre à nouveau la pastille dans la solution tampon A à une concentration finale de 200 millions de cellules par ml, et pipette doucement pour briser les touffes. Après cette incubation, la suspension cellulaire sur une extrémité au-dessus du rotateur d’extrémité à 4