Das Morris Water Maze, oder MWM-Experiment, hat sich zum am weitesten verbreiteten und klassischen Verhaltensexperiment zur Bewertung der räumlichen Lern- und Gedächtnisfähigkeit von Tieren gemacht. Obwohl es viele Artikel über MWM gibt, fühlen sich Forscher in der Praxis immer noch verwirrt. Daher ist dieses intuitive und strenge Bedienprozessvideo besonders wichtig.
Wir haben zuvor eine MWM-basierte Studie durchgeführt, die nahelegte, dass Akupunktur Symptome von AD-Modellmäusen lindern kann. Hierin stellen wir das Betriebsprotokoll von MWM vor, das in unseren jüngsten Studien verwendet wird, um Forschern eine einfache und sichtbare Methode zur Beurteilung des räumlichen Lernens und Gedächtnisses von AD-Modelltieren zu bieten. MWM ist eine leistungsfähige Technik zur Beurteilung der kognitiven Funktion und wird häufig in Studien verwendet.
Es gibt jedoch keine definierten oder Standardparameter, um die Aufgabe auszuführen, z. B. die Größe des Pools und der Plattform. Daher ist eine echte Demonstration der Methode von entscheidender Bedeutung. Beginnen Sie mit der Einrichtung für den Morris Water Maze oder MWM-Test nach Manuskriptanweisungen.
Das MWM-Gerät und das Signalerfassungs- und -verarbeitungssystem sollten sich in einem Experimentierraum befinden, der für die Schalldämmung ausgelegt ist. Ein kreisförmiger weißer Tank, der von einem opaken Tuch umgeben ist, sollte in der Mitte des MWM-Geräts positioniert werden. Eine Videokamera sollte an der Decke des Geräts befestigt und mit einem Videorecorder mit einem automatisierten Tracking-System verbunden werden.
Teilen Sie den Wasserlabyrinthtank in vier gleiche Regionen mit Linien mit der Bezeichnung Norden, Süden, Osten und Westen, die den Poolbereich konzeptionell in vier Quadranten unterteilen. Platzieren Sie dann einen einzigartigen visuellen Hinweis an die Wand jedes Quadranten in Sichtweite der Maus. Füllen Sie den kreisförmigen Tank mit Wasser für eine Tiefe von 30 Zentimetern, Und fügen Sie 150 Gramm Milchpulver in das Wasser, um es undurchsichtig zu machen.
Um die Prüfung der Visible Platform durchzuführen, legen Sie eine kreisförmige Kunststoffplattform einen Zentimeter über der Wasseroberfläche in jedem Quadranten nach dem Zufallsprinzip und legen Sie eine schwarze Flagge darauf. Lassen Sie jede Maus sanft ins Wasser von einer der vier Startpositionen mit Blick auf die Tankwand. Aktivieren Sie das Computer-Tracking-Programm, sobald die Maus ins Wasser freigegeben wird, und geben Sie jeder Maus 60 Sekunden, um die Plattform zu erreichen.
Platzieren Sie am Ende jeder Testversion die Maus auf der Plattform, und lassen Sie sie 10 bis 30 Sekunden dort bleiben. Beobachten Sie die Schwimmbahnen der Mäuse am Computer. Zeichnen Sie die Zeit auf, die die Maus benötigte, um die Plattform als Escape-Latenz zu finden, und analysieren Sie die Schwimmgeschwindigkeit der Maus.
Dann trocknen Sie die Maus mit Handtüchern und erwärmen Sie sie mit einer elektrischen Heizung. Bewegen Sie die Plattform und führen Sie vier Versuche pro Maus durch, um eine Maus in einem anderen Quadranten zu starten. Lassen Sie die Maus zwischen jeder Testversion 15 bis 20 Minuten wiederherstellen.
Um die Prüfung "Versteckte Plattform" durchzuführen, platzieren Sie dieselbe Plattform ohne Flagge im südöstlichen Quadranten. Platzieren Sie dann die Maus nach dem Zufallsprinzip in einem der vier Quadranten, und geben Sie ihr 60 Sekunden, um die versteckte Plattform zu finden. Wenn die Maus die Plattform nicht in 60 Sekunden finden kann, führen Sie sie zur Plattform und lassen Sie sie dort für 10 bis 30 Sekunden bleiben.
Zeichnen Sie die Escape-Latenz jeder Prüfung auf. Trocknen Sie die Maus mit Handtüchern, und halten Sie es warm mit einer elektrischen Heizung. Führen Sie vier Versuche pro Maus mit 15 bis 20 Minuten zwischen jeder Testversion durch, wobei Sie die Maus jedes Mal in einem anderen Quadranten starten.
Wiederholen Sie die Versuche für fünf aufeinanderfolgende Tage mit der Plattform und visuellen Hinweisen an konstanten Positionen. Um die Probe-Studie durchzuführen, entfernen Sie die Plattform und legen Sie die Maus in das Wasser mit Blick auf die Tankwand im nordwestlichen Quadranten. Zeichnen Sie seine Schwimmdistanz, Geschwindigkeit und Plattform-Crossover-Nummer auf.
Wenn Sie fertig sind, trocknen Sie die Maus und halten Sie sie warm. Um die Reverse-Testversion durchzuführen, positionieren Sie die Plattform im nordwestlichen Quadranten, und wiederholen Sie die Prüfung "Versteckte Plattform". Dieses Protokoll wurde verwendet, um die Auswirkungen der manuellen Akupunktur oder MA auf das Lernen und Gedächtnis von Mäusen mit Alzheimer-Krankheit zu untersuchen.
Für die MA-Gruppe begann die Behandlung 15 Tage vor mWM-Tests und wurde während der 11-tägigen Tests fortgesetzt. Beim Visible Platform-Test am ersten MWM-Tag wurden keine statistischen Unterschiede in der Fluchtlatenz oder Schwimmgeschwindigkeit zwischen den Gruppen beobachtet. Während der Hidden Platform und der Reversal-Studie blieb die Fluchtlatenz der Alzheimer-Krankheit oder AD-Gruppe hoch, während die Latenz der anderen drei Gruppen allmählich abnahm.
Wichtig ist, dass die Escape-Latenz der MA-Gruppe kürzer war als die der AD-Gruppe. Während der Probe-Studie war die Plattform-Crossover-Anzahl von Mäusen in der MA-Gruppe niedriger als die der Kontrollgruppe, aber deutlich höher als die der AD-Gruppe. Darüber hinaus war der Prozentsatz der Zeit, die die MA-Mäuse im Quadranten verbrachten, wo sich die Plattform zuvor befand, ähnlich wie die Drogengruppe, die weniger als kontrolleiös war, aber größer als AD. Es ist wichtig, sich daran zu erinnern, dass, wenn die Maus die Plattform nicht in 60 Sekunden finden kann, der Forscher sie zur Plattform führen und ihr erlauben sollte, dort 10 bis 30 Sekunden zu bleiben.
Es gibt keine spezifischen Standards für die Abmessungen des Pools und die Plattformgröße. Diese Parameter müssen in Vorversuchen entsprechend den experimentellen Anforderungen und dem Zustand der Versuchstiere optimiert werden. Die meisten Studien müssen an grundlegenden Experimenten wie MWM durchgeführt werden.
Derzeit liegt die Flexibilität von MWM als experimentelles Werkzeug nur in der Fähigkeit, die grundlegenden Protokolle entsprechend der vorgeschlagenen Studie zu wählen, und daher kann dieser Test angewendet werden, um die kognitive Funktion in größerer Tiefe zu beurteilen.
