In diesem Protokoll wird zum ersten Mal die Harnröhrenrekonstruktion mit einem Wangenschleimhauttransplantat in einer lokalen pathophysiologischen Umgebung entwickelt, die für die Nachahmung von Krankheiten entscheidend ist. Diese Technik ermöglicht es uns, innovative Therapien zu entwickeln und ihre molekularen Mechanismen und klinischen Vorteile translational zu untersuchen. Tragen Sie zunächst schützendes Augengel auf beide Augen der betäubten Ratte auf.
Legen Sie das Tier in der dorsalen Dekubitusposition auf ein Wärmekissen und positionieren Sie ein Dissektionsmikroskop über der Ratte für den chirurgischen Eingriff. Nachdem Sie die Vorhaut des Penis zurückgezogen haben, legen Sie dorsal eine oberflächliche Sieben-Null-Naht auf die Penisdrüsen. Lassen Sie einen Nadelhalter an Ort und Stelle, um den Penis zurückgezogen zu halten.
Legen Sie einen 22-Gauge-Venenkatheter zur Katheterisierung mit Gleitgel in die Harnröhre. Machen Sie mit einer chirurgischen Skalpellklinge einen einen einen Zentimeter langen ventralen Schnitt in die Penishaut. Präparieren Sie die Penisgewebeschichten mit einer Pinzette und einer Federschere, bis die Harnröhre bis zur Mitte des Schaftes freiliegt.
Wenden Sie den Strom mit einem Elektrokautergerät auf eine seitliche Seite der Harnröhre und ventral an den Penismittelschaft an. Verschließen Sie den Schnitt mit einer resorbierbaren Sechs-Null-Naht. Entfernen Sie den Harnröhrenkatheter und die Penistraktrnaht.
Bringen Sie die Ratte in eine ventrale Dekubitusposition und verabreichen Sie eine subkutane Injektion der antisedativen Lösung. Reinigen Sie die Unterlippe, die Wangenschleimhaut, den Penis und die Bauchhaut einer betäubten Ratte mit Povidon-Jod. Platzieren Sie drei Sieben-Null-Nähte auf beiden Seiten und in der Mitte der Unterlippe.
Legen Sie jeweils eine Mücke hinein, um die Lippe zurückzuziehen und die innere Schleimhaut freizulegen. Entnehmen Sie mit einer Federschere und einer spitzen Pinzette ein vier Millimeter großes Transplantat aus der inneren Wangenschleimhaut der Unterlippe. Legen Sie das Transplantat in einen kleinen Behälter mit steriler 0,9%iger Kochsalzlösung.
Drücken Sie den Spenderbereich mit einem Schwamm zusammen. Entfernen Sie die zuvor gelegten Nähte der Unterlippe und legen Sie den Penis frei. Legen Sie einen 22-Gauge-Venenkatheter zur Kauterisation mit einem Gleitgel in die Harnröhre.
Machen Sie mit einer Federschere einen umlaufenden subkoronalen Schnitt und ziehen Sie den Penis an der Basis ab. Sezieren Sie die restlichen Schichten, um die Harnröhre freizulegen. Machen Sie einen vier Millimeter langen ventralen Schnitt etwa drei Millimeter distal des koronalen Sulcus und schlitzen Sie die Harnröhre auf Höhe der Striktur ein.
Platzieren Sie zwei Sieben-Null-Nähte auf jeder Seite der Spatulation. Lassen Sie in jedem eine Mücke, um die Harnröhre zurückzuziehen. Platzieren Sie zwei nicht resorbierbare Sieben-OH-Nähte an jedem Ende des Spatels.
Platzieren Sie das Wangenschleimhauttransplantat in einer ventralen Onlay-Manier, wobei die Schleimhautseite zum Harnröhrenlumen zeigt. Führen Sie eine der Nähte durch das Transplantat und führen Sie eine halbe Ellipse mit einer laufenden Naht durch. Entfernen Sie den Harnröhrenkatheter und positionieren Sie die Penishaut neu.
Schließen Sie die umlaufende subkoronale Inzision mit einer resorbierbaren unterbrochenen Naht. Entfernen Sie die Penistraktionsnaht und verabreichen Sie dann die Antisedativlösung, wie zuvor gezeigt. Die Ratte, die einer Strikturinduktion unterzogen wurde, zeigte einen Harnleiterdurchmesser von 0,92 Millimetern, der sich zwei Wochen nach der Transplantat-Urethroplastik auf 1,59 Millimeter verbesserte.
Der mittlere Blutfluss war nach der Urethroplastik im Vergleich zu den Tieren vor der Urethroplastik signifikant reduziert. Zu viel Strom kann zu einem Harnröhrenverschluss führen. Das Transplantat muss mit der Schleimhaut in Richtung des Harnröhrenlumens mit einer wasserdicht verlaufenden Naht platziert werden, um Fisteln zu vermeiden.
Jede Art von Urethroplastik mit Transplantaten kann durchgeführt werden, verschiedene Arten von Transplantaten können beurteilt werden. Dieses experimentelle Modell ermöglicht es uns, die Verwendung von Transplantaten zu optimieren und neue therapeutische Strategien zu erforschen, wie z. B. Tissue-Engineering-Materialien, die sich auf die translationale Forschung auswirken, um den klinischen Anforderungen gerecht zu werden.
