Este protocolo permite a los investigadores obtener fracciones distintas de una célula sin el uso de equipos especializados, reactivos caros o técnicas complejas. La principal ventaja de este protocolo es la simplicidad de las técnicas que lo hacen modificable y fácil de realizar. Demostrando el procedimiento serán Matt Deragon, Rob Haluska y Alexa Hodges.Tres estudiantes graduados de mi laboratorio. Para comenzar a centrifugar la suspensión celular preparada para crear un pellet. Retire el sobrenadante y vuelva a suspender el pellet a temperatura ambiente PBS. Centrifugar la suspensión celular a 400 xg durante diez minutos. A continuación, retire el sobrenadante y vuelva a suspender el pellet celular en el tampón de hielo frío. Preparar el búfer Una solución según el protocolo de texto. Centrifugar la suspensión celular a 400 xg durante diez minutos y retirar el sobrenadante. Vuelva a suspender el pellet en tampón Una solución a una concentración final de 200 millones de células por ml, y pipetee suavemente para romper cualquier grupo. Después de esta incubación de la suspensión celular en un rotador extremo a 4