Este método puede ayudar a responder preguntas clave en la biogeoquímica relacionadas con la desnitrificación en sedimentos que son relevantes para entender el ciclo del nitrógeno y las emisiones de gases de efecto invernadero. Las principales ventajas de esta técnica son la baja perturbación de la estructura de sedimentos y el registro de contenedores de acumulación de óxido de nitrógeno para una estimación fiable de la tasa de desnitrificación. Para cuerpos de aguas profundas, seleccione el punto de muestreo de acuerdo con los objetivos de la investigación.
Tome nota de la posición utilizando coordenadas GPS y tome la profundidad de medición usando una sonda de mano. Despliegue un sistema de perforación por gravedad adaptado al mensajero hasta que el tubo de muestreo esté aproximadamente a un metro del sedimento. Estabilice el equipo de muestreo durante 60 segundos para garantizar la correcta penetración de sedimentos y la recuperación de un núcleo de sedimentos apenas perturbado.
Suelte aproximadamente un metro más de cuerda para que el tubo de muestreo penetre en el sedimento. Tenga en cuenta que si el tubo de muestreo penetra demasiado, puede perturbar la interfaz de sedimento de agua. Suelte el mensajero mientras intenta mantener la tensión en la cuerda para que el núcleo permanezca fijo y en posición vertical.
Recuperar el núcleo tirando de la cuerda constantemente y suavemente. Una vez que el núcleo esté cerca de la superficie pero todavía completamente sumergido, coloque un tapón de goma en la parte inferior del tubo de muestreo. Elevar todo el sistema de perforación del agua.
Inspeccione la interfaz de sedimento de agua. Debe ser claro y no visiblemente perturbado. Suelte el tubo de muestra del núcleo y coloque una cubierta de PVC en la parte superior.
Selle el tubo con cinta adhesiva evitando la formación de espacio de aire. Al tomar muestras de hábitats literales y cuerpos de agua poco profundos, vístete en un zancudo para tomar muestras en aguas muy poco profundas. Inserte manualmente el tubo de muestreo en el sedimento.
Coloque un tapón de goma en la parte superior del tubo de muestreo para obtener un vacío. Retire el núcleo del sedimento e introduzca rápidamente otro tapón de goma en el fondo del tubo. Para el valor de calibración con cero óxido nitroso, lea primero la señal del sensor manteniendo la punta del sensor sumergida en agua desionizada.
Para calibrar con agua de óxido nitroso a la concentración deseada, obtenga agua saturada de óxido nitroso burbujeando óxido nitroso en agua desionizada durante unos minutos. Diluir el agua saturada de óxido nitroso añadiendo un volumen específico de agua de óxido nitroso saturada a un volumen de agua desionizada. Mezclar suavemente el agua saturada de óxido nitroso con agua desionizada en el recipiente de calibración para diluirla a la concentración deseada.
Al mezclar la solución, tenga cuidado de no generar burbujas, ya que esto eliminaría el óxido nitroso de la solución de calibración. Ahora, lea la señal del sensor cuando sea constante. Esta lectura es el valor de calibración con agua de óxido nitroso micromolar X.
Cambie la cubierta de PVC situada en la parte superior de cada núcleo de sedimento a otra cubierta con un agujero en el centro y un agitador magnético colgante. Vuelva a sellar la unión con cinta adhesiva. Reducir la fase de agua de cada muestra a una altura aproximada de 12 centímetros.
Para ello, primero inserte un tubo de silicio en el orificio central. A continuación, coloque el núcleo del sedimento en un cilindro y empuje el tapón inferior para crear presión. El tapón y la muestra de sedimentos subo y el exceso de agua pasa a través del tubo.
Recoger el agua en un recipiente receptor. Realizar la inhibición del acetileno burbujeando con gas acetileno en la fase de agua del núcleo durante aproximadamente 10 minutos. Evite resuspender el sedimento.
Llene todo el espacio de aire con el agua sobrante anterior antes de sellar la cubierta de PVC del sensor de unión. Coloque el sensor en el núcleo del sedimento a través del orificio central de la cubierta superior del PVC. La punta del sensor debe ubicarse en la fase de agua por encima del agitador.
Encienda el circuito de pulso electromagnético que forma parte del sistema de agitación. Mueva el electroimán alrededor de la parte externa del tubo de acrílico hasta que el agitador se mueva continuamente y luego fijelo en su lugar usando cinta adhesiva. Cierre la cámara de incubación para garantizar una temperatura constante.
Pulse el botón de grabación del software del sensor para iniciar la grabación de la señal del sensor. A continuación, pulse el botón de parada al final del período de medición. Espere al menos 10 minutos con la punta del sensor sumergida en agua libre de óxido nitroso antes de leer la señal de la medida de calibración de óxido nitroso cero.
Después de realizar una calibración final del sensor, guarde el archivo con el software del sensor. Para realizar cálculos de la tasa de desnitrificación, comience con un archivo de salida tabulado generado por el software del sensor que contiene el registro de la señal del sensor en milivoltios y óxido nitroso micromolar y los datos de calibración. Bloquee la señal del sensor contra el tiempo para visualizar la tendencia de acumulación de óxido nitroso.
Utilice sólo el intervalo de tiempo con una acumulación lineal excluyendo el período de aclimatación inicial de la muestra y una posible saturación final debido a la limitación del sustrato. Las tasas de desnitrificación se estimaron utilizando este protocolo en sedimentos de lagos pirenaicos durante el período de 2013 a 2014. Aquí, las tasas se miden desde Lake Plan sin adición de nitrato.
Las mediciones son ruidosas y sólo en algunos casos se pueden estimar adecuadamente las tasas. En esta figura, las mismas muestras mostradas con adición de nitratos exhiben lecturas más estables y una buena estimación de las tasas potenciales. Si bien este procedimiento se aproxima a la desnitrificación y ve las tasas, también proporciona una manera de cambiar experimentalmente los factores clave que controlan esta actividad.
Para probar la temperatura y los sustratos, no olvide que un buen control de la temperatura es fundamental para una buena y estable medición. Además, una interfaz sedimento-agua sin perturbaciones durante la recolección del núcleo es el primer requisito crítico para una estimación confiable. Después de este procedimiento, otros métodos como las relaciones N15 se pueden combinar para investigar la nitrificación, el acoplamiento de desnitrificación y otros procesos de ciclo de nitrógeno.
