小鼠应用慢性约束应激的低成本足迹分析和吊箱试验协议

我们的协议使用步态分析是非常有用的，以确定小鼠运动障碍的电机是否模仿有步态障碍的患者的症状。因此，在压力负荷测试中，步态分析可以方便地进行，无需昂贵的设备，即可检测小鼠的某些运动表型，无自发效应。在开始行为测试之前，记录每只鼠标的重量，并使用标记笔标记每只尾巴。

当所有动物都称重和标记后，将小鼠放在实验室至少30分钟，并在实验室的长椅上放置一个清晰、25比25至40厘米的吊盒，并配有可旋转的网盖。当鼠标适应后，将一只鼠标放入网盖的中心，并小心地将盖子倒置。然后，测量鼠标从网盖的坠落延迟，然后再将鼠标返回到其家庭保持架。

测试完所有小鼠后，将一张 9.9 到 42 厘米的白纸放在实验室的长椅上，并在纸张的端端放置一个深色目标框。将其他箱子（与纸张长度大致相同）放在跑道两侧，以防止逃生。并添加黑色和红色的墨水，以分离35毫升的培养皿。

要训练鼠标进行分析，请将鼠标放在纸张的近端，对着目标框，让鼠标从纸张的近端走到目标框。当鼠标到达盒子时，轻轻地擦伤动物，将后尾夹在拇指球和其他手指之间，以限制后肢的运动。将前肢的底部浸入红色墨水中，后肢底部浸入黑色墨水中。

然后，立即将鼠标放回纸张的近端，面对目标框，让鼠标从近端走到目标框。风干脚印纸后，使用尺子测量爪印相同部分之间的距离，获得步长的三次测量。在前部基宽中，通过绘制一条连续的、相同的侧、前脚印之间的线，以及测量垂直线的长度，从前脚印的垫到脚印之间绘制的线。

和后基宽度，通过绘制一条线之间的连续右后脚印，并测量垂直线的长度，从左后脚印垫，到其他右后脚印之间绘制的线。对于重叠，测量前部和后脚印的垫之间的距离。要准备约束管，请使用方形钻头，在 50 毫升管中沿刻度标记和每个刻度标记的背面打 16 个两毫米孔。

切断管尖，做一个五毫米的孔，用于呼吸，并在管盖上做一个四毫米的孔，用于尾部。在压力加载测试中，先将鼠标擦去，然后将动物放入约束管头，用前肢轻轻封闭。在盖住管子之前，通过盖子上的孔穿过尾巴。

在室温下将鼠标放在长椅上两小时。在压力加载期结束时，将鼠标从管子中取出，然后将动物返回到其家庭笼子。正如这些有代表性的数字所观察到的，异质性快速发作的肌张力障碍帕金森病模型小鼠，比四周大时野生类型的垃圾伴侣明显短前肢和后肢步幅长度。

压力异质性快速发作肌张力障碍帕金森症模型小鼠，也表现出明显短的步幅长度的两肢比那些紧张的野生类型垃圾伴侣在八周大。在任何年龄的小鼠中，四肢步幅的不对称没有显著差异。两肢的前基和重叠在所有年龄段的各组也相似。

这些有压力的异质性快速发作性肌张力障碍帕金森病模型小鼠的后基明显较在10周大时观察到的，表明压力导致杂端快速发作性肌张力障碍肌张力障碍模型小鼠的运动缺陷。在4至10周大的动物中，野生型动物和突变体在悬挂时间上没有显著差异。然而，在12周大时，压力野生型小鼠的悬挂时间明显长于其他动物，这表明，通过对较老动物进行约束试验，异质性快速发作性肌张力障碍模型小鼠的运动缺陷与野生型小鼠有区别。

在鼠标将四肢底部挂在墨水中后立即将鼠标放在纸上，以避免在步行测试前墨水干燥。可以执行其他情绪特征测试，如开放场地、高架加迷宫和整个游泳测试，以回答步态异常是否仅由运动缺陷导致。我们的协议可用于探索应力的易感性，通过更改应力载荷的数量和持续时间，以及通过比较各种载荷条件之间的电机表型。

我们的协议可用于通过更改应力载荷的数量和持续时间，以及通过比较各种载荷条件下的电机表型来探索应力的易感性。