体内 大型动物视网膜神经节细胞及视神经功能及结构的评估方法

大家好！这是来自温州眼科医院的张轶奎。上神经缺乏来自食兰素神经节细胞的埃克森氏体，然后将视觉信号传递到大脑。

较大的上神经损伤模型对于将新型治疗从机器人模型转化为淋巴应用至关重要。在这里，我们描述了一些体内方法来评估大型动物上神经中食管蛋白神经节细胞的结构和功能。通过逐步介绍这种方法，我们希望增加实验性生殖障碍，并促进更大的视神经症模型的使用。

用电子剃须刀剃须。并且，用70%酒精准备三次，以清洁皮肤并暴露皮下静脉。静脉注射外周静脉蓖麻。

然后滴去阿托品和丙泊酚。用六毫米气管插管给山羊插管，并连接到人工呼吸器。在氧气中用3.5%异氟醚以恒定的2升管理流速维持麻醉。

将温度传感器放在山羊的舌头下。将血氧饱和度切口夹在山羊耳近端。将血压袖带绑在大腿底部。

钳夹心电图按顺序切开四肢。然后，我们可以监测山羊的重要指标。剃掉头发，在额骨中心用倍他定和70%酒精消毒皮肤三次。

打开装有剪刀和指甲的消毒袋。做皮肤切口，用剪刀露出头骨。用于植入额骨中心的钢螺钉。

剃掉头发，用β-丁烷和70%酒精在枕骨两只耳朵的中间点消毒皮肤三次。做皮肤切口。用于植入枕骨两只耳朵中间点的钢螺钉。

接地针电极皮下插入额颅螺钉下方。活性电极和参比电极分别用鳄鱼夹连接到额叶和枕部螺钉上，以减少电极阳痿。遮盖一只眼睛。

将局部麻醉滴眼液涂抹在眼表。两侧的瞳孔被瞳孔散大滴眼液放大。将山羊的头部放在充满气体的刺激器中，瞄准流动光。

将黑色毯子放在刺激器和山羊头上五分钟。眼睑窥器用于完全暴露其瞳孔。检查电极组织接触阳痿。

确保每个阳痿在10公里以下，以避免来自同一房间内其他电气设备的电磁干扰。在没有光刺激的情况下检查基线噪音。开始 FVEP 录制。

请注意，在每种光强度下进行FVEP记录两次。请注意，如果角膜看起来干燥，请用人工泪液润湿角膜。对侧眼重复有关步骤。

以不同的光强度连续开始FVEP记录。对于每个记录，平均64条迹线以产生一个波形。FVEP波形中的第一个正和主动峰被指定为P1和N1。灭菌接地电极位于耳垂中。

灭菌的活性电极和参比电极分别沿中线和额叶和枕骨皮下插入。眼睑窥器用于完全暴露其瞳孔。遮盖一只眼睛。

连续记录另一只眼睛在不同空间频率下的VEP响应模式。用鳄鱼夹连接到接地电极。将两个灭菌的针头参比电极放置在皮肤下，两侧侧侧肱后方一厘米处。

眼睑窥器用于完全暴露其瞳孔。局部应用人工泪液后，将两个消毒的ERG记录电极置于角膜的中心。每只眼睛前方放置两个刺激器，观察距离为50厘米。

确保阳痿低于10公里。在没有光刺激的情况下跟踪基线噪声。瞄准流动的光。

从两只眼睛同时以不同的空间频率连续开始模式ERG记录。最后，返回屏幕以记录图案ERG，无需视觉刺激器和主动控制。对于三个 CPD 模式 ERG，带通滤波器的功率范围设置为 1 至 75 赫兹。

带通滤波器从1赫兹到50赫兹，可在不影响其振幅的情况下平滑形状。波形中的第一个正峰和主动峰被指定为P1和N1。将图案ERG振幅从N1测量到 P1.To 减少电极阳痿，将灭菌的针头参比放置在额皮下。并将灭菌的针头参比电极放置在皮肤下一侧侧纵梁后面一厘米处。

将消毒的ERG记录电极放置在角膜上，局部应用人工撕裂。遮盖一只眼睛。显示器放置在50厘米的观看距离处。

眼睑窥器用于完全暴露其瞳孔。然后，将山羊放在下巴托上。将山羊与相机对齐，通过修改其头部位置，将其视神经头发送到共聚焦扫描激光眼底镜图像中。

单击开始按钮进入检测结束阶段。等待机器完成加载。按黄色开始按钮开始正式成像。

调整操纵杆以均匀照亮红外图像，以提高图像质量。向前滑动照相机，直到右上方屏幕上显示直立的视网膜OCT图像。修改操纵杆，使其在水平视网膜OCT图像中均匀地跳舞。

按下操纵杆上的按钮以自动捕捉图像。按住此操纵杆以保持实时图像屏幕上的图像质量，直到图像执行完成。然后按获取。

选择高质量的初始照片。右键单击并选择设置引用。按后续按钮以允许程序自动将当前扫描与基线扫描匹配。

匹配后，按下操纵杆上的按钮以激活自动实时跟踪。单击测量按钮进入测量平台。选择橡皮擦工具并擦除RFL线，该线由机器自动标记。

选择线条绘制工具以手动勾勒 IPL 和 INL 之间的边界。在红线和蓝线之间是海湾合作委员会综合体。恒河猴的视网膜改变成像是通过使用与山羊相同的设备和程序进行的。

图A显示了山羊中具有代表性的FVEP。图B显示了山羊中具有代表性的ERG波形。图C显示了恒河猴中具有代表性的FVEP模式。

而且，图D显示了恒河猴中具有代表性的ERG波形。图二显示了视神经头周围的代表性视网膜OCT图像以及山羊和恒河猴不同外围区域GCC复合物的厚度。大型动物模型在转化研究中发挥着重要作用。

在许多情况下，小动物模型中有前途的治疗效果未能转化为人类患者。在这项研究中，我们介绍了山羊和恒河猴中FVEP，PERG和OCT的视频方案。这种体内方法可以应用于各种视神经症的较大模型，如青光眼缺血性或创伤性视神经病变和视神经炎。