快速高尔基染色用于海马体和前额叶皮层树突状脊柱可视化

虽然相对简单，但高尔基体浸渍技术确实有一些棘手的步骤，如果不能正确完成这些步骤，会导致细胞不适合分析。该技术为高尔基体浸渍神经元提供了快速，可重复的标记。此外，均值的小标准误允许在实验之间进行比较。

关于这种技术最具挑战性的部分是切割低温恒温器部分，因为存在不寻常的一致性和固定，因此将它们放在幻灯片平面上是一个需要练习的挑战。首先，将少量组织培养基放在预冷的低温恒温器卡盘上。将脑阻滞物安装在低温恒温盘上，方法是用戴手套的手稍微解冻积木块的一侧，并将其放在组织培养基上。

在刀和块上使用冷冻喷雾。使用防滚板或刷子在切割时保持截面平坦。在零下22摄氏度的低温恒温器上切割100微米的部分。

如果可能的话，通过使用室温载玻片来解冻安装，并迅速将其与截面相对。或者，将载玻片保存在低温恒温器中，使它们冻结。用冷镊子或冷漆刷转移该部分，然后解冻安装座。

将三到四个日冕部分安装到下沉上。用纸巾擦拭刀片之间的刀。如果刀具需要进一步清洁，请在切割下一片之前使用100%乙醇并干燥。

将载玻片放在机架中，间隔足够远，以便解决方案能够进入各个部分。将切片放入蒸馏水中两次，持续四分钟，然后将其放入高尔基体浸渍溶液中10分钟。分离盖玻片，以确保各部分上只放置一个盖玻片。

在载玻片上放置玻璃盖玻片之前，用大量的安装介质覆盖载玻片。一旦盖子滑落，干燥的载玻片在任何无孔纸上标记三到五天，稍微移动它们，特别是在第一天之后，以避免粘附。然后将载玻片转移到载玻片架上，理想情况下，在检查载玻片之前至少干燥三周。

为了分析内侧前额叶皮层和海马体CA1区域的锥体神经元中的树突状脊柱密度，使用图像分析程序测量树突状长度。使用手动计数器计算树突上的棘，并记录棘的长度和数量。对于分析，选择浸渍时具有细胞体和树突的神经元，以及连续且可与相邻细胞区分开来的树突。

该图显示了海马体CA1区域高尔基体浸渍细胞在低功率和高功率下的示例。该图说明了一项实验，其中在CA1和内侧前额叶皮层中环境富集后，青春期雄性和雌性大鼠锥体细胞上的基底树突状脊柱密度增加。切割时保持足够的温度是具有挑战性的，为此我们使用了大量的冷冻喷雾。

然后，很难将这些部分放到载玻片上并将它们干燥平放。该技术用于检查神经解剖学特征。它可以单独使用或与其他神经解剖学示踪方法结合使用。